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基于生物信息学分析非酒精性脂肪性肝病的线粒体自噬相关基因及防治中药筛选

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中草药 2024年第19期55卷 6655-6665页

作者：高松林韦柳婷管晓温文建覃雁刘沛恬廖芸旭黄贵华广西中医药大学广西中医药大学第一附属医院

目的基于生物信息学探讨非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）与线粒体自噬相关的特征基因，并筛选对这些基因起调控作用的中药。方法从GSE89632数据集中提取差异表达的线粒体自噬相关基因（differentially... 详细信息

目的基于生物信息学探讨非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）与线粒体自噬相关的特征基因，并筛选对这些基因起调控作用的中药。方法从GSE89632数据集中提取差异表达的线粒体自噬相关基因（differentially expressed mitophagy-related genes,DEMRGs），并对其进行相关性分析、蛋白互作网络构建和富集分析。根据DEMRGs的表达量对NAFLD患者进行共识聚类，分析亚型间DEMRGs的表达情况和基因集变异分析。构建并预测了4种机器学习模型的效能，通过列线图、校准曲线、决策曲线和外部数据集评估最佳机器学习模型的有效性，筛选最佳机器学习模型中NAFLD的线粒体自噬特征基因。预测能够调控线粒体自噬特征基因治疗NAFLD的潜在中药。结果在NAFLD样本和正常对照样本中获得14个DEMRGs,DEMRGs具有相互调控的作用。根据DEMRGs的表达量可将NAFLD分为2个亚型。随机森林（random forest,RF）模型是最佳模型，可以准确地预测NAFLD。UNC-51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK1)、磷酸酶和张力蛋白同源物（phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten,PTEN）诱导的激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、FUN14结构域蛋白1(FUN14 domain containing 1,FUNDC1)、微管相关蛋白1轻链3β(microtubule associated protein 1 light chain 3 beta,MAP1LC3B)和视神经蛋白（optineurin,OPTN）是NAFLD的线粒体自噬特征基因。具有NAFLD潜在治疗中药有三七、川芎、藁本等，功效主要以补虚、清热、化痰止咳平喘和活血化瘀为主。结论 DEMRGs在NAFLD的发生和发展中起重要作用，ULK1、PINK1、FUNDC1、MAP1LC3B和OPTN是NAFLD与线粒体自噬相关的特征基因，三七、川芎、藁本可能通过调节线粒体自噬治疗NAFLD，为NAFLD的诊断和治疗提供了新思路。

关键词：非酒精性脂肪性肝病线粒体自噬相关基因生物信息学机器学习三七川芎藁本

麦粒灸对神经根型颈椎病大鼠细胞自噬与内质网应激的影响

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中国针灸 2024年第10期44卷 1165-1171页

作者：张熙粟胜勇广西中医药大学南宁530000 广西中医药大学第一附属医院针灸科南宁530023

目的:观察麦粒灸对神经根型颈椎病(CSR)模型大鼠脊髓及神经根组织细胞自噬及内质网应激凋亡因子表达的影响,探讨麦粒灸缓解CSR神经病理性疼痛的可能作用机制。方法:将48只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、麦粒灸组和麦粒灸+3-甲... 详细信息

目的:观察麦粒灸对神经根型颈椎病(CSR)模型大鼠脊髓及神经根组织细胞自噬及内质网应激凋亡因子表达的影响,探讨麦粒灸缓解CSR神经病理性疼痛的可能作用机制。方法:将48只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、麦粒灸组和麦粒灸+3-甲基腺嘌呤(3MA)组,每组12只。模型组、麦粒灸组和麦粒灸+3MA组大鼠采用椎管插线法制备CSR模型。造模成功后第3天,麦粒灸组于“大椎”行麦粒灸干预,每日1次,每次6壮;麦粒灸+3MA组先予3MA溶液腹腔注射(2.5 mg/kg),后进行与麦粒灸组相同的麦粒灸干预。均每日1次,连续干预7 d。分别于干预前后观察各组大鼠步态障碍评分并测量外周神经机械性痛阈;干预后采用Western blot法检测大鼠脊髓及神经根组织内质网应激凋亡因子C/EBP同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)及自噬底物P62蛋白表达,透射电镜观察大鼠脊髓及神经根组织自噬小体及细胞超微结构。结果:造模后(干预前),与假手术组比较,模型组、麦粒灸组、麦粒灸+3MA组大鼠步态障碍评分升高(P<0.05),外周神经机械性痛阈降低(P<0.05)。干预后,与假手术组比较,模型组大鼠步态障碍评分升高(P<0.05),外周神经机械性痛阈降低(P<0.05);与模型组比较,麦粒灸组、麦粒灸+3MA组大鼠步态障碍评分降低(P<0.05),外周神经机械性痛阈升高(P<0.05);与麦粒灸+3MA组比较,麦粒灸组大鼠步态障碍评分降低(P<0.05),外周神经机械性痛阈升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠脊髓及神经根组织CHOP、Caspase-12蛋白表达升高(P<0.05);与模型组及麦粒灸+3MA组比较,麦粒灸组大鼠脊髓及神经根组织CHOP、Caspase-12、P62蛋白表达降低(P<0.05)。麦粒灸组大鼠脊髓及神经根组织自噬小体数量较模型组及麦粒灸组+3MA组增多,且细胞超微结构清晰完整,与假手术组相近。结论:麦粒灸“大椎”可有效缓解CSR模型大鼠神经病理性疼痛,其镇痛机制可能与促进自噬,抑制内质网应激,减少内质网应激介导的细胞凋亡,修复受损神经有关。

