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不同海拔牦牛快肌、慢肌相关调控基因表达的比较

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动物学杂志 2024年

作者：权君莲周娟张勤文青海大学农牧学院动物医学系

为了阐明不同海拔牦牛（Bos mutus）骨骼肌快肌和慢肌调控基因的表达特点及其低氧适应机制，选取青海省化隆县（海拔1 900 m，以下简称低海拔组）、海晏县（海拔3 200 m，以下简称中海拔组）及班玛县（海拔4 200 m，以下简称高海拔组）... 详细信息

为了阐明不同海拔牦牛（Bos mutus）骨骼肌快肌和慢肌调控基因的表达特点及其低氧适应机制，选取青海省化隆县（海拔1 900 m，以下简称低海拔组）、海晏县（海拔3 200 m，以下简称中海拔组）及班玛县（海拔4 200 m，以下简称高海拔组）高原型牦牛作为研究对象，以低海拔牦牛作为对照，采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术分别检测不同海拔牦牛骨骼肌快肌和慢肌调控基因mRNA表达及蛋白含量的变化。结果表明：随着海拔升高，调控快肌表达的因子MYOG mRNA和MYOG蛋白的表达量逐渐增加；调控慢肌表达的因子MYOD mRNA随海拔升高表现为先降低再升高，而MYOD蛋白表达呈现先升高再降低的趋势；PGC-1 mRNA和PGC-1蛋白均随海拔的升高表达量逐渐升高（P <0.05）。以上结果说明，不同海拔牦牛骨骼肌快肌和慢肌调控基因MYOG、MYOD及PGC-1的m RNA表达量可能与低氧环境有一定联系。为适应高原低氧环境，高原型牦牛骨骼肌肌纤维类型及调控基因的表达会发生一定的变化。本研究为深入研究青海省不同海拔地区牦牛的低氧适应机制提供了基础数据。

关键词：高原牦牛骨骼肌肌纤维类型低氧适应机制

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复合益生菌对老龄蛋鸡产蛋性能的影响

饲料研究 2024年 50-54页

作者：黎肖昱佘福泽李坤葛昆陇杨家军秦顺义天津农学院动物科学与动物医学学院江苏农林职业技术学院

试验旨在研究饲粮中添加芽孢杆菌、乳杆菌及复合益生菌制剂对老龄罗曼褐壳蛋鸡的产蛋性能、蛋品质、肠道形态和消化酶活性的影响。选择700只570日龄的罗曼褐壳蛋鸡，随机分成5组，每组20个重复，每个重复7只蛋鸡。对照组饲喂基础饲粮，... 详细信息

试验旨在研究饲粮中添加芽孢杆菌、乳杆菌及复合益生菌制剂对老龄罗曼褐壳蛋鸡的产蛋性能、蛋品质、肠道形态和消化酶活性的影响。选择700只570日龄的罗曼褐壳蛋鸡，随机分成5组，每组20个重复，每个重复7只蛋鸡。对照组饲喂基础饲粮，芽孢杆菌组、乳杆菌组、复合益生菌组分别在基础饲粮中添加500 g/t芽孢杆菌、500 g/t乳杆菌及250 g/t芽孢杆菌+250 g/t乳杆菌，黄霉素组在基础饲粮中添加5 mg/kg黄霉素。预试期7 d，正式试验期30 d。结果显示：与对照组相比，各益生菌处理组产蛋率、平均日采食量均极显著增加（P<0.01），乳杆菌组、复合益生菌组和黄霉素组平均蛋重均极显著降低（P<0.01），复合益生菌组料蛋比极显著降低（P<0.01）。与对照组相比，复合益生菌组蛋黄颜色显著增加（P<0.05），乳杆菌组、复合益生菌组的蛋白高度极显著增加（P<0.01），哈夫单位显著增加（P<0.05）。与对照组相比，3种益生菌处理组空肠、回肠绒隐比（VH/CD）均极显著提高（P<0.01），十二指肠、空肠的α-淀粉酶、β-淀粉酶、糜蛋白酶活性均极显著增强（P<0.01）。研究表明，在老龄罗曼褐壳蛋鸡饲粮中添加益生菌可提高产蛋性能，改善肠道形态，增强肠道中消化酶的活性，复合益生菌综合效果优于单一益生菌。

