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镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠血压及粪便菌群的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 76-85页

作者：刘双芳金华凌必时祁尚文司美龙张秋菊王宇甘肃中医药大学兰州730000 敦煌医学与转化教育部重点实验室兰州730000

目的:观察镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠(SHR)血压及粪便菌群的影响。方法:9周龄雄性SHR75只随机分为SHR组、贝那普利组(1.00 mg·kg^(-1)·d^(−1))、镇肝熄风汤高剂量组(34.5 g·kg^(-1)·d^(−1))、中剂量组(17.25 g·kg^(-1)·d^(−1)... 详细信息

目的:观察镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠(SHR)血压及粪便菌群的影响。方法:9周龄雄性SHR75只随机分为SHR组、贝那普利组(1.00 mg·kg^(-1)·d^(−1))、镇肝熄风汤高剂量组(34.5 g·kg^(-1)·d^(−1))、中剂量组(17.25 g·kg^(-1)·d^(−1))、低剂量组(8.625 g·kg^(-1)·d^(−1)),同源9周龄雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠15只为正常组,正常组、SHR组予等体积蒸馏水灌胃,连续干预8周,给药期间定期检测大鼠血压。干预结束后,用无菌冻存管收集新鲜粪便,进行16S扩增子信息采集与分析;收集大鼠血浆、海马及回肠组织,进行超高液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测。结果:镇肝熄风汤降低了SHR的收缩压和舒张压。与SHR组比较,镇肝熄风汤降低了SHR粪便菌群多样性;门水平,镇肝熄风汤增加了SHR疣微菌门(Verrucomicrobia)、放线菌门(Actinobacteria)物种相对丰度,降低了互养菌门(Synergistetes)、软壁菌门(Tenericutes)、Candidatus Saccharibacteria物种相对丰度。种水平,与SHR组比较,镇肝熄风汤增加了Blautia wexlerae、Fusicatenibacter saccharivorans、嗜黏蛋白阿克曼氏菌(Akkermansia muciniphila)物种相对丰度;降低了薰衣草梭菌(Clostridium lavalense)、产丁酸肠杆菌(Intestinimonas butyriciproducens)、Acetatifactor muris、拉瓦异普雷沃菌(Alloprevotella rava)、缬草杆菌(Oscillibacter valericigenes)物种相对丰度。经Spearman相关分析,大鼠收缩压与产乙醇杆菌属(Ethanoligenens)、气球菌属(Aerococcus)、丁酸弧菌属(Butyrivibrio)、欧陆森氏菌属(Olsenella)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、梭菌属XIVBb(Clostridium XIVBb)、异杆菌属(Allobaculum)、梭菌杆菌属(Fusicatenibacter)物种相对丰度呈负相关,与异普雷沃菌(Alloprevotella)物种相对丰度呈正相关。镇肝熄风汤升高了SHR血浆、海马5-羟色胺(5-HT)、回肠5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量,降低了回肠5-HT、血浆5-HIAA含量,且海马与回肠5-HT含量呈负相关。结论:镇肝熄风汤可降低SHR血压,可能与降低SHR菌群多样性、调节菌群结构,增加产5-HT、短链脂肪酸菌的相对丰度,降低与肠道炎症相关致病菌相对丰度有关。

关键词：镇肝熄风汤高血压粪便菌群 5-羟色胺(5-HT)

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敦煌芮草膏防治大鼠膝骨关节炎的作用机制

中国中西医结合杂志 2024年

作者：李亮亮李爽杜籼芹高榕妮陈启启蔺兴遥敦煌医学与转化教育部重点实验室甘肃中医药大学基础医学院

目的探讨敦煌芮草膏对大鼠膝骨关节炎（KOA）的治疗作用及其机制。方法将72只SPF级SD大鼠，按随机数字表法分为6组，每组12只。除空白组外，剩余60只大鼠采用关节腔注射木瓜蛋白酶制造KOA模型，并且分为5组，即模型组、双氯芬酸乳膏组... 详细信息

