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gdh基因在猪链球菌中的分布及重组GDH的抗原性研究

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中国人兽共患病学报 2008年第6期24卷 522-525页

作者：潘秀珍赵华梅葛俊超王长军李先富郑峰唐家琪南京军区军事医学研究所

目的了解谷氨酸脱氢酶基因(gdh)在不同血清型猪链球菌(***)中的分布情况,分析重组谷氨酸脱氢酶(GDH)的抗原性,为其应用于***感染诊断和疫苗研究提供实验数据。方法应用PCR方法检测不同血清型***中的gdh;利用45 kD重组GDH制备多克隆抗体,... 详细信息

目的了解谷氨酸脱氢酶基因(gdh)在不同血清型猪链球菌(***)中的分布情况,分析重组谷氨酸脱氢酶(GDH)的抗原性,为其应用于***感染诊断和疫苗研究提供实验数据。方法应用PCR方法检测不同血清型***中的gdh;利用45 kD重组GDH制备多克隆抗体,Western blot方法分析***各血清型菌株与多克隆抗体的反应以及实验感染***2型的猪血清与重组GDH的反应情况。结果在***35个血清型标准株中,除了22、26、27、29、32及34型以外,其余包括1、2、1/2、7、9和14型在内的29个血清型、61株国内外***2型分离株全部扩增出目的条带。用重组GDH免疫小鼠,在小鼠血清中均检测到抗GDH的抗体;Western blot结果显示,全部被检菌株与抗GDH血清反应均有单一特异性反应条带,6份实验感染猪血清均能与重组GDH产生反应条带。结论重组GDH具有免疫原性和反应原性,该蛋白有可能作为建立诊断试验的候选抗原,为进一步开展相关的血清学诊断方法和疫苗研究奠定基础。

关键词：猪链球菌谷氨酸脱氢酶 gdh基因抗原

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胶体金标记抗体技术

生物化学与生物物理进展 1989年第1期16卷 31-36页

作者：韩刚毅济南军区军事医学研究所

胶体金标记抗体技术是近十多年来免疫组织(或细胞)化学迅速发展起来的一项免疫标记技术。在国外许多研究领域中已经得到发展,并逐渐受到国内同行的重视。本文介绍了胶体金标记抗体技术的原理、方法及其发展概况。

关键词：胶体金标记抗体技术

革螨、恙螨作为肾综合征出血热传播媒介的研究进展

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中国人兽共患病杂志 2001年第3期17卷 87-88,96页

作者：张云吴光华南京军区军事医学研究所

革螨、恙螨为世界性分布。本世纪40年代根据人体实验和流行病学分析结果，提出肾综合征出血热（HFRS）有虫媒传播的依据。70～80年代对HFRS病毒（HFRSV）形态及生化研究结果，证明本病病毒的形态大小和特征类似布尼亚病毒科（Bunyaviri... 详细信息

革螨、恙螨为世界性分布。本世纪40年代根据人体实验和流行病学分析结果，提出肾综合征出血热（HFRS）有虫媒传播的依据。70～80年代对HFRS病毒（HFRSV）形态及生化研究结果，证明本病病毒的形态大小和特征类似布尼亚病毒科（Bunyaviridae）病毒，而该科的已知病毒均属虫媒病毒，因而引起对虫媒传播的进一步注意，其中以对革螨和恙螨的研究较多。现将有关研究进展综述如下：

关键词：肾综合征出血热传播媒介革螨恙螨

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传染性法氏囊病病毒的生态学与流行病学研究

中国兽医学报 1998年第5期18卷 430-433页

作者：周宗安王永山邓小昭刁振宇高建施正良罗函禄方元南京军区军事医学研究所

血清学调查结果表明，麻雀、鸭、鹅等均可自然感染传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），其血清阳性率分别为７．４％（４／５４），９５．５％（３６３／３８０）和９．４％（１１／１１７）。从鸭和麻雀分离到的ＩＢＤＶ可适应于鸡胚和鸡... 详细信息

