检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库博看期刊

毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX的原核表达与分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2024年第2期55卷 846-853页

作者：彭月梅叶状汪飞燕王礼跃冯永翠王乐乐候照峰许金俊陶建平刘丹丹扬州大学兽医学院扬州225009 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

旨在研究毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX的反应原性及其在虫体内的亚细胞定位。提取毒害艾美耳球虫(扬州株)配子体总RNA,RT-PCR扩增En GPX的ORF编码序列,构建原核表达质粒pET-28a(+)-En GPX,转化至BL21(DE3)进行体外诱导表达,... 详细信息

旨在研究毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX的反应原性及其在虫体内的亚细胞定位。提取毒害艾美耳球虫(扬州株)配子体总RNA,RT-PCR扩增En GPX的ORF编码序列,构建原核表达质粒pET-28a(+)-En GPX,转化至BL21(DE3)进行体外诱导表达,同时制备鼠抗rEnGPX多克隆抗体,对重组蛋白进行Western blot反应原性分析和激光共聚焦免疫荧光定位分析。结果表明,En GPX ORF序列全长753 bp,编码250个氨基酸,体外重组表达蛋白大小约30 ku,主要以包涵体形式存在。该重组蛋白能被6×HIS标签单克隆抗体,鼠抗rEnGPX多克隆抗体,毒害艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫病鸡康复血清所识别,表明其具有较好的反应原性和交叉反应原性。在天然配子体蛋白中检测出EnGPX,其编码蛋白主要分布于配子体内的Ⅱ型成壁体(WFBII)及卵囊壁上。本研究成功克隆表达了毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX,验证其具有良好的反应原性,并定位于配子体及卵囊壁上。以期为研究En GPX参与卵囊壁形成的分子机制提供新的线索,也为研制新型球虫亚单位疫苗提供新的靶标。

关键词：毒害艾美耳球虫 EnGPX 克隆表达反应原性免疫荧光定位

玉米赤霉烯酮对性成熟前公猪性腺的毒性作用及牛磺酸的保护功能

维普期刊数据库

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2024年

作者：刘泮竹尚重兴苟克勉崔胜张娣扬州大学兽医学院江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

本研究的主要目的是利用40日龄巴马公猪建立玉米赤霉烯酮（ZEA）染毒模型，研究和分析ZEA对性成熟前公猪睾丸和附睾的毒性作用以及牛磺酸是否能缓解ZEA的毒性损伤。利用组织学、免疫组织化学和相关的分子生物学等方法的研究结果证明，3 ... 详细信息

本研究的主要目的是利用40日龄巴马公猪建立玉米赤霉烯酮（ZEA）染毒模型，研究和分析ZEA对性成熟前公猪睾丸和附睾的毒性作用以及牛磺酸是否能缓解ZEA的毒性损伤。利用组织学、免疫组织化学和相关的分子生物学等方法的研究结果证明，3 mg/kg ZEA导致猪睾丸生精上皮发生空泡化现象；睾丸支持细胞中CX43、OCCLUDIN和VIMENTIN基因的表达水平降低；附睾输精小管中未变形精子细胞显著增加，大量生殖细胞不能完成分化过程形成精子。补充牛磺酸能显著缓解睾丸的空泡化、部分恢复精子发生过程，并在一定程度上提高了CX43和VIMENTIN基因的表达水平。这些结果表明，ZEA主要通过损伤睾丸生精上皮和精子的发生过程影响公猪的繁殖力，牛磺酸在缓解ZEA的生殖毒性方面具有潜在的应用前景。

关键词：玉米赤霉烯酮牛磺酸性成熟前公猪支持细胞

两株马立克病毒的分离鉴定及其主要致病基因分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国动物传染病学报 2024年第2期32卷 65-72页

作者：闫彩虹金文杰刘文博羊扬钱琨王志强彭大新扬州大学兽医学院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

为了解国内鸡群马立克病毒(MDV)流行毒株的分子特征,采用细胞培养法对马立克病疑似病鸡抗凝血进行MDV分离,间接荧光法鉴定MDV血清型,PCR扩增分离病毒的meq和pp38两个主要致病基因,所得序列与MDV参考毒株的序列进行比对分析。结果显示,... 详细信息

