检索结果-南通市图书馆

尖吻蝮蛇蛇毒纤溶酶的分离纯化及氨基酸序列测定

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中国药科大学学报 2007年第5期38卷 469-471页

作者：郑颖沈居仁范泉水邱薇成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所昆明650032

目的:从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化出高纯度的纤溶酶并对其进行初步性质研究和氨基酸序列分析。方法:采用DEAE-Sepharose FF离子交换和两次Superdex75PG凝胶过滤,从尖吻蝮蛇蛇毒中纯化出可直接溶解纤维蛋白原的蛋白酶。结果:分离到的纤溶... 详细信息

目的:从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化出高纯度的纤溶酶并对其进行初步性质研究和氨基酸序列分析。方法:采用DEAE-Sepharose FF离子交换和两次Superdex75PG凝胶过滤,从尖吻蝮蛇蛇毒中纯化出可直接溶解纤维蛋白原的蛋白酶。结果:分离到的纤溶酶相对分子质量为25kD,HPLC分析纯度在97%以上,氨基酸序列分析其N末端为MSTEF QRYME IVVNHS MVKKY NGDSD KIKAW。结论:采用此工艺可从尖吻蛇毒中分离出高比活的纤溶酶,为进一步研究其药理作用奠定了基础。

关键词：尖吻蝮蛇蛇毒纤溶酶纯化氨基酸序列

中国大虎头蜂蜂毒毒性及其F(ab)_2抗体的制备研究

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中国药学杂志 2013年第9期48卷 672-677页

作者：郑颖余方芳叶锋平崔庆华邱薇张向荣张琳聂雪峰范泉水成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所昆明650032

目的测定中国大虎头蜂蜂毒毒性,制备能有效中和中国大虎头蜂蜂毒的F(ab)2抗体。方法小鼠腹腔注射测定胡蜂毒LD50,以胡蜂毒免疫日本大耳白兔获得免疫血浆,经盐析、酶解、加热等步骤获得F(ab)2抗体,并以免疫扩散、ELISA和小鼠体外中和法... 详细信息

目的测定中国大虎头蜂蜂毒毒性,制备能有效中和中国大虎头蜂蜂毒的F(ab)2抗体。方法小鼠腹腔注射测定胡蜂毒LD50,以胡蜂毒免疫日本大耳白兔获得免疫血浆,经盐析、酶解、加热等步骤获得F(ab)2抗体,并以免疫扩散、ELISA和小鼠体外中和法分别测定超免血浆、纯化的IgG及制备的F(ab)2抗体对中国大虎头蜂及多种蛇毒的抗体效价。结果小鼠腹腔注射中国大虎头蜂蜂毒的LD50为0.697 mg·kg-1,制备的F(ab)2抗体SDS-PAGE电泳纯度为94.3%;ELISA检测结果表明纯化的IgG质量浓度为1×10-9mg·mL-1时对胡蜂毒素为阳性;免疫扩散结果表明制备的F(ab)2抗体与中国大虎头蜂毒素(1∶1)时出现明显沉淀线,该抗体与胡蜂毒质量比(3.5∶1)时可保护小鼠100%存活。结论首次利用胡蜂毒免疫动物制备高纯度F(ab)2抗体,该抗体可有效中和抗中国大虎头蜂毒蜂毒,并对银环蛇毒具有交叉中和作用。

关键词：中国大虎头蜂胡蜂毒毒性 F(ab)2抗体制备

尖吻蝮蛇血凝酶N末端序列测定及其止血活性分析

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中国药科大学学报 2008年第4期39卷 365-367页

作者：郑颖沈居仁张富强邱薇冯子良范泉水成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所昆明650032

目的:测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,并对其止血活性进行分析。方法:采用Edm an法测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,采用毛细管电泳估算其等电点,根据纤维蛋白出现时间和全血凝时间研究其止血活性。结果:尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨... 详细信息

目的:测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,并对其止血活性进行分析。方法:采用Edm an法测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,采用毛细管电泳估算其等电点,根据纤维蛋白出现时间和全血凝时间研究其止血活性。结果:尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列为VIGGNECDTNEEHFL,等电点为6.59,使用后能明显缩短纤维蛋白出现时间和全血凝时间。结论:尖吻蝮蛇血凝酶具有较强的止血活性。

关键词：尖吻蝮蛇血凝酶氨基酸序列止血活性

云南省蝙蝠携带重要人兽共患病相关病毒病原的研究进展

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中国人兽共患病学报 2017年第9期33卷 821-827页

