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miR-140-5p/BCL2L1在HFOB1.19凋亡、自噬中的作用及补肾健脾活血方的影响

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中国中药杂志 2024年

作者：陈桐莹付赛李小韵刘树华杨贻富杨东升曾韵杰李扬博罗丹黄宏兴万雷广州中医药大学广州中医药大学岭南医学研究中心中医骨伤科学实验室广州中医药大学第二附属医院广州中医药大学第三附属医院

骨质疏松症(osteoporosis，OP)是一种骨重建与骨形成失衡的老年性骨病，补肾健脾活血方针对肾虚脾虚血瘀的病机，以补肾健脾活血为法，对治疗OP有显著效果，微核糖核酸（microRNA，miRNA)、B细胞淋巴瘤-2样蛋白1（B-cell lymphoma-2-lik... 详细信息

骨质疏松症(osteoporosis，OP)是一种骨重建与骨形成失衡的老年性骨病，补肾健脾活血方针对肾虚脾虚血瘀的病机，以补肾健脾活血为法，对治疗OP有显著效果，微核糖核酸（microRNA，miRNA)、B细胞淋巴瘤-2样蛋白1（B-cell lymphoma-2-like protein 1，BCL2L1）与骨细胞代谢密切相关，故该研究采用双荧光素酶法、聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）法检测miR-140-5p与BCL2L1的结合情况；沉默或过表达miR-140-5p后，流式检测、蛋白免疫印迹（Western blot）观察人胎成骨细胞（human fetal osteoblast cell line1.19，HFOB1.19）凋亡与自噬的发生与成骨功能；大鼠灌胃补肾健脾活血方后制备含药血清，采用不同浓度的补肾健脾活血方含药血清分别干预含或不含miR-140-5p micmi的HFOB1.19，观察各组细胞的成骨蛋白表达，研究miR-140-5p/BCL2L1在HFOB1.19凋亡、自噬中的作用，并观察补肾健脾活血方对其的影响。研究发现，双荧光素酶检测显示miR-140-5p与BCL2L1结合；流式检测、Western blot检测结果显示miR-140-5p促进HFOB1.19细胞凋亡且miR-140-5p抑制HFOB1.19细胞自噬；高、中、低剂量补肾健脾活血方含药血清干预HFOB1.19后，与miR-140-5p NC组对比，miR-140-5p micmic组的成骨蛋白骨钙蛋白（osteocalcin，OCN）、骨桥蛋白（osteopontin，OPN）、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2，RUNX2)、转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1，TGF-β1）表达下降，而高剂量干预下的micmic组骨形成蛋白2（bone morphogenetic protein 2，BMP2）表达无明显差别。故miR-140-5p/BCL2L1可促进HFOB1.19凋亡与抑制自噬的发生，补肾健脾活血方可通过BMP2影响miR-140-5p的抑成骨作用。

关键词：骨质疏松症补肾健脾活血方 miR-140-5p BCL2L1 凋亡自噬

人工智能术前规划系统辅助人工全髋关节置换术后翻修手术的疗效研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第4期38卷 455-460页

作者：朱家庆孙家豪刘金柱马博闻张驰宇张超夏天卫沈计荣南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 常州市中医医院骨伤科江苏常州213004

目的探究人工智能术前规划系统(AIHIP系统)辅助髋关节翻修手术的早期疗效。方法回顾分析2019年6月—2023年3月收治且符合选择标准的22例(23髋)髋关节翻修患者临床资料。其中男12例,女10例;年龄44~90岁,平均69.7岁。初次翻修19髋,2次翻修... 详细信息

