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炭炒地榆鞣质提取物的壳聚糖PLGA乳液抑菌活性研究

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动物医学进展 2024年第8期45卷 59-64页

作者：苏宏芮李嘉雯林欣怡倪泽睿洪海龙彭伟龙伯若楠扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了探讨炭炒地榆鞣质提取物的壳聚糖PLGA(SCCP)乳液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)的杀伤作用,用96孔板微量肉汤稀释法测定其对***的最低抑菌浓度、最小杀菌浓度和联合药敏试验检测抑菌活性。结果显示,与炭炒地榆鞣质提... 详细信息

为了探讨炭炒地榆鞣质提取物的壳聚糖PLGA(SCCP)乳液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)的杀伤作用,用96孔板微量肉汤稀释法测定其对***的最低抑菌浓度、最小杀菌浓度和联合药敏试验检测抑菌活性。结果显示,与炭炒地榆鞣质提取物相比,SCCP的抑菌活性更强,对***的最小杀菌浓度为0.063 mg/mL。表明SCCP对***有较好的抑菌活性,有望开发成新型中药抗菌制剂。

关键词：炭炒地榆鞣质提取物壳聚糖 PLGA乳液金黄色葡萄球菌抑菌活性

浅谈高校动物生物安全三级实验室管理与经验交流

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中国比较医学杂志 2024年第9期34卷 88-93页

作者：田晓彦杨文浩扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

动物生物安全三级实验室(ABSL-3)作为国家新发再发传染病的生物安全体系基础支撑平台,为研究高致病性病原微生物的生物学特性、预防和治疗手段提供了至关重要的硬件基础。ABSL-3实验室也为高校“产学研”结合提供了重要支撑。ABSL-3实... 详细信息

动物生物安全三级实验室(ABSL-3)作为国家新发再发传染病的生物安全体系基础支撑平台,为研究高致病性病原微生物的生物学特性、预防和治疗手段提供了至关重要的硬件基础。ABSL-3实验室也为高校“产学研”结合提供了重要支撑。ABSL-3实验室正常运行和科研工作顺利开展,离不开应急预案工作的精心策划和有效实施。此外,实验室合理的设计和布局也是规避和降低意外事故的关键因素。本文结合扬州大学ABSL-3建设管理实践,从应急预案准备工作入手对实验室建设布局、日常运行及污水处理、终末消毒具体措施和突发事件处置等方面的注意事项展开介绍,以期为今后操作各种病原微生物的生物安全实验室提供有益的参考。

关键词：动物生物安全三级实验室应急准备日常管理

鸡球虫重组蛋白rEnApiAP2对鸡免疫保护效果的观察

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畜牧兽医学报 2024年第4期55卷 1716-1727页

作者：王乐乐王礼跃蔡为民康喜龙冯茜茜张知之范雪莲朱玉刘丹丹许金俊潘志明陶建平扬州大学兽医学院扬州225009 江苏动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009 江苏省人兽共患病学重点实验室扬州225009 宿迁学院宿迁223800

将毒害艾美耳球虫重组蛋白rEnApiAP2单独免疫(单免)或分别与柔嫩艾美耳球虫重组蛋白rEtGAM56或rEtGAM59联合免疫(联免)雏鸡,同时设rEtGAM56单免、rEtGAM59单免、未免疫攻虫和空白组为对照,分别攻毒害艾美耳球虫或柔嫩艾美耳球虫,以成活... 详细信息

将毒害艾美耳球虫重组蛋白rEnApiAP2单独免疫(单免)或分别与柔嫩艾美耳球虫重组蛋白rEtGAM56或rEtGAM59联合免疫(联免)雏鸡,同时设rEtGAM56单免、rEtGAM59单免、未免疫攻虫和空白组为对照,分别攻毒害艾美耳球虫或柔嫩艾美耳球虫,以成活率、排出血便数、平均增重、相对增重率、病变记分、卵囊减少率、抗球虫指数(ACI)和血清抗体水平为指标,评价rEnApiAP2单免及与rEtGAM联免的免疫保护效果。结果显示:各试验组的成活率均为100%;与未免疫攻虫组比较,各免疫组鸡排血便堆数减少、平均增重增加。在rEnApiAP2单免组间,低剂量组的相对增重率(82.36%)、卵囊减少率(73.88%)和抗球虫指数(155.26)均为最高,平均病变记分最低(1.71)。攻毒害艾美耳球虫后,联免组的ACI值均大于相应的单免组,其中rEnApiAP2与rEtGAM56联免组的ACI值(169.83)最高。攻柔嫩艾美耳球虫后,rEnApiAP2单免组的ACI值(128.37)低于rEtGAM56、rEtGAM59单免组(130.12、151.88),rEnApiAP2与rEtGAM59联免组的ACI值(141.62)接近于rEtGAM59单免组,rEnApiAP2与rEtGAM56联免组的ACI值(115.46)小于rEtGAM56单免组。各免疫组血清抗体水平均显著高于空白对照组(P<0.05)。rEnApiAP2对毒害艾美耳球虫具有一定的免疫保护效果,与rEtGAM联免可提高对毒害艾美耳球虫的免疫保护力。本研究结果为鸡球虫病重组亚单位疫苗研制奠定了基础。