血清学调查结果表明，麻雀、鸭、鹅等均可自然感染传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），其血清阳性率分别为７．４％（４／５４），９５．５％（３６３／３８０）和９．４％（１１／１１７）。从鸭和麻雀分离到的ＩＢＤＶ可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞，并产生ＣＰＥ，对ＳＰＦ鸡有致病性。病毒核酸和结构蛋白的电泳分析结果表明，鸡源、鸭源和麻雀源ＩＢＤＶ均有２条核酸带，５条蛋白带，毒株间的病毒核酸及结构蛋白电泳迁移率无显著差异，但其结构蛋白的相对含量不尽一致。经鉴定，鸡源、鸭源和麻雀源ＩＢＤＶ均属血清Ⅰ型，为同源病毒。本研究结果提示，鸡并非是ＩＢＤＶ的唯一自然动物宿主，非鸡禽鸟类宿主的存在可引起ＩＢＤ的传播和续源流行，也为ＩＢＤＶ的变异提供了特殊的生态条件，成为诱导ＩＢＤＶ变异的另一重要因素。

关键词：传染性法氏囊病病毒生态学流行病学

汉滩病毒S基因全长和截短片段在大肠杆菌中表达及其初步应用

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中华传染病杂志 1999年第3期17卷 176-180页

作者：王长军唐家琪操敏李光富潘秀珍李先富南京军区军事医学研究所

目的体外克隆表达汉滩病毒全长及部分核蛋白编码基因，筛选病毒核蛋白在人体体液应答中的主要抗原决定簇区，以期获得高质量核蛋白抗原，为研制新型肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）基因工程诊断试剂奠定基础。方法利用聚合酶链反应（ＰＣＲ... 详细信息

目的体外克隆表达汉滩病毒全长及部分核蛋白编码基因，筛选病毒核蛋白在人体体液应答中的主要抗原决定簇区，以期获得高质量核蛋白抗原，为研制新型肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）基因工程诊断试剂奠定基础。方法利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性内切酶酶切的方法分离汉滩病毒７６－１１８Ｓ基因全长及部分氨基端编码基因（Ｓ、ＳＡ、ＳＢ、ＳＣ和ＳＤ），分别将各编码基因克隆入Ｔ７原核表达载体，在大肠杆菌中表达；免疫印迹试验（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔａｎａｌｙｓｉｓ）分析重组抗原活性。结果完整和截短核蛋白皆得到有效表达，相对分子质量分别为５００００（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＳｐｒｏｔｅｉｎ，ｒＳ）、４５００（ｒＳＡ）、２２０００（ｒＳＢ）、２５０００（ｒＳＣ）和２７０００（ｒＳＤ），Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析表明截短核蛋白（ｒＳＢ、ｒＳＣ和ｒＳＤ）具有较好的抗原活性；粗提抗原Ｄｏｔｂｌｏｔ方法检测ＨＦＲＳ患者血清结果与ＩＦＡ法一致；重组小片段抗原与抗汉滩病毒单克隆抗体５Ｈ５及Ｈ７可发生特异性反应。结论汉滩病毒核蛋白的氨基端含有一主要抗原决定簇区；原核表达的截短核蛋白在ＨＦＲＳ的血清学诊断中具有一定的价值。

关键词：汉滩病毒重组核蛋白肾综合征出血热大肠杆菌

PCR/RFLP用于恙虫病立克次体基因分析的研究

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临床检验杂志 1998年第2期16卷 71-74页

作者：郭恒彬唐家琪李先富潘秀珍张云吴光华南京军区军事医学研究所

为查明江苏地区恙虫病立克次体（Ｒｔ）型别及目的基因序列差异性。本室构建Ｒｔ外膜主要蛋白型特异抗原５６ｋＤ的群、型引物进行ＰＣＲ分型。选用ＳｎａＢＩ，ＨｈａＩ和ＢｇｌⅡ限制性核苷酸内切酶切割ＰＣＲ产物（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ... 详细信息