关键词：神经根型颈椎病麦粒灸大椎细胞自噬内质网应激凋亡

强心汤保护心血管内皮治疗慢性心力衰竭的作用机制

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北京中医药大学学报 2024年第2期47卷 238-248页

作者：毛美玲卢健棋潘朝锌温志浩庞延唐梅玲彭志林谢丽钰陈佳永广西中医药大学南宁530200 广西中医药大学第一附属医院

目的探讨强心汤调控miR⁃125b⁃5p、抑制核因子κB(NF⁃κB)介导的炎性因子的表达以保护心血管内皮祖细胞,治疗慢性心力衰竭(CHF)的作用机制。方法42只SPF级SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、强心汤低剂量组(7.45 g/kg)、强心汤... 详细信息

目的探讨强心汤调控miR⁃125b⁃5p、抑制核因子κB(NF⁃κB)介导的炎性因子的表达以保护心血管内皮祖细胞,治疗慢性心力衰竭(CHF)的作用机制。方法42只SPF级SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、强心汤低剂量组(7.45 g/kg)、强心汤中剂量组(14.90 g/kg)、强心汤高剂量组(29.80 g/kg)、沙库巴曲缬沙坦组(10.42 mg/kg),每组7只。除对照组外,其他各组大鼠均采用结扎冠状动脉左前降支方法建立CHF模型。造模后第2天分别给予相应药物灌胃,连续给药28 d。采用心脏彩超检测各组大鼠心功能指标[左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVEDs)、左室射血分数(LVEF)]。HE染色观察大鼠左心室心肌组织病理学变化。Masson染色观察各组大鼠心脏心肌纤维化情况。荧光原位杂交(FISH)检测大鼠左心室心肌组织miR⁃125b⁃5p在内皮祖细胞的表达情况。蛋白质印迹法检测大鼠左心室心肌组织脑源性神经营养因子(BDNF)、NF⁃κB p65、磷酸化NF⁃κB p65(p⁃NF⁃κB p65)蛋白表达。酶联免疫吸附测定法检测炎性因子肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白细胞介素(IL)⁃1β和IL⁃6的含量。结果与对照组比较,模型组大鼠LVEDd、LVEDs升高,LVEF降低;心肌组织病理损伤严重,组织结构异常改变,横纹肌模糊,心肌细胞排列紊乱且部分变性坏死;心肌组织呈蓝色的胶原纤维、黏液沉积增多;左心室心肌组织miR⁃125b⁃5p平均光密度明显升高;左心室心肌组织BDNF蛋白表达减少,p⁃NF⁃κB p65/NF⁃κB p65值增加;TNF⁃α、IL⁃1β和IL⁃6含量明显增加(P<0.05)。与模型组比较,强心汤中、高剂量组和沙库巴曲缬沙坦组大鼠LVEDd、LVEDs均降低,LVEF均升高;左心室心肌组织的病理损伤改善明显,横纹肌清晰,心肌细胞排列整齐有序,细胞坏死减少;心肌组织呈蓝色的胶原纤维、黏液沉积减少,心肌纤维化情况明显减少;左心室心肌组织miR⁃125b⁃5p平均光密度明显降低;左心室心肌组织BDNF蛋白表达增加,p⁃NF⁃κB p65/NF⁃κB p65值降低;TNF⁃α、IL⁃1β和IL⁃6含量明显降低(P<0.05)。结论强心汤能够降低miR⁃125b⁃5p表达,抑制NF⁃κB通路的激活,降低促炎因子TNF⁃α、IL⁃1β和IL⁃6的表达,减轻心肌炎性反应、病理损伤及减少心肌纤维化,最终保护心血管内皮,改善心功能,从而治疗CHF。