为了解国内鸡群马立克病毒(MDV)流行毒株的分子特征,采用细胞培养法对马立克病疑似病鸡抗凝血进行MDV分离,间接荧光法鉴定MDV血清型,PCR扩增分离病毒的meq和pp38两个主要致病基因,所得序列与MDV参考毒株的序列进行比对分析。结果显示,共分离鉴定出2株MDV I型毒株,分别命名为JS0316和JS0424。meq基因编码的氨基酸序列结果显示,2个MDV分离株缺乏弱毒疫苗株的特征(A71S、P194-),具有MDV强毒分离株的分子特征(D80Y、V115A、T139A、P176R和P217A)。同时,JS0316 Meq蛋白出现Q93R和V123A突变,pp38蛋白出现L98I和F240S突变,而JS0424 Meq蛋白出现P217T突变,pp38蛋白出现W67G和V210A突变。因此,2株MDV均具有国内流行强毒株的分子特征,同时存在新的基因突变。

关键词：马立克病毒分离鉴定 meq pp38 序列分析

维普期刊数据库博看期刊

短期血清饥饿胁迫对猪骨骼肌卫星细胞代谢及自噬发生的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2024年第8期55卷 3408-3417页

作者：王怡高娟胡悦旻杨跃飞范博钧鞠辉明扬州大学广陵学院扬州225000 扬州大学兽医学院/江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

旨在研究短期饥饿胁迫对猪骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells,SMSCs)代谢及自噬发生的影响,解析自噬机制在骨骼肌发育调控网络中的地位和作用,为改良家猪产肉性状提供理论依据。将本实验室分离并保存的SMSCs细胞系复苏,... 详细信息

旨在研究短期饥饿胁迫对猪骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells,SMSCs)代谢及自噬发生的影响,解析自噬机制在骨骼肌发育调控网络中的地位和作用,为改良家猪产肉性状提供理论依据。将本实验室分离并保存的SMSCs细胞系复苏,按培养体系中血清浓度将细胞分为20%血清组(对照组)、15%血清组、10%血清组、5%血清组和0%血清组,以形成不同程度的饥饿胁迫。当细胞融合度达到70%~80%后再培养24 h进行检测,每组4个重复。流式细胞术检测各组细胞凋亡率、膜电位和活性氧水平;试剂盒测定ATP水平;WB检测自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ、p62和通路相关蛋白AMPK、mTOR的表达;透射电镜检测细胞线粒体形态和细胞器的变化。结果显示,随着细胞中血清浓度降低,细胞活力、p62蛋白量、p-mTOR/mTOR比值逐渐降低;细胞凋亡率、ROS水平、ATP水平、LC3B-Ⅱ蛋白水平、p-AMPK/AMPK比值、细胞内自噬溶酶体数量、细胞核及线粒体异常率则逐渐升高;与对照组相比,15%组膜电位显著升高,5%和0%组极显著降低。这表明,短期血清饥饿胁迫能诱导基于AMPK/mTOR信号通路的自噬发生,加快细胞代谢,但同时存在加快细胞凋亡、抑制细胞增殖等毒副作用。

关键词：猪自噬 SMSCs 血清饥饿胁迫 AMPK/mTOR通路

维普期刊数据库

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山羊肠道微生物群发育与多样性分析

扬州大学学报(农业与生命科学版) 2024年第5期 98-104页

作者：成成成大荣朱生敏陈晓芳陶建平扬州大学兽医学院扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

为了解山羊肠道微生物群成员的多样性及其发育规律,从江苏2个不同山羊养殖场随机选择2只山羊,分别在1、3、5、10、20、30、40、45、50、60、70、80和90日龄时采集新鲜粪便样品,并采用宏基因组测序对所有样品进行分析。结果表明:山羊肠... 详细信息

