检索结果-南通市图书馆

探讨适用于HE染色、免疫组织化学染色和分子检测的最佳脱色素方法

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中华病理学杂志 2024年第6期53卷 570-577页

作者：张文雯邱雅婷吴晨榆柯龙凤朱伟峰陈刚陈燕坪福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院病理科福州350014 福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院分子病理研究室福州350014

目的探索适用于HE染色、免疫组织化学染色和分子检测的最佳脱色素方法。方法收集2018年1月至2022年3月福建省肿瘤医院病理科38例富含黑色素的黑色素瘤石蜡标本,制成组织芯片,分别采用水浴过氧化氢法、双重氧化脱色素法、改良高锰酸钾法... 详细信息

目的探索适用于HE染色、免疫组织化学染色和分子检测的最佳脱色素方法。方法收集2018年1月至2022年3月福建省肿瘤医院病理科38例富含黑色素的黑色素瘤石蜡标本,制成组织芯片,分别采用水浴过氧化氢法、双重氧化脱色素法、改良高锰酸钾法、三氯异氰尿酸法脱黑色素后行HE染色。之后将切片分成2个队列,第1个队列分别采用上述4种方法脱色素后再行免疫组织化学染色(SOX10、Ki-67、HMB45和Melan A);第2个队列先行同样指标的免疫组织化学染色后再分别采用上述4种方法脱色素。另收集其中色素含量较高的17例石蜡标本,采用上述4种方法脱黑色素后提取DNA,进行DNA浓度及质量的测定。比较分析不同脱色素方法的脱色素能力,以及对HE和免疫组织化学染色的效果、DNA浓度和质量的影响。结果在脱黑色素能力方面,改良高锰酸钾法和水浴过氧化氢法脱色素效果最好,均仅5.26%(2/38)有少量色素残留;其次是三氯异氰尿酸法,10.53%(4/38)有大量色素残留;最差的是双重氧化脱色素法,15.79%(6/38)有大量色素残留。在HE染色方面,水浴过氧化氢法脱色素后染色好的比例达92.11%,优于其他3种方法。在免疫组织化学染色方面,改良高锰酸钾法、双重氧化脱色素法和三氯异氰尿酸法,先免疫组织化学染色后脱色素的染色评分均值分别为20.84、26.63和35.02,均优于先脱色素后免疫组织化学的染色评分均值(8.70、15.41和21.22);水浴过氧化氢法,先脱色素后免疫组织化学的染色评分均值为33.57,优于先免疫组织化学染后脱色素的染色评分均值(19.96)。HMB45、Melan A和Ki-67这3个指标采用先免疫组织化学染色后三氯异氰尿酸脱色素的染色评分分别为36.45、33.79和36.24,效果最佳;SOX10采用先水浴过氧化氢法脱色素后免疫组织化学染色的评分为34.39,效果最佳。在DNA浓度及质量方面,采用双重氧化脱色素法、改良高锰酸钾法及三氯异氰尿酸法脱色素后,DNA降解严重;而水浴过氧化氢法脱色素后提取的DNA平均浓度为59.59μg/L,显著高于未经脱色素处理的平均DNA浓度(30.3μg/L,P=0.001);DNA的吸光度值A_(260)/A_(280)均在1.8~2.0之间,A_(260)/A_(230)16例在2.0以上,而未经脱色素处理提取的DNA中8例A_(260)/A_(280)<1.8,16例A_(260)/A_(230)<2.0。结论对富含黑色素的黑色素瘤组织进行HE染色和分子检测时,宜选用水浴过氧化氢法脱色素;免疫组织化学染色后采用三氯异氰尿酸法脱色素,色素残留少,染色效果佳,且方便快捷。同一种脱色素方法对不同的抗体染色效果不同,可根据要检测的抗体选择最佳的脱色素方法。