关键词：毒害艾美耳球虫柔嫩艾美耳球虫 rEnApiAP2 rEtGAM 保护效果

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鸡白痢沙门菌感染产蛋期蛋鸡的致病性分析

中国兽医学报 2024年第3期44卷 484-490页

作者：周雯王彦红鞠辉明扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了解鸡白痢沙门菌感染产蛋期蛋鸡致病特点,采集2022年2-11月感染产蛋期蛋鸡的肝脏等组织开展研究。对病鸡的肝脏、脾脏进行细菌分离,对分离菌株进行多重PCR鉴定和血清型检测;取病变的肝脏等组织制备病理切片以观察其病理变化;通过qRT-... 详细信息

为了解鸡白痢沙门菌感染产蛋期蛋鸡致病特点,采集2022年2-11月感染产蛋期蛋鸡的肝脏等组织开展研究。对病鸡的肝脏、脾脏进行细菌分离,对分离菌株进行多重PCR鉴定和血清型检测;取病变的肝脏等组织制备病理切片以观察其病理变化;通过qRT-PCR分析肝脏、脾脏组织中鸡白痢沙门菌毒力基因和细胞因子mRNA的表达水平。结果表明,从送检的蛋鸡中分离出18株细菌,在麦康凯培养基上生长无色小菌落,多重PCR鉴定和血清型为鸡白痢沙门菌;病理切片可见心肌、肝脏及肺脏炎性细胞群浸润和细胞坏死;qRT-PCR检测显示感染鸡白痢沙门菌的病鸡诱导生物被膜相关基因(CsgB、RpoS、bcsA和PagC)、SPI-1基因(HilA、InvA、PrgH和SipC)和SPI-2基因(SteE、RcsC、SseL和SpiC)等毒力基因的表达水平上调;感染产蛋鸡的肝脏中IL-1β、IL-6、IL-4和IL-13的表达水平上调,IL-18和IFN-γ表达水平降低;脾脏中IL-6高度表达,IL-1β和IL-18表达水平显著降低。本研究中感染病鸡组织中鸡白痢沙门菌使生物被膜、SPI-1、SPI-2相关毒力基因和TH2分泌的细胞因子表达上调,表明鸡白痢沙门菌感染宿主时在细胞内和细胞外大量增殖和扩散,引起病理变化和自身免疫反应。

关键词：鸡白痢沙门菌蛋鸡产蛋期毒力基因细胞因子

亚抑菌浓度万古霉素对质粒接合转移的促进作用

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中国兽医杂志 2024年第5期60卷 78-85页

作者：游祖姣曾福鑫王志强肖霞扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了分析亚抑菌浓度万古霉素对质粒接合转移的影响,本试验建立了以大肠杆菌(***)J53作为受体菌,携带RP4-7质粒的*** DH5α和携带mcr-1阳性IncI2质粒的临床菌株*** LD67-1为供体菌的接合转移模型,测定亚抑菌浓度的万古霉素对接合转移的影... 详细信息

为了分析亚抑菌浓度万古霉素对质粒接合转移的影响,本试验建立了以大肠杆菌(***)J53作为受体菌,携带RP4-7质粒的*** DH5α和携带mcr-1阳性IncI2质粒的临床菌株*** LD67-1为供体菌的接合转移模型,测定亚抑菌浓度的万古霉素对接合转移的影响,并通过细胞膜通透性检测、扫描电子显微镜观察、活性氧(ROS)检测和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法探究其内在机制。结果显示,与空白对照组相比,亚抑菌浓度万古霉素可显著提高RP4-7质粒和mcr-1阳性IncI2质粒的接合转移频率(P0.05);RT-qPCR结果显示,与空白对照组相比,亚抑菌浓度万古霉素显著上调了供体菌和受体菌的孔蛋白基因ompF和ompC的mRNA表达水平(P<0.05),极显著上调了trbBp基因(调控细菌间形成“连接桥”)的mRNA表达水平(P<0.01),显著上调了细菌SOS响应(SOS response)相关基因recA、recN、ruvA和lexA的mRNA表达水平(P<0.05)。结果表明,亚抑菌浓度的万古霉素可能通过提高细菌细胞膜通透性,触发SOS响应,促进接合转移“连接桥”形成等方式促进RP4-7质粒和mcr-1阳性IncI2质粒的接合转移过程。