目的探讨敦煌芮草膏对大鼠膝骨关节炎（KOA）的治疗作用及其机制。方法将72只SPF级SD大鼠，按随机数字表法分为6组，每组12只。除空白组外，剩余60只大鼠采用关节腔注射木瓜蛋白酶制造KOA模型，并且分为5组，即模型组、双氯芬酸乳膏组（DDE）、按摩组（MGC）、敷药组（DRO）、膏摩组（DRO-M）。除空白组外，各组给予相应药物干预3周。通过CT影像学测定膝关节CT值，测量膝关节肿胀度并进行Lequesne评分，肉眼观察膝关节软骨并进行Pelletier评分，番红固绿、甲苯胺蓝、HE染色观察软骨组织形态结构并进行Mankin评分，ELISA法检测血清中白细胞介素（IL）-1β、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平，Western Blot法检测软骨组织中IL-6、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、磷酸化（p）-p38 MAPK、基质金属蛋白酶13(MMP13)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)蛋白表达。免疫荧光法检测软骨组织MMP13平均荧光强度。结果与空白组比较，模型组大鼠膝关节肿胀度显著增加（P部分缺损，表面有裂纹，色泽较好；DRO组及DRO-M组软骨结构完整，表面较平滑、色泽好、基本无裂纹，接近正常水平。各干预组大鼠软骨Pelletier评分均降低（P敦煌芮草膏具有改善大鼠KOA症状的作用。这种作用机制可能是通过抑制p38MAPK信号通路，进而下调p38MAPK、p-p38MAPK、MMP13、ADAMTS5蛋白表达来实现的。

关键词：敦煌芮草膏膝骨关节炎 p38活化蛋白激酶信号通路机制

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食欲调控系统介导高血压发病的分子机制

中国病理生理杂志 2024年第8期40卷 1536-1541页

作者：祁尚文凌必时金华刘双芳甘肃中医药大学敦煌医学与转化教育部重点实验室甘肃兰州730000

食欲调节系统通过促进/抑制食欲神经元/因子,在促进新陈代谢、调节能量、维持体重等方面发挥着重要作用。近年来的研究表明,食欲调节系统可直接影响多种与高血压相关的病理生理机制,包括交感神经兴奋、水钠潴留、血管损伤、氧化应激等... 详细信息

食欲调节系统通过促进/抑制食欲神经元/因子,在促进新陈代谢、调节能量、维持体重等方面发挥着重要作用。近年来的研究表明,食欲调节系统可直接影响多种与高血压相关的病理生理机制,包括交感神经兴奋、水钠潴留、血管损伤、氧化应激等。本文就中枢食欲神经元、中枢食欲因子和外周食欲因子在高血压中的作用进行综述。

关键词：食欲高血压下丘脑

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中药药理学体外实验方法研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第20期30卷 283-289页

作者：张秋菊李能莲王宇金华甘肃中医药大学兰州730000 敦煌医学与转化教育部重点实验室兰州730000

体外实验是中药药理学研究不可或缺的方法,但由于中药来源广泛、成分多样、理化性质不稳定等因素阻碍了其体外实验的开展。因此,寻找更为科学、合理的体外药理学研究方法已成为亟待解决的问题。目前中药药理学体外实验常用的方法有直接... 详细信息

体外实验是中药药理学研究不可或缺的方法,但由于中药来源广泛、成分多样、理化性质不稳定等因素阻碍了其体外实验的开展。因此,寻找更为科学、合理的体外药理学研究方法已成为亟待解决的问题。目前中药药理学体外实验常用的方法有直接给药法和间接给药法,间接给药法又包括含药血清/浆法、含药肠吸收液法、含药肝孵育液法等。随着计算机技术和系统生物学的发展,将高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)、组学、网络药理学、计算机/人工智能辅助药物设计等技术与中药体外实验方法相结合,不仅大大降低了科研实验成本,还明显提高了中药药理作用探索、有效成分筛选及药物研发的效率,已逐渐被认可并广泛应用。该文就目前常用的中药药理学体外实验方法及其进展做一梳理,以期为选择合理的研究方法提供帮助。