关键词：黑色素瘤分子诊断技术免疫组织化学

金针菇多糖通过调节髓系细胞生成缓解苯并[a]芘染毒小鼠血管炎症

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食品科学 2024年第8期45卷 105-113页

作者：牛泽淼李鑫陈宁梁振华赵娟吕品张岩付程浩河北医科大学基础医学院河北石家庄050017 河北医科大学药学院河北石家庄050017 河北医科大学教学实验中心河北石家庄050017 河北省食品检验研究院河北省食品安全重点实验室河北石家庄050227

金针菇多糖(Flammulina velutipes polysaccharide,FVP)具有良好的抗炎、抗氧化作用。为进一步探讨FVP缓解血管损伤的效果和作用机制,构建苯并[a]芘(benzo[a]pyrene,Ba P)小鼠染毒模型,通过免疫组化检测血管炎症因子表达量;使用流式细... 详细信息

金针菇多糖(Flammulina velutipes polysaccharide,FVP)具有良好的抗炎、抗氧化作用。为进一步探讨FVP缓解血管损伤的效果和作用机制,构建苯并[a]芘(benzo[a]pyrene,Ba P)小鼠染毒模型,通过免疫组化检测血管炎症因子表达量;使用流式细胞术分析外周血和脾脏中促炎细胞比例及骨髓造血细胞亚群构成。结果显示,FVP处理缓解Ba P诱导的白介素-6、单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附分子-1等血管促炎因子的表达。此外,FVP处理显著抑制Ba P诱发的小鼠外周血中单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞以及脾脏中巨噬细胞和中性粒细胞比例的增加。进一步分析骨髓造血细胞亚群构成发现,Ba P处理后增加了小鼠骨髓中造血祖细胞和粒细胞巨噬细胞祖细胞的比例,减少了造血干细胞和普通髓系祖细胞的比例,而FVP处理后逆转了这一现象,使骨髓造血细胞亚群恢复至健康对照水平。同时细胞水平上的研究表明,FVP可抑制Ba P诱导Raw264.7细胞产生的氧化应激。综上,FVP可能是通过维持骨髓造血系统的稳态、调节促炎细胞向循环系统的输出和下调外周促炎细胞的比例缓解Ba P引发的血管炎症损伤。

关键词：金针菇多糖苯并[a]芘血管炎症造血作用髓系细胞生成

中国河北省新生儿败血症病原体构成及耐药性的横断面研究

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中国当代儿科杂志 2024年第4期26卷 350-357页

作者：河北新生儿败血症研究协作组马莉不详河北医科大学附属河北省儿童医院

目的分析河北地区新生儿败血症病原体构成及其耐药特征,为优化区域内新生儿败血症管理策略提供依据。方法前瞻性收集2021年11月1日—2022年12月31日河北省23家医院经血培养证实的新生儿败血症病例资料,分析早发型败血症(early-onset sep... 详细信息

目的分析河北地区新生儿败血症病原体构成及其耐药特征,为优化区域内新生儿败血症管理策略提供依据。方法前瞻性收集2021年11月1日—2022年12月31日河北省23家医院经血培养证实的新生儿败血症病例资料,分析早发型败血症(early-onset sepsis,EOS)、社区获得性晚发型败血症(community-acquired lateonset sepsis,CALOS)与医院获得性晚发型败血症(hospital-acquired late-onset sepsis,HALOS)患儿病原体构成及其耐药特征。结果共纳入289例患儿,发生292次感染,其中EOS、CALOS及HALOS分别有117例次(40.1%)、95例次(32.5%)及80例次(27.4%)。共分离到294株病原体,其中EOS组分离病原体118株(40.1%),最常见的是大肠埃希菌(39株,33.0%)和凝固酶阴性的葡萄球菌(13株,11.0%);CALOS组分离病原体95株(32.3%),最常见的是大肠埃希菌(35株,36.8%)和B族链球菌(14株,14.7%);HALOS组分离病原体81株(27.6%),最常见的是肺炎克雷伯菌(24株,29.6%)和大肠埃希菌(21株,25.9%)。凝固酶阴性的葡萄球菌对青霉素类抗菌药物的耐药率达80%以上,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对常用β内酰胺类药物的耐药率为2.2%~75.0%。HALOS组主要的革兰氏阴性菌对常用β内酰胺类药物的耐药率高于CALOS组。结论在河北地区,大肠埃希菌是新生儿EOS与LOS最常见的病原体;不同类型新生儿败血症病原体组成及耐药性存在差异,经验性抗菌药物的选择需依据该地区最新监测数据。

