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血管性血友病因子裂解酶间隔区结构域突变对酶生物学功能的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第4期50卷 900-907页

作者：王萌吴昊李华赵艺鸿金圣宇延边大学附属医院血液内科吉林延吉133000 浙江省绍兴市人民医院康复医学科浙江绍兴312000 延边大学附属医院体检科吉林延吉133000 延边大学附属医院中心实验室吉林延吉133000

目的:探讨血管性血友病因子裂解酶ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1型13(ADAMTS13)间隔区结构域在血管性血友病因子(vWF)裂解过程中的生物学功能,阐明ADAMTS13在血栓性血小板减少性紫癜(TTP)发病机制中的作用。方法:将ADAMTS13间隔区结构... 详细信息

目的:探讨血管性血友病因子裂解酶ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1型13(ADAMTS13)间隔区结构域在血管性血友病因子(vWF)裂解过程中的生物学功能,阐明ADAMTS13在血栓性血小板减少性紫癜(TTP)发病机制中的作用。方法:将ADAMTS13间隔区结构域中的氨基酸残基TEDRLPR以点突变技术逐个基因突变(突变体M1~M7),将构建的ADAMTS13与其突变体质粒转染至人胚肾HEK293细胞,稳定表达后提纯重组蛋白。观察野生型和突变型ADAMTS13在变性条件、剪切应力作用和ADAMTS13抗体处理后裂解vWF的能力。结果:荧光共振能量转移(FRET)实验,与野生型ADAMTS13比较,ADAMTS13突变体M4(R635A)和突变体M7(R638A)对FRET-vWF73剪切能力降低(P0.05),表明ADAMTS13的C末端与vWF之间存在多个结合位点。ADAMTS13抗体处理可在一定程度上抑制野生型和突变型ADAMTS13裂解vWF的能力。结论:间隔区突变后ADAMTS13的活性降低。ADAMTS13突变体M4(R635A)和突变体M7(R638A)可能是ADAMTS13在底物识别时的重要作用位点。

关键词：血管性血友病因子裂解酶 ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1型13 间隔区结构域血管性血友病因子血栓性血小板减少性紫癜

胃肠道功能障碍在肝硬化脓毒症患者预后中的价值

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中国感染控制杂志 2024年第2期23卷 162-168页

作者：韩才均黄媛吴政燮金星朴美花金花延边大学附属医院检验科延边大学附属医院消化内科延边大学附属医院感染科延边大学附属医院手术室

目的评估急性胃肠道损伤(AGI)和肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)在肝硬化脓毒症患者预后中的价值。方法回顾性分析2020年9月—2023年3月某院重症监护病房(ICU)收治的84例肝硬化脓毒症患者临床资料，并选择同期41例失代偿期肝硬化患者作为对... 详细信息

目的评估急性胃肠道损伤(AGI)和肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)在肝硬化脓毒症患者预后中的价值。方法回顾性分析2020年9月—2023年3月某院重症监护病房(ICU)收治的84例肝硬化脓毒症患者临床资料，并选择同期41例失代偿期肝硬化患者作为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定患者血清I-FABP水平。计算入院终末期肝病模型(MELD)和序贯器官衰竭评估(SOFA)评分，根据住院病历评估AGI程度，观察30天和90天生存状况。采用Spearman相关分析判断变量间相关性，多因素Cox回归分析确定肝硬化脓毒症死亡的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线确定最佳临界值，ROC曲线下面积(AUC)比较诊断效能。结果肝硬化脓毒症组患者AGI分级和I-FABP水平均高于对照组(均P<0.05)。肝硬化脓毒症患者I-FABP与降钙素原(PCT)、MELD和SOFA评分均相关(均P<0.05),AGI分级与SOFA评分呈正相关(P=0.038)。肝硬化脓毒症组患者30天病死率为25.0%(21例),90天病死率为35.7%(30例)。多因素Cox回归分析显示，基线I-FABP、SOFA评分与30天和90天生存结局独立相关，且I-FABP四分位数显示出良好的预后区分能力。ROC曲线显示，I-FABP能明显提高SOFA评分对患者预后的预测效能。结论肝硬化脓毒症患者AGI分级和I-FABP水平明显升高。血清I-FABP与患者预后相关，并可提高SOFA评分对生存结局的预测效能。

关键词：肝硬化脓毒症胃肠道功能障碍肠脂肪酸结合蛋白急性胃肠道损伤

基于转录组测序探究OSW-1抗肝癌的作用机制

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食品工业科技 2024年

作者：徐博姜汀金旺德金星林延边大学附属医院

目的：基于转录组测序发掘虎眼万年青皂苷（Ornithogalum saundersiae Saponins，OSW-1）作用于肝癌细胞（HEP3B）后的关键通路及差异表达基因。方法：利用转录组测序技术检测OSW-1处理HEP3B的基因表达数据，通过测定的序列信息精确地... 详细信息