目的探究人工智能术前规划系统(AIHIP系统)辅助髋关节翻修手术的早期疗效。方法回顾分析2019年6月—2023年3月收治且符合选择标准的22例(23髋)髋关节翻修患者临床资料。其中男12例,女10例;年龄44~90岁,平均69.7岁。初次翻修19髋,2次翻修3髋,3次翻修1髋。翻修原因:假体松动12髋,髋臼杯松动4髋,骨溶解3髋,髋臼脱位2髋,术后感染1髋,假体磨损1髋。Paprosky髋臼骨缺损分期:ⅡA期6髋,ⅡB期9髋,ⅡC期4髋,ⅢA期3髋,ⅢB期1髋。记录患者更换假体型号、手术时间、住院时间、下地情况等,以及术后感染、骨折、假体松动等不良事件发生情况。术前、术后1周及6个月采用Harris评分评价患肢功能,比较术前及术后6个月髋关节活动度。结果患者手术时间85~510 min,平均241.8 min;住院时间7~35 d,平均15.2 d;脱离助行器时间2~108 d,平均42.2 d。22例患者均获随访,随访时间8~53个月,平均21.7个月。除1例患者术后出现大腿血肿、1髋发生髋关节脱位外,余患者均无假体松动、感染等不良事件发生。术后髋臼杯型号匹配程度为完全匹配22髋,不匹配1髋(+2号),匹配率95.65%;股骨柄型号匹配程度为完全匹配22例髋、一般匹配1髋(–1号),匹配率100%。术后1周及6个月Harris评分分别为(55.3±9.8)分和(89.6±7.2)分,较术前(33.0±8.6)分显著改善(P<0.05),术后6个月较1周时进一步改善(P<0.05);术后6个月根据Harris评分评价患者髋关节功能,获良21髋、中2髋,可满足日常生活需求。术后6个月髋关节活动度为(111.09±10.11)°,与术前(79.13±18.50)°比较差异有统计学意义(t=−7.269,P<0.001)。结论AIHIP系统辅助治疗THA术后翻修患者,可提升翻修手术的精准性,降低手术难度,患者术后恢复效果好,早期疗效满意。

关键词：人工智能术前规划人工全髋关节置换术翻修手术

臀肌腱炎、原发性髋关节病可能导致髂胫束综合征—一项孟德尔随机化研究

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南方医科大学学报 2024年第9期44卷 1821-1830页

作者：姚辰李文佳庞瑞明周继红广州中医药大学附属宝安中医院骨伤科一区广东深圳518000 广州中医药大学附属宝安中医院呼吸与危重症学科广东深圳518000

目的利用孟德尔随机化方法,分析臀肌腱炎、原发性髋关节病与髂胫束综合征发生的潜在因果关系。方法利用已知臀肌腱炎、原发性髋关节病及髂胫束综合征的GWAS数据,筛选出高相关性单核苷酸多态性(SNPs),采用随机效应逆方差加权法(IVW)、MR-... 详细信息

目的利用孟德尔随机化方法,分析臀肌腱炎、原发性髋关节病与髂胫束综合征发生的潜在因果关系。方法利用已知臀肌腱炎、原发性髋关节病及髂胫束综合征的GWAS数据,筛选出高相关性单核苷酸多态性(SNPs),采用随机效应逆方差加权法(IVW)、MR-Egger回归和加权中位数法进行MR分析,判断臀肌腱炎及原发性髋关节病和髂胫束综合征是否存在因果关系,并通过异质性检验、多效性检验及敏感性分析、临床数据验证分析结果的可靠性。结果臀肌腱炎与髂胫束综合征呈显著正相关[IVW:OR(95%CI)=1.32(1.03~1.68),P=0.026]。原发性髋关节病与髂胫束综合征呈显著正相关[IVW:OR(95%CI)=1.40(1.06~1.84),P=0.017]。结论臀肌腱炎及原发性髋关节病可能增加髂胫束综合征的发病风险。

关键词：臀肌腱炎原发性髋关节病髂胫束综合征孟德尔随机化

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人工智能在颈椎病诊断中的创新与突破

中山大学学报(医学科学版) 2024年

作者：高鑫海何升华广州中医药大学第四临床医学院深圳市中医院骨伤科二病区

颈椎病是一种常见的脊柱退行性疾病，严重影响患者的生活质量，并可能导致严重的并发症。准确诊断和早期干预对于改善患者预后至关重要。然而，传统的诊断方法在精确性和效率方面存在不足，主要依赖于医生的主观判断和经验，容易导致误... 详细信息