关键词：败血症病原体耐药新生儿

基于动态磨损模型的汽车覆盖件模具磨损数值模拟研究

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中国机械工程 2024年第3期35卷 515-523页

作者：赵妍洁张双杰穆振凯王伟闫华军马世博张永辉河北科技大学河北省材料近净成形技术重点实验室石家庄050018 河北省汽车冲压模具技术创新中心泊头062150 河北省汽车冲压模具工程研究中心泊头062150 河北省汽车冲压模具产业技术研究院泊头062150

针对某铝合金覆盖件冲模磨损失效问题,为更加准确地预测汽车覆盖件模具的使用寿命,基于Archard磨损模型建立了动态磨损模型。该模型耦合了动态磨损系数和表面硬度变化曲线,其中,磨损系数K转化为随接触压力和相对滑移速度变化的动态磨损... 详细信息

针对某铝合金覆盖件冲模磨损失效问题,为更加准确地预测汽车覆盖件模具的使用寿命,基于Archard磨损模型建立了动态磨损模型。该模型耦合了动态磨损系数和表面硬度变化曲线,其中,磨损系数K转化为随接触压力和相对滑移速度变化的动态磨损系数,表面硬度考虑了磨损深度的变化。利用Python语言对ABAQUS软件进行二次开发,将动态磨损模型耦合到有限元模拟中,实现了考虑磨损系数和硬化层深度变化的汽车覆盖件模具磨损计算。通过对比分析凸凹模典型位置在成形过程中的动态磨损演化规律,并以模具最大磨损深度0.5 mm作为失效判据,得到该铝合金覆盖件冲压模具的使用寿命为635428次。模具主要发生磨损的位置集中在模具合模线附近和大圆角处,在实际生产中需要对这些位置进行修模、调试,从而有效延长模具的使用寿命。

关键词：汽车覆盖件模具模具寿命模具磨损动态磨损模型

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活性氧影响牙周炎发生发展及牙周组织再生

中国组织工程研究 2024年第14期28卷 2254-2260页

作者：翟浩嫣赵圆范登莹刘春艳河北医科大学口腔医(学)院正畸科河北省口腔医学重点实验室河北省口腔疾病临床医学研究中心河北省石家庄市050017

背景:活性氧在牙周炎发生发展和牙周组织再生过程中发挥双刃剑作用,低浓度的活性氧诱导牙周膜成纤维细胞的分化,过量的活性氧会造成牙周组织损伤。炎症发生时,牙周组织中的活性氧聚集,通过多种细胞信号通路或通过氧化还原反应诱导细胞... 详细信息

