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基于网络药理学、分子对接和实验验证探讨莪术-鳖甲药对抗肝纤维化的作用机制

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天然产物研究与开发 2024年第5期36卷 856-867页

作者：周玉娇廖珊珊高攀杨钰敏李秋杏秦旭华金沈锐成都中医药大学药学院成都中医药大学基础医学院成都611137

采用网络药理学、分子对接技术和实验验证探讨莪术-鳖甲药对(Curcumae Rhizoma-Trionycis Carapax,CRTC)抗肝纤维化的作用机制。首先搜集鳖甲和莪术的化学成分和靶点信息;然后将两味药的作用靶点合并去重。使用疾病数据库以获取肝纤维... 详细信息

采用网络药理学、分子对接技术和实验验证探讨莪术-鳖甲药对(Curcumae Rhizoma-Trionycis Carapax,CRTC)抗肝纤维化的作用机制。首先搜集鳖甲和莪术的化学成分和靶点信息;然后将两味药的作用靶点合并去重。使用疾病数据库以获取肝纤维化的相关基因。提取CRTC和肝纤维化的交集靶点,进一步对“药物-潜在活性成分-潜在靶点”网络进行可视化展示。将交集靶点导入STRING数据库以构建蛋白-蛋白相互作用网络(PPI);然后进行GO功能和KEGG通路富集分析并可视化,再用Autodock Vina软件实现分子对接模型的构建。最后通过体内实验对网络药理学预测的靶点及通路进行实验验证。共筛选得到CRTC与肝纤维化的交集靶点共65个。PPI网络中筛选得到度值排名前四的靶点分别为白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Akt serine/threonine kinase 1,AKT1)、信号传导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferative activated receptor gamma,PPARG)。GO功能富集分析显示涉及的生物过程有1025条,细胞组分有41条,分子功能有84条;KEGG通路富集分析得到149条通路,其中关键通路有EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性。分子对接结果显示IL-6、STAT3等核心靶点与其对应成分均有良好的结合活性。体内动物实验结果证实CRTC能改善肝纤维化的病理学形态,且显著抑制了IL-6、EGFR、STAT3的表达。综上所述,CRTC通过多靶点、多通路发挥其抗肝纤维化作用,其机制与网络药理和分子对接技术预测的IL-6/EGFR/STAT信号轴相关。

关键词：莪术-鳖甲药对肝纤维化网络药理学分子对接实验验证

补肾活血方导法治疗薄型子宫内膜-肾虚血瘀证模型大鼠的全转录测序分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第2期30卷 79-90页

作者：张璇夏宛廷尹志行韩娜娜黄金珠周航王毅李涓曾倩成都中医药大学附属医院成都610075 成都中医药大学护理学院成都610075 成都中医药大学基础医学院成都610075

目的:通过全转录组测序技术从基因层面探讨补肾活血方导法治疗薄型子宫内膜-肾虚血瘀证(KDBS-TE)的作用机制。方法:应用雷公藤多苷片灌胃联合肾上腺素皮下注射造模及干预处理后,观察各组大鼠子宫内膜病理变化,每组随机选取3个子宫组织... 详细信息

目的:通过全转录组测序技术从基因层面探讨补肾活血方导法治疗薄型子宫内膜-肾虚血瘀证(KDBS-TE)的作用机制。方法:应用雷公藤多苷片灌胃联合肾上腺素皮下注射造模及干预处理后,观察各组大鼠子宫内膜病理变化,每组随机选取3个子宫组织进行全转录组测序,筛选差异表达基因,构建疾病相关的特异性内源竞争RNA(ceRNA)调控网络,并对ceRNA调控网络中的信使RNA(mRNA)进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:与空白组比较,模型组大鼠子宫内膜发育不良,子宫内膜厚度及内膜/全子宫壁厚度比值显著降低(P<0.01),模型组中18个环状RNA(circRNA)、410个长链非编码RNA(lncRNA)及7个微小RNA(miRNA)有差异表达;与模型组比较,中药导法组及补佳乐组子宫内膜形态改善,子宫内膜厚度及内膜/全子宫壁厚度值均明显增加(P<0.05),中药导法组中21个circRNA、518个lncRNA及17个miRNA有差异表达。疾病相关的特异circRNA-miRNA-mRNA调控网络包括2个circRNA、34个miRNA、593个mRNA、629个节点和664条边,lncRNA-miRNA-mRNA调控网络包括5个lncRNA、10个miRNA、164个mRNA、180个节点和212条边,涉及的信号通路主要有Hippo信号通路、自噬-动物、轴突的指导等。结论:补肾活血方导法能通过调控KDBS-TE模型大鼠子宫上存在的特异性circRNA、lncRNA、miRNA及ceRNA网络,有效治疗KDBS-TE。

