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基于p53/Nrf2信号通路探讨新加苁蓉菟丝子汤对早发性卵巢功能不全大鼠颗粒细胞铁死亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 104-111页

作者：刘敏史薇杨菁吴克明成都中医药大学临床医学院成都610075 成都中医药大学附属医院成都610072 成都医学院生物科学与技术学院成都610500

目的:探究新加苁蓉菟丝子汤(中药)对早发性卵巢功能不全(POI)模型大鼠卵巢功能的影响及调控肿瘤抑制蛋白p53(p53)/核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)通路减轻颗粒细胞铁死亡的潜在机制。方法:将48只SPF级雌性SD大鼠随机分为6组:正常组、模型... 详细信息

目的:探究新加苁蓉菟丝子汤(中药)对早发性卵巢功能不全(POI)模型大鼠卵巢功能的影响及调控肿瘤抑制蛋白p53(p53)/核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)通路减轻颗粒细胞铁死亡的潜在机制。方法:将48只SPF级雌性SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、辅酶Q_(10)组(0.002 7 g·kg^(-1))和中药低、中、高剂量组(1.1、2.2、4.4 g·kg^(-1)),每组8只。以灌胃雷公藤甲素混悬液建立POI模型大鼠,造模成功后,各组予相应药物干预14 d。称量大鼠体质量、卵巢湿重并计算卵巢指数,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织形态学并计算生长卵泡及闭锁卵泡比例,酶联免疫吸附测定法检测血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_(2))和抗缪勒管激素(AMH)水平,DCFH-DA荧光探针检测颗粒细胞活性氧(ROS)含量,比色法检测细胞亚铁离子(Fe^(2+))、脂质过氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物岐化酶(SOD)水平,免疫组化法和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤抑制蛋白p53、Nrf2、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠卵巢湿重、体质量及卵巢指数降低(P<0.01),卵巢组织体积缩小、生长卵泡占比减少(P<0.01),闭锁卵泡占比增多(P<0.01),血清AMH和E_(2)水平降低(P<0.01),FSH水平升高(P<0.01),颗粒细胞内Fe^(2+)、ROS、LPO及MDA含量显著增加(P<0.01),GSH和SOD含量显著降低(P<0.01),免疫组化和Western blot检测结果提示卵巢组织内p53蛋白表达增多(P<0.01),Nrf2、SLC7A11及GPX4蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,中药各剂量组大鼠体质量、卵巢湿重及卵巢指数显著升高(P<0.01),卵巢组织形态均不同程度改善,生长卵泡占比增加(P<0.01),闭锁卵泡占比减少(P<0.01),颗粒细胞内ROS含量明显降低(P<0.05,P<0.01);中药中、高剂量组血清FSH水平降低(P<0.01),E_(2)、AMH水平升高(P<0.01),颗粒细胞内Fe^(2+)含量下降(P<0.01),GSH含量上升(P<0.01);中药高剂量组颗粒细胞内LPO和MDA含量显著降低(P<0.01),SOD含量显著升高(P<0.01),免疫组化和Western blot检测结果提示卵巢组织内p53蛋白表达减少(P<0.05),Nrf2、SLC7A11及GPX4蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01)。结论:新加苁蓉菟丝子汤能保护POI模型大鼠卵巢功能,其作用机制可能与调控p53/Nrf2信号通路减轻卵巢颗粒细胞的铁死亡有关。

关键词：新加苁蓉菟丝子汤早发性卵巢功能不全铁死亡 p53/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路颗粒细胞

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老年结核病患者营养状况评价的研究进展

中华临床感染病杂志 2024年第3期17卷 229-234页

作者：傅佳丹徐敏徐燕王晓燕王华芬浙江大学医学院附属第一医院感染病科杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院护理部杭州310003

我国结核病病例数在全球位居第三, 随着人口老龄化趋势的加剧, 老年结核病疾病负担也面临着巨大挑战。老年人免疫功能减退、结核病内源性复燃及外源性再感染、营养不良等因素直接影响疾病的预后。其中, 营养不良是结核病重要危险因素。... 详细信息

我国结核病病例数在全球位居第三, 随着人口老龄化趋势的加剧, 老年结核病疾病负担也面临着巨大挑战。老年人免疫功能减退、结核病内源性复燃及外源性再感染、营养不良等因素直接影响疾病的预后。其中, 营养不良是结核病重要危险因素。而结核病属于消耗性疾病, 病情的进展又加重了营养不良的发生, 两者相互影响, 互为因果。为加强老年结核病营养状况的的重视程度, 本文就老年结核病患者营养现状、营养评价意义及营养状况评价方法等进行综述, 比较其应用现况及使用限制, 以帮助医务人员根据患者情况选择适合的营养状况评价工具。

