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乳岩内消霜通过调控Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路促进乳腺癌前病变细胞铁死亡的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：张昊天邱叶贝苏燃颜显欣马民暨南大学中医学院暨南大学附属第一医院

目的：探讨乳岩内消霜（Ruyanneixiao Cream，RUc）诱导乳腺癌前病变（Breast premalignant lesion，BPL）细胞铁死亡的作用机制，丰富乳岩内消霜治疗乳腺癌前病变的理论基础。方法：通过细胞增殖与活性检测法（CCK-8）实验、克隆形成... 详细信息

目的：探讨乳岩内消霜（Ruyanneixiao Cream，RUc）诱导乳腺癌前病变（Breast premalignant lesion，BPL）细胞铁死亡的作用机制，丰富乳岩内消霜治疗乳腺癌前病变的理论基础。方法：通过细胞增殖与活性检测法（CCK-8）实验、克隆形成实验检测1%、2%和4%浓度乳岩内消霜透皮液（Ruyanneixiao Cream transdermal solution，RUt）对细胞增殖的抑制情况；使用DCFH-DA探针对活性氧（Reactive oxygen species，ROS）进行检测，使用相应试剂盒检测细胞内亚铁离子(Fe2+)、谷胱甘肽（Glutathione，GSH）和丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量；采用脂质过氧化荧光探针C11-BODIPY581/591检测脂质过氧化；通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测核因子E2相关因子2（Nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2）、溶质载体家族7成员11（Solute carrier family 7 member 11，SLC7A11）和谷胱甘肽过氧化物酶4（Glutathione peroxidase 4，GPX4）蛋白的表达情况。使用二甲基苯并蒽(2，2'-bis（hydroxymethyl）butyric acid，DMBA)联合雌孕激素构建BPL大鼠模型，同时使用RUc外用治疗，第十二个周期后安乐死大鼠，通过苏木素-伊红（Hematoxylin-eosin staining，HE）染色观察乳腺组织病理学改变，使用相应试剂盒检测乳腺组织Fe2+和MDA含量；通过免疫组化法（Immunohistochemistry，IHC）和蛋白免疫印迹法检测BPL大鼠乳腺组织Nrf2、SLC7A11和GPX4蛋白的表达情况。结果：与基质组比较，1%、2%和4% RUt组MCF-10AT细胞活性显著降低（P＜0.05），具有浓度依赖性，24小时半数抑制浓度(IC50)为2.23%；与4% RUt组比较，RUt+Fer-1组细胞活性显著提高（P＜0.05）。与基质组比较，1%、2%和4% RUt组MCF-10AT细胞克隆形成率显著降低（P＜0.05）；与4% RUt组比较，RUt+Fer-1组细胞克隆形成率显著增高（P＜0.05）。与基质组比较，1%、2%和4% RUt组细胞内ROS和Fe2+水平显著增高（P＜0.05），GSH水平显著降低（P＜0.05），MDA和脂质过氧化水平显著增高（P＜0.05）；与4% RUt组比较，RUt+Fer-1组细胞内ROS和Fe2+水平显著降低（P＜0.05），GSH水平显著增高（P＜0.05），MDA和脂质过氧化水平显著降低（P＜0.05）。与基质组比较，1%、2%和4% RUt组MCF-10AT细胞内Nrf2、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）；与4% RUt组比较，RUt+Fer-1组细胞内Nrf2、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平显著增高（P＜0.05）。在体内实验中，与基质组比较，RUc组BPL大鼠乳腺组织病理状态有效改善，乳腺导管扩张程度低且导管排列有序，未见浸润性癌的病理形态。与基质组比较，RUc组大鼠乳腺组织中Fe2+和MDA水平显著增高（P＜0.05）。与基质组比较，RUc组大鼠乳腺组织中Nrf2、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。结论：乳岩内消霜可能通过抑制Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路，提高Fe2+积累并通过脂质过氧化反应诱导乳腺癌前病变细胞发生铁死亡。

关键词：乳腺癌前病变乳岩内消霜铁死亡脂质过氧化核因子E2相关因子2(Nrf2)