目的：基于转录组测序发掘虎眼万年青皂苷（Ornithogalum saundersiae Saponins，OSW-1）作用于肝癌细胞（HEP3B）后的关键通路及差异表达基因。方法：利用转录组测序技术检测OSW-1处理HEP3B的基因表达数据，通过测定的序列信息精确地分析转录本，筛选与细胞存活相关的表达差异基因，得到核心基因。并通过实验验证OSW-1是否通过调控核心靶点治疗肝细胞癌。结果：MTT结果表明，经OSW-1给药后HEP3B细胞活性明显降低，且呈浓度依赖性。通过转录组测序检测，共获得1381个存在明显表达差异的基因，并且多数基因富集在TNF信号通路。进一步通过免疫荧光及Western blot表明，OSW-1干预HEP3B细胞后，p-PI3K、p-AKT、p-NF-κB蛋白水平表达降低。结论：OSW-1可能通过调控炎症信号通路降低炎症反应，抑制HEP3B细胞活性，可作为潜在的治疗肝癌的药物，以及为保肝护肝的保健食品研发提供实验依据。

关键词：虎眼万年青皂苷转录组测序 HEP3B细胞差异表达基因

基于GEO数据库和体内实验探讨小鼠急性肺损伤发生机制与治疗方法

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中国免疫学杂志 2024年

作者：陈永虎武西林姜哲李雪征延边大学附属医院静脉用药调配中心延边大学药学院

目的基于GeneExpressionOmnibus（GEO）数据库筛选脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）关键基因，探讨其发病机制并寻找潜在的治疗药物。方法采用GEO数据库收集LPS诱导ALI的基因表达数据，并利用微生信在线分析平台，筛选表达差异... 详细信息

目的基于GeneExpressionOmnibus（GEO）数据库筛选脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）关键基因，探讨其发病机制并寻找潜在的治疗药物。方法采用GEO数据库收集LPS诱导ALI的基因表达数据，并利用微生信在线分析平台，筛选表达差异基因，并得到核心基因。利用Metascape和DAVID对核心基因，进行GeneOntology（GO）和KyotoEncyclopediaofGenesandGenomes（KEGG）富集分析，寻找与ALI相关的通路，并针对通路进行GeneSetEnrichmentAnalysis（GSEA）分析和蛋白互作网络分析，最后筛选出核心靶点。并通过动物实验，验证kaempferol-3-O-α-L-(4″-E-p-coumaroyl)-rhamnoside（KAE）调控核心靶点治疗ALI。结果本研究共纳入两组GEO数据集，筛选出261表达差异的核心基因，数据可视化分析发现，LPS诱导的ALI主要涉及TNF与NF-κB信号通路等炎症通路。针对该通路中的两个核心靶点NF-κB与NLRP3进行小鼠体内验证，并给予潜在的治疗药物KAE。发现KAE可以减轻LPS引起的肺组织损伤，进一步研究表明，KAE可通过降低p-NF-κB与NLRP3等蛋白的表达，发挥治疗ALI的作用。结论本研究首次在GEO数据库中筛选LPS诱导ALI模型，发现LPS诱导ALI主要与TNF和NF-κB信号通路中的NF-κB与NLRP3有关，而KAE通过降低p-NF-κB与NLRP3等蛋白的表达，显示出治疗ALI的潜力，有望成为ALI治疗的候选药物。

关键词： GEO数据库急性肺损伤 LPS NF-κB NLRP3

人工晶状体保护下超声乳化白内障吸除术疗效及安全性评价:一项随机对照临床研究

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中华实验眼科杂志 2024年第3期42卷 248-255页

作者：金玉娇李楠孙秋爽金韦奕江美玲刘颖锋卢焱孙丽霞崔仁哲延边大学附属医院眼科延吉133000

目的观察人工晶状体(IOL)保护下超声乳化手术(PHACO)对硬核白内障患者的治疗效果。方法采用随机对照临床研究方法,连续纳入2019年1月至2022年5月于延边大学附属医院收治的Emery分级Ⅳ~Ⅴ级的硬核白内障患者120例120眼,按照随机数字表法... 详细信息

