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KIF2C对肝细胞癌细胞恶性生物学行为和人脐静脉内皮细胞血管生成的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第5期31卷 477-483页

作者：安海英涂建成武汉大学中南医院检验科湖北武汉430071

目的:探究驱动蛋白-13家族2C(KIF2C)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖、侵袭和迁移以及人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管生成的影响,为HCC治疗提供潜在靶点。方法:用数据库数据分析KIF2C mRNA和蛋白在HCC组织中的表达及其与血管生成相关因子(VEGFR2... 详细信息

目的:探究驱动蛋白-13家族2C(KIF2C)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖、侵袭和迁移以及人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管生成的影响,为HCC治疗提供潜在靶点。方法:用数据库数据分析KIF2C mRNA和蛋白在HCC组织中的表达及其与血管生成相关因子(VEGFR2和HIF-1α)表达的相关性,常规培养人正常肝细胞QSG-7701、HUVEC和HCC细胞Huh-7、Hep3B2.1-7,用Lipofectamine 3000转染试剂将sh-NC和sh-KIF2C转染至Huh-7、Hep3B2.1-7细胞,qPCR检测各组QSG-7701、Huh-7和Hep3B2.1-7细胞中KIF2C mRNA的表达,WB法检测各组细胞中KIF2C蛋白的表达,细胞克隆形成实验检测敲低KIF2C对Hep3B2.1-7和Huh-7细胞克隆形成的影响,小管生成实验检测敲低KIF2C表达的Huh-7和Hep3B2.1-7细胞的条件培养液对HUVEC血管生成能力的影响。结果:数据库分析结果显示,KIF2C mRNA和蛋白在HCC组织中均呈高表达(均P<0.01),用qPCR和WB法检测人HCC中KIF2C mRNA和蛋白的表达水平,结果显示其mRNA和蛋白在各HCC细胞中也呈高表达(均P<0.01),与数据库数据分析结果相符。数据库数据分析还显示,KIF2C与HCC组织中VEGFR2、HIF-1α的表达水平呈正相关(P<0.05或P<0.01)。成功构建了稳定低表达KIF2C的Huh-7和Hep3B2.1-7细胞(均P<0.01),敲低KIF2C表达均可明显抑制Huh-7和Hep3B2.1-7细胞的增殖能力(均P<0.01)、侵袭和迁移能力(均P<0.01),敲低KIF2C表达的HCC细胞条件培养液均可显著抑制体外HUVEC的血管生成能力(P<0.05或P<0.01)。结论:KIF2C可促进Huh-7和Hep3B2.1-7细胞增殖、侵袭和迁移以及HUVEC血管生成的能力,提示KIF2C可能是治疗HCC的潜在靶点。

关键词：驱动蛋白-13家族2C 肝细胞癌 Huh-7细胞 Hep3B2.1-7细胞增殖迁移侵袭人脐静脉内皮细胞血管生成

植物源外泌体样纳米囊泡刺激成骨细胞、抑制破骨细胞并促进成骨

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中国组织工程研究 2024年

作者：药文鑫王毅蔡林冯晓波武汉大学中南医院疼痛科武汉大学中南医院脊柱与骨肿瘤科

背景：骨质疏松症易引发病理性骨折且严重影响患者的生活质量，植物源外泌体样纳米囊泡在调节骨质疏松症骨平衡方面发挥着重要作用。目的：综述不同植物源外泌体样纳米囊泡在骨质疏松症治疗中的研究现状与展望。方法：通过计算机在PubMe... 详细信息