为了解山羊肠道微生物群成员的多样性及其发育规律,从江苏2个不同山羊养殖场随机选择2只山羊,分别在1、3、5、10、20、30、40、45、50、60、70、80和90日龄时采集新鲜粪便样品,并采用宏基因组测序对所有样品进行分析。结果表明:山羊肠道微生物群的成员和丰度随日龄增长而不断变化,并受哺乳和采食的影响。其中,40日龄哺乳期山羊的肠道微生物有600余种,90日龄断奶山羊肠道微生物群最终稳定在1 500种左右。在80多种核心成员中,脆弱拟杆菌、大肠埃希菌和丁酸球菌是哺乳羔羊肠道中的优势细菌,而栖瘤胃普雷沃菌和厚壁菌在断奶山羊肠道细菌群中占主导地位。值得注意的是宋内志贺菌、鲍氏志贺菌、福氏志贺菌、痢疾志贺菌、肠道沙门菌、邦戈里沙门菌、梭状芽孢杆菌、格氏乳球菌和幽门螺杆菌等人兽共患细菌也可在山羊中检测到,这提示山羊可能是这些微生物的宿主。

关键词：山羊肠道菌群发育多样性

神经介素B及其受体在兔圆小囊中的表达和分布

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

扬州大学学报(农业与生命科学版) 2024年第5期 90-97页

作者：李佳于畅李雯倩陈广振李红霞王丹丹张金龙马志禹扬州大学兽医学院扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

为检测神经介素B (neuromedin B,NMB)及其受体(neuromedin B receptor,NMBR)基因和蛋白在圆小囊(sacculus rotundus,SR)中的表达模式和分布情况,制备圆小囊组织石蜡切片,通过HE染色,观察圆小囊组织形态;提取圆小囊组织mRNA,采用实时荧... 详细信息

为检测神经介素B (neuromedin B,NMB)及其受体(neuromedin B receptor,NMBR)基因和蛋白在圆小囊(sacculus rotundus,SR)中的表达模式和分布情况,制备圆小囊组织石蜡切片,通过HE染色,观察圆小囊组织形态;提取圆小囊组织mRNA,采用实时荧光定量PCR (qPCR)检测NMB和NMBR基因在圆小囊中的表达情况;提取圆小囊组织蛋白,采用免疫印迹(Western blot)检测NMB和NMBR蛋白在圆小囊中的表达情况;并采用免疫组织化学法(IHC)检测NMB和NMBR蛋白在圆小囊中的分布情况。结果表明:圆小囊结构与普通动物肠道类似,但具有发达的淋巴组织,且淋巴组织中散在分布着弥散神经内分泌系统细胞;NMB和NMBR mRNA在不同性别兔的圆小囊中均有表达,但NMBR mRNA在公兔圆小囊中的表达显著高于母兔;NMB和NMBR蛋白在不同性别兔的圆小囊中均有表达,但两者在公兔圆小囊中的表达均显著高于母兔;NMB和NMBR蛋白主要分布于圆小囊的淋巴组织及绒毛内,分布情况略有不同。综上,这一研究从形态学和分子生物学方面明确了NMB及其受体在圆小囊中的表达和分布情况,可为后续深入研究NMB及其受体在圆小囊内的功能奠定基础。

关键词：兔神经介素B 神经介素B受体圆小囊表达分布

非人灵长类多能干细胞体外培养和诱导分化的研究进展

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2024年第10期 4278-4289页

作者：沈可成朱家桥刘宗平扬州大学兽医学院江苏高校动物重要疫病与人畜共患病防控协同创新中心

干细胞在疾病发生、细胞治疗、药物筛选和临床应用等方面具有巨大价值。自日本科学家Shinya Yamanaka发现诱导多能干细胞以来，相关的研究立即成为研究热点并持续至今。小鼠干细胞的研究为其它动物的相关研究开辟了道路，但在药物筛选... 详细信息