关键词：慢性心力衰竭强心汤 miR⁃125b⁃5p NF⁃κB 炎症反应心血管内皮祖细胞大鼠

中医药干预Nrf2/HO-1信号通路治疗急性胰腺炎的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 265-271页

作者：辛宛铃王宁梁岑怡祖悦李偲嘉冯敏超陈国忠广西中医药大学南宁530001 广西中医药大学第一附属医院南宁530023

急性胰腺炎(AP)是临床常见的急腹症,具有起病急、发展快、病情重、并发症多、致死率高等特点。早期阶段如果治疗不及时可向重症急性胰腺炎(SAP)发展。AP发病机制繁杂,涉及多个细胞分子层面。目前已经明确氧化应激和活性氧(ROS)的生成参... 详细信息

急性胰腺炎(AP)是临床常见的急腹症,具有起病急、发展快、病情重、并发症多、致死率高等特点。早期阶段如果治疗不及时可向重症急性胰腺炎(SAP)发展。AP发病机制繁杂,涉及多个细胞分子层面。目前已经明确氧化应激和活性氧(ROS)的生成参与了AP的生理病理过程,这与胰腺细胞内的抗氧化酶数量少及活性低有关。核转录因子E2相关因子2(Nrf2)是维持组织细胞内氧化还原平衡的“金钥匙”,通过与下游血红素加氧酶-1(HO-1)等抗氧化酶协作,构成了体内对抗氧化反应和炎症的重要信号通路。中药因其多成分、多靶点、多给药方式、多方剂等特点在治疗疾病方面有着独特疗效。基于中西医协同理念,目前中药在治疗AP方面也逐渐成为新热潮。AP胰腺组织中氧化应激水平与Nrf2/HO-1信号通路处于一个动态变化的过程,通过中医药干预可以有效清除ROS,影响炎症途径,减少氧化应激损伤,从而起到保护胰腺的作用,提示该通路在AP中有着重要作用。该文就近年来关于中医药调控Nrf2/HO-1信号通路治疗AP的相关文献进行梳理阐述,总结出以该通路为靶点的中药单体主要以清热解毒类、活血化瘀类、益气温中类为主,中药复方包括茵陈蒿汤、清胰Ⅱ号等,以期为AP疾病的防治及进一步的药物开发提供新方向。

关键词：急性胰腺炎氧化应激核转录因子E_(2)相关因子2/下游血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路中医药研究进展

调肝化纤丸对乙型肝炎肝纤维化的防治临床疗效及对弥散加权成像的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第4期30卷 159-165页

作者：代海洋黄古叶许文聪沈炎李媛广西中医药大学南宁530000 广西中医药大学第一附属医院南宁530000

目的:探讨调肝化纤丸联合恩替卡韦对肝郁脾虚兼血瘀证型慢性乙型肝炎肝纤维化的防治疗效及对弥散加权成像(DWI)的影响。方法:回顾性分析2021年1月至2022年4月广西中医药大学第一附属医院肝病科门诊117例患者的临床数据资料,根据不同治... 详细信息

目的:探讨调肝化纤丸联合恩替卡韦对肝郁脾虚兼血瘀证型慢性乙型肝炎肝纤维化的防治疗效及对弥散加权成像(DWI)的影响。方法:回顾性分析2021年1月至2022年4月广西中医药大学第一附属医院肝病科门诊117例患者的临床数据资料,根据不同治疗方案分为对照组(59例)和观察组(58例)。2组患者均采用恩替卡韦基础病因治疗,观察组在基础治疗上加用中药调肝化纤丸,均治疗24周。治疗前后记录两组患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、乙型肝炎病毒(HBV)-DNA阴转率、肝脏硬度值(LSM)、肝纤四项(透明质酸酶、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层粘连蛋白)、基于4因子的肝纤维化指数(FIB-4)、AST和血小板比率指数(APRI)、磁共振成像(MRI)中表观弥散系数值(ADC)及中医症状积分情况,比较两组患者用药效果。结果:治疗前两组患者ALT、AST、TBil、LSM、肝纤四项、FIB-4指数、APRI指数、HBVDNA阴转率、ADC值及中医症状积分比较差异无统计学意义。与本组治疗前比较,治疗后两组患者ALT、AST、TBil、LSM、透明质酸酶、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层粘连蛋白、FIB-4指数、APRI指数均明显降低(P中医症状积分明显下降(P中医临床有效率为91.38%(53/58),明显优于对照组的54.23%(32/59)(Z=−4.325,P中医症状积分均明显下降(P中医症状积分,值得临床推广应用。

