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益生菌冷冻干燥高活性保护机制研究进展

微生物学报 2024年第5期64卷 1402-1416页

作者：吴家琳李滢刘振杰陈谋通吴清平广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室、国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070 华南农业大学食品学院广东广州510642

摄取足量益生菌有助于维持肠道微生物群落的稳态,对维持人体肠道健康具有重要意义。然而,在工业化应用中,益生菌抗逆能力较弱且对储存条件要求高,导致益生菌产品对运输和活性维持条件要求较高,这些产业需求对高活力益生菌的制备工艺提... 详细信息

摄取足量益生菌有助于维持肠道微生物群落的稳态,对维持人体肠道健康具有重要意义。然而,在工业化应用中,益生菌抗逆能力较弱且对储存条件要求高,导致益生菌产品对运输和活性维持条件要求较高,这些产业需求对高活力益生菌的制备工艺提出了挑战。干燥处理常应用于保持益生菌活性和稳定性,其中冷冻干燥技术应用最广泛,但冻干过程中益生菌会受到各类环境压力的刺激,引起细胞损伤甚至死亡。因此,可以显著提高益生菌存活率的冻干保护剂成为目前益生菌工业应用的研究热点。本文从益生菌常用及新发现的冻干保护剂种类及其作用机制进行了系统归纳,对菌株冻干后细胞存活率的影响因素进行全面综述,并对冻干保护剂研究方向进行了展望,旨在为高活力益生菌冻干菌粉的研制提供理论支持。

关键词：益生菌冷冻干燥冻干保护剂生理状态脂肪酸调控

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外膜囊泡的物质传递及细菌保护作用研究进展

微生物学报 2024年第2期64卷 364-377页

作者：潘琪琪王涓汪智肖铠姗吴清平广东省科学院微生物研究所、国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室广东广州510070 华南农业大学食品学院广东广州510642

外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)是一种直径为10-250 nm的球状结构,由革兰氏阴性菌分泌。OMVs已逐渐被认为是一种新型的分泌系统,它能运输脂质、蛋白质、核酸、细胞毒素和信号分子等不同物质,具有多种生物学功能,包括细菌与细... 详细信息

外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)是一种直径为10-250 nm的球状结构,由革兰氏阴性菌分泌。OMVs已逐渐被认为是一种新型的分泌系统,它能运输脂质、蛋白质、核酸、细胞毒素和信号分子等不同物质,具有多种生物学功能,包括细菌与细菌之间的交流、致病因子传递、抵抗外界不良环境和调节免疫反应等。近年来,细菌OMVs基于生物特征介导的抗生素耐药性传递与OMVs的应用潜能逐步受到重视。本文旨在对细菌OMVs的来源与物质传递作用、其在抗生素条件与其他逆境环境下的细菌保护作用、细菌OMVs在治疗疾病方面的应用潜力进行综述,以期对OMVs的相关研究提供更全面的认识。

关键词：外膜囊泡耐药性物质传递保护应用

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益生菌对特应性皮炎的防治及机制研究进展

微生物学报 2024年第5期64卷 1378-1391页

作者：王婉妮李滢曾嘉辉谢新强吴清平陕西科技大学食品科学与工程学院陕西西安710021 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070

特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种以反复发作和严重瘙痒为特征、发病率最高的过敏性皮肤病。AD的致病机制涉及遗传易感性、表皮屏障功能障碍、微生物组失调、免疫反应失衡以及环境等多个因素,而现有治疗用药副作用大、疗效欠佳... 详细信息

特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种以反复发作和严重瘙痒为特征、发病率最高的过敏性皮肤病。AD的致病机制涉及遗传易感性、表皮屏障功能障碍、微生物组失调、免疫反应失衡以及环境等多个因素,而现有治疗用药副作用大、疗效欠佳。目前研究已发现肠道菌群尤其是益生菌在AD中起着重要作用。益生菌能够通过抑制病原菌、增强屏障功能、改善肠道环境和平衡Th1/Th2免疫应答等机制改善AD症状。本文综述了AD患者皮肤及肠道微生态特征,基于AD发病的致病机制和影响因素,系统阐明益生菌缓解AD的机制,以期为益生菌治疗AD及相关皮肤过敏性疾病提供理论支持。

关键词：特应性皮炎肠道菌群免疫益生菌组胺

一株拮抗单增李斯特菌的蒙氏肠球菌A9-1A筛选及其细菌素抗菌活性分析

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微生物学通报 2024年

作者：叶庆磊张颖刘子豪冯瑞珍蔡佳怡蔡佳张菊梅吴清平陈谋通广东海洋大学水产学院广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台

【背景】单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)，简称单增李斯特菌，是一种重要的食源性致病菌，易感人群感染后致死率可达20%-30%。【目的】筛选高效拮抗单增李斯特菌的乳酸菌(Lactobacillus)菌株，并探究其细菌素的理化特性... 详细信息