背景:活性氧在牙周炎发生发展和牙周组织再生过程中发挥双刃剑作用,低浓度的活性氧诱导牙周膜成纤维细胞的分化,过量的活性氧会造成牙周组织损伤。炎症发生时,牙周组织中的活性氧聚集,通过多种细胞信号通路或通过氧化还原反应诱导细胞和组织的损伤。目的:对活性氧在牙周炎发生发展及牙周组织再生中的双刃剑效果进行综述,为临床治疗牙周炎及促进牙周组织再生提供潜在靶点及治疗思路。方法:通过检索1990年4月至2023年4月PubMed及中国知网数据库,英文检索词为“periodontal tissue engineering,periodontal defect,regeneration of periodontal tissue,chronic periodontitis,reactive oxygen species,oxidative stress,antioxidative stress,oxidative injuries,free radicals,reactive nitrogen species”,中文检索词为“牙周组织工程,牙周缺损,牙槽骨丧失,牙周组织再生,牙周炎,破骨细胞,氧化应激,抗氧化,活性氧”,经过对每条文献文题、摘要的筛选,排除与研究目的相关性差及内容陈旧、重复的文献,对最终符合标准的77篇文献进行综述。结果与结论:(1)活性氧是一种反应活性较高的自由基,在细菌入侵时活性氧经中性粒细胞的呼吸爆发作用大量释放,经其氧化还原反应或作为多效性生理信号传导剂在体内发挥双刃剑作用。(2)在牙周炎中,低浓度的活性氧可以杀灭入侵的病原菌,但高浓度的活性氧经JNK、RANK、Wnt/β-连环蛋白等通路促进炎症因子分泌,促进免疫损伤或通过氧化反应直接损伤组织等方式加重牙周炎症。(3)在牙周组织再生过程中,低浓度的活性氧可以经Nrf2等通路促进牙周膜干细胞的增殖与分化,并能促进血管内皮生长因子的分泌进而促进血管再生。这为牙周组织再生提供了种子及营养的环境,对促进牙周组织再生极为重要,而高浓度的活性氧则会降低牙周膜干细胞的活性,并损伤内皮细胞,不利于血管再生。这将影响伤口愈合,抑制牙周组织再生。(4)因此,探索活性氧在牙周炎发生发展和牙周组织再生中的作用并发现其作用的潜在机制,并探索其发挥减轻牙周炎症并促进牙周组织再生的适宜浓度,对未来临床牙周炎和牙周组织再生的治疗具有重要意义。以活性氧作为靶点,探索减轻牙周炎症并促进牙周膜干细胞活性及血管再生的方法,可能成为临床上有效治疗牙周炎并促进牙周组织再生的方法。

关键词：氧化应激破骨细胞牙周组织再生 ROS 牙周炎活性氧血管生成牙周膜干细胞

典型城市不同河流沉积物中抗生素抗性基因的时空分布特征:以石家庄为例

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环境科学 2024年第6期45卷 3176-3185页

作者：赵波宋圆梦卢梦淇白寅虎陈昊达高赛王琳静张璐璐崔建升河北科技大学环境科学与工程学院石家庄050000 河北省污染防治生物技术实验室石家庄050000 河北省水利规划设计研究院有限公司石家庄050021

河流是抗生素抗性基因(ARGs)的重要储库.然而,目前有关河流中ARGs的研究多集中在其时空分布,而较少对同一区域城市和农村河流中ARGs的种类和丰度进行比较.鉴于此,以石家庄市不同河流为例,分别在2020年12月和2021年4月,选取了2条农村河流... 详细信息

河流是抗生素抗性基因(ARGs)的重要储库.然而,目前有关河流中ARGs的研究多集中在其时空分布,而较少对同一区域城市和农村河流中ARGs的种类和丰度进行比较.鉴于此,以石家庄市不同河流为例,分别在2020年12月和2021年4月,选取了2条农村河流和3条城市河流,布设了15个采样点,采集了各个样点的沉积物,运用宏基因组测序技术分析了各样点沉积物中ARGs的种类和丰度,比较了城市和农村河流沉积物中ARGs的时空差异.结果表明:①在城市和农村河流中分别检出162种(4 776±4 452,丰度,下同)和79种ARGs(1 043±632),ARGs种类和丰度均呈城市>农村的趋势;②在城市河流中磺胺类(SAs,27%)、氨基糖苷类(AGs,26%)和多药类(MDs,15%) ARGs的相对丰度最高;而在农村河流中MDs类ARGs的相对丰度最高(65%),且城市河流中ARGs的复杂程度高于农村河流.③城市河流中SAs、AGs、MDs、四环素类(TCs)、利胆醇类(PNs)、大环内酯类(MLS)、β-内酰胺类(β-lactams)和二氨基嘧啶类(DAPs)ARGs间呈显著正相关(P <0.01),而糖肽类(GPs)ARGs与各类ARGs呈显著负相关(P <0.05和P <0.01);而在农村河流中MDs和SAs类ARGs呈显著正相关(P <0.05),氨基香豆素类(ACs)ARGs与肽类(PTs)、利福霉素类(RMs)和磷霉素类(FMs)ARGs呈显著负相关(P <0.05和P <0.01);④在时间分布上,城市河流12月和4月分别检出162种(4 776±4 452)和148种(5 673±5 626)ARGs;而农村河流12月和4月分别检出79种(1 043±632)和46种(467±183)ARGs;⑤RDA分析结果表明,城市和农村河流中的ARGs均呈时间分布差异;相关分析表明城市河流主要与工业企业数量显著相关,而农村河流则主要与牧业产值显著相关.总体而言,通过比较城市和农村河流中ARGs的时空异质性,识别其主要社会影响因子,可为后续河流中ARGs风险管控提供数据支撑.