关键词：薄型子宫内膜肾虚血瘀证补肾活血方导法全转录组测序特异性内源竞争RNA(ceRNA)调控网络

茱萸丸治疗痰浊阻遏型高脂血症合并颈动脉粥样硬化的随机对照临床观察

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：宋玮杨乐乐张钟艺沈涛成都中医药大学成都中医药大学附属医院

目的：观察茱萸丸治疗高脂血症（HL）痰浊阻遏证合并颈动脉粥样硬化（CAS）患者的临床疗效及安全性。方法：采用随机对照方法，纳入HL痰浊阻遏证合并CAS患者120例，随机分为对照组与治疗组各60例。对照组给予瑞舒伐他汀钙片口服，每次10... 详细信息

目的：观察茱萸丸治疗高脂血症（HL）痰浊阻遏证合并颈动脉粥样硬化（CAS）患者的临床疗效及安全性。方法：采用随机对照方法，纳入HL痰浊阻遏证合并CAS患者120例，随机分为对照组与治疗组各60例。对照组给予瑞舒伐他汀钙片口服，每次10 mg，每日1次；治疗组给予茱萸丸颗粒，每日1剂，分3次冲服。两组均采取饮食运动指导，连续治疗24周。治疗前后观察痰浊阻遏中医证候；检测血脂[总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）]，颈动脉彩色超声[颈动脉内中膜厚度（IMT）、斑块数量、最大斑块面积、最大斑块横切厚度]，血管内皮功能相关指标[一氧化氮（NO）、内皮素1（ET-1）、可溶性细胞间黏附分子1（sICAM-1）、血栓素B2（TXB2）]，氧化应激相关指标[超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）]，治疗期间观察不良反应发生情况，治疗后比较两组患者临床疗效。结果：最终完成试验并纳入统计112例，其中治疗组57例，对照组55例，两组患者一般资料具有可比性。治疗组、对照组总有效率分别为87.72%（50/57）、74.55%（41/55）；治疗组临床疗效高于对照组，差异具有统计学意义(χ2=4.823，P中医证候总积分均显著降低（P中医证候总积分均显著降低（P<0.05，P<0.01）。与本组治疗前比较，两组患者TC、TG、LDL-C、IMT、斑块数量、最大斑块面积、最大斑块横切厚度、ET-1、sICAM-1、TXB2水平均显著降低（P<0.05，P<0.01），HDL-C、NO、SOD水平均显著升高（P<0.05，P<0.01）；与对照组治疗后比较，治疗组TC、TG、LDL-C、IMT、斑块数量、最大斑块面积、最大斑块横切厚度、ET-1、sICAM-1、TXB2水平均显著降低（P<0.01），HDL-C、NO、SOD、GSH-Px水平均显著升高（P<0.05，P<0.01）。治疗期间治疗组出现3例（5.26%，头晕、反酸、便秘各1例）、对照组出现4例（7.27%，上呼吸道感染2例，腹痛、腰痛各1例）不良反应，未予特殊处理，两组比较差异均无统计学意义。结论：茱萸丸可有效降低血脂水平，抑制CAS斑块形成，改善痰浊阻遏证候，其机制可能与改善血管内皮功能、提高抗氧化功能有关。

关键词：高脂血症痰浊阻遏证颈动脉粥样硬化茱萸丸随机对照试验

干姜黄芩黄连人参汤通过NLRP3/caspase-1途径对溃疡性结肠炎小鼠结肠上皮细胞焦亡的影响

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中成药 2024年

作者：周策易泽林张明星李亥辰杨阳陈敏邬颖华成都中医药大学附属医院成都中医药大学

目的研究干姜黄芩黄连人参汤对溃疡性结肠炎（UC）小鼠结肠黏膜上皮细胞焦亡的影响。方法63只C57BL/6小鼠随机选取13只为模型组，其余分为空白组、阳性组（柳氮磺吡啶肠溶片0.6g/kg）及干姜黄芩黄连人参汤低、中、高剂量组（3.9、7.8、... 详细信息