关键词：中药药理学体外实验含药血清/浆含药肠吸收液含药肝孵育液法

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中医药调控ROS防治阿尔茨海默病研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 281-288页

作者：王佳伟魏本君甘肃中医药大学兰州730000 甘肃中医药大学甘肃省中医方药挖掘与创新转化重点实验室敦煌医学与转化教育部重点实验室兰州730000

阿尔茨海默病(AD)病理机制十分复杂,有多种假说,β-淀粉样蛋白(Aβ)和Tau样蛋白磷酸化是其主流学说。氧化应激(OS)是其他假说和机制的连接桥梁,在多种假说中有关键作用。因此,针对ADOS的治疗有利于缓解疾病进展。活性氧(ROS)既是一种氧... 详细信息

阿尔茨海默病(AD)病理机制十分复杂,有多种假说,β-淀粉样蛋白(Aβ)和Tau样蛋白磷酸化是其主流学说。氧化应激(OS)是其他假说和机制的连接桥梁,在多种假说中有关键作用。因此,针对ADOS的治疗有利于缓解疾病进展。活性氧(ROS)既是一种氧化剂,也是一种氧化产物,与Aβ和Tau样蛋白相互作用,活化小胶质细胞及星形胶质细胞,触发炎症和线粒体功能障碍,导致脑内环境恶化,加快疾病发生发展。ROS作为诱导OS的信号使者广泛参与了AD疾病进程,可能是AD疾病进展的新靶点。中药单体及复方在AD的防治中起到越来越重要的作用,最新研究发现中医药有效防治AD与调控ROS关系密切。从ROS探讨中医药治疗AD发生发展的作用机制的研究较多,但尚缺乏系统综述。该文通过分析汇总近年来国内外文献,从ROS的产生及生理,在AD的作用机制及中医药通过相关途径调控ROS防治AD方面进行综述,为中医药对ROS调控研究提供参考,以期为防治AD提供新靶点和新方法。

关键词：中医药阿尔茨海默病(AD) 氧化应激(OS) β淀粉样蛋白(Aβ) Tau样蛋白磷酸化活性氧(ROS)

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“金水相生”治法的历史源流及其发展探析

中华中医药杂志 2024年第09期 4715-4718页

作者：洪涛蒋倩羽李金田甘肃中医药大学中医临床学院敦煌医学与转化教育部重点实验室

中医学很早就以五行相生规律“金生水”来说明人体肺肾的生理功能和病理传变，至“水生金”理论提出，使“金水相生”理论更趋完善。肺肾经脉相连、同主呼吸运动和共司水液代谢等生理、病理上的关系为“金水相生”理论的形成及系统化起... 详细信息

中医学很早就以五行相生规律“金生水”来说明人体肺肾的生理功能和病理传变，至“水生金”理论提出，使“金水相生”理论更趋完善。肺肾经脉相连、同主呼吸运动和共司水液代谢等生理、病理上的关系为“金水相生”理论的形成及系统化起了重要作用。历代医家亦注重在临床实践方面探讨“金水相生”的治疗方法及相关方药，形成了“肾病治肺”“肺病治肾”“肺肾同治”“肺脾肾同治”等治法。从现今诸多医家的论述可以看出：狭义的“金水相生”单指滋养肺肾之阴，广义的“金水相生”亦从水液代谢和呼吸功能方面而言。近现代医家已将金水相生法作为中医的基本治法之一，广泛应用于临床各科疑难杂症的治疗。

关键词：金水相生肾病治肺肺病治肾肺肾同治肺脾肾同治

基于IGF-1/PI3K/Akt信号通路探讨红芪多糖对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 130-139页

作者：苗琳琳万生芳张磊李荣科魏昭辉朱小利安惠甘肃中医药大学基础医学院兰州730000 甘肃省中医方药挖掘与创新转化重点实验室兰州730030 甘肃中医药大学敦煌医学与转化教育部重点实验室兰州730030

目的:观察红芪多糖对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃窦平滑肌细胞凋亡及胰岛素样生长因子-1/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(IGF-1/PI3K/Akt)通路蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法:将62只Wistar雄性大鼠随机分为空白组12只、造模组50只。造... 详细信息