【背景】单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)，简称单增李斯特菌，是一种重要的食源性致病菌，易感人群感染后致死率可达20%-30%。【目的】筛选高效拮抗单增李斯特菌的乳酸菌(Lactobacillus)菌株，并探究其细菌素的理化特性及对单增李斯特菌的杀伤作用。【方法】采用牛津杯法筛选高效拮抗单增李斯特菌的产细菌素乳酸菌菌株；通过形态特征、16S rRNA基因序列分析及平均核苷酸一致性分析进行菌株分类学鉴定；并进一步分析其细菌素的理化特性；利用激光共聚焦显微镜和扫描电子显微镜表征细菌素粗提物对单增李斯特菌的拮抗作用。【结果】筛选获得一株高效拮抗单增李斯特菌的菌株A9-1A，其抑菌圈大小为37.56 mm，仅对李斯特菌属和粪肠球菌具有拮抗作用，经形态特征、16S rRNA基因和平均核苷酸一致性分析鉴定为蒙氏肠球菌(Enterococcus mundtii)；其产生的细菌素粗提物能够耐受强酸强碱(pH 2.0-11.0)、高温(37-121 ℃)环境，对淀粉酶和脂肪酶不敏感，但对蛋白酶类敏感，最低抑菌浓度为16 μg/mL，激光共聚焦显微镜和扫描电子显微镜结果表明细菌素粗提物通过损伤细胞细胞膜并形成孔洞，造成细胞内容物泄漏，从而杀死单增李斯特菌。【结论】分离筛选到一株高效拮抗单增李斯特菌的产细菌素蒙氏肠球菌A9-1A菌株，其细菌素粗提物具有耐受强酸强碱和高温特性，具有在食品生产过程中高效防控单增李斯特菌污染的潜在应用前景。

关键词：单增李斯特菌蒙氏肠球菌细菌素拮抗机制

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食药用菌蛋白质研究现状及应用

食用菌学报 2024年第2期31卷 113-126页

作者：陈亭菊刘远超蔡曼君郭慧阳陈少丹吴清平胡惠萍广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070

食药用菌是优质的蛋白质来源,介绍食药用菌蛋白质的提取、含量测定方法,探讨食药用菌蛋白质的氨基酸组成、营养评价及其来源、种类、功能,总结食药用菌蛋白质在医药、食品及生物防治方面的应用,并对食药用菌蛋白质的发展前景进行展望。

关键词：食药用菌蛋白质凯氏定氮法抗肿瘤蛋白质组学

基于数值鉴定法的肠杆菌科生化试剂盒的研制及效果评价

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微生物学报 2024年第5期64卷 1668-1682页

作者：金乐萱万强曹璐璐叶青华王迅张菊梅蔡芷荷吴清平合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥230601 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆526238

【背景】肠杆菌科细菌是食源性和临床感染的主要病原菌,对人类和动物健康有重要影响,以API 20E为“金标准”的数值鉴定法是其主要的鉴定方法之一,但现有的数值鉴定方法存在手工单个加样或/和准确率低、价格贵的问题。【目的】研制出半... 详细信息

【背景】肠杆菌科细菌是食源性和临床感染的主要病原菌,对人类和动物健康有重要影响,以API 20E为“金标准”的数值鉴定法是其主要的鉴定方法之一,但现有的数值鉴定方法存在手工单个加样或/和准确率低、价格贵的问题。【目的】研制出半自动化、准确性高及价格低的肠杆菌科细菌数值鉴定生化试剂盒。【方法】在本团队前期建立的肠杆菌科数值鉴定系统理论模型与配套软件的基础上,设计并优化筛选出的24种生化基质微量化配方,在此基础上,研制半自动冻干鉴定条;以现行商品化的数值鉴定条API 20E、MALDI-TOF MS及16S rRNA基因测序为对照,对研制的集半自动生化鉴定条与在线分析软件于一体的生化试剂盒进行效果评价。【结果】共获得458株肠杆菌科细菌的生化谱,在属水平总体鉴定准确率达到98.5%,在种水平总体鉴定准确率达到96.5%;仅需两次加样即可获得鉴定结果,且价格仅为API 20E的4.46%;产品保质期为7 d,生化试验具有稳定可重复性。【结论】本研究研制出的半自动化肠杆菌科细菌数值鉴定生化试剂盒简便经济、准确率高,为肠杆菌科细菌的鉴定提供技术支撑,并为其他科属细菌的数值鉴定生化产品的开发提供技术指引。

关键词：肠杆菌科数值鉴定生化试剂盒效果评价

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益生菌抗流感病毒作用及其机制研究进展

病毒学报 2024年第4期40卷 877-886页

作者：赵佳明李滢吴毓薇谢新强吴清平陕西科技大学食品科学与工程学院西安710000 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广州510000 广东科环生物科技有限公司广州510525