关键词：结核病老年患者营养评价

基于HPLC-QQQ-MS技术探讨炮制对肉苁蓉中5个活性成分的含量影响

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天然产物研究与开发 2024年第1期36卷 86-93页

作者：雷慧博余雅婷韩璐吴岩原永芳俞晓艳上海交通大学医学院附属第九人民医院药剂科上海200011

炮制一般会对中药材的成分及药效产生重要作用,本文为了探讨炮制加工对肉苁蓉成分的影响,建立了同时测定炮制前后肉苁蓉中肉苁蓉苷F、毛蕊花糖苷、毛蕊花糖苷、2′-乙酰基毛蕊花糖苷和松果菊苷的含量的高效液相色谱-串联三重四极杆质谱... 详细信息

炮制一般会对中药材的成分及药效产生重要作用,本文为了探讨炮制加工对肉苁蓉成分的影响,建立了同时测定炮制前后肉苁蓉中肉苁蓉苷F、毛蕊花糖苷、毛蕊花糖苷、2′-乙酰基毛蕊花糖苷和松果菊苷的含量的高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法(high-performance liquid chromatography-tandem triple quadrupole mass spectrometry,HPLC-QQQ-MS)的检测方法。采用50%甲醇溶液提取药物粉末,在Agilent Zorbax Eclipse Plus C 18(2.1 mm×150 mm,1.8μm)的色谱柱上,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,选取负离子多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式,以木通苯乙醇苷为内标成分,以进样量1μL,流速0.3 mL/min,柱温35℃,样品管理器温度8℃于HPLC-QQQ-MS进行同一批次炮制前后肉苁蓉中这五种成分的含量测定。结果显示5种成分在各自范围内线性关系良好,相关系数(r)在0.9929~0.9985之间,平均加样回收率在98.15%~100.2%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于4.6%。所建立的研究方法简便准确,可用于肉苁蓉的质量控制,并用于评价炮制对肉苁蓉含量及药效的影响。

关键词：肉苁蓉炮制化学成分含量测定 HPLC-QQQ-MS

基于生物信息学和实验验证分析巨噬细胞极化在肺结节病中的作用

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国际呼吸杂志 2024年第5期44卷 497-509页

作者：阮霞何杰成都医学院第一附属医院康复医学科成都610500 成都医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科成都610500

目的通过生物信息学分析和实验验证探讨巨噬细胞极化在肺结节病中的作用。方法本研究为实验研究。从基因表达综合数据库下载肺结节病相关RNA-seq数据集GSE83456、GSE34608、GSE42834、GSE16538、GSE18781、GSE19314、GSE19976和GSE3791... 详细信息