关键词：亚抑菌浓度万古霉素质粒接合转移 mcr-1

葛根素对镉致大鼠大脑皮质线粒体损伤的保护效应

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中国兽医科学 2024年第4期54卷 560-565页

作者：黄心昱徐明畅张文华邹辉顾建红刘学忠卞建春刘宗平袁燕扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了探究葛根素对镉(Cd)致大鼠大脑皮质线粒体损伤的保护效应,将24只SD大鼠随机分为对照组(Con)、葛根素组(Pur)、镉组(Cd)、镉与葛根素共处理组(Cd+Pur)。Pur组、Cd+Pur组大鼠每日以每千克体重200 mg葛根素(溶解于羧甲基纤维素钠)灌胃,... 详细信息

为了探究葛根素对镉(Cd)致大鼠大脑皮质线粒体损伤的保护效应,将24只SD大鼠随机分为对照组(Con)、葛根素组(Pur)、镉组(Cd)、镉与葛根素共处理组(Cd+Pur)。Pur组、Cd+Pur组大鼠每日以每千克体重200 mg葛根素(溶解于羧甲基纤维素钠)灌胃,Con组、Cd组大鼠每日用相同剂量羧甲基纤维素钠灌胃,持续7周。从第4周开始,Cd组、Cd+Pur组大鼠在灌胃的同时自由饮用75 mg/L镉水溶液,持续4周。试验结束后,剖杀采集大鼠大脑皮质,火焰原子吸收光谱法检测镉含量,化学发光法检测ATP水平,比色法检测NAD^(+)/NADH比率、Mn SOD活性和H_(2)O_(2)水平,实时荧光定量PCR法检测线粒体氧化应激相关基因(GST、CAT、Gpx、UCP1、UCP2和UCP3)转录水平。结果显示,与Con组相比,Cd组大鼠大脑皮质镉含量、H_(2)O_(2)水平、线粒体氧化应激相关基因转录水平显著上升(P0.05),MnSOD活性显著上升(P0.05)。结果表明,葛根素可降低镉暴露大鼠大脑皮质镉含量,同时葛根素通过缓解线粒体功能障碍、线粒体氧化应激减轻了镉致大鼠大脑皮质线粒体损伤。

关键词：镉葛根素大鼠大脑皮质线粒体损伤

注射外源性NMB对小鼠睾酮合成和分泌的影响

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黑龙江畜牧兽医 2024年第19期 102-107,112页

作者：李雯倩李梓明于畅李红霞陈广振王丹丹李佳张金龙马志禹扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了研究注射外源性神经介素B(NMB)对小鼠睾丸中NMB及其受体和睾酮合成关键酶(St AR、CYP11A1和3β-HSD)表达及血清中睾酮浓度的影响,试验将40只雄性ICR小鼠随机分成12 h对照组(12 h Control组)、12 h试验组(12 h NMB组)、24 h对照组(24... 详细信息

为了研究注射外源性神经介素B(NMB)对小鼠睾丸中NMB及其受体和睾酮合成关键酶(St AR、CYP11A1和3β-HSD)表达及血清中睾酮浓度的影响,试验将40只雄性ICR小鼠随机分成12 h对照组(12 h Control组)、12 h试验组(12 h NMB组)、24 h对照组(24 h Control组)和24 h试验组(24 h NMB组),每组10只,2个对照组和2个试验组分别按体重10μL/g腹腔注射生理盐水和10 nmol/L NMB溶液;称量注射前后小鼠体重,计算饲料用量,并观察小鼠行为特征;各组小鼠分别于注射后12小时、24小时摘眼球采血并处死取睾丸,通过ELISA法检测小鼠血清中睾酮的浓度;通过实时荧光定量PCR(q PCR)和蛋白印迹法(Western-blot)检测小鼠睾丸中NMB、NMBR、St AR、CYP11A1和3β-HSD m RNA和蛋白表达量。结果表明:与12 h Control组相比,12 h NMB组小鼠行为无明显异常,体重增量、总摄食量略有减少,料重比略有增高,但差异不显著(P>0.05);NMB、NMBR、St AR、CYP11A1和3β-HSD m RNA及蛋白表达量均差异不显著(P>0.05);血清中睾酮浓度差异不显著(P>0.05)。与24 h Control组相比,24 h NMB组小鼠被毛粗乱、脾气暴躁,体重增量显著减少(P0.05);NMB m RNA和蛋白表达量极显著降低(P0.05);血清中睾酮浓度差异不显著(P>0.05)。与12 h NMB组相比,24 h NMB组NMBR m RNA表达量极显著降低(P<0.01),24 h NMB组NMBR蛋白表达量显著增加(P<0.05)。说明小鼠腹腔注射NMB能够抑制小鼠摄食,但对小鼠睾丸中睾酮的合成和分泌影响不大。