颈椎病是一种常见的脊柱退行性疾病，严重影响患者的生活质量，并可能导致严重的并发症。准确诊断和早期干预对于改善患者预后至关重要。然而，传统的诊断方法在精确性和效率方面存在不足，主要依赖于医生的主观判断和经验，容易导致误诊或漏诊。人工智能（AI）技术近年来在医学诊断领域展现出巨大的潜力，特别是在医学影像分析和病变识别方面。AI技术通过深度学习算法，如卷积神经网络（CNN），能够自动分割和识别影像数据中的病变区域，大幅提高了诊断的准确性和效率。本文综述了AI在颈椎病诊断中的最新研究进展，探讨了其在提高诊断精度和个性化治疗方面的应用潜力，同时分析了当前存在的挑战和未来研究方向，以推动AI技术在颈椎病诊断中的进一步发展和临床应用。

关键词：人工智能颈椎病机器学习深度学习卷积神经网络

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裙带菜多糖抑制肝癌细胞增殖和迁移的机制

中国药理学通报 2024年第4期40卷 670-678页

作者：刘伟萍陈建芬安金琪罗艺刘凤斌广州中医药大学第一附属医院脾胃病科广东广州510405 广州中医药大学博士后科研流动站广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广东燕岭医院中医骨伤科广东广州510507 粤北人民医院中医科广东韶关512000 广州中医药大学第一附属医院白云分院内一科广东广州510000

目的探讨裙带菜多糖(sulfated polysaccharide from Undaria pinnatifida,SPUP)对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在机制。方法MTT和克隆形成实验检测SPUP对肝癌细胞HepG2、SMMC-7721增殖的影响;Hoechst 33258染色和Western blot法检测SPUP干预后对HepG2、SMMC-7721细胞凋亡的影响;Transwell和划痕法检测HepG2、SMMC-7721细胞的迁移和侵袭;免疫荧光和Western blot法检测SPUP对肝癌细胞自噬、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9蛋白的影响。结果SPUP对HepG2、SMMC-7721细胞有短期和长期的抑制增殖作用,对正常肝细胞L-02无明显抑制作用,SPUP可促进两种肝癌细胞凋亡和自噬水平。同时,SPUP可以抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力,降低EMT和MMPs水平。结论SPUP通过促进凋亡和自噬、抑制EMT和MMPs,进而抑制肝癌细胞的增殖和迁移。

关键词：裙带菜多糖肝细胞癌增殖自噬凋亡侵袭迁移上皮间质转化基质金属蛋白酶

“筋出槽”大鼠模型骨骼肌形态学和功能的特征性变化

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中国组织工程研究 2024年第26期28卷 4170-4177页

作者：杨宗睿葛海雅石金玉汪正明王媛媛李正言杜国庆詹红生上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海市201203 上海市中医药研究院骨伤科研究所上海市201203

背景:“筋出槽”是被《国际疾病分类第十一次修订本》收录的疾病名称,也是手法、针刺等治疗的临床指征,但其具体的效应机制尚不明确,亟待建立一种可以反映其临床特征和病理特点的动物模型,以便深入研究其临床治疗方法的作用机制。目的:... 详细信息

背景:“筋出槽”是被《国际疾病分类第十一次修订本》收录的疾病名称,也是手法、针刺等治疗的临床指征,但其具体的效应机制尚不明确,亟待建立一种可以反映其临床特征和病理特点的动物模型,以便深入研究其临床治疗方法的作用机制。目的:基于骨骼肌等长收缩建立大鼠“筋出槽”疾病动物模型,探究“筋出槽”后大鼠骨骼肌形态学和功能的特征性变化。方法:60只大鼠随机分为对照组、静态负荷组和额外负重组,每组20只。对照组大鼠正常饲养,不做处理;后两组采用作者课题组设计的静态负荷悬挂造模装置固定大鼠,通过施加静态负荷(以大鼠自身体质量作为静态负荷)使大鼠上肢肌肉持续的等长收缩,建立“筋出槽”损伤模型;额外负重组在静态负荷组的基础上于大鼠踝关节处额外施加体质量50%的质量。分别于造模2,4周后取材,测试大鼠四肢抓力、骨骼肌湿质量、血清肌肌酸激酶和乳酸脱氢酶A水平的改变情况,观察大鼠骨骼肌组织形态学和超微结构的变化。结果与结论:①2周时,模型组(静态负荷组和额外负重组)大鼠抓力显著降低,骨骼肌湿质量显著下降,血清肌肌酸激酶和乳酸脱氢酶A水平显著上升,肌纤维形态结构异常,伴有大量胶原纤维沉积,电镜结果显示肌原纤维结构紊乱,Z线扭曲,明暗界限模糊;②4周时,模型组大鼠抓力较2周有所上升,血清肌肌酸激酶和乳酸脱氢酶A水平下降,肌纤维形态和超微结构的改变均有不同程度恢复;③提示基于骨骼肌持续等长收缩建立的大鼠骨骼肌损伤模型,2周时可良好反映“筋出槽”的病理特点,可用于进行针刺、手法等治疗“筋出槽”的效应机制研究。