关键词：复合益生菌蛋鸡产蛋性能肠道形态消化酶活性

猪流行性腹泻病毒非结构蛋白NSP15抑制细胞焦亡的分子机制研究

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中国预防兽医学报 2024年第7期46卷 731-739页

作者：李鑫悦徐维律吕倩傅心雨石玉华李丹月何苏慧董露陈楠师福山浙江大学动物科学学院动物医学系浙江杭州310058

为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)及其NSP15蛋白对细胞焦亡的影响及初步的分子作用机制,本研究将表达pGSDMD-p30的质粒转染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞),24 h后将PEDV感染该细胞,于感染后12 h和24 h分别收集细胞上清液和细胞,采用LDH试剂... 详细信息

为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)及其NSP15蛋白对细胞焦亡的影响及初步的分子作用机制,本研究将表达pGSDMD-p30的质粒转染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞),24 h后将PEDV感染该细胞,于感染后12 h和24 h分别收集细胞上清液和细胞,采用LDH试剂盒测定各时间点细胞上清中乳酸脱氢酶(LDH)的释放比例;采用qPCR检测细胞中GSDMD mRNA的转录水平。结果显示,各时间点,转染表达pGSDMD-p30质粒的IPEC-J2细胞中LDH的释放比例均极显著升高,表明细胞发生焦亡,且与转染p GSDMD-p30质粒的细胞相比,PEDV感染的细胞中LDH的释放比例及GSDMD mRNA的转录水平均极显著降低。将表达pGSDMD-p30的质粒分别与不同剂量的PEDV-NSP15质粒共转染HEK293T细胞(pGSDMD-p30+NSP15组);将表达Caspase-1、pGSDMD和表达NSP15的质粒分别共转染HEK293T和IPEC-J2细胞(Caspase-1+pGSDMD+NSP15组)。上述细胞于24 h后均测定各组细胞上清液中LDH的释放比例。结果显示,与pGSDMD-p30组(共转染表达pGSDMD-p30与空载体的细胞)相比,pGSDMD-p30+NSP15组HEK293T细胞及IPEC-J2细胞中LDH的释放比例均显著降低;与Caspase-1+pGSDMD对照组细胞相比,Caspase-1+pGSDMD+NSP15组细胞中LDH的释放比例极显著降低。上述结果表明,NSP15在不同细胞中均可以抑制GSDMD-p30及GSDMD+Caspase-1两种方式引起的细胞焦亡,提示PEDV可能通过NSP15抑制细胞的焦亡。将自噬抑制剂3-MA和蛋白酶体途径抑制剂MG132分别加入不同剂量的NSP15质粒与MYC-pGSDMD质粒共转染的HEK293T细胞中,6 h后采用western blot检测细胞中GSDMD的表达水平;将上述质粒共转染HEK293T细胞,24 h后通过qPCR检测细胞中GSDMD mRNA的转录水平。结果显示,随着NSP15转染剂量的增加,细胞中GSDMD的表达水平逐渐减少,加入3-MA和MG132并不影响GSDMD的表达水平;相比于共转染空载体和NSP15质粒的对照组,MYC-pGSDMD+NSP15组细胞中GSDMD mRNA的转录水平极显著降低。上述结果表明,PEDV NSP15降解GSDMD的过程不是通过自噬和蛋白酶体途径实现的。将4个核酸内切酶活性位点突变的NSP15质粒分别与pGSDMD-p30或pGSDMD质粒共转染HEK293T细胞,24 h后采用LDH试剂盒测定各组细胞上清中LDH的释放比例;采用western blot检测各组细胞中GSDMD的表达水平。结果显示,与p30组相比,H^(226)、H^(241)和K^(282)突变组细胞上清中LDH的释放比例均无显著变化,而D^(265)突变组细胞上清中LDH的释放比例极显著降低;H^(226)、H^(241)和K^(282)突变组细胞中GSDMD的表达水平与阴性对照组细胞中GSDMD的表达水平相当,而D^(265)突变组细胞中GSDMD的表达水平明显减少。上述结果表明,PEDV通过其NSP15蛋白抑制各种细胞的细胞焦亡,且本研究首次证明该蛋白通过其核酸内切酶活性位点H^(226)、H^(241)和K^(282)降解GSDMD并抑制细胞焦亡,为PED的治疗和开发抗PED的药物提供参考。