目的通过生物信息学分析和实验验证探讨巨噬细胞极化在肺结节病中的作用。方法本研究为实验研究。从基因表达综合数据库下载肺结节病相关RNA-seq数据集GSE83456、GSE34608、GSE42834、GSE16538、GSE18781、GSE19314、GSE19976和GSE37912。将GSE83456数据集作为训练集,其余数据集作为验证集。采用非随机抽样的方法选取2021年1月至2023年1月于成都医学院第一附属医院住院的15例肺结节病患者(Ⅰ期或Ⅱ期)、15例肺结核患者和15例肺腺癌患者,以及同期接受体检的20名健康受试者为研究对象,收集肺结节病患者和健康受试者的外周血样本,收集肺结节病、肺结核和肺腺癌患者的纵隔淋巴结样本(肺腺癌患者淋巴结转移阴性)。通过"xCell"包分析GSE83456数据集中巨噬细胞、M1巨噬细胞和M2巨噬细胞在肺结节病患者中的丰度变化,并通过流式细胞术检测肺结节病患者和健康受试者外周血M1和M2巨噬细胞比例。通过基因集富集分析探索肺结节病组与对照组、高M1巨噬细胞组与低M1巨噬细胞组、高M2巨噬细胞组与低M2巨噬细胞组之间的潜在生物学差异。加权基因共表达网络分析筛选与巨噬细胞极化高度相关的模块基因,将GSE83456数据集中肺结节病组和对照组的差异基因与相关模块基因取交集,得到巨噬细胞极化相关差异基因,并对其进行基因本体论富集分析。通过Lasso回归和随机森林算法筛选出肺结节病患者巨噬细胞极化关键基因,并在验证集中验证关键基因的表达情况,对GSE83456数据集中关键基因与巨噬细胞丰度的关系进行Pearson相关分析。通过蛋白质印迹法验证关键基因在肺结节病、肺结核和肺腺癌患者纵隔淋巴结中的蛋白表达水平。绘制受试者工作特征曲线分析关键基因表达蛋白鉴别肺结节病和肺结核的价值。结果在GSE83456数据集中,肺结节病组巨噬细胞、M1巨噬细胞丰度评分均高于对照组[(0.27±0.09)分比(0.12±0.07)分,(0.18±0.07)分比(0.12±0.04)分,均P<0.001]。肺结节病患者外周血M1巨噬细胞比例和M1/M2巨噬细胞比值均高于健康受试者[(0.60±0.12)比(0.47±0.11),(1.23±0.07)比(0.84±0.06),均P<0.05]。炎症反应和干扰素反应等免疫相关通路富集于肺结节病组和高M1巨噬细胞组。加权基因共表达网络分析与差异基因分析的交集共获得32个巨噬细胞极化相关的差异基因,这些基因主要富集于免疫相关的生物过程和分子功能。Lasso回归和随机森林算法筛选出肺结节病患者巨噬细胞极化关键基因ANKRD22。在7个验证集中,肺结节病组ANKRD22 mRNA表达量均高于对照组,并且在GSE42834数据集中肺结核组ANKRD22 mRNA表达量高于肺结节病组(均P<0.001)。Pearson相关分析显示,在GSE83456数据集中,ANKRD22 mRNA表达量与巨噬细胞丰度(r=0.65)、M1巨噬细胞丰度(r=0.54)和单核细胞丰度(r=0.45)均呈正相关(均P<0.001)。蛋白质印迹法显示,肺结核患者和肺结节病患者的ANKRD22蛋白相对表达量均高于肺腺癌患者,且肺结核患者高于肺结节病患者[(0.98±0.02)比(0.38±0.03),(0.62±0.02)比(0.38±0.03),(0.98±0.02)比(0.62±0.02),均P<0.05]。ANKRD22蛋白鉴别肺结节病和肺结核的曲线下面积为0.802,最佳截断值为0.58,敏感度为73.3%,特异度为80.0%。结论M1巨噬细胞介导免疫炎症反应参与肺结节病的发生发展。肺结节病巨噬细胞极化关键基因ANKRD22可以作为肺结节病的潜在生物标志物,并具有鉴别肺结节病和肺结核的潜在价值。

关键词：结节病,肺巨噬细胞极化计算生物学 ANKRD22 生物标志物

急性缺血性脑卒中患者院前延迟现状及影响因素分析

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成都医学院学报 2024年第1期19卷 146-152页

作者：蒋敏王辉李培培高蕊贺诗蕊孙云成都医学院护理学院成都610083 成都医学院第一附属医院成都610500

目的了解急性缺血性脑卒中(AIS)患者院前延迟现状及影响因素。方法采用方便抽样法,选取2022年11月至2023年8月在成都市3所三甲医院神经内科住院的368例AIS患者为研究对象,根据溶栓时间窗,将其分为就医延迟组(院前时间>3 h,n=261)和就医... 详细信息

目的了解急性缺血性脑卒中(AIS)患者院前延迟现状及影响因素。方法采用方便抽样法,选取2022年11月至2023年8月在成都市3所三甲医院神经内科住院的368例AIS患者为研究对象,根据溶栓时间窗,将其分为就医延迟组(院前时间>3 h,n=261)和就医及时组(院前时间≤3 h,n=107)。采用一般资料调查问卷、就医决策障碍感知量表、领悟社会支持量表、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)对两组进行比较分析。结果纳入AIS患者的院前中位时间为8.18 h。与及时组比较,延迟组脑卒中严重程度、不知道溶栓时间窗的比例、门诊入院率更高(P医院为三级综合医院、决策时间、就医决策障碍感知是AIS患者院前延迟的独立影响因素(P<0.05)。结论AIS患者院前延迟发生率较高,患者拨打120频次较低,未来应提高居民脑卒中风险意识,加强紧急医疗服务的宣传,减少转诊,为高危患者提供社会支持,以缩短院前时间。