关键词： “筋出槽” 中医证候骨骼肌等长收缩肌酸激酶乳酸脱氢酶动物模型

血红素氧合酶1促进氧化应激条件下神经干细胞向神经元分化

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4931-4938页

作者：于庆贺蔡子鸣田禾李翩阮烨梁金柱林淑惠林文平广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院脊柱外科广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院妇科广东省深圳市518118 广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510006

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)... 详细信息

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)从新生Balb/c小鼠脊髓组织中分离培养小鼠原代神经干细胞,免疫荧光检测神经干细胞标志物Nestin的表达;(2)采用慢病毒感染神经干细胞以诱导血红素氧合酶1过表达,流式检测绿色荧光蛋白荧光强度,Western blot检测血红素氧合酶1的表达水平;(3)在慢病毒感染神经干细胞培养基中添加H_2O_2以模拟脊髓损伤后的氧化应激微环境,采用细胞增殖检测试剂盒、细胞凋亡检测试剂盒和TUNEL染色试剂盒分析血红素氧合酶1过表达对神经干细胞增殖和凋亡水平的影响;(4)采用试剂盒检测脂质氧化标志物丙二醛、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平;(5)采用流式检测细胞内的活性氧水平以及神经干细胞向星形胶质细胞和神经元分化情况;(6)光学和荧光显微镜观察血红素氧合酶1过表达对神经干细胞分化的神经元轴突生长的影响。结果与结论:(1)小鼠神经干细胞球形态稳定,生长状态良好,免疫荧光检测Nestin呈阳性;(2)Western blot检测发现血红素氧合酶1过表达组神经干细胞中血红素氧合酶1的表达显著高于空载体对照组;流式检测血红素氧合酶1过表达组和空载体对照组神经干细胞均表达绿色荧光蛋白;(3)血红素氧合酶1过表达维持了神经干细胞在氧化应激条件下的增殖活力并显著减少了细胞凋亡数量;(4)血红素氧合酶1过表达抑制了氧化应激微环境下神经干细胞的脂质过氧化,增强了维持氧化-还原稳态的相关酶类表达,降低了细胞内的活性氧水平;(5)血红素氧合酶1过表达促进了神经干细胞向神经元分化,并抑制了向星形胶质细胞分化;(6)血红素氧合酶1过表达组的神经元轴突更长并且细胞间的连接更多。上述结果表明过表达血红素氧合酶1能减轻H_2O_2诱导的神经干细胞氧化损伤,抑制神经干细胞凋亡,促进神经干细胞增殖及向神经元细胞分化。

关键词：血红素氧合酶1 神经干细胞氧化应激脊髓损伤神经元凋亡轴突

补中益气汤通过PINK1途径调控骨骼肌线粒体稳态抗运动性疲劳

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：韦华妮姜婷彭娟荆纯祥刘伟潘华山陈道睿广州中医药大学广州中医药大学岭南医学研究中心

目的：探究补中益气汤对运动性疲劳的影响及其发挥疗效的潜在机制。方法：60只雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、补中益气汤低、中、高剂量组及维生素C组。补中益气汤低、中、高剂量组分别按4.1g/8.2g/16.4g·kg-1浓度给... 详细信息