基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方对脑缺血再灌注损伤大鼠的影响

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中国免疫学杂志 2024年第8期40卷 1709-1717页

作者：孙亚萍石瑞孙玲玲谢占维崔怡娴田军彪河北中医学院研究生学院石家庄050200 河北中医学院第一附属医院河北省中医院石家庄050011

目的:基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方(YHHJP)对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑组织炎症因子、脑和结肠组织紧密连接、肠道菌群及其代谢产物的影响。方法:50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO)、YHHJP低、中、高... 详细信息

目的:基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方(YHHJP)对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑组织炎症因子、脑和结肠组织紧密连接、肠道菌群及其代谢产物的影响。方法:50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO)、YHHJP低、中、高剂量组(TCM-L/TCM-M/TCM-H)。采用Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,治疗3 d后观察神经功能缺损评分,TTC染色计算脑梗死面积,尼氏染色观察脑组织病理形态改变,HE染色观察脑和结肠组织病理形态改变,ELISA检测脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α和血清LPS含量,生物化学法检测血清D-乳酸(D-LA)含量,实时荧光定量PCR检测脑组织ZO-1、Claudin-5和结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达,16S rDNA高通量测序检测肠道菌群。结果:与假手术组相比,模型组大鼠脑和结肠组织病理损伤严重,肠道菌群微生态结构存在明显差异,神经功能损伤加重,脑梗死面积增加,脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α和血清LPS、D-LA含量升高,脑组织ZO-1、Claudin-5及结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达降低(P<0.05)。与模型组相比,YHHJP低、中、高剂量组大鼠脑组织和结肠组织病理损伤减轻,肠道菌群微生态紊乱得到改善,神经功能损伤减轻,脑梗死面积明显缩小,脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低,结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达显著升高(P<0.05);YHHJP中、高剂量组大鼠血清LPS、D-LA含量明显降低,脑组织ZO-1、Claudin-5基因表达显著升高(P<0.05)。结论:YHHJP可改善CIRI,其机制可能与调节肠道菌群多样性,抑制肠道细菌代谢产物LPS、D-LA释放,增加紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5、Claudin-1基因表达,下调炎症因子分泌有关。

关键词：脑肠轴益气活血化浊解毒方脑缺血再灌注损伤炎症因子肠道菌群代谢产物紧密连接

健脾活血方联合针刺法治疗胃络瘀血型慢性萎缩性胃炎的临床疗效及对炎症指标和胃黏膜功能的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 103-110页

作者：康文婷时昭红刘嵩张书石拓杨林曹丹湖北中医药大学中医学院武汉430000 武汉市第一医院武汉430000

目的:探讨健脾活血方联合针刺法方案在胃络瘀血型慢性萎缩性胃炎(CAG)患者中的应用效果。方法:选取武汉市第一医院2021年11月至2023年3月收治CAG患者86例,按随机数字表法均分为两组(每组43例),对照组给予常规西药治疗,观察组在其基础上... 详细信息