背景：骨质疏松症易引发病理性骨折且严重影响患者的生活质量，植物源外泌体样纳米囊泡在调节骨质疏松症骨平衡方面发挥着重要作用。目的：综述不同植物源外泌体样纳米囊泡在骨质疏松症治疗中的研究现状与展望。方法：通过计算机在PubMed、Web of Science、中国知网中检索1995年1月至2024年3月发表的相关文献，以“osteoporosis,plant-derived exosome-like nanovesicles,exosomes,osteoblasts,osteoclasts”为英文检索词，以“骨质疏松症，植物源外泌体样纳米囊泡，外泌体，成骨细胞，破骨细胞”为中文检索词，最终纳入53篇文献进行分析。结果与结论：植物源外泌体样纳米囊泡具有生物相容性、低毒性和天然靶向性等优点，这些特性不仅确保了其在体内的稳定存在与有效作用，还避免了不必要的免疫反应，为长期治疗策略的设计奠定了基础。植物源外泌体样纳米囊泡可以通过刺激成骨细胞增殖、抑制破骨细胞分化以及促进成骨-抑制破骨双重作用抗骨质疏松症；此外，部分植物源外泌体样纳米囊泡因具有骨靶向性，未来或将成为新型示踪靶标和治疗方案广泛应用于骨质疏松症治疗过程中。

关键词：骨质疏松症植物源性外泌体样纳米囊泡外泌体成骨细胞破骨细胞工程化外泌体

自噬在大鼠睾丸扭转致缺血再灌注损伤中的作用机制

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海军军医大学学报 2024年第1期45卷 57-63页

作者：胡志徐律孙伟付桥张炜陈一衍褚浩武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院)光谷院区泌尿外科武汉430014 武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院)泌尿外科武汉430000

目的探讨自噬在大鼠睾丸扭转所致缺血再灌注损伤(I/RI)中的作用机制。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、I/RI组、I/RI+雷帕霉素(RAPA)组和I/RI+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,每组10只。后3组大鼠建立左侧睾丸扭转(720°,1 h)复位模型... 详细信息

目的探讨自噬在大鼠睾丸扭转所致缺血再灌注损伤(I/RI)中的作用机制。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、I/RI组、I/RI+雷帕霉素(RAPA)组和I/RI+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,每组10只。后3组大鼠建立左侧睾丸扭转(720°,1 h)复位模型,I/RI+RAPA组和I/RI+3-MA组大鼠造模前分别给予自噬激动剂RAPA和自噬抑制剂3-MA干预。于睾丸复位12 h后取各组大鼠左侧睾丸和附睾,收集精子进行精子质量分析,采用H-E染色观察睾丸组织病理变化,采用试剂盒检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC),采用TUNEL染色检测睾丸组织细胞凋亡水平,通过蛋白质印迹法检测睾丸组织中自噬相关蛋白(Beclin1、p62)和凋亡相关蛋白(Bcl2、Bax、cleaved caspase 3)表达水平。结果与假手术组比较,I/RI组大鼠精子质量下降,睾丸曲细精管排列松散,生殖细胞减少、脱落,睾丸组织SOD活性、T-AOC降低(均P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),p62和Bcl2蛋白表达水平降低(均P<0.05),Beclin1、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平升高(均P<0.05),凋亡生殖细胞明显增多。与I/RI组比较,I/RI+RAPA组大鼠精子质量提高,睾丸曲细精管排列正常,睾丸组织SOD活性、T-AOC升高(均P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),Beclin1和Bcl2蛋白表达水平升高(均P<0.05),p62、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平降低(均P<0.05),凋亡生殖细胞减少;I/RI+3-MA组大鼠精子质量下降,睾丸曲细精管排列松散,睾丸组织SOD活性、T-AOC降低(均P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),Beclin1和Bcl2蛋白表达水平降低(均P<0.05),p62、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平升高(均P<0.05),凋亡生殖细胞增多。结论激活自噬可改善I/RI大鼠精子质量和睾丸组织病理损伤,缓解氧化应激,抑制生殖细胞凋亡。

关键词：睾丸扭转缺血再灌注损伤自噬氧化性应激生殖细胞细胞凋亡

电针促进脂肪干细胞在体成骨分化改善骨质疏松的机制

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中国骨质疏松杂志 2024年第10期 1412-1419页