关键词：抗生素抗性基因(ARGs) 时空分布宏基因组城市河流农村河流社会经济因子

小鼠短散布核元件B1反义RNA通过激活TFEB途径介导自噬水平抗小鼠衰老

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中国老年学杂志 2024年第9期44卷 2157-2162页

作者：武崇光吉宁宋志学王晓蝶吴沛园王秀芳吕占军河北医科大学河北省实验动物重点实验室遗传研究室邯郸市中心医院

目的探讨小鼠短散布核元件B1反义RNA(B1as RNA)抗小鼠衰老的分子机制及是否通过激活老年小鼠转录因子(TF)EB进而提高小鼠的自噬水平。方法将老年BALB/c小鼠(≥14月龄)分成3组：B1as RNA治疗(治疗组),LacZ3F3R RNA无关RNA对照(无关对照... 详细信息

目的探讨小鼠短散布核元件B1反义RNA(B1as RNA)抗小鼠衰老的分子机制及是否通过激活老年小鼠转录因子(TF)EB进而提高小鼠的自噬水平。方法将老年BALB/c小鼠(≥14月龄)分成3组：B1as RNA治疗(治疗组),LacZ3F3R RNA无关RNA对照(无关对照)组和生理盐水对照(空白对照)组；每周注射1次，注射4 w,然后二氧化碳安乐处死小鼠。6～8周龄、同品系年轻正常小鼠不用任何药物处理作为实验对照(年轻对照)组。透射电镜观察小鼠肝脏细胞中自噬溶酶体。Western印迹检测小鼠肝脏和脾脏细胞中微管相关蛋白轻链(LC)3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白表达；Western印迹检测小鼠肝脏和脾脏细胞质与细胞核中TFEB蛋白表达。实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测小鼠肝脏和脾脏细胞中TFEB基因及自噬相关基因Beclin-1,Sqstm1/p62,Map1lc3b, Atg10,Atg12和Ppargc1A mRNA水平。结果透射电镜检测到治疗组及年轻对照组肝脏细胞自噬溶酶体的形成。治疗组肝脏及脾脏LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、细胞核TFEB蛋白表达明显高于空白对照组(P0.05),而治疗组肝脏和脾脏细胞中Beclin-1、Sqstm1/p62、Map1lc3b、Atg10、Atg12和Ppargc1A mRNA表达水平明显高于空白对照组及无关对照组(P<0.05),接近年轻对照组水平。结论促进老年小鼠细胞TFEB的核转位进而提高TFEB依赖的自噬水平是B1as RNA抗小鼠衰老的一种分子机制。

关键词：小鼠短散布核元件B1反义RNA 自噬转录因子(TF)EB核转位自然衰老小鼠

斑马鱼卵黄脂磷蛋白在早期胚胎中促进L1-ORF2诱导的EGFP报告基因表达

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中国细胞生物学学报 2024年第5期46卷 939-953页