目的:探讨健脾活血方联合针刺法方案在胃络瘀血型慢性萎缩性胃炎(CAG)患者中的应用效果。方法:选取武汉市第一医院2021年11月至2023年3月收治CAG患者86例,按随机数字表法均分为两组(每组43例),对照组给予常规西药治疗,观察组在其基础上加用健脾活血方联合针刺法方案治疗,观察两组治疗后临床疗效、中医证候积分、病理组织评分、幽门螺杆菌(Hp)转阴率、炎症指标[中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、白细胞介素(IL)-1β]、胃蛋白酶(PG)Ⅰ、PGⅠ/PGⅡ、胃泌素-17(G-17)水平变化及治疗期间药物安全性情况。结果:研究结果显示,治疗后观察组患者总有效率为95.35%(41/43),对照组患者总有效率为79.07%(34/43),观察组患者临床疗效明显高于对照组,差异具有统计学意义(χ^(2)=5.108,P中医证候主次证积分及总分均明显降低(P中医证候主次证积分及总分降低更明显(P<0.05)。与本组治疗前比较,观察组与对照组患者胃黏膜萎缩、活动性、慢性炎症、肠化生及异型增生病理评分均明显降低(P<0.05);治疗后与对照组比较,观察组患者胃黏膜萎缩、活动性、慢性炎症、肠化生及异型增生病理评分降低更明显(P<0.05)。治疗后与对照组比较,观察组患者Hp转阴率明显提高(χ^(2)=3.957,P=0.047)。与本组治疗前比较,观察组与对照组患者炎症指标NLR、IL-1β水平均明显较低(P<0.05);治疗后与对照组比较,观察组患者炎症指标NLR、IL-1β水平均明显较低(P<0.05)。与本组治疗前比较,观察组与对照组患者PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ水平则明显较高(P<0.05);治疗后与对照组比较,观察组患者PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ水平则明显较高(P<0.05)。与本组治疗前比较,观察组与对照组患者不同时间点的G-17水平差异有统计学意义(P<0.05),治疗后与对照组相比,观察组不同时间点G-17水平均较高(P<0.05),且与对照组相比,观察组G-17水平升高趋势差异有统计学意义(P<0.05)。两组药物不良反应发生风险差异无统计学意义。结论:健脾活血方联合针刺法方案用于CAG患者可有效缓解患者症状,提高Hp转阴率,抑制机体炎症,调节PG、G-17水平,从而控制甚至逆转胃黏膜萎缩,降低其向胃癌进展的概率。

关键词：慢性萎缩性胃炎胃络瘀血健脾活血方针刺临床疗效

基于网络药理学研究滋阴明目汤对高脂饮食小鼠肠道黏膜菌群的影响

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中国微生态学杂志 2024年第9期 993-999+1008页

作者：邓娜易鑫陈美丽湖南中医药大学中医学院长沙市中医医院

目的通过网络药理学和16S rRNA基因测序探究滋阴明目汤干预高脂饮食诱导肥胖小鼠体重和肠道黏膜菌群的影响。方法采用网络药理学预测滋阴明目汤-黄斑变性的潜在功能，将25只4周龄18～22 g的SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组(CN组，... 详细信息

目的通过网络药理学和16S rRNA基因测序探究滋阴明目汤干预高脂饮食诱导肥胖小鼠体重和肠道黏膜菌群的影响。方法采用网络药理学预测滋阴明目汤-黄斑变性的潜在功能，将25只4周龄18～22 g的SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组(CN组，5只)和造模组(20只)，造模组小鼠予高脂饲料喂养12周。造模结束后，选取造模成功小鼠随机分为模型组(HF组，5只)和滋阴明目汤组(ZYMM组，5只)，ZYMM组小鼠以滋阴明目汤干预4周，其余两组灌胃等量无菌水。收集各组小鼠肠道黏膜，高通量测序分析菌群。结果网络药理学分析得到滋阴明目汤-黄斑变性存在糖尿病心肌病、胰岛素抵抗、流体切应力和动脉粥样硬化以及糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等与降脂作用相关的通路。滋阴明目汤干预后，高脂饮食小鼠体重下降。HF组小鼠肠道黏膜菌群中OTU数和alpha多样性均较高。相较于HF组，ZYMM组和CN组小鼠肠道黏膜菌群beta多样性距离较近。Escherichia-Shigella和Lachnospiraceae NK4A136group差异显著，结合LEfSe分析，HF组富集Escherichia-Shigella,ZYMM组富集uncultured bacterium f Lachnospiraceae和Lachnospiraceae NK4A136 group。相关性分析表明，滋阴明目汤给药后小鼠体重与uncultured bacterium f Muribaculaceae和Desulfovibrio丰度呈负相关，同时与uncultured bacterium c subgroup 6丰度呈正相关。结论滋阴明目汤干预后高脂饮食小鼠的肠道致病菌数量下降，有益菌数量增加，其机制主要通过影响Escherichia-Shigella、Desulfovibrio、uncultured bacterium f Muribaculaceae和Lachnospiraceae NK4A136 group改善高脂饮食小鼠肠道微生态，降低体重。

关键词：滋阴明目汤高脂饮食肠道菌群肠道黏膜网络药理学

加味十宝汤对肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者血清性激素水平的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：单意陈少康史振滏徐海锋路艺宁夏医科大学中医学院银川市中医医院