作者：郭佳舒晴张思钰赵娟田峻武汉大学中南医院康复医学科

目的探讨电针(electroacupuncture, EA)联合自体脂肪干细胞(adipose derived stem cells, ADSCs)移植对去卵巢大鼠骨质疏松的作用及对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、EA组、ADSCs组和EA+AD... 详细信息

目的探讨电针(electroacupuncture, EA)联合自体脂肪干细胞(adipose derived stem cells, ADSCs)移植对去卵巢大鼠骨质疏松的作用及对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、EA组、ADSCs组和EA+ADSCs组，每组10只。采用大鼠卵巢切除建立模型，在造模手术后2个月开始干预，EA组予双侧“脾俞”“肾俞”电针治疗，频率2 Hz,连续波，强度1 mA。每次10 min,每周3次，连续8周。ADSCs组将绿色荧光蛋白标记的ADSCs经尾静脉移植体内。每次1×10～6个，每周1次，连续8周。EA+ADSCs组予电针治疗，联合自体ADSCs移植，干预连续8周。检测大鼠股骨骨微结构及骨组织病理变化、血清骨代谢指标，股骨Wnt3a、β-catenin和Runx2基因及蛋白表达，及Runx2/β-catenin蛋白的共表达。结果与假手术组比较，模型组大鼠骨密度显著降低(P<0.01),骨小梁间距变大；与模型组比较，EA组大鼠骨密度显著增高(P<0.01),骨小梁数量和厚度增加，Wnt3a、β-catenin、Runx2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Runx2/β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.01);ADSCs组Runx2的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。EA+ADSCs组骨小梁结构均优于ADSCs组和EA组，并且Runx2/β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论 ADSCs移植联合电针可以有效改善卵巢摘除大鼠模型骨质疏松状况，这种作用可能和激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词：电针脂肪干细胞骨质疏松症 Wnt/β-catenin信号通路

鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系中TIGD1的表达及作用

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武汉大学学报（医学版） 2024年第7期45卷 780-785页

作者：陈哲肖伟刘萌芷李志勇彭涛武汉大学中南医院耳鼻咽喉头颈外科湖北武汉430071

目的:探讨触发转座衍生因子1(TIGD1)在鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系中的功能。方法:运用siRNA以及过表达质粒干扰CNE2和HNE1细胞系中的TIGD1基因,采用实时荧光定量PCR及Western Blot进行基因敲减以及过表达之后的效率验证;借助CCK-8的方... 详细信息

目的:探讨触发转座衍生因子1(TIGD1)在鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系中的功能。方法:运用siRNA以及过表达质粒干扰CNE2和HNE1细胞系中的TIGD1基因,采用实时荧光定量PCR及Western Blot进行基因敲减以及过表达之后的效率验证;借助CCK-8的方法测量不同处理组中细胞的增殖活性;采用实时荧光定量PCR、Western Blot和流式细胞技术对不同的处理组中细胞的凋亡率、细胞的周期变化情况进行检测。结果:在CNE2和HNE1细胞系中,TIGD1基因的敲减使细胞增殖减慢,细胞的凋亡率上升,细胞周期停滞;TIGD1基因的过表达使细胞增殖加快,细胞的凋亡率下降,细胞增殖加快。结论:TIGD1在鼻咽低分化鳞状细胞癌中的高表达,可能与疾病的发生及进展相关,这可为寻找鼻咽低分化鳞状细胞癌的治疗靶点提供线索。

关键词：触发转座衍生因子1 鼻咽低分化鳞状细胞癌增殖凋亡

抑制白三烯介导的炎症反应改善新生鼠急性肺损伤和支气管肺发育不良

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武汉大学学报（医学版） 2024年第4期45卷 398-405页

作者：徐悦诗兰舰杨璞赵东赤武汉大学中南医院儿科湖北武汉430071

目的:探究5-脂氧酶抑制剂齐留通和白三烯受体拮抗剂孟鲁司特缓解脂多糖(LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤(ALI)和支气管肺发育不良(BPD)病理变化的效果。方法:新生大鼠分为对照组、二甲基亚砜(DMSO)对照组、模型组(LPS组)、LPS+孟鲁司特组... 详细信息