目的观察人工晶状体(IOL)保护下超声乳化手术(PHACO)对硬核白内障患者的治疗效果。方法采用随机对照临床研究方法,连续纳入2019年1月至2022年5月于延边大学附属医院收治的Emery分级Ⅳ~Ⅴ级的硬核白内障患者120例120眼,按照随机数字表法分为PHACO组、IOL保护PHACO组和囊外白内障摘除术(ECCE)组,分别行常规PHACO、IOL保护下的PHACO和ECCE,每组40例40眼。最终99例受试者完成随访,其中PHACO组30例30眼,IOL保护PHACO组35例35眼,ECCE组34例34眼。记录各组总手术时间、术中超声乳化时间、累计释放能量。术后随访3个月,检测并比较3个组患眼角膜内皮细胞密度(ECD)、角膜内皮细胞面积变异系数(CV)、角膜六角形内皮细胞比率(6A)、角膜散光值,不同等级裸眼远视力的眼数分布;记录术中和术后并发症发生情况。结果IOL保护PHACO组与PHACO组超声能量及超声时间比较差异均无统计学意义(P=0.691、0.982)。IOL保护PHACO组和PHACO组总手术时间分别为(38.81±2.73)和(36.45±3.45)min,明显短于ECCE组的(69.60±4.35)min,差异均有统计学意义(均P0.05)。术后3个月,PHACO组和IOL保护PHACO组裸眼视力较高的人数较ECCE组高(P=0.006、0.007);IOL保护PHACO组的ECD和6A分别为(2155.57±177.88)/mm^(2)和(41.31±5.18)%,均显著高于PHACO组的(1912.64±224.11)/mm^(2)和(36.18±3.27)%,IOL保护PHACO组的CV为(50.34±5.90)%,低于PHACO组的(55.67±3.30)%,差异均有统计学意义(P=0.007、0.003、0.005)。术后1周和3个月,IOL保护PHACO组的角膜散光度数均显著低于ECCE组,且高于PHACO组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论IOL保护下的PHACO相对常规PHACO可有效减少超声能量对角膜内皮的损伤,相对ECCE能明显缩短手术时间,减轻术后炎症反应,且并未明显增加术后角膜散光。IOL保护下的PHACO是硬核白内障患者一种有效的改良手术方式。

关键词：白内障人工晶状体超声乳化白内障吸除术角膜内皮术源性散光

PD-1/PDL-1在原因不明复发性流产患者T细胞、Tregs和Bregs细胞中的表达及意义

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中华检验医学杂志 2024年第6期47卷 678-685页

作者：陈葆国干军郑瑞章卫国俞依妮温州医科大学附属台州医院中心实验室临海317000

目的探讨程序性死亡因子1(PD-1)/程序性死亡因子配体1(PDL-1)在原因不明复发性流产(URSA)患者T细胞、调节性T细胞(Tregs)、调节性B细胞(Bregs)中的表达及意义。方法收集2020年2月至2022年2月在温州医科大学附属台州医院就诊的42例URSA... 详细信息

目的探讨程序性死亡因子1(PD-1)/程序性死亡因子配体1(PDL-1)在原因不明复发性流产(URSA)患者T细胞、调节性T细胞(Tregs)、调节性B细胞(Bregs)中的表达及意义。方法收集2020年2月至2022年2月在温州医科大学附属台州医院就诊的42例URSA患者为患者组,34名健康孕妇(正常妊娠组)和30名未孕健康体检者(对照组),进行回顾性分析。采用流式细胞术检测外周血PD-1/PDL-1在Tregs细胞、Bregs细胞和[T细胞、B细胞和自然杀伤细胞(TBNK)]淋巴细胞亚群中的表达,以及血清辅助T细胞1[γ干扰素(IFN-γ)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)]Th1/辅助T细胞2[白介素4(IL-4)、IL-6和IL-10]Th2/辅助T细胞17(IL-17)Th17细胞因子表达水平。对患者进行淋巴细胞免疫治疗,治疗结束检测患者PD-1/PD-L1水平变化及随访记录妊娠结局。多组间比较用方差分析,URSA患者治疗前后比较用配对t检验,各检测指标相关性用双变量相关分析法。结果PD-1/PDL-1在URSA患者组外周血Tregs、Bregs细胞和T淋巴细胞亚群中的表达显著低于正常妊娠组,差异有统计学意义(均P0.05)。结论PD-1/PDL-1在URSA患者外周血Tregs、Bregs细胞和T细胞亚群中低表达,造成Th1/Th2、Tregs/Th17平衡失调,母胎免疫耐受损害而导致妊娠失败,其可能是潜在的治疗靶点。