关键词：急性缺血性脑卒中院前延迟就医延迟影响因素

肿瘤间质比在口腔鳞状细胞癌患者预后评估中的价值分析

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口腔医学研究 2024年第3期40卷 242-247页

作者：房敏健刘亮邱若兰曹伟葛素云柴大敏蚌埠医学院第一附属医院口腔科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院病理科安徽蚌埠233004

目的:分析肿瘤间质比(tumor-stroma ratio,TSR)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者预后中的价值。方法:收集2015年1月~2017年12月在蚌埠医学院第一附属医院接受根治性切除术的OSCC患者为研究对象,并收集临床及病... 详细信息

目的:分析肿瘤间质比(tumor-stroma ratio,TSR)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者预后中的价值。方法:收集2015年1月~2017年12月在蚌埠医学院第一附属医院接受根治性切除术的OSCC患者为研究对象,并收集临床及病理资料。TSR以50%为界限,将其分为高间质比组(≥50%)及低间质比组(<50%)。分析TSR和OSCC患者的无病生存期及总生存期之间的关系。结果:术后随访及临床资料完整的98例患者中,高间质比患者42例,低间质比患者56例。高间质比组OSCC患者的5年总生存率以及5年无病生存率分别为31.0%(13/42)、26.2%(11/42);低间质比组OSCC患者的5年总生存率以及5年无病生存率分别为73.2%(41/56)、67.9%(38/56)。肿瘤发病部位与患者的5年总生存率(χ^(2)=1.327,P=0.932)及5年无病生存率(χ^(2)=3.113,P=0.683)无关;肿瘤临床分期、TSR与患者的5年总生存率5年无病生存率显著相关(P<0.001)。单因素COX分析结果显示,年龄、肿瘤T分期、淋巴结转移、TSR与OSCC患者总体生存率以及无病生存率有关。而通过多因素COX研究显示,肿瘤T分期、淋巴结转移以及TSR是影响OSCC患者总生存率与无病生存率的独立危险因素(P<0.05)。结论:TSR可作为OSCC患者术后预后的影响因素,可为OSCC患者术后辅助治疗方法的选择提供参考依据。

关键词：肿瘤间质比口腔鳞状细胞癌预后生存率

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引导性骨再生膜在骨缺损应用中的研究进展

创伤外科杂志 2024年第10期26卷 791-795页

作者：洪军涛何平杨红胜成都医学院第一附属医院骨科成都610500

引导骨再生(GBR)技术是一种利用屏障膜实现骨组织再生的治疗方法。其良好的屏蔽作用可快速诱导骨形成,有效促进骨再生。在长骨骨缺损修复中,缺损处覆盖材料的选择对修复效果至关重要,而屏障膜则是影响GBR疗效的主要决定因素。屏障膜使... 详细信息

引导骨再生(GBR)技术是一种利用屏障膜实现骨组织再生的治疗方法。其良好的屏蔽作用可快速诱导骨形成,有效促进骨再生。在长骨骨缺损修复中,缺损处覆盖材料的选择对修复效果至关重要,而屏障膜则是影响GBR疗效的主要决定因素。屏障膜使骨缺损处形成相对稳定的空间,防止纤维组织生长嵌入骨缺损处造成骨不连续,选择性地使损伤处新生骨组织再生、长入,修复受损伤骨组织,从而达到骨性愈合。本文将从屏障膜的分类及各类膜的研究进展等方面进行综述,以期为研发理想的GBR技术治疗骨缺损提供参考。

关键词：骨缺损引导骨再生屏障膜骨折可吸收材料

miR-221-5p靶向VDR调控肾透明癌上皮细胞-间充质转化的机制

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中国老年学杂志 2024年第17期 4283-4286页

作者：张群妹狄文玉王海峰焦路阳鲁广建新乡医学院第一附属医院输血科新乡医学院第一附属医院病理科新乡医学院第一附属医院肿瘤内科一病区新乡医学院第一附属医院新乡市实验诊断学重点实验室新乡医学院第一附属医院检验科

目的探讨微小RNA(miR)-221-5p靶向维生素D受体(VDR)调控肾透明癌上皮细胞-间充质转化的潜在机制。方法过表达或敲低miR-221-5p后，检测肾透明癌细胞786-O中VDR的表达水平。荧光素酶报告实验检测miR-221-5p是否靶向VDR。过表达或敲低mi... 详细信息