关键词：神经介素B 睾丸睾酮小鼠 NMB受体

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猪圆环病毒4型Cap蛋白多克隆抗体的制备

中国兽医科学 2024年

作者：戴贝凝周贝怡周琳怡蓝小媛王如嘉张倩倩周建卫扬州大学兽医学院(比较医学研究院) 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

以合成的猪圆环病毒4型（PCV4）全基因组为模板，PCR扩增PCV4 Cap和dCap基因序列，并将其克隆至原核表达载体pET-28a中，得到重组质粒pET-28a-PCV4-Cap和pET-28a-PCV4-dCap。经酶切和测序鉴定后，将重组质粒转化至大肠杆菌BL21感受态细... 详细信息

以合成的猪圆环病毒4型（PCV4）全基因组为模板，PCR扩增PCV4 Cap和dCap基因序列，并将其克隆至原核表达载体pET-28a中，得到重组质粒pET-28a-PCV4-Cap和pET-28a-PCV4-dCap。经酶切和测序鉴定后，将重组质粒转化至大肠杆菌BL21感受态细胞，经IPTG诱导，成功表达了约28 ku的融合蛋白His-PCV4-dCap，通过镍离子亲和层析法纯化His-PCV4-dCap融合蛋白，皮下多点注射免疫BALB/c小鼠，经3次免疫后获得PCV4 Cap蛋白多克隆抗体。Western-blotting和间接免疫荧光（IFA）结果显示，本研究制备的PCV4 Cap蛋白多克隆抗体与原核以及真核表达的PCV4 Cap蛋白均具有良好的反应性，为建立PCV4检测方法以及研究PCV4 Cap蛋白功能，揭示PCV4感染及致病机制奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒4型衣壳蛋白原核表达多克隆抗体

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纳米二氧化硅对小鼠卵巢形态结构的影响

动物医学进展 2024年第10期45卷 22-26页

作者：左文龙张石婧孙翊傑叶蓉蓉郑珍许显玉陈风雷扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为探究纳米二氧化硅(silica nanoparticles,SNPs)的卵巢毒性,将不同剂量的SNPs处理小鼠,进行急性毒性试验,检测SNPs对小鼠卵巢的毒性作用。12.5 mg/kg(低剂量)、25.0 mg/kg(中剂量)和50.0 mg/kg(高剂量)的SNPs通过尾静脉注射到小鼠体内... 详细信息

为探究纳米二氧化硅(silica nanoparticles,SNPs)的卵巢毒性,将不同剂量的SNPs处理小鼠,进行急性毒性试验,检测SNPs对小鼠卵巢的毒性作用。12.5 mg/kg(低剂量)、25.0 mg/kg(中剂量)和50.0 mg/kg(高剂量)的SNPs通过尾静脉注射到小鼠体内,观察15 d内小鼠的生长状况和测定每日体重变化和小鼠卵巢指数,利用苏木精-伊红(HE)染色检测SNPs对小鼠卵巢的形态结构的影响。结果显示,不同浓度SNPs处理小鼠后,小鼠生长状况、体重和卵巢指数无显著差异;然而,HE染色结果显示,SNPs能够显著引起小鼠卵巢皮质和髓质的组织结构改变,主要表现为次级卵泡数量所占比例显著减少,原始卵泡、初级卵泡、闭锁卵泡和黄体数量占比显著增加,并且皮质间质增多及皮质和髓质的血管变粗。结果表明,SNPs暴露可能通过破坏卵巢的组织结构影响卵泡的生长、发育和成熟,对小鼠的卵巢功能产生潜在危害。

关键词：纳米二氧化硅毒性形态组织学卵巢