关键词：复发性流产程序性死亡因子1 程序性死亡因子配体1 调节性B细胞调节性T细胞

运用微流控技术分析虫草素对剪切诱导血小板聚集和活化的抑制效果

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中国药学杂志 2024年第6期59卷 541-548页

作者：高雪梅张天聪黄小静宦宣容李远重庆医科大学附属永川医院中心实验室重庆402160

目的分析虫草素对不同非生理性剪切率诱导的血小板聚集和活化的抑制效果。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用钙黄绿素对血小板进行染色标记,并以虫草素体外孵育后,分别以14.7... 详细信息

目的分析虫草素对不同非生理性剪切率诱导的血小板聚集和活化的抑制效果。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用钙黄绿素对血小板进行染色标记,并以虫草素体外孵育后,分别以14.7和50μL·min^(-1)流过带有0.5 mm长的80%狭窄的通道150 s,同时用荧光显微镜实时拍摄血小板在微通道表面的黏附聚集图像;用Image J分析荧光图片,以血小板表面覆盖率作为血小板聚集的量化指标。流式细胞术分析虫草素对血小板钙离子动员,单核细胞-血小板聚集体的抑制效果,并通过凝血检测和溶血实验对虫草素出血风险以及血液相容性做评估。结果虫草素可抑制剪切诱导的血小板聚集。在14.7和50μL·min^(-1)条件下,血小板聚集均可被虫草素抑制。虫草素抑制血小板钙离子动员和单核细胞-血小板聚集具有剪切力相关性,并且对外源性凝血途径和内源性凝血途径无影响,具有良好血液相容性。结论虫草素可有效抑制剪切率诱导的血小板聚集,是一种有潜力的抗血小板药物。

关键词：血小板聚集微流控技术壁剪切率虫草素

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腹膜恶性间皮瘤疝入后纵隔1例

中国医学影像技术 2024年

作者：王双金光玉延边大学附属医院放射科

患者男，69岁，腹泻伴乏力2年，进油腻饮食后加重，体质量减轻8 kg；无其他特殊病史。查体：腹部饱满柔软，移动性浊音（+）。实验室检查未见明显异常。腹部CT：腹膜、大网膜及肠系膜弥漫性增厚，局部形成边界清晰的团块状软组织密度影... 详细信息

患者男，69岁，腹泻伴乏力2年，进油腻饮食后加重，体质量减轻8 kg；无其他特殊病史。查体：腹部饱满柔软，移动性浊音（+）。实验室检查未见明显异常。腹部CT：腹膜、大网膜及肠系膜弥漫性增厚，局部形成边界清晰的团块状软组织密度影，内见条状低密度区，边缘呈液体密度，经食管裂孔疝入后纵隔并推挤食管使之移位；增强后延迟期呈中度强化，内见强化血管；大量腹腔积液。腹部MRI：腹膜、大网膜及肠系膜不均匀增厚；后纵隔9.5 cm×5.8 cm哑铃状肿块，边界清，T1WI呈等信号、内见点状及条状高信号，T1WI反向位信号减低，脂肪抑制T2WI呈等-高混杂信号、外缘见新月形高信号并见流空血管，弥散加权成像（diffusion weighted imaging， DWI）呈高信号，表观弥散系数（apparent diffusion coefficient， ADC）图呈低信号。影像学诊断：考虑腹膜间皮瘤。

关键词：腹膜肿瘤间皮瘤纵隔体层摄影术,X线计算机

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坏死性凋亡在肝纤维化中的作用

临床肝胆病杂志 2024年第08期40卷 1677-1681页

作者：吴旋李晖董海舰杨希坤王凯鑫成都中医药大学附属医院中心实验室成都中医药大学临床医学院

肝纤维化作为各种慢性肝病向肝硬化发展的关键环节，影响其预后与转归。坏死性凋亡是一种新型的程序性细胞死亡模式，已被证明在多种疾病的病理生理中发挥重要作用，同样也被认为是改善肝纤维化的潜在靶点。不同类型的肝内细胞（包括肝... 详细信息

肝纤维化作为各种慢性肝病向肝硬化发展的关键环节，影响其预后与转归。坏死性凋亡是一种新型的程序性细胞死亡模式，已被证明在多种疾病的病理生理中发挥重要作用，同样也被认为是改善肝纤维化的潜在靶点。不同类型的肝内细胞（包括肝细胞、肝星状细胞、肝巨噬细胞及肝窦内皮细胞）发生坏死性凋亡，可对肝纤维化发挥促进或抑制作用，本文着重阐述上述作用机制，并讨论靶向坏死性凋亡介导的肝纤维化的治疗策略。

关键词：肝纤维化坏死性凋亡肝星状细胞