关键词：猪流行性腹泻病毒非结构蛋白15 核酸内切酶细胞焦亡 GSDMD

冬季添加精料补充料对牦牛胰腺发育、血液生化指标和瘤胃细菌多样性的影响

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中国饲料 2024年第12期 49-52页

作者：李善春李凯杨启林青海农牧科技职业学院动物医学系青海西宁812100

文章旨在研究冬季添加精料补充料对牦牛胰腺发育、血液生化指标和瘤胃细菌多样性的影响。试验将48头体况良好的公牦牛犊牛(120日龄)随机分为4组,每组4个重复,每个重复3头。对照组放牧饲养,试验I、Ⅱ和Ⅲ组在放牧基础上每日分别补饲0.125... 详细信息

文章旨在研究冬季添加精料补充料对牦牛胰腺发育、血液生化指标和瘤胃细菌多样性的影响。试验将48头体况良好的公牦牛犊牛(120日龄)随机分为4组,每组4个重复,每个重复3头。对照组放牧饲养,试验I、Ⅱ和Ⅲ组在放牧基础上每日分别补饲0.125、0.25、0.5 kg精料补充料。预试期20 d,正式试验期100 d。结果表明:(1)与对照组相比,试验组体重、胰腺重量及胰腺内外分泌部面积占比显著提高(P<0.05),而胰腺内外分泌部面积比显著降低(P<0.05),且以试验Ⅲ组最为明显。(2)与对照组相比,补饲Ⅱ、Ⅲ组牦牛血清中血糖和白蛋白含量显著增加(P<0.05),其他指标并无明显变化。(3)添加精料补充料可显著提高牦牛瘤胃中拟杆菌门和放线菌门丰度(P<0.05),对疣微菌门和螺旋体门丰度的提升极为显著(P<0.01),极显著降低了黏胶球形菌门和纤维杆菌门丰度(P<0.01)。由此可见,冬季添加精料补充料能提高牦牛生长性能,促进胰腺发育水平,提升优势菌群的相对丰度,降低有害菌群的丰度,为牦牛养殖提供科学、合理的依据。

关键词：牦牛精料补充料胰腺发育生化指标瘤胃细菌多样性

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利用冷冻干燥法制备四烯雌酮固体分散体

畜牧兽医学报 2024年第9期55卷 4131-4140页

作者：朱珍珍刘大虎杨升天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392

本研究旨在制备四烯雌酮(altrenogest,ALT)固体分散体,提高四烯雌酮的溶解度及其生物利用度,为其在实际生产中的应用提供参考依据。以聚乙烯吡洛烷酮K30(polyvinyl pyrrolidone k30,PVPK30)为药物载体,叔丁醇为冻干溶剂,冷冻干燥法制备... 详细信息

本研究旨在制备四烯雌酮(altrenogest,ALT)固体分散体,提高四烯雌酮的溶解度及其生物利用度,为其在实际生产中的应用提供参考依据。以聚乙烯吡洛烷酮K30(polyvinyl pyrrolidone k30,PVPK30)为药物载体,叔丁醇为冻干溶剂,冷冻干燥法制备四烯雌酮固体分散体。以固体分散体体外溶出度为评价指标对所得ALT固体分散体的质量进行评估,采用X射线衍射法(X-ray diffraction,XRD)、同步热分析法(simultaneous thermal analysis,TG-DSC)、傅里叶红外光谱法(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)、扫描电镜法(scanning electron microscopy,SEM)等方法来描绘其特性,并研究其在体外的溶出规律。结果显示,四烯雌酮固体分散体最优制备工艺为药载比1∶8,叔丁醇浓度为50%,超声时间80 min。固体分散体在pH为7.4的PBS缓冲液中的平衡溶解度为原料药的5.91倍,1∶8混合物的3.65倍,固体分散体6 h体外累积溶出率为89.09%,ALT原料药和物理混合物的累积溶出率为32.94%、28.93%。综上所述,此方法制备的固体分散体能够有效提高四烯雌酮原料药的溶解度。