目的：观察加味十宝汤对肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者血清性激素水平的影响。方法：选取2022年10月至2023年10月就诊于银川市中医医院符合标准的肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者60例，随机分为... 详细信息

目的：观察加味十宝汤对肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者血清性激素水平的影响。方法：选取2022年10月至2023年10月就诊于银川市中医医院符合标准的肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者60例，随机分为观察组与对照组各30例。两组均维持降糖、调脂等原有治疗手段，观察组予加味十宝汤治疗，对照组予十一酸睾酮胶囊治疗，疗程12周。比较两组治疗前后中医证候评分、PADAM症状积分、糖代谢相关指标［空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）］、血清性激素指标［性激素结合球蛋白（SHBG）、游离睾酮（FT）、总睾酮（TT）、催乳素（PRL）、促黄体生成素（LH）、促卵泡生成素（FSH）、雌二醇(E2)］的变化，并进行安全性评价。结果：（1）临床疗效比较。治疗后，与对照组比较，两组患者临床疗效相当，差异无统计学意义；（2）中医证候评分、PADAM症状积分比较。与本组治疗前比较，治疗后两组患者中医证候评分、PADAM症状积分均明显降低（P中医证候评分、PADAM症状积分降低更明显（P0.05）；（4）血清性激素指标比较。与本组治疗前比较，治疗后两组患者血清FT、TT、PRL、LH、FSH水平均明显上升（P0.05）。两组患者SHBG指标组内及组间比较差异均无统计学意义。临床观察过程中两组患者均未见明显不良反应。结论：加味十宝汤能明显改善肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者的临床症状，降低血糖，提高性激素水平，其机制可能是通过抑制脂肪细胞中芳香化酶的转化作用，促进GnRH的生成，调节下丘脑-垂体-性腺轴功能而实现的。

关键词：迟发性性腺功能减退症糖尿病加味十宝汤十一酸睾酮胶囊肾精亏虚型

基于胃络理论探讨慢性胃炎“炎癌转化”的病机与防治

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北京中医药大学学报 2024年第8期47卷 1037-1042页

作者：贾元萍姚欣凝丁霞北京中医药大学东直门医院北京100700 北京中医药大学中医学院

慢性胃炎“炎癌转化”是多因素、多阶段、多机制的复杂过程,随着疾病进展,胃黏膜的腺管开口及微血管形态发生变化,病理表现为腺体数量减少、结构紊乱或细胞异型等。中医学认为,慢性胃炎病发在胃,与外邪犯胃或内生诸邪等相关,呈现由气及... 详细信息

慢性胃炎“炎癌转化”是多因素、多阶段、多机制的复杂过程,随着疾病进展,胃黏膜的腺管开口及微血管形态发生变化,病理表现为腺体数量减少、结构紊乱或细胞异型等。中医学认为,慢性胃炎病发在胃,与外邪犯胃或内生诸邪等相关,呈现由气及血、由经到络的渐进过程,符合“久病入络”理论。基于胃络理论探讨慢性胃炎“炎癌转化”的病机与防治,病机演变特点概括为:胃络受邪、气络失和,胃络瘀阻、浊毒内生,胃络亏虚、积生失荣。临床可采用祛邪调气活络、化瘀解毒通络、补虚消积荣络的治法,使胃络得通、胃腑得养。本文从胃络理论出发,结合现代科学研究,探讨慢性胃炎“炎癌转化”的胃络辨治及动态全程管理,以期为临床提供理论参考和实践指导。

关键词：慢性胃炎炎癌转化胃络

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨黄精-当归配伍对阿尔茨海默病小鼠海马神经干细胞增殖的影响

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中国老年学杂志 2024年第5期44卷 1161-1165页

作者：董琦钱红月廖可欣熊浩仲侯吉华肖移生江西中医药大学中医学院江西南昌330004

目的观察黄精-当归配伍(CPA)对阿尔茨海默病(AD)小鼠海马神经干细胞(NSCs)增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法雄性KM小鼠64只,随机分成正常对照组、AD模型组、CPA组、IWR-1-endo组。AD模型组、CPA组、IWR-1-endo组采用颈背部... 详细信息