作者：张海林张富强胡挺松余静范泉水成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所昆明650118

蝙蝠是一些重要病毒的自然储存宿主。2010-2015年调查研究表明,云南省蝙蝠中广泛存在SARS样冠状病毒(SARS-like CoV)和其它多种类型冠状病毒(α-CoV和β-CoV)的自然感染,还从蝙蝠中分离或检测到新的呼肠孤病毒(Reovirus)、轮状病毒(Rota... 详细信息

蝙蝠是一些重要病毒的自然储存宿主。2010-2015年调查研究表明,云南省蝙蝠中广泛存在SARS样冠状病毒(SARS-like CoV)和其它多种类型冠状病毒(α-CoV和β-CoV)的自然感染,还从蝙蝠中分离或检测到新的呼肠孤病毒(Reovirus)、轮状病毒(Rotavirus)、肝炎病毒(Orthohepadnavirus)、丝状病毒(Filovirus)、副粘病毒(Paramyxovirus)、腺病毒(Adenovirus)、博卡病毒(Bocavirus)和圆形病毒(Circovirus)。本文对云南省自然界蝙蝠携带重要人兽共患病相关病毒病原的研究进展及其公共卫生意义做一综述。

关键词：蝙蝠病毒新发病毒储存宿主

CDV,CPV,CAV三联DNA疫苗的实验免疫研究

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云南大学学报（自然科学版） 2007年第5期29卷 529-535页

作者：郑颖邱薇李丽红聂福平龙贵伟李作生张富强李江范泉水成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所云南昆明650032

犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)是引起犬传染病的主要病原体,严重危害犬的健康,基因疫苗具有安全和克服幼犬母源抗体对主动免疫干扰的优点.根据CDV的H基因、CPV的VP1基因、犬2型腺病毒(CAV-2)F基因的核苷酸序列,用PCR... 详细信息

犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)是引起犬传染病的主要病原体,严重危害犬的健康,基因疫苗具有安全和克服幼犬母源抗体对主动免疫干扰的优点.根据CDV的H基因、CPV的VP1基因、犬2型腺病毒(CAV-2)F基因的核苷酸序列,用PCR或RT-PCR方法扩增克隆目的基因,分别构建了pIRCDV-H,pIRESVP1和pcCAV-F 3个真核表达质粒并进行了序列验证,用3种免疫质粒经纯化后混合对15只犬进行免疫,所有接种混合基因疫苗的犬,2次免疫后即可产生较高的抗体水平,攻毒后大部分犬能抵抗3种强毒的攻击,对照犬发病严重,证明所构建的核酸疫苗在一定程度上可抵抗强毒的攻击.

关键词：犬瘟热H基因犬细小病毒VP1基因犬腺病毒F基因基因免疫

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尖吻蝮蛇毒38k凝血酶样酶的分离纯化工艺

药物生物技术 2009年第1期16卷 68-71页

作者：郑颖沈居仁邱薇张富强周卫国范泉水成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所云南昆明650032

建立从尖吻蝮蛇毒中分离纯化38k凝血酶样酶的生产工艺,利用离子交换和凝胶过滤技术,中间品加入巯基乙醇处理后,再利用凝胶过滤技术除去性质相近的杂蛋白,获得的38k凝血酶样酶HPLC纯度达99.93%,比活力达4416U/mg,出血毒试验800U/ml无出血... 详细信息

建立从尖吻蝮蛇毒中分离纯化38k凝血酶样酶的生产工艺,利用离子交换和凝胶过滤技术,中间品加入巯基乙醇处理后,再利用凝胶过滤技术除去性质相近的杂蛋白,获得的38k凝血酶样酶HPLC纯度达99.93%,比活力达4416U/mg,出血毒试验800U/ml无出血,所建立的分离纯化方法适合规模生产。

关键词：尖吻蝮蛇毒凝血酶样酶纯化

应用噬菌体展示技术筛选人巨细胞病毒糖蛋白M新的中和抗原表位(英文)

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生物化学与生物物理进展 2009年第2期36卷 220-227页