关键词：四烯雌酮冷冻干燥法固体分散体溶解度

动物免疫学线上线下混合式教学融入课程思政的方法及实践

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中国免疫学杂志 2024年第3期40卷 621-625,635页

作者：李海花李留安胡烨丁巧玲赵瑞利邵华天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300384

目的:在动物免疫学课程中真正实现思想政治教育和专业教育的深度融合,有效提升学生的综合素质。方法:实验采用了动物免疫学线上线下混合式教学融入课程思政的教学方法,对课程设计理念、教学目标、教学设计和教学实施进行研究,并且从成... 详细信息

目的:在动物免疫学课程中真正实现思想政治教育和专业教育的深度融合,有效提升学生的综合素质。方法:实验采用了动物免疫学线上线下混合式教学融入课程思政的教学方法,对课程设计理念、教学目标、教学设计和教学实施进行研究,并且从成绩和思政效果对教学成效进行评价。结果:表明该新型教学模式能够激发学生的学习兴趣,有助于提高学生考试成绩和综合能力的培养。结论:该方法教学效果良好,实现了立德树人的根本任务。

关键词：动物免疫学线上线下教学课程思政教育内涵式发展课程设计学生素质教育

非复制型尿嘧啶营养缺陷型弓形虫刺激雏鸡胸腺细胞的转录组学分析

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中国农业大学学报 2024年第9期29卷 122-134页

作者：廖艳鹏曾宇航经岱昀任超天津农学院动物科学与动物医学学院/天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392

为研究非复制型尿嘧啶营养缺陷型弓形虫(Nonreplicating Toxoplasma uracil auxotrophs,NRTUAs)在转录组水平对雏鸡胸腺的免疫调节作用,本研究以接种NRTUAs虫株3 d的雏鸡为试验对象,利用RNA-seq技术对其胸腺组织进行转录组测序以挖掘其... 详细信息

为研究非复制型尿嘧啶营养缺陷型弓形虫(Nonreplicating Toxoplasma uracil auxotrophs,NRTUAs)在转录组水平对雏鸡胸腺的免疫调节作用,本研究以接种NRTUAs虫株3 d的雏鸡为试验对象,利用RNA-seq技术对其胸腺组织进行转录组测序以挖掘其中的差异表达基因(DEGs),进而对得到的DEGs进行GO功能注释、KEGG信号通路富集分析和蛋白互作网络分析。结果表明:1)筛选出964个DEGs,其中517个基因表达上调,447个表达下调。2)通过GO功能注释发现差异基因在生物过程、细胞组分和分子功能三大类别显著富集在免疫应答、防御反应、对外界刺激反应、对刺激反应、细胞外区域、细胞表面等条目。3)KEGG信号通路富集分析发现DEGs显著集中在细胞因子及其受体相互作用、IgA产生的肠道免疫网络、细胞粘附分子、Toll样受体信号通路等通路上。4)通过蛋白互作网络分析发现9个重要的关键分子,其中IL-6和IL-18具有调节细胞分化促进干扰素产生的功能,IRF1和IRF7能够调节巨噬细胞等细胞的活化以及抗原递呈能力,SOCS1能够防止STAT1信号通路异常活跃而导致的过度炎症反应,CCL4、CCR5和CCL20作为趋化因子能够诱导多种免疫细胞浸润炎症区域,CD40能够增强抗原递呈进而调节机体的免疫功能。综上,NRTUAs虫株刺激雏鸡胸腺后,胸腺细胞的增殖活动减弱,T细胞活化以及细胞因子分泌等活动增强,并且IL-6、IL-18、IRF1、IRF7、SOCS1、CCL4、CCR5、CCL20和CD40是NRTUAs虫株调节雏鸡胸腺细胞的重要分子,本研究为深入探讨NRTUAs虫株调节家禽胸腺的先天性免疫反应的分子机制提供了理论依据。