作者：王文霞王晓蝶武崇光 Luqman ALI 耿琦张国忠冯旭杨悦成王秀芳吕占军河北医科大学河北省实验动物学重点实验室遗传研究室石家庄050017

为了探讨长散布核元件-1(long interspersed nuclear element-1,L1)在胚胎早期高表达的分子机制,将人L1的第二个开放阅读框(open reading frame 2,ORF2)(L1-ORF2,该文中简称ORF2),插入到pEGFP-C1质粒(C1)的EGFP基因下游,生成C1-ORF2表达载体,插入的ORF2可以影响EGFP报告基因的表达。将C1-ORF2等表达载体注射到斑马鱼(Danio rerio)早期胚胎中,结果表明,在所使用的表达载体中,只有插入ORF2的表达载体诱导EGFP报告基因高表达。C1-ORF2表达载体诱导的EGFP荧光强度随着胚胎的发育而显著降低。EGFP荧光报告蛋白在C1-ORF2中的表达受到组蛋白的抑制,0 h胚胎溶卵液(简称胚胎溶卵液)能减弱组蛋白对EGFP表达的抑制作用,从胚胎溶卵液中纯化的卵黄脂磷蛋白(lipovitellin,Lv)的作用强于胚胎溶卵液。凝胶阻滞实验表明,ORF2 DNA能与胚胎溶卵液蛋白、组蛋白和Lv结合。改变组蛋白、Lv和ORF2片段三者的添加顺序,结果证明Lv可以结合ORF2片段和组蛋白,从而干扰组蛋白与ORF2的结合。进一步研究发现,Lv增加了C1-ORF2 DNA对DNase I消化的敏感性。该研究获得以下结论:Lv可以与所有检测的DNA片段结合,但与ORF2的结合比与其他DNA片段的结合亲和力更高。Lv通过提高ORF2 DNA染色质的易接近性,激活ORF2诱导的斑马鱼早期胚胎EGFP基因的表达。

关键词：长散布核元件-1 斑马鱼(Danio rerio)早期胚胎卵黄脂磷蛋白凝胶阻滞实验染色质重组体外转录

儿童原发性扩张型心肌病的遗传因素及死亡危险因素研究

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中国全科医学 2024年第6期27卷 679-684页

作者：郑奎刘露王永丽李会王璇李博郝京霞张英谦河北省儿童医院心内科河北省小儿心血管重点实验室河北省石家庄市050031 河北医科大学研究生学院河北省石家庄市050017 河北北方学院研究生学院河北省张家口市075132

背景扩张型心肌病(DCM)是儿童心源性猝死和心力衰竭的常见原因之一,不同病因与DCM患儿的预后显著相关。其中原发性DCM的占比最高且预后相对较差,特别是与遗传因素相关的患儿预后更差。因此基于遗传背景下的死亡危险因素分析将有利于DCM... 详细信息

背景扩张型心肌病(DCM)是儿童心源性猝死和心力衰竭的常见原因之一,不同病因与DCM患儿的预后显著相关。其中原发性DCM的占比最高且预后相对较差,特别是与遗传因素相关的患儿预后更差。因此基于遗传背景下的死亡危险因素分析将有利于DCM患儿的精准预后评估及危险分层。目的探讨儿童原发性DCM的遗传病因占比、遗传学特征及死亡危险因素。方法回顾性纳入2018年7月—2022年12月在河北省儿童医院住院治疗并完成基因检测的42例原发性DCM患儿的临床资料,收集患儿的基因检测结果。出院后定期于河北省儿童医院心内科门诊随访。以患儿死亡时间或2022-12-31为随访终点,根据随访结局将患儿分为死亡组(9例)与存活组(33例)。采用Kaplan-Meier法绘制患儿的生存曲线,生存曲线比较采用Log-rank检验。采用多因素COX比例风险模型分析患儿死亡的危险因素。结果患儿中位首诊年龄12(7,96)个月,中位随访时间24(9,36)个月。死亡组患儿中位随访时间8(0,11)个月,存活组中位随访时间30(12,39)个月,差异有统计学意义(Z=-2.19,P室短轴缩短率(LVFS)低于生存组(PT)杂合变异,致病分类为临床意义未明。绘制患儿Kaplan-Meier生存曲线,Log-rank检验结果显示基因突变阴性患儿生存率高于基因突变阳性患儿(χ^(2)=18.1,P研究38.1%的原发性DCM患儿与遗传病因相关,诊断后第1年内是DCM患儿死亡的高发期,基因突变阳性的患儿预后更差。存在致病基因突变、首诊心功能分级Ⅲ/Ⅳ级是患儿死亡的独立危险因素。

关键词：扩张型心肌病基因突变儿童基因检测预后影响因素分析