目的研究干姜黄芩黄连人参汤对溃疡性结肠炎（UC）小鼠结肠黏膜上皮细胞焦亡的影响。方法63只C57BL/6小鼠随机选取13只为模型组，其余分为空白组、阳性组（柳氮磺吡啶肠溶片0.6g/kg）及干姜黄芩黄连人参汤低、中、高剂量组（3.9、7.8、15.6g/kg），每组10只。采用DSS建立UC小鼠模型，灌胃给予相应药物。记录小鼠的一般状态、DAI评分，测量结肠长度，HE染色观察组织病理损伤，ELISA法检测小鼠结肠组织IL-1β、IL-8、TNF-α水平，Westernblot法检测结肠组织NLRP3、GSDMD、pro-IL-1β、pro-caspase-1、IL-1β蛋白表达，TUNEL、GSDMD荧光双染色检测细胞焦亡情况。结果与空白组比较，模型组小鼠体质量降低（P<0.01），结肠长度缩短（P<0.01），DAI评分，IL-1β、IL-8、TNF-α水平，NLRP3、GSDMD、active-caspase-1蛋白表达，GSDMD、TUNEL阳性率升高（P<0.05，P<0.01），组织损伤、炎症反应明显；与模型组比较，干姜黄芩黄连人参汤各剂量组体质量升高（P<0.01），结肠长度增长（P<0.05，P<0.01），DAI评分，IL-1β、IL-8、TNF-α水平，NLRP3、GSDMD、active-caspase-1蛋白表达，GSDMD、TUNEL阳性率降低（P<0.05，P<0.01），结肠组织病理损伤减轻。结论干姜黄芩黄连人参汤可改善DSS诱导UC小鼠结肠黏膜的炎症反应，其作用机制主要涉及结肠黏膜上皮细胞NLRP3/caspase-1介导的细胞焦亡过程。

关键词：干姜黄芩黄连人参汤溃疡性结肠炎细胞焦亡 NLRP3炎症小体

慢性阻塞性肺疾病患者出院后30天内再入院风险预测模型的系统评价

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中国循证医学杂志 2024年第1期24卷 49-55页

作者：杜秋凤蒋运兰李滔易晓冬宋爽康静成都中医药大学护理学院成都610075 成都中医药大学附属医院成都610072

目的系统评价慢性阻塞性肺疾病患者出院后30天内再入院风险预测模型,为临床选择风险评估工具提供借鉴。方法计算机检索CNKI、WanFang Data、VIP、CBM、PubMed、Embase、Web of Science、Cochrane Library数据库中与研究目的相关的文献... 详细信息

目的系统评价慢性阻塞性肺疾病患者出院后30天内再入院风险预测模型,为临床选择风险评估工具提供借鉴。方法计算机检索CNKI、WanFang Data、VIP、CBM、PubMed、Embase、Web of Science、Cochrane Library数据库中与研究目的相关的文献,检索时限均为建库至2023年4月25日。文献筛选和数据提取由2名研究者独立进行,采用预测模型研究的偏倚风险评估工具对纳入文献的偏倚风险和适用性进行评价。结果共纳入8项研究,包含14个慢性阻塞性肺疾病患者出院后30天内再入院风险预测模型,总样本量为125~8 263例,结局事件数为24~741例,受试者工作特征曲线下面积为0.58~0.918。纳入模型最常见的前5个预测因子为吸烟、合并症、年龄、文化程度、家庭氧疗。8项研究均存在一定的偏倚风险,主要是因为模型样本量较小、未报告盲法、缺乏外部验证、缺失数据处理不恰当。结论慢性阻塞性肺疾病患者出院后30天内再入院风险预测模型整体预测性能较好,但整体研究质量较低,未来应持续改进模型,为临床早期识别慢性阻塞性肺疾病患者出院后30天内再入院高危人群提供科学的评估工具。

关键词：慢性阻塞性肺疾病再入院风险预测模型系统评价

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针刺治疗功能性便秘的机制研究进展

针刺研究 2024年第1期49卷 79-87页

作者：李艳秋姚俊鹏鄢香芸杨婉卿陈敏唐太春李瑛成都中医药大学针灸推拿学院成都610075 成都中医药大学附属医院成都610075

针刺治疗功能性便秘(FC)疗效确切,具有早期起效迅速、远期疗效稳定和整体性调节的特点。本文检索并总结近年来针刺治疗FC的相关文献,结果显示针刺能从促进肠道动力、调节肠道菌群、调节脑-肠轴、减轻肠道炎性反应、改善直肠低敏感性等... 详细信息