流行性感冒是一种由流感病毒引起的急性呼吸道传染病。在高危人群中,严重的病毒感染可导致下呼吸道感染、多器官功能衰竭,甚至死亡。益生菌是一种能提升人体健康的功能微生物,具有防止病原微生物定植、调节宿主免疫等功能。目前已有多... 详细信息

流行性感冒是一种由流感病毒引起的急性呼吸道传染病。在高危人群中,严重的病毒感染可导致下呼吸道感染、多器官功能衰竭,甚至死亡。益生菌是一种能提升人体健康的功能微生物,具有防止病原微生物定植、调节宿主免疫等功能。目前已有多项研究发现某些益生菌具有防治流感病毒感染的作用,且近年来关于益生菌抗流感病毒的机制研究已有了一些探索,因此,在系统解析流感病毒致病机制的基础上,本文从病毒拮抗、免疫调节、预防继发感染和平衡肠道微生态4个角度总结了抗流感病毒益生菌的作用机制,进而探讨益生菌抗流感病毒的应用模式,以期对益生菌抗流感病毒的应用提供参考。

关键词：流感病毒发病机制益生菌微生态免疫调控

小肠结肠炎耶尔森氏菌生物膜和浮游态的蛋白质组学对比分析

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现代食品科技 2024年第7期40卷 53-63页

作者：徐天翔刘鸣丁郁吴清平张菊梅王梓萌王涓华南农业大学食品学院广东省食品质量安全重点实验室广东广州510642 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070

小肠结肠炎耶尔森氏菌是革兰氏阴性食源性致病菌,能够在食物以及食品加工设备表面形成生物膜。生物膜可以增强菌株的生存能力并危害食品安全。该文以分离自速冻食品且具有强生物膜形成能力的小肠结肠炎耶尔森氏菌C1967-1作为出发菌株。... 详细信息

小肠结肠炎耶尔森氏菌是革兰氏阴性食源性致病菌,能够在食物以及食品加工设备表面形成生物膜。生物膜可以增强菌株的生存能力并危害食品安全。该文以分离自速冻食品且具有强生物膜形成能力的小肠结肠炎耶尔森氏菌C1967-1作为出发菌株。通过蛋白质组分析生物膜与浮游态细菌中的蛋白表达差异。GO富集分析表明富集程度最大的前9个GO条目中,7个条目在生物膜中呈现下调趋势。仅GO:0046873(金属离子跨膜转运蛋白活性)条目在生物膜中未呈现明显上下调趋势。KEGG富集结果表明富集程度最大的前20个KEGG通路主要涉及碳水化合物、氨基酸和脂质的代谢过程。亚细胞定位分析结果表明,45.65%的差异蛋白位于细胞质内。为进一步验证蛋白质组数据,从GO:0046873条目中筛选出生物膜上调蛋白MgtA并敲除基因mgtA。结果表明,mgtA的敲除没有抑制菌株的生长,但ΔmgtA的生物膜量下降约80%且生物膜结构松散。综上所述,研究结果为小肠结肠炎耶尔森氏菌生物膜形成机制以及其在食品行业生物膜防控提供重要理论依据。

关键词：小肠结肠炎耶尔森氏菌生物膜蛋白质组学 mgtA

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噬菌体分类学技术进展

现代食品科技 2024年

作者：黄士轩朱斌何嘉欣李滢薛亮周星佑伍君权陈谋通张菊梅吴清平杨美艳广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台华南农业大学农学院&食品学院广东省食品质量安全重点实验室

噬菌体是一类细菌病毒，能特异性识别并杀灭细菌，具有替代抗生素的潜力，特别是在食品安全领域中，以解决“人-环-食”生态链中泛耐药病原微生物的威胁。噬菌体分类学是阐明噬菌体间物种进化和发展规律的重要学科。近年来，随着新一代... 详细信息

噬菌体是一类细菌病毒，能特异性识别并杀灭细菌，具有替代抗生素的潜力，特别是在食品安全领域中，以解决“人-环-食”生态链中泛耐药病原微生物的威胁。噬菌体分类学是阐明噬菌体间物种进化和发展规律的重要学科。近年来，随着新一代测序、培养组学等技术发展，噬菌体分类出现了许多新的技术进展与挑战。本文通过回顾噬菌体分类学的发展历程，阐明目前常用分类技术的优缺点；同时，本文系统总结了噬菌体进化分类的具体方案，重点探讨了分类学标尺及系统发育构建的前沿进展；最后，本文归纳了目前噬菌体分类技术的新进展，重点推荐了纯培养噬菌体分类的可靠流程，并讨论了培养组学、宏病毒组及原噬菌体分析手段对噬菌体分类学技术的挑战与要求。本文为噬菌体分类学技术的进一步发展提供参考。

关键词：噬菌体分类学进化分类法系统发育宏病毒组