目的探讨微小RNA(miR)-221-5p靶向维生素D受体(VDR)调控肾透明癌上皮细胞-间充质转化的潜在机制。方法过表达或敲低miR-221-5p后，检测肾透明癌细胞786-O中VDR的表达水平。荧光素酶报告实验检测miR-221-5p是否靶向VDR。过表达或敲低miR-221-5p及过表达VDR或敲低VDR后，检测786-O中上皮细胞-间充质转化标志蛋白[E-钙黏蛋白(Cadherin)、β-连环蛋白(Catenin)和紧密连接蛋白(ZO)-1]表达水平、线粒体功能相关蛋白[电压依赖性阴离子通道蛋白(VDAC)1、线粒体内膜中视神经萎缩症蛋白(OPA)1和线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)]的表达水平及线粒体呼吸水平[基础呼吸、三磷酸腺苷(ATP)相关呼吸和最高呼吸]。结果过表达miR-221-5p在肾透明癌细胞中导致VDR的mRNA和蛋白水平明显下降(P一步的双荧光素酶报告表明，miR-211-5p mimic能够针对野生型VDR mRNA-3′UTR组明显降低荧光素酶活性(P0.05)。此外，miR-221-5p过表达或VDR的敲低会导致肾透明癌细胞中上皮细胞-间充质转化标志蛋白的水平明显上升，而反之则明显下降(P>0.05),共表达或共敲低miR-221-5p和VDR时以上蛋白水平未发生显著变化(P>0.05)。miR-221-5p过表达或VDR敲低会导致线粒体功能相关蛋白水平明显下降，反之则明显上升(P0.05)。miR-221-5p过表达或VDR敲低导致肾透明癌细胞中线粒体呼吸相关参数明显下降，反之则明显上升(P0.05)。结论 miR-221-5p通过调控VDR表达水平影响肾透明癌细胞的上皮细胞-间充质转化、线粒体功能及线粒体呼吸。

关键词：微小RNA(miR)-221-5p 维生素D受体(VDR) 肾透明癌上皮细胞-间充质转化线粒体

基于MRI深度迁移学习影像组学术前预测直肠癌脉管浸润的研究

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磁共振成像 2024年

作者：袁权吴树剑范莉芳翟建皖南医学院第一附属医院(弋矶山医院)放射科皖南医学院医学影像学院

目的探讨基于横轴位高分辨T2WI深度迁移学习影像组学术前预测直肠癌患者脉管浸润（lymphovascular invasion,LVI）的应用价值。材料与方法回顾性分析皖南医学院弋矶山医院2018年1月至2023年12月行MRI检查且术后病理证实为直肠癌的384... 详细信息

目的探讨基于横轴位高分辨T2WI深度迁移学习影像组学术前预测直肠癌患者脉管浸润（lymphovascular invasion,LVI）的应用价值。材料与方法回顾性分析皖南医学院弋矶山医院2018年1月至2023年12月行MRI检查且术后病理证实为直肠癌的384例患者，收集临床及影像资料。根据病理LVI状态将患者分为LVI阳性（LVI+）组81例及LVI阴性（LVI-）组303例，按7∶3比例将患者随机分为训练组（n=269）与验证组（n=115）。以ResNet-34为深度迁移学习特征提取的基础模型，基于瘤体分别提取深度迁移学习特征与传统影像组学特征，通过Spearman秩相关和最小绝对收缩和选择算子（least absolute shrinkage and selection operator, LASSO）回归的方法进行降维，消除冗余特征，保留最具预测价值的特征。使用自适应增强（adaptive boosting, AdaBoost）、朴素贝叶斯（na?ve Bayes, NB）、弹性网络（elastic net, Enet）、梯度推进机（gradient boosting machine, GBM）、神经网络（neutral network, NN）及支持向量机（support vector machine, SVM）共6种机器学习算法基于传统影像组学特征、深度迁移学习特征及组合特征分别构建预测模型。通过受试者工作特征（receiver operating characteristics curve,ROC）曲线评价各模型的诊断效能。结果通过Spearman秩相关及LASSO回归降维后共筛选出23个最优特征，其中传统影像组学特征6个，深度迁移学习特征17个，构建的所有模型中基于组合特征模型的曲线下面积（area under the curve, AUC）均高于单独特征模型，6种机器学习算法基于组合特征的AUC在训练组分别为0.956、0.802、0.879、0.966、0.973、0.944，验证组分别为0.924、0.868、0.901、0.892、0.817、0.905。结论基于组合特征的模型在预测直肠癌LVI状态方面具有高效能，可辅助术前个体化预测，改善患者预后。

关键词：直肠癌脉管浸润磁共振成像深度迁移学习影像组学