目的:观察红芪多糖对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃窦平滑肌细胞凋亡及胰岛素样生长因子-1/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(IGF-1/PI3K/Akt)通路蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法:将62只Wistar雄性大鼠随机分为空白组12只、造模组50只。造模组采用小剂量多次腹腔注射链脲佐菌素联合不规律高脂高糖饮食法4周构建大鼠DGP模型。将成模大鼠随机分为模型组、莫沙必利组和红芪多糖高、中、低剂量组。红芪多糖高、中、低剂量组分别予红芪多糖200、100、50 mg·kg^(-1)灌胃,莫沙必利组予枸橼酸莫沙必利1.35 mg·kg^(-1)灌胃,空白组和模型组予等体积纯净水灌胃,每日1次,连续8周。每2周测定大鼠随机血糖及体质量,检测胃排空率;苏木素-伊红(HE)染色观察胃窦组织平滑肌病理形态;原位末端标记法(TUNEL)染色检测胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数;免疫组化法检测胃窦组织平滑肌IGF-1、磷酸化(p)-PI3K、p-Akt蛋白的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胃窦组织平滑肌中IGF-1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠各时间点随机血糖显著升高(P<0.01),体质量、胃排空率显著降低(P<0.01),胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数显著升高(P<0.01),IGF-1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠给药8周后随机血糖降低,体质量、胃排空率均明显升高(P<0.05,P<0.01)、胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数明显降低(P<0.05,P<0.01),IGF-1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与莫沙比利组比较,红芪多糖低剂量组给药6、8周后随机血糖升高、体质量减轻(P<0.05,P<0.01),红芪多糖低剂量组大鼠胃排空率降低、胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数升高(P<0.05),红芪多糖各剂量组p-PI3K/PI3K蛋白表达,以及红芪多糖低剂量组IGF-1、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);与红芪多糖高剂量组比较,红芪多糖低剂量组给药6、8周后随机血糖升高、体质量减轻(P<0.05,P<0.01),红芪多糖低、中剂量组大鼠胃排空率降低、胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数升高(P<0.05,P<0.01),IGF-1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);与红芪多糖中剂量比较,HPS低剂量组给药6、8周后体质量、大鼠胃排空率降低及胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数升高(P<0.05,P<0.01),IGF-1、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:红芪多糖能够在一定程度上保护胃窦平滑肌细胞凋亡损伤并促进胃动力,其机制可能与激活IGF-1/PI3K/Akt信号通路,上调IGF-1、p-PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达有关。

关键词：糖尿病胃轻瘫红芪多糖胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路胃窦平滑肌凋亡大鼠

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基于网络药理学及实验验证探讨敦煌医方小补肝汤抗运动性疲劳的作用机制

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中药药理与临床 2024年第6期40卷 25-32页

作者：芦文娟张禄璐梁永林霍敏峰张李香甘肃中医药大学基础医学院兰州730030 敦煌医学与转化教育部重点实验室兰州730030

目的:运用网络药理学及实验验证的方法探讨小补肝汤干预运动性疲劳的有效成分及可能作用机制。方法:在中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索小补肝汤的活性成分;通过人类基因组数据库(Genecards)、药物数据库(Drugbank)、在线人类孟德尔遗... 详细信息