目的观察黄精-当归配伍(CPA)对阿尔茨海默病(AD)小鼠海马神经干细胞(NSCs)增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法雄性KM小鼠64只,随机分成正常对照组、AD模型组、CPA组、IWR-1-endo组。AD模型组、CPA组、IWR-1-endo组采用颈背部皮下注射1%D-半乳糖[140 mg/(kg·d),连续3 w]联合腹腔注射东莨菪碱[2 mg/(kg·d),连续2 w]复制小鼠AD模型;造模1 w后同时对CPA组及IWR-1-endo组灌胃CPA提取液[2.5 g/(kg·d),持续4 w],并对IWR-1-endo组增给腹腔注射Wnt信号抑制剂IWR-1-endo液;第5周开始,对各组再增加腹腔注射5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)处理[50 mg/(kg·d),连续5 d]。药物干预结束后,运用跳台仪检测各组行为学改变;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)与Western印迹分别检测各组海马神经β-catenin、GSK-3β mRNA和蛋白表达变化;免疫组化及免疫荧光检测海马DG区BrdU阳性细胞表达量的差异。结果与正常对照组比较,AD模型组痴呆症状明显,学习与记忆各测试指标均明显变差,海马β-catenin mRNA及蛋白表达水平均明显下降,GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均明显升高,海马DG区BrdU免疫组化及免疫荧光阳性细胞数量均明显减少(均P<0.01)。与AD模型组比较,CPA组痴呆症状明显改善,学习与记忆各测试指标均明显好转,海马β-catenin mRNA及蛋白表达水平均明显升高,GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均明显下降,海马DG区BrdU免疫组化及免疫荧光阳性细胞数量均明显增多(均P<0.01)。与CPA组比较,IWR-1-endo组痴呆症状严重,学习与记忆各测试指标均明显变差,海马β-catenin mRNA及蛋白表达水平均明显下降,GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均明显升高,海马DG区BrdU免疫组化及免疫荧光阳性细胞数量均明显减少(均P<0.01)。结论 CPA可通过激活AD小鼠海马神经Wnt/β-catenin信号通路促进NSCs增殖发挥治疗AD作用。

关键词：黄精-当归配伍阿尔茨海默病 Wnt/β-catenin信号通路神经干细胞增殖

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中医杂志 2024年第13期65卷 1383-1391页

作者：邱明亮熊佳丽肖晨晓周鑫珠莫丽莎柯诗文朱国双刘良徛江西中医药大学临床医学院江西省南昌市330006 江西中医药大学附属医院江西中医药大学中医学院

目的探讨温肺化纤汤治疗系统性硬化症相关间质性肺病(SSc-ILD)肺纤维化的作用机制。方法将60只C3H/He雌鼠随机分为对照组、模型组、吡非尼酮组及温肺化纤汤低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组小鼠予博来霉素溶液0.04 mg/d背部皮下... 详细信息