目的：探究补中益气汤对运动性疲劳的影响及其发挥疗效的潜在机制。方法：60只雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、补中益气汤低、中、高剂量组及维生素C组。补中益气汤低、中、高剂量组分别按4.1g/8.2g/16.4g·kg-1浓度给药；维生素C组按0.04g·kg-1浓度给药；空白组和模型组予生理盐水；各组每日灌胃0.2ml，每日1次。除空白组外，其余组小鼠进行为期6周的负重力竭游泳实验。实验结束取血，留取胸腺、肝、脾、肾等脏器称重。试剂盒检测小鼠血清乳酸（LD）、血尿素氮（BUN）、肌酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）等指标以评估疲劳程度；苏木素-伊红（HE）染色观察骨骼肌病理形态；电镜下观察骨骼肌细胞超微结构重点观察线粒体形态变化；试剂盒检测骨骼肌腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）含量及骨骼肌线粒体呼吸链复合体I、Ⅱ、V的活性；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-timePCR）及蛋白免疫印迹法（WB）检测PTEN诱导的假定蛋白激酶1（PINK1）介导的骨骼肌线粒体稳态通路关键基因及蛋白的表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠体重增长率显著下降（P<0.01）；胸腺指数显著降低（P<0.01）；血清LD、BUN、MDA含量及CK活性提高（P<0.01）；HE染色可见骨骼肌排列紊乱、肌纤维断裂，肌纤维间隙可见较多的炎症细胞浸润；电镜下可见骨骼肌细胞内线粒体形态改变（空泡状线粒体增多，嵴消失），线粒体数量减少；骨骼肌ATP含量及骨骼肌线粒体呼吸链复合体I、Ⅱ、V的活性降低（P<0.05）；PINK1、E3泛素连接酶（Parkin）、与YRPW基序相关的分裂毛状/增强子（HEY1）、动力相关蛋白1（Drp1）、螯合体1（p62）蛋白及缺氧诱导因子1亚基α（HIF-1α）基因表达水平升高（P<0.05），微管相关蛋白1轻链3β（LC3B）蛋白表达水平降低（P<0.01）。与模型组比较，补中益气汤各组游泳力竭时间显著延长（P<0.01）；体重增长率显著提高（P<0.01）；胸腺指数显著增加（P<0.01）；血清LD、BUN、MDA含量及CK活性降低（P<0.05，P<0.01）；HE染色可见骨骼肌排列整齐，炎症细胞减少；透射电镜下骨骼肌线粒体形态完整，嵴密集，线粒体数量增多；骨骼肌ATP含量及骨骼肌线粒体呼吸链复合体I、Ⅱ、V的活性提高（P＜0.05，P<0.01）；骨骼肌组织中PINK1、Parkin、HEY1、LC3B、Drp1蛋白及HIF-1α基因表达水平升高（P＜0.05，P<0.01），p62水平降低（P＜0.05，P<0.01）。结论：补中益气汤能够有效防治运动性疲劳，并可能通过以PINK1为中心的HIF-1α/PINK1/Parkin与HIF-1α/HEY1/PINK1信号通路调控骨骼肌线粒体稳态发挥作用。

关键词：运动性疲劳补中益气汤 PINK1 骨骼肌线粒体稳态骨骼肌

芒柄花素抑制脂多糖诱导髓核间充质干细胞的炎症反应

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5328-5334页

背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞... 详细信息

背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞表面标志;②CCK-8法检测脂多糖、芒柄花素对髓核间充质干细胞增殖活力的影响,以确定后续处理细胞应用的芒柄花素浓度;③在DMEM/F-12完全培养基中添加5μg/mL脂多糖模拟炎症微环境,然后用不同浓度芒柄花素处理髓核间充质干细胞24 h,通过Western blot、实时荧光定量PCR、免疫荧光检测炎症标志物表达,Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平。结果与结论:①贴壁培养的髓核间充质干细胞呈梭形,生长状态良好,流式细胞术结果显示间充质干细胞表面标志物CD29、CD44、CD90呈阳性,造血干细胞表面标志物CD34、CD45呈阴性。②12.5,25,50,100,200μmol/L芒柄花素处理24 h对髓核间充质干细胞无明显增殖抑制效果。与脂多糖组相比,12.5,25,50μmol/L芒柄花素处理24 h后髓核间充质干细胞活力显著提高,因此后续选用12.5,25,50μmol/L为芒柄花素低、中、高浓度处理髓核间充质干细胞。③与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、肿瘤坏死因子α蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。④与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中磷酸化核因子κB和磷酸化核因子κB抑制蛋白的表达显著降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。上述结果说明芒柄花素可能通过抑制核因子κB信号通路减轻脂多糖诱导的大鼠髓核间充质干细胞炎症。

关键词：芒柄花素髓核间充质干细胞炎症椎间盘退变核因子κB