目的:运用网络药理学及实验验证的方法探讨小补肝汤干预运动性疲劳的有效成分及可能作用机制。方法:在中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索小补肝汤的活性成分;通过人类基因组数据库(Genecards)、药物数据库(Drugbank)、在线人类孟德尔遗传(OMIM)、遗传药理学与药物基因组学数据库(PharmGkb),获取疾病的靶标基因;利用Venny2.1.0在线工具绘制药物与疾病靶点的韦恩图,获得交集靶点,将其导入STRING数据库,构建蛋白相互作用(PPI)网络图,通过Bioconductor等在线软件进行基因组数据的高通量分析,得到基因本体(GO)生物功能注释图和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集通路图,预测作用通路,并采用动物实验验证网络药理学预测结果。结果:通过筛选得到小补肝汤36种活性成分,药物-疾病共同靶点244个;通过构建药物-成分-靶点-疾病调控网络,筛选出豆甾醇(Stigmasterol)、海风藤酮(Kadsurenone)、β-谷固醇(Beta-sitosterol)、山蒟酮C(Hancinone C)及黄杉素(Taxifolin)等核心成分;通过蛋白互作网络的构建,筛选出AKT1、GNAQ及PTGS2等11个关键靶点;GO富集分析得出生物学过程BP 3675个,包括对药物的反应、对氧含量的反应、对缺氧的反应等;细胞组分379个,包括膜筏、膜微区、线粒体外膜等;分子功能624个,包括DNA-结合转录因子结合、泛素蛋白连接酶结合及G蛋白偶联胺受体活性等;KEGG富集分析得出涉及的信号通路主要有钙信号通路(GNAQ-PLCB2-IP3R1-CAM)、cAMP信号通路和甲状腺激素信号等通路。动物实验结果显示,与正常对照组比较,模型对照组负重游泳力竭时间显著减少,血清中乳酸(LD)、尿素氮(BUN)的含量显著升高,肝糖原与肌糖原的含量显著降低(P<0.01),骨骼肌组织病理可见骨骼肌细胞排列紊乱不均,有较多炎症细胞弥漫浸润,骨骼肌组织GNAQ、PLCB2、IP3RI、CAM蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,各给药组小鼠负重游泳力竭时间显著增加(P<0.01),血清中LD、BUN的含量明显降低(P<0.05),肝糖原与肌糖原的含量明显升高(P<0.05),各给药组小鼠骨骼肌纤维排列有所改善,炎性细胞浸润明显减少,骨骼肌组织GNAQ、PLCB2、IP3RI、CAM蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:小补肝汤能下调运动性疲劳小鼠骨骼肌组织中GNAQ、PLCB2、IP3RI、CAM蛋白表达,从而调节胞内钙离子浓度,减轻因钙超载导致的细胞线粒体、肌浆网功能破坏而引起的疲劳。

关键词：小补肝汤网络药理学运动性疲劳鸟嘌呤核苷酸结合蛋白q肽钙离子

敦煌芮草膏对Ⅱ度冻伤大鼠的治疗作用及抗炎作用机制

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中国中西医结合杂志 2024年第6期44卷 709-716页

作者：张莉尚芸王强杜籼芹李爽李亮亮高榕妮蔺兴遥甘肃中医药大学基础医学院兰州730000 敦煌医学与转化教育部重点实验室兰州730000

目的探究敦煌芮草膏对冻伤的治疗作用及机制。方法将96只SPF级SD大鼠用随机数字表法分为6组,每组16只。除空白组之外,剩余80只大鼠采用液氮冷冻法造模,分为5组,即模型(M)组,敦煌芮草膏低(DRP-L)、中(DRP-M)、高剂量(DRP-H)组,磺胺嘧... 详细信息

目的探究敦煌芮草膏对冻伤的治疗作用及机制。方法将96只SPF级SD大鼠用随机数字表法分为6组,每组16只。除空白组之外,剩余80只大鼠采用液氮冷冻法造模,分为5组,即模型(M)组,敦煌芮草膏低(DRP-L)、中(DRP-M)、高剂量(DRP-H)组,磺胺嘧啶银乳膏(SSC)组。除空白组外,其余组每日擦涂给药。于造模后第3、7天取材,每组8只。检测冻伤大鼠皮损大体情况、创口愈合率、肿胀率、病理检查;ELISA法检测大鼠血清中促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、血管内皮生长因子(VEGF)表达;采用实时荧光定量PCR、Western Blot法检测局部创面组织中Toll样受体4(TLR4),髓样分化因子88(MyD88),核转录因子κB p65(NF-κB p65) mRNA及蛋白表达。结果与空白组比较,第3、7天,M组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量及VEGF表达量均明显升高(P敦煌芮草膏可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的激活,减少炎症因子的释放和表达,来发挥冻伤的治疗作用。

关键词：敦煌芮草膏冻伤药效机制中药