针刺治疗功能性便秘(FC)疗效确切,具有早期起效迅速、远期疗效稳定和整体性调节的特点。本文检索并总结近年来针刺治疗FC的相关文献,结果显示针刺能从促进肠道动力、调节肠道菌群、调节脑-肠轴、减轻肠道炎性反应、改善直肠低敏感性等多角度、多途径发挥作用。未来研究可深入挖掘针刺改善直肠低敏感性的机械传感机制、明确针刺调控的关键肠道菌属及代谢特征、探究不同作用机制间的网络关系,并阐明不同针刺治疗方案的效应差异机制,以期更好地优化临床治疗方案,提高针刺治疗FC的临床疗效。

关键词：功能性便秘针刺机制综述

基于16S rDNA测序研究茱萸丸对动脉粥样硬化小鼠肠道菌群结构的影响

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中华中医药杂志 2024年第9期 4674-4681页

作者：宋玮史敏胡志鹏杨乐乐周昕沈涛成都中医药大学成都中医药大学附属医院

目的：观察茱萸丸对ApoE-/-动脉粥样硬化（AS）小鼠肠道菌群的影响。方法：采用高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠诱导AS模型，总造模周期为12周。造模成功的50只ApoE-/-小鼠随机分为模型组，茱萸丸低、中、高剂量组，阿托伐他汀钙组，每组10只，... 详细信息

目的：观察茱萸丸对ApoE-/-动脉粥样硬化（AS）小鼠肠道菌群的影响。方法：采用高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠诱导AS模型，总造模周期为12周。造模成功的50只ApoE-/-小鼠随机分为模型组，茱萸丸低、中、高剂量组，阿托伐他汀钙组，每组10只，C57BL/6J小鼠10只作为空白对照组。造模后空白对照组与模型组给予等体积无菌蒸馏水灌胃，茱萸丸低、中、高剂量组分别给予茱萸丸混悬液130.54、261.08、552.16 mg/kg灌胃，阿托伐他汀钙组给予阿托伐他汀钙混悬液10.40 mg/kg灌胃，各组小鼠均灌胃12周。检测小鼠体质量、摄食量；苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠主动脉组织的病理学改变；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）水平；采用16S rDNA技术检测小鼠粪便的肠道菌群Alpha、Beta多样性及物种组成差异。结果：与空白对照组比较，模型组小鼠体质量、摄食量降低；HE染色可见主动脉内膜大面积增厚；血清ox-LDL、MCP-1、VCAM-1、ICAM-1水平显著升高（P<0.01）;Chao1指数、Ace指数以及observed species指数显著降低（P<0.01）；疣微菌门、杜氏牙形石属、乳杆菌属相对丰度显著升高（P<0.01），拟杆菌门、放线菌门、圣埃里立支杆菌属、粪杆菌属、布劳特氏属相对丰度显著降低（P<0.01）。与模型组比较，各给药组体质量、摄食量上升；HE染色可见随着茱萸丸浓度的增加，斑块富集区域逐渐缩小；血清ox-LDL、MCP-1、VCAM-1、ICAM-1水平显著下降（P<0.01）;Chao1指数、Ace指数以及observed species指数显著升高（P<0.01）；拟杆菌门、变形菌门、粪杆菌属、布劳特氏属相对丰度显著升高（P<0.01），厚壁菌门、放线菌门、疣微菌门、杜氏牙形石属、圣埃里立支杆菌属、乳杆菌属相对丰度显著降低（P<0.01）。结论：茱萸丸能够显著抑制AS小鼠主动脉病理改变，调节肠道菌群中有益菌和有害菌的相对丰度，纠正菌群紊乱情况，从而减轻主动脉炎症反应。