关键词：调肝化纤丸慢性乙型肝炎肝纤维化弥散加权成像临床疗效

勃起功能障碍和早泄共病中西医结合诊治中国专家共识

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 147-153页

作者：中国性学会中医性学分会专家共识编写组王权胜不详广西中医药大学第一附属医院

目前,国内对于勃起功能障碍(ED)/早泄(PE)共病的中西医结合诊疗和管理缺乏共识,为制订ED/PE共病中西医结合临床诊疗策略,根据近年来国内外发布的ED/PE共病指南并结合全国多家泌尿外科、男科研究单位的临床实践,中国性学会中医性学分会... 详细信息

目前,国内对于勃起功能障碍(ED)/早泄(PE)共病的中西医结合诊疗和管理缺乏共识,为制订ED/PE共病中西医结合临床诊疗策略,根据近年来国内外发布的ED/PE共病指南并结合全国多家泌尿外科、男科研究单位的临床实践,中国性学会中医性学分会组织相关临床专家根据现有的循证医学证据,经共识起草、学会审核、专家函审访谈、审稿会的程序充分讨论形成本共识。该共识针对中西医结合的诊疗定位和价值,基于医生临床经验、研究证据、患者意愿和生活环境因素,综合评估做出ED/PE共病的中西医结合诊治规范,为更多患者在诊疗进程中获益。中医诊断注重望诊、闻诊、问诊、切诊四诊信息的收集,并据此进行《伤寒论》六经辨证、卫气营血辨证、脏腑辨证。基于中西医协同方式,发挥中医药整体调节的优势,实施个性化中西医结合治疗。中药内服治疗根据《中医外科学》第四章外科疾病的辨证第二节阴阳辨证。《类经·阴阳类》“人之疾病……必有所本,或本于阴,或本于阳,病变虽多,其本则一。”《黄帝内经·素问·阴阳应象大论》“善诊者,察色按脉,先别阴阳。”该共识依据“八纲辨证,首辨阴阳”分为阳证、阴证两类。此外,对ED/PE共病的证型证候,基于异病同治有应用柴胡桂枝汤、温经汤、补中益气汤治疗本病,可以参考。

关键词：勃起功能障碍(ED) 早泄(PE) ED/PE共病中西医结合共识

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基于AGE-RAGE/p38MAPK信号通路探讨温阳复元方对脑缺血再灌注损伤大鼠脑损伤的保护作用

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中成药 2024年第10期 3249-3255页

作者：张鼎李方存姜明贺宋晨曦陈炜胡跃强广西中医药大学广西中医药大学第一附属医院

目的探究温阳复元方对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑损伤的保护作用。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、FPS-ZM1组、温阳复元方组，每组6只。除假手术组外，其余各组大鼠建立CIRI模型，采用TTC染色和改良神经病学严重程度评分(mNSS... 详细信息

目的探究温阳复元方对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑损伤的保护作用。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、FPS-ZM1组、温阳复元方组，每组6只。除假手术组外，其余各组大鼠建立CIRI模型，采用TTC染色和改良神经病学严重程度评分(mNSS)评判模型成功与否，TUNEL染色检测神经细胞凋亡情况，免疫荧光染色检测脑组织RAGE、S100β蛋白表达，RT-qPCR法检测脑组织RAGE、p38MAPK mRNA表达，Western blot法检测脑组织RAGE、AGE、HMGB1、p38、Bcl-2蛋白表达。结果与假手术组比较，模型组大鼠脑组织出现明显白色梗死灶，梗死面积增加(P<0.05),神经功能评分升高(P<0.05),神经元凋亡细胞数增多(P<0.05),脑组织RAGE、S100β蛋白表达升高(P<0.05),脑组织AGE、RAGE、HMGB1、p38MAPK蛋白与mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较，FPS-ZM1组和温阳复元方组上述指标均有改善(P<0.05),其中温阳复元方组作用更佳。结论温阳复元方可能通过抑制AGE-RAGE及其下游p38MAPK信号通路的活化，从而减轻神经元凋亡，发挥对大鼠的脑保护作用。