干细胞在疾病发生、细胞治疗、药物筛选和临床应用等方面具有巨大价值。自日本科学家Shinya Yamanaka发现诱导多能干细胞以来，相关的研究立即成为研究热点并持续至今。小鼠干细胞的研究为其它动物的相关研究开辟了道路，但在药物筛选和疾病治疗等方面有很大局限性。非人灵长类与人类具有更高的基因同源性，在生理、病理、生殖、药理、神经等多方面与人类高度相似，是研究人类疾病和开发人用药物的理想动物模型。非人灵长类研究也是新药在进入临床实验前必须的一个环节。非人灵长类干细胞的研究在疾病的机理研究和药物开发中越发重要，同时避免了伦理问题。本文从体外培养系统的优化和诱导分化的方法两个方面对非人灵长类多能干细胞的相关研究进行了综述，以期为非人灵长类干细胞进一步深入研究提供参考。

关键词：非人灵长类多能干细胞体外培养诱导分化

同方期刊数据库

基于CRISPR/Cas9技术进行家猫Fel d1基因编辑的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2024年第6期32卷 1353-1361页

作者：张亚鑫李玲 Farhab MUHAMMAD 吕美芸佰伍加蔡何清袁玉国扬州大学兽医学院/扬州大学动物基因工程重点实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

Fel d1蛋白是家猫(Felis catus)过敏原中最主要的致敏原，可引起人不同程度的过敏反应。Fel d1蛋白由2个异源的二聚体组成，其编码基因分别为chain 1 (CH1)和chain 2 (CH2)。本研究对38只不同品种的家养宠物猫CH1和CH2基因组序列进行生... 详细信息

Fel d1蛋白是家猫(Felis catus)过敏原中最主要的致敏原，可引起人不同程度的过敏反应。Fel d1蛋白由2个异源的二聚体组成，其编码基因分别为chain 1 (CH1)和chain 2 (CH2)。本研究对38只不同品种的家养宠物猫CH1和CH2基因组序列进行生物信息学分析，进一步在CH2外显子位点设计2个单链引导RNA (single-guide RNAs, sgRNAs)，构建打靶载体分别转染猫胎儿成纤维细胞，PCR测序验证靶位点突变效率。结果表明，CH1和CH2序列上分别含有12和51个多态性位点，且这些位点大多在富含GC的内含子2上，其他个别位于外显子2，内含子3和外显子3上。在整体的进化演变中，CH1的保守性要远高于CH2。CRISPR/Cas9打靶载体转染猫胎儿成纤维细胞后突变检测表明，CH2基因编辑效率为40%,2种突变方式均能消除潜在的抗原位点，其中敲除45个碱基的1型突变占比35%，敲除44个碱基的2型突变占比5%。本研究为进一步利用该CRISPR/Cas9打靶载体获得Fel d1基因突变细胞株进行体细胞核移植或胚胎注射获得低过敏原猫提供参考。

关键词： Fel d1基因 CRISPR/Cas9 猫基因编辑

脱氢乙酸钠对不同性别Wistar大鼠凝血功能的影响

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

动物医学进展 2024年第1期45卷 83-88页

作者：毕思才肖宜容王存凯张媛江雅陈新张雨梅扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了探究脱氢乙酸钠(S-DHA)对Wistar大鼠的凝血功能的影响及性别间的差异,设置50、100、150、200 mg/kg 4个剂量,每个剂量分为雌、雄2组,同时设定空白组,连续灌胃给药13 d,实时监测大鼠体重变化和饲料消耗,并在第3、5、7、9、11、13天... 详细信息

为了探究脱氢乙酸钠(S-DHA)对Wistar大鼠的凝血功能的影响及性别间的差异,设置50、100、150、200 mg/kg 4个剂量,每个剂量分为雌、雄2组,同时设定空白组,连续灌胃给药13 d,实时监测大鼠体重变化和饲料消耗,并在第3、5、7、9、11、13天分别检测大鼠凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)、血清维生素K 1水平和S-DHA浓度。结果表明,大鼠体重、饲料消耗和血清维生素K 1水平均显著降低,PT和APTT延长。雌性大鼠血清S-DHA浓度显著高于雄性大鼠,且雌性大鼠PT和APTT与血清S-DHA浓度的相关性以及与血清维生素K 1水平的相关性均高于雄性大鼠。S-DHA导致Wistar大鼠凝血功能异常,且雌性大鼠比雄性大鼠对S-DHA更敏感。

关键词：脱氢乙酸钠 Wistar大鼠凝血异常敏感性

维普期刊数据库