关键词：茱萸丸动脉粥样硬化肠道菌群炎症因子 16S rDNA测序

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从“破癥坚积聚”探讨麻黄抗肿瘤治疗

中药药理与临床 2024年

作者：雷丽桢艾彦伶魏玉洁唐健元成都中医药大学成都中医药大学附属医院

《神农本草经》记载麻黄能“破癥坚积聚”，然明代以前，本功用为诸多医家所忽视，至阳和汤之后，麻黄破坚之功方被逐渐重视，并逐步应用于临床。目前，麻黄被广泛用于各类肿瘤的临床治疗，实验研究也证明了其具有抗肿瘤的作用。但有关... 详细信息

《神农本草经》记载麻黄能“破癥坚积聚”，然明代以前，本功用为诸多医家所忽视，至阳和汤之后，麻黄破坚之功方被逐渐重视，并逐步应用于临床。目前，麻黄被广泛用于各类肿瘤的临床治疗，实验研究也证明了其具有抗肿瘤的作用。但有关麻黄的“破癥坚积聚”之功仍少有论述，也未在临床抗肿瘤治疗和药物开发中得到足够的重视。因此，本文从“破癥坚积聚”角度初步探讨麻黄在肿瘤治疗领域的有效性及中医理论基础，为抗肿瘤临床应用及药物研发提供新思路和新选择。

关键词：麻黄肿瘤中药破癥坚积聚

芪甲柔肝方及其拆方调控VEGF/SRF/c-FOS通路与改善肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化的机制研究

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中国中药杂志 2024年第20期 5528-5538页

作者：刘进许欣怡刘悸斌冯全生苏悦成都中医药大学

基于血管内皮生长因子（VEGF）/血清应答因子（SRF）/原癌基因c-FOS（c-FOS）通路及肝窦毛细血管化揭示芪甲柔肝方及其拆方抗肝纤维化的机制。将大鼠随机分为空白组（6只）和造模组（28只）,造模组大鼠采用皮下注射40%四氯化碳（CCl4）... 详细信息

基于血管内皮生长因子（VEGF）/血清应答因子（SRF）/原癌基因c-FOS（c-FOS）通路及肝窦毛细血管化揭示芪甲柔肝方及其拆方抗肝纤维化的机制。将大鼠随机分为空白组（6只）和造模组（28只）,造模组大鼠采用皮下注射40%四氯化碳（CCl4）橄榄油的方法建立肝纤维化模型。确定造模成功后，将造模组剩余大鼠分为模型组（7只）、芪甲柔肝全方组（6只）、拆方益气养血药组（6只）、拆方化瘀通络药组（6只）,芪甲柔肝全方组、拆方益气养血药组、拆方化瘀通络药组分别采用中药灌胃治疗，空白组与模型组给予生理盐水灌胃。灌胃28 d后处死大鼠，检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）判断肝功能，肝组织苏木素-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色观察肝脏炎症及纤维化，检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原（collagenⅠ）判断肝星状细胞激活，检测肝组织血管内皮生长因子A（VEGFA）、血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2）、SRF、c-FOS、分化抗原簇31（CD31）、血管性血友病因子（vWF）的表达水平，扫描电镜观察肝窦内皮细胞窗孔形态以揭示各组药物抗肝纤维化的机制。结果显示，与模型组相比，芪甲柔肝方及其拆方益气养血药、化瘀通络药均能减轻肝组织病理损伤，降低肝纤维化大鼠ALT、AST和肝指数（P<0.01）;各治疗药物均能降低肝组织α-SMA和collagenⅠ表达（P<0.01）,降低肝纤维化大鼠肝组织CD31和vWF的表达（P<0.05）,维持肝窦内皮细胞窗孔形态；各治疗药物均能降低VEGFA、SRF、c-FOS的表达（P<0.05）,恢复VEGFR-2的表达（P<0.05）。其中，芪甲柔肝全方在改善大鼠肝损伤与血清肝功能，抑制肝窦毛细血管化，以及调控VEGF/SRF/c-FOS信号通路方面优于拆方的益气养血药及化瘀通络药（P<0.05）。综上，芪甲柔肝方及其拆方均能够改善肝纤维化大鼠肝功能，减轻病理损伤，抑制肝星状细胞激活，减轻肝纤维化及肝窦毛细血管化，其机制与调控VEGF/SRF/c-FOS信号通路有关。单用化瘀通络药不及联合益气养血药的芪甲柔肝全方，提示荣通并治在肝纤维化及肝窦毛细血管化的积极意义。

关键词：肝纤维化肝窦毛细血管化芪甲柔肝方 VEGF/SRF/c-FOS信号通路益气养血化瘀通络

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