目的探讨温肺化纤汤治疗系统性硬化症相关间质性肺病(SSc-ILD)肺纤维化的作用机制。方法将60只C3H/He雌鼠随机分为对照组、模型组、吡非尼酮组及温肺化纤汤低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组小鼠予博来霉素溶液0.04 mg/d背部皮下连续注射28天建立SSc-ILD小鼠模型。造模成功后,吡非尼酮组予吡非尼酮胶囊300 mg/(kg·d)灌胃,温肺化纤汤低、中、高剂量组分别给予温肺化纤汤7.81、15.62、31.24 g/(kg·d)灌胃,对照组及模型组予生理盐水0.1 ml/10 g灌胃,共21天。干预结束后采用HE染色和Masson染色观察小鼠皮肤及肺组织的病理变化;检测小鼠皮肤及肺组织的羟脯氨酸含量;Western blot法测定小鼠肺组织中的内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(BIP)和C/EBP同源蛋白(CHOP)及核因子κB(NF-κB)通路中p65的蛋白表达水平;ELISA测定小鼠血清中的γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平。结果HE染色、Masson染色结果显示,与对照组比较,模型组小鼠皮肤组织表皮棘层肥厚,胶原纤维明显增粗、膨大,数量增多,炎性细胞明显增多;肺组织出现明显的炎性细胞反应,大量胶原纤维增生,并伴有炎性细胞浸润。与模型组比较,吡非尼酮组和温肺化纤汤各剂量组皮肤组织和肺组织胶原纤维增生明显减少,炎性细胞浸润减少,且吡非尼酮组和温肺化纤汤中、高剂量组效果基本相当。与对照组比较,模型组小鼠皮肤组织和肺组织羟脯氨酸含量,血清IFN-γ、IL-6、TNF-α含量,肺组织BIP和CHOP蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与模型组比较,吡非尼酮组和温肺化纤汤低、中剂量组皮肤组织羟脯氨酸含量降低,温肺化纤汤中剂量组肺组织羟脯氨酸含量下降,吡非尼酮组和温肺化纤汤高剂量组小鼠血清IFN-γ、IL-6、TNF-α含量及肺组织BIP、CHOP和p65蛋白表达水平降低(P<0.05)。温肺化纤汤中剂量组肺组织羟脯氨酸含量明显低于温肺化纤汤低、高剂量组,温肺化纤汤低、中剂量组小鼠血清IFN-γ、IL-6、TNF-α含量高于温肺化纤汤高剂量组,温肺化纤汤高剂量组BIP蛋白表达水平明显低于温肺化纤汤低、中剂量组(P<0.05)。结论温肺化纤汤可改善SSc-ILD模型小鼠皮肤组织及肺组织纤维化,其作用机制可能是通过抗炎、抑制NF-κB通路,进而抑制内质网应激,最终阻抑纤维化进程。

关键词：系统性硬化症间质性肺病温肺化纤汤内质网应激核因子κB

人参皂苷Rg通过miR-155/Notch1/Hes1通路调控自噬减轻HL-1细胞缺氧/复氧损伤的机制研究

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中国中药杂志 2024年

作者：张会雨辛高杰陈原原曹策崔晓珊高佳明郭浩付建华滨州医学院中医学院中国中医科学院西苑医院基础医学研究所

该文探讨人参皂苷Rg1通过微小RNA155（miR-155）/神经源性基因Notch同源蛋白1（neurogenic gene Notch homologous protein 1，Notch1）/发状分裂相关增强子1（hairy and enhancer of split 1，Hes1）通路调控细胞自噬减轻HL-1心肌细胞缺氧复氧（hypoxia/reoxygenation，H/R）损伤的具体机制。构建H/R损伤HL-1细胞模型，使用人参皂苷Rg1和（或）Notch1抑制剂（DAPT）、miR-155 mimics处理细胞。cell counting kit（CCK）-8检测H/R损伤HL-1细胞的相对活力；乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）试剂盒检测细胞培养基上清液中LDH的含量；透射电镜观察细胞自噬小体；MDC法检测细胞自噬水平；荧光定量聚合酶链式反应检测miR-155、Notch1、Hes1、微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein1 light chain 3，LC3）的mRNA水平；蛋白免疫印迹法检测Notch1、Hes1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的蛋白表达水平。结果显示，H/R损伤后HL-1细胞活性降低、LDH漏出量增加，细胞内自噬小体增多，LC3的mRNA水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高；人参皂苷Rg1能提高细胞活性，减少LDH漏出量，减少细胞内自噬小体数量，降低细胞内LC3的mRNA水平，降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值，通过抑制细胞自噬发挥心肌细胞保护作用，Notch1抑制剂或miR-155过表达则抑制人参皂苷Rg1的作用，促进细胞自噬，加重HL-1细胞H/R损伤；人参皂苷Rg1抑制H/R损伤造成的Notch1、Hes1 mRNA水平和蛋白表达降低、miR-155 mRNA水平升高，Notch1抑制剂或miR-155过表达则呈现相反作用。综上所述，人参皂苷Rg1通过miR-155/Notch1/Hes1通路调控自噬减轻HL-1心肌细胞H/R损伤。

关键词： MIRI 自噬人参皂苷Rg miR-155 Notch1 Hes1