目的:探究5-脂氧酶抑制剂齐留通和白三烯受体拮抗剂孟鲁司特缓解脂多糖(LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤(ALI)和支气管肺发育不良(BPD)病理变化的效果。方法:新生大鼠分为对照组、二甲基亚砜(DMSO)对照组、模型组(LPS组)、LPS+孟鲁司特组、LPS+齐留通组。对照组为正常新生Wistar大鼠娩出后给予0.9%NaCl、DMSO;模型组为Wistar大鼠孕20及21天连续2 d腹腔注射LPS(2.5 mg/kg),干预组为模型鼠娩出后给予孟鲁司特、齐留通10 mg/kg,隔天一次腹腔注射,直至生后14 d。观察各组幼鼠出生24 h内、生后第7、14天肺组织病理改变,检测白三烯合成酶5-脂氧合酶(5-LO)及白三烯受体1(CysLTR1)在肺组织中的表达,ELISA检测肺泡灌洗液中LTB4和细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量变化。结果:成功构建ALI和BPD模型鼠,观察到ALI和BPD模型鼠肺组织中5-LO、CysLTR1 mRNA和蛋白质表达量增高,肺泡灌洗液中LTB4以及促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量升高。齐留通组5-LO表达量下降,LTB4及IL-1β、IL-6、TNF-α含量下降;孟鲁司特组CysLTR1表达量和LTB4含量与模型组无差异,IL-1β、IL-6、TNF-α含量下降;齐留通组和孟鲁司特组肺组织病变较LPS组改善。结论:5-脂氧酶抑制剂和白三烯受体拮抗剂可减轻ALI以及BPD病理变化。

关键词：急性肺损伤支气管肺发育不良白三烯抗白三烯药炎症反应

褪黑素对链脲佐菌素诱导的糖尿病肺纤维化的作用及机制研究

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中华内分泌代谢杂志 2024年第6期40卷 505-514页

作者：付庭吕李国瑞熊锐何如愿刘博昊李宁耿庆武汉大学人民医院胸外科武汉430060 吉林大学第一医院胸外科长春130021

目的探讨褪黑素对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病肺纤维化的作用及其具体调控机制。方法将C57BL/6小鼠以随机数字表法随机分为对照组、STZ组、STZ+低剂量褪黑素(5 mg/kg)组、STZ+高剂量褪黑素(30 mg/kg)组,采用单次腹腔注... 详细信息

目的探讨褪黑素对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病肺纤维化的作用及其具体调控机制。方法将C57BL/6小鼠以随机数字表法随机分为对照组、STZ组、STZ+低剂量褪黑素(5 mg/kg)组、STZ+高剂量褪黑素(30 mg/kg)组,采用单次腹腔注射STZ(150 mg/kg)建立糖尿病肺纤维化小鼠模型,2周后血糖≥16.7 mmol/L为造模成功,随后给予褪黑素灌胃4周并喂养至16周处死取材。将人脐静脉内皮细胞分为对照组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度为33.3 mmol/L)、高糖+低剂量褪黑素(5μmol/L)组、高糖+高剂量褪黑素(20μmol/L)组,药物刺激结束后收集各组细胞用于后续检测。采用马松染色和免疫荧光染色观察肺纤维化病变,Western印迹法检测相关蛋白表达,采用转染沉默调节蛋白3(Sirtuin 3,Sirt3)siRNA的方法敲低Sirt3。结果与对照组相比,STZ组肺组织发生显著的纤维化病变,而STZ+低剂量褪黑素组、STZ+高剂量褪黑素组纤维化均较STZ组减少。同时,与对照组相比,STZ/高糖组内皮细胞标志物血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)显著减少(P<0.001;P<0.001),间质纤维化标志物胶原蛋白3(Collagen 3)、波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)显著增加(P<0.001,P=0.035,P<0.001;P<0.001,P<0.001,P<0.001),而STZ/高糖+低剂量褪黑素组、STZ/高糖+高剂量褪黑素组在给予褪黑素治疗后上述趋势被部分逆转。此外,与对照组相比,STZ/高糖组Sirt3的蛋白表达显著减少(P<0.001;P<0.001),而STZ/高糖+低剂量褪黑素组、STZ/高糖+高剂量褪黑素组的Sirt3的蛋白表达较STZ/高糖组增加(P=0.047,P<0.001;P=0.048,P<0.001)。转染Sirt3 siRNA敲低Sirt3的表达后,与高糖+高剂量褪黑素组相比,高糖+高剂量褪黑素+Sirt3 siRNA组内皮细胞标志物CD31显著减少(P=0.026),间质纤维化标志物Collagen 3、Vimentin和α-SMA显著增加(P<0.001,P<0.001,P<0.001)。结论褪黑素通过激活Sirt3的表达抑制内皮间质转化,进而减轻STZ诱导的糖尿病小鼠肺纤维化。