作者：王本旭刘玉刘展高亚萍王芳潘和平杨光徐华沈倍奋柳川邵宁生北京军区疾病预防控制中心军事医学科学院基础医学研究所怀柔妇幼保健医院

人巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白复合物Ⅱ包括两种蛋白,即糖蛋白M(gM)和糖蛋白N(gN).尽管来自于HCMV阳性病人血清中的糖蛋白复合物Ⅱ的IgG抗体能够中和HCMV粒子,但迄今为止,还没有gM中和性抗原表位的相关研究.应用消减杂交技术,通过噬菌体肽... 详细信息

人巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白复合物Ⅱ包括两种蛋白,即糖蛋白M(gM)和糖蛋白N(gN).尽管来自于HCMV阳性病人血清中的糖蛋白复合物Ⅱ的IgG抗体能够中和HCMV粒子,但迄今为止,还没有gM中和性抗原表位的相关研究.应用消减杂交技术,通过噬菌体肽库筛选获得gM抗原的一个表位,即***氨基酸序列与gM第32～38位序列高度同源.将MAD与钥孔血蓝蛋白偶联免疫小鼠可产生抗MAD多抗,该多抗不仅结合天然HCMV病毒粒子,而且特异结合重组表达的gM30～78多肽.ELISA结果表明MAD能够特异结合HCMV阳性的病人血清.病毒中和实验结果进一步证明抗MAD多抗能够抑制HCMV AD169株病毒感染人胚肺细胞.总之,MAD表位有可能成为HCMV病毒疫苗潜在的保护性抗原.

关键词：人巨细胞病毒糖蛋白M 中和表位

革螨和恙螨体内汉坦病毒增殖与定位的分子生物学研究

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中华医学杂志 2002年第20期82卷 1415-1419页

作者：张云朱进陶开华吴光华郭恒彬王敬军张家驹邢爱华南京军区军事医学研究所南京210002 陕西省疾病预防控制中心

目的　研究汉坦病毒在革螨、恙螨体内增殖、定位及与传播肾综合征出血热 (HFRS)的关系。方法　采用聚合酶链反应 (PCR)检测螨体内HV RNA和基因分型 ;Vero E6细胞培养检测TCID50 /ml滴度 ;原位RT PCR分子杂交法检测HV RNA在螨体内分布和... 详细信息

目的　研究汉坦病毒在革螨、恙螨体内增殖、定位及与传播肾综合征出血热 (HFRS)的关系。方法　采用聚合酶链反应 (PCR)检测螨体内HV RNA和基因分型 ;Vero E6细胞培养检测TCID50 /ml滴度 ;原位RT PCR分子杂交法检测HV RNA在螨体内分布和定位。结果　用PCR技术从革螨、恙螨体内检测到HV RNA ;取革螨、恙螨幼虫、若虫定期做HVTCID50 /ml滴度 ,证明HV在革螨、恙螨体内可经期传播 ,并有增殖现象 ;用原位RT PCR分子杂交法在革螨、恙螨的中肠上皮细胞和卵巢细胞内检测到HV RNA阳性颗粒 ;用PCR分型证明从同一疫区鼠、螨、病人所分离的HV的基因型一致。结论　研究结果为革螨、恙螨作为HFRS的媒介提供了分子水平的证据 ,对HFRS的流行病学和预防具有重要的理论意义和实用价值。

关键词：恙螨汉坦病毒增殖定位分子生物学

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东北虎致死病原体的分离鉴定及药敏试验

中国兽医杂志 2016年第10期52卷 38-39页

作者：邱薇胡挺松王文博余静郭平郑颖李刚山范泉水成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所云南昆明650118

东北虎（Siberian Tiger）也叫西伯利亚虎、阿穆尔虎、阿尔泰虎、乌苏里虎、满洲虎、北亚虎、远东虎、朝鲜虎,属猫科豹属,是我国Ⅰ级保护动物并被列入濒危野生动植物种,也是国际自然与自然资源保护联合会（IUCN）红色名单中列出的全球... 详细信息

东北虎（Siberian Tiger）也叫西伯利亚虎、阿穆尔虎、阿尔泰虎、乌苏里虎、满洲虎、北亚虎、远东虎、朝鲜虎,属猫科豹属,是我国Ⅰ级保护动物并被列入濒危野生动植物种,也是国际自然与自然资源保护联合会（IUCN）红色名单中列出的全球十大最濒危动物之一。在国内已有狮、虎、豹等大型食肉动物感染大肠杆菌的报道,但还未见其与肺炎克雷伯菌同时感染的报道。

关键词：自然资源保护药敏试验肺炎克雷伯菌濒危野生动植物濒危动物豹属 Tiger 见其猫科抗生素敏感性