为查明江苏地区恙虫病立克次体（Ｒｔ）型别及目的基因序列差异性。本室构建Ｒｔ外膜主要蛋白型特异抗原５６ｋＤ的群、型引物进行ＰＣＲ分型。选用ＳｎａＢＩ，ＨｈａＩ和ＢｇｌⅡ限制性核苷酸内切酶切割ＰＣＲ产物（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）方法，对江苏地区的５份Ｒｔ目的基因分析研究与Ｇｉｌｉａｍ，Ｋａｒｐ，Ｋａｔｏ，Ｋａｗａｓａｋｉ和Ｋｕｒｏｋｉ标准参照株Ｒｔ比较，结果证明江苏地区Ｒｔ型别与日本Ｋａｗａｓａｋｉ型相似，但缺乏ＨｈａＩ的酶切位点。

关键词：恙虫病立克次体聚合酶链反应 RFLP 基因分型

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甘肃省肃南县首次发现丹氏血蜱

兰州大学学报（自然科学版） 1996年第1期32卷 138-138,141页

作者：孙朝霞张宇撰田红李春颖李秋瑾杨卫华兰州军区军事医学研究所

甘肃省肃南县首次发现丹氏血蜱孙朝霞，张宇撰，田红，李春颖，李秋瑾，杨卫华（兰州军区军事医学研究所，兰州７３００００）蜱是家畜和野生动物体外经常寄生的一种吸血节肢动物，除叮吸宿主血液，造成局部机械损伤外，更主要的还是人... 详细信息

甘肃省肃南县首次发现丹氏血蜱孙朝霞，张宇撰，田红，李春颖，李秋瑾，杨卫华（兰州军区军事医学研究所，兰州７３００００）蜱是家畜和野生动物体外经常寄生的一种吸血节肢动物，除叮吸宿主血液，造成局部机械损伤外，更主要的还是人畜共患或自然疫源性疾病的传播媒介．...

关键词：啤丹氏血蜱甘肃家畜生活习性宿主

乙型肝炎表面抗原124aa分子在大肠杆菌中的高效表达

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免疫学杂志 1999年第3期15卷 180-182页

作者：房德兴李法卿谭维国陈华标金慧英李素芹南京军区军事医学研究所

利用聚合酶链反应特异性扩增编码乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）羧基末端１２４个氨基酸的基因片段，并将其在大肠杆菌中获得了高效表达。表达产物氨基末端有１个含６组氨酸肽段的２０氨基酸融合部分，分子量１６１７８Ｄａ，以包含体... 详细信息

利用聚合酶链反应特异性扩增编码乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）羧基末端１２４个氨基酸的基因片段，并将其在大肠杆菌中获得了高效表达。表达产物氨基末端有１个含６组氨酸肽段的２０氨基酸融合部分，分子量１６１７８Ｄａ，以包含体形式存在，约占细菌总蛋白的２２％。以ＨｉＴｒａｐ亲和层析纯化，纯度可达９５％以上。分别用抗ＨＢｓＡｇ多克隆抗体和抗ＨＢｓＡｇａ单克隆抗体进行ＥＬＩＳＡ检测表明，该蛋白具有ＨＢｓＡｇ反应原性。

关键词：乙型肝炎表面抗原大肠杆菌基因表达 HBsAg

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固相目视比色法简易测定水中痕量镍

工业水处理 1996年第1期16卷 30-31页

作者：赵进沛杨志奎李清亚北京军区军事医学研究所

建立了一个镍的固相目视比色分析方法，最低检测浓度为０．６μｇ／ｍＬ；精密度、准确度均好，是一种简易的水质快速检测方法。

关键词：镍测定固相目视比色法水质分析