关键词：非复制型尿嘧啶营养缺陷型弓形虫转录组学雏鸡胸腺

复合脂肪酸对母猪繁殖性能、仔猪抗氧化性能和免疫性能的影响

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饲料研究 2024年第4期47卷 29-33页

作者：周鹏宋晨池仕红冯军佛山科学技术学院动物医学系广东佛山528200

试验旨在研究复合脂肪酸对母猪繁殖性能、仔猪抗氧化性能和免疫性能的影响。选择体况相近、健康、预产期接近的4~6胎次美系母猪42头,随机分成3组,每组14个重复,每个重复1头母猪。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组在基础饲粮中添加长链脂肪... 详细信息

试验旨在研究复合脂肪酸对母猪繁殖性能、仔猪抗氧化性能和免疫性能的影响。选择体况相近、健康、预产期接近的4~6胎次美系母猪42头,随机分成3组,每组14个重复,每个重复1头母猪。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组在基础饲粮中添加长链脂肪酸和中链脂肪酸比例为8∶2的复合脂肪酸,试验Ⅱ组在基础饲粮中添加长链脂肪酸和中链脂肪酸比例为7∶3的复合脂肪酸。试验从妊娠期第107 d开始,至仔猪21日龄断奶时结束,试验共28 d。结果表明,与对照组相比,试验Ⅰ组母猪初乳中乳脂率和总固形物含量显著提高(P0.05)。研究表明,在母猪妊娠后期和哺乳期饲粮中添加长链脂肪酸和中链脂肪酸比例为8∶2复合脂肪酸,可以改善母猪初乳品质,增强仔猪机体的抗氧化能力。

关键词：脂肪酸繁殖性能抗氧化性能免疫性能母猪仔猪

鼠伤寒沙门菌yibT和csgD双基因缺失株的构建及对生物膜形成的影响

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福建农业学报 2024年

作者：刘晓彤王冰冰王治梅刘菲凡赵威齐永华新乡学院药学院天津农学院动物科学与动物医学学院河南科技学院动物科技学院

【目的】通过构建鼠伤寒沙门菌（Salmonella typhimurium）yibT、csgD双基因缺失株及缺失株的回补株，探究其对鼠伤寒沙门菌生物膜形成的影响，以期为沙门菌的有效防控提供新策略。【方法】以鼠伤寒沙门菌野生株CVCC541(wild-type, WT)... 详细信息

【目的】通过构建鼠伤寒沙门菌（Salmonella typhimurium）yibT、csgD双基因缺失株及缺失株的回补株，探究其对鼠伤寒沙门菌生物膜形成的影响，以期为沙门菌的有效防控提供新策略。【方法】以鼠伤寒沙门菌野生株CVCC541(wild-type, WT)为研究对象，利用λ-red同源重组技术构建yibT和csgD基因缺失株；利用重组载体技术构建其基因回补株；利用结晶紫染色法比较鼠伤寒沙门菌突变株生物膜形成能力的差异；通过苯酚-硫酸法测定胞外多糖含量、半固体平板测定运动能力的变化；比较不同突变菌株自聚集能力的变化；通过扫描电镜观察生物膜结构；最后利用荧光定量PCR技术鉴定生物膜形成过程中关键基因的mRNA表达水平。【结果】成功构建了鼠伤寒沙门菌yibT和csgD的双基因缺失株WTΔyibTΔcsgD和csgD基因单缺失株WTΔcsgD及基因缺失株的回补株WTΔcsgDΔyibT/pcsgD和WTΔcsgD/pcsgD。yibT和csgD基因的缺失降低了生物膜的形成能力、胞外多糖含量和自聚集能力，增强了运动能力；invF和sdiA基因的m RNA表达水平下降。【结论】yibT和csgD基因缺失会降低鼠伤寒沙门菌的生物膜形成能力。

关键词：鼠伤寒沙门菌 yibT基因 csgD基因生物膜