关键词：糖尿病肺纤维化褪黑素链脲佐菌素 Sirt3 内皮间质转化

股骨后髁角对内侧髌股韧带重建治疗复发性髌骨脱位疗效的影响

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武汉大学学报（医学版） 2024年第1期45卷 68-73页

作者：张镭文印宪倪曲波陈廖斌武汉大学中南医院骨科湖北武汉430071

目的:探讨股骨后髁角(PCA)对复发性髌骨脱位(RPD)患者行内侧髌股韧带(MPFL)重建术疗效的影响。方法:选2017年7月—2022年7月间符合纳入标准的复发性髌骨脱位患者38例(39膝),这些患者均行MPFL重建术,为了减少股骨滑车形态对结果的影响,按... 详细信息

目的:探讨股骨后髁角(PCA)对复发性髌骨脱位(RPD)患者行内侧髌股韧带(MPFL)重建术疗效的影响。方法:选2017年7月—2022年7月间符合纳入标准的复发性髌骨脱位患者38例(39膝),这些患者均行MPFL重建术,为了减少股骨滑车形态对结果的影响,按Dejour分型,将患者分为正常滑车组20例,滑车发育不良组(Dejour分型A、B、C、D型分别为4、2、12、1例)19例;以上2组按照后髁角大小,分为非大后髁角组(PCA0.05)。结论:MPFL重建术对RPD中期疗效满意,PCA对手术效果无明显影响。

关键词：复发性髌骨脱位内侧髌股韧带关节重建股骨后髁角

肾小管上皮细胞程序性死亡在草酸钙结石形成中的作用

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中华泌尿外科杂志 2024年第6期45卷 485-488页

作者：董才韬廖文彪杨嗣星武汉大学人民医院泌尿外科武汉430061

草酸钙结石是肾结石最主要的类型。草酸钙晶体或高草酸尿诱导的肾小管上皮细胞损伤和程序性死亡是草酸钙结石形成的关键因素。肾小管上皮细胞程序性死亡可为草酸钙晶体提供附着位点、参与构成结石成分和加剧周边组织损伤。多种细胞程序... 详细信息

草酸钙结石是肾结石最主要的类型。草酸钙晶体或高草酸尿诱导的肾小管上皮细胞损伤和程序性死亡是草酸钙结石形成的关键因素。肾小管上皮细胞程序性死亡可为草酸钙晶体提供附着位点、参与构成结石成分和加剧周边组织损伤。多种细胞程序性死亡模式可同时参与损伤过程,调节其中串联点,有望达到多层级调控。本文就肾小管上皮细胞程序性死亡与草酸钙结石形成机制间的联系,以及不同的程序性死亡模式参与草酸钙结石发病机制的相关研究进行总结和探讨。

关键词：草酸钙结石程序性细胞死亡细胞凋亡肾小管上皮细胞