关键词：温阳复元方脑缺血再灌注 AGE-RAGE/p38MAPK信号通路神经元凋亡

温肺降浊方通过调节Nrf2/Keap 1-GPx4信号通路抑制铁死亡改善血管性痴呆模型大鼠认知功能障碍的研究

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中药药理与临床 2024年

作者：张鼎李方存姜明贺周珂青秦红玲陈炜胡跃强广西中医药大学广西中医药大学第一附属医院

目的：观察温肺降浊方对血管性痴呆模型大鼠的影响，探究其可能的作用机制。方法：制备2VO大鼠模型，使用Ferrostatin-1抑制剂和温肺降浊方2.95、5.9、11.8 g/kg干预，持续2月。观察成模后大鼠认知学习能力，HE染色、普鲁士蓝染色、免... 详细信息

目的：观察温肺降浊方对血管性痴呆模型大鼠的影响，探究其可能的作用机制。方法：制备2VO大鼠模型，使用Ferrostatin-1抑制剂和温肺降浊方2.95、5.9、11.8 g/kg干预，持续2月。观察成模后大鼠认知学习能力，HE染色、普鲁士蓝染色、免疫组化、qRT-PCR和Western Blot法检测大鼠海马组织中铁沉积和GPx4、Nrf2、HO-1、Keap 1、Cox2 mRNA及蛋白的表达情况。结果：与假手术对照组比较，模型对照组大鼠逃避潜伏期延长、穿越平台次数明显缩短（P＜0.05），海马细胞出现明显水肿及棕蓝色铁颗粒沉积；海马组织中GPx4、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA的表达下降（P＜0.05），Keap 1、Cox2蛋白及mRNA的表达升高（P＜0.05）；与模型对照组比较，Ferrostatin-1抑制剂和温肺降浊方各剂量组大鼠逃避潜伏期缩短、穿越平台次数明显增加（P＜0.05），海马组织细胞水肿化减少；GPx4、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA的表达升高（P＜0.05），Keap 1、Cox2蛋白及mRNA的表达下降（P＜0.05）。结论：温肺降浊方可能通过调节Nrf2/Keap 1-GPx4信号通路相关蛋白抑制铁死亡，从而减少大脑海马组织中铁颗粒的沉积，从而改善大脑认知情况，以温肺降浊方11.8 g/kg组作用最佳。

关键词：温肺降浊方核因子-红细胞2相关因子2/Kelch样ECH关联蛋白1-谷胱甘肽过氧化物酶4信号通路铁死亡血管性痴呆认知功能障碍

基于TLR4信号通路探讨中医药干预急性胰腺炎研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 263-271页

作者：罗佐媚王宇青陈南韩冰洁黎丽群刘礼剑陈广文杨成宁广西中医药大学研究生学院南宁530001 广西中医药大学第一附属医院南宁530001

急性胰腺炎(AP)是临床常见的消化急腹症之一,具有起病急,发展快,病情凶险,致死率高等特点。疾病早期如果不及时进行干预,后期可向重症急性胰腺炎发展,损害长期生活质量,给患者及家属带来严重的经济负担。该病发病机制比较复杂,至今尚未... 详细信息

急性胰腺炎(AP)是临床常见的消化急腹症之一,具有起病急,发展快,病情凶险,致死率高等特点。疾病早期如果不及时进行干预,后期可向重症急性胰腺炎发展,损害长期生活质量,给患者及家属带来严重的经济负担。该病发病机制比较复杂,至今尚未被完全阐述清楚。AP的产生和发展与多种信号通路的共同参与密不可分。其中,Toll样受体4(TLR4)作为一种跨膜信号转导受体,可介导免疫应答和炎症反应,在AP发生发展中发挥关键作用。中医药可以多靶点,多效应,多给药方式等特点调控TLR4信号通路,抑制炎症反应,而有效干预AP的进展,已逐渐成为防治AP的新热潮。大量研究表明,中医药防治AP具有明显的优势,其可通过调控TLR4信号通路,加强免疫抵抗和防御,抑制炎症反应而有效治疗AP,并取得了一定的研究进展,但目前仍缺乏对中医药调控TLR4信号通路治疗AP的全面综述。故文章就近年来关于中医药调控TLR4信号通路的相关文献进行系统性梳理阐述,以期为AP的治疗及进一步的药物开发提供新的思路。

关键词：急性胰腺炎中医药 Toll样受体4(TLR4)信号通路研究进展