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梨小食心虫对阿维菌素的抗性风险评估及其交互抗性

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果树学报 2024年第3期41卷 525-532页

作者：张蕊张东霞朱兴秋郑卫锋李娅郭艳琼庾琴山西农业大学植物保护学院太原030031 山西省植物保护检疫总站太原030801

【目的】明确阿维菌素致死中浓度(LC50)连续处理对梨小食心虫(Grapholita molesta)的抗性风险及其交互抗性。【方法】在室内条件下,采用浸果法测定阿维菌素对梨小食心虫田间种群(F)初孵幼虫的LC50值;以F种群为基础,建立梨小食心虫对阿... 详细信息

【目的】明确阿维菌素致死中浓度(LC50)连续处理对梨小食心虫(Grapholita molesta)的抗性风险及其交互抗性。【方法】在室内条件下,采用浸果法测定阿维菌素对梨小食心虫田间种群(F)初孵幼虫的LC50值;以F种群为基础,建立梨小食心虫对阿维菌素相对敏感品系(SS)、F种群连续6代接触LC50浓度阿维菌素的田间抗性品系(FR)和6代未接触阿维菌素的田间对照品系(FS),测定阿维菌素对不同品系梨小食心虫初孵幼虫的毒力,计算其抗性水平;测定高效氯氟氰菊酯、吡虫啉和氯虫苯甲酰胺对不同品系的毒力,分析不同品系与其交互抗性。【结果】田间种群对阿维菌素抗性倍数为4.608倍,敏感性降低;阿维菌素致死中浓度汰选2代后,梨小食心虫对阿维菌素抗性为低水平,汰选4代后升至中等水平,6代后升至20.304倍;未接触阿维菌素的梨小食心虫从第4代降为敏感,第6代时敏感性进一步恢复。抗性品系抗性现实遗传力h2=0.186,在致死率50%~90%选择压力下,梨小食心虫对阿维菌素抗性增加10倍,预计需汰选4~9代。汰选6代品系对高效氯氟氰菊酯抗性倍数为8.487倍,有交互抗性;对吡虫啉和氯虫苯甲酰胺无交互抗性。对照品系对高效氯氟氰菊酯、吡虫啉和氯虫苯甲酰胺均无交互抗性。【结论】梨小食心虫对阿维菌素存在快速产生抗性的风险,中抗品系与高效氯氟氰菊酯有交互抗性,低敏感品系与3种药剂均无交互抗性。田间使用阿维菌素时可通过间隔用药或与无交互抗性药剂轮换使用来减缓抗性发展。

关键词：梨小食心虫阿维菌素初孵幼虫抗性风险评估交互抗性

广东省番茄白尖曲叶病病原鉴定及其致病性分析

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中国农业科学 2024年第12期57卷 2350-2363页

作者：王愿都梦丹李正刚佘小漫于琳蓝国兵丁善文何自福汤亚飞华南农业大学植物保护学院广东省农业科学院植物保护研究所/农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室/广东省植物保护新技术重点实验室

【目的】洋桔梗耳突曲叶病毒（lisianthus enation leaf curl virus,LELCV）是2015年发现的菜豆金色黄花叶病毒属（Begomovirus）病毒新种。论文旨在探究入侵中国大陆的首个LELCV分离物Tomato-2022的分子特征、亲缘关系、致病性及有效... 详细信息

【目的】洋桔梗耳突曲叶病毒（lisianthus enation leaf curl virus,LELCV）是2015年发现的菜豆金色黄花叶病毒属（Begomovirus）病毒新种。论文旨在探究入侵中国大陆的首个LELCV分离物Tomato-2022的分子特征、亲缘关系、致病性及有效传播介体，为防控该病毒病提供理论依据。【方法】2022年，在广东省广州市增城区发生一种番茄新病害，病株表现叶小、卷曲、叶尖白化症状，采集两份病样提取总DNA，利用Begomovirus通用引物AV494/CoPR进行PCR检测。选取PCR检测为阳性的样品进行RCA扩增、酶切、克隆及测序，获得分离物Tomato-2022的基因组全长序列。采用BLASTn程序对病毒序列进行相似性检索并下载相似性较高的代表分离物序列，进一步用SDTv1.2的MUSCLE alignment方法进行序列相似性比对；利用软件MEGA7.0对获得的Tomato-2022基因组序列及已报道的相似性较高的代表分离物进行系统发育分析。应用酶切连接法构建Tomato-2022的侵染性克隆pGreenII0229-1.6A，通过农杆菌介导注射接种本氏烟叶片和番茄茎秆，测定其致病性。采取室内人工传毒方法，测定烟粉虱MEAM1隐种对分离物Tomato-2022的传播效率。利用LELCV的PCR特异引物对2021—2023年采集于广东省番茄主产区的135份番茄病样进行检测，明确该病毒在广东省的分布。【结果】PCR检测结果表明，两份表现叶小、卷曲、叶尖白化症状的番茄病样感染了菜豆金色黄花叶病毒属病毒。基因克隆与序列分析显示，该病毒分离物Tomato-2022基因组仅含DNA-A，大小为2 757 nt，含有6个ORF。序列相似性比较表明，分离物Tomato-2022基因组序列与已登录GenBank的LELCV各分离物相似性较高，其中与LELCV中国台湾洋桔梗分离物（LC091539、LC091538）相似性最高，为98.33%。系统发育分析显示，Tomato-2022与LELCV的19个分离物聚在一个独立的分支，亲缘关系较近。利用构建的Tomato-2022侵染性克隆pGreenII0229-1.6A，农杆菌介导注射接种本氏烟和番茄，10 dpi，本氏烟上部叶叶缘轻微上卷，1株番茄的新叶轻微卷曲；18 dpi，本氏烟和番茄植株均表现较为明显的卷曲症状；随着接种时间的延长，接种植株的症状越来越明显，30 dpi，本氏烟表现叶脉肿大、叶片严重卷曲，番茄植株的叶片表现卷曲、叶尖白化；PCR检测表明，在接种发病本氏烟和番茄植株中均能检测到LELCV。室内传毒试验证明，烟粉虱MEAM1隐种能高效传播Tomato-2022，当每株番茄接1、5、10头饲毒48 h的烟粉虱时，MEAM1的平均传毒效率分别为26.67%、93.33%、96.67%。PCR检测结果表明，采集的135份番茄病样中，8份样品检测到LELCV，说明LELCV已在广东省定殖。【结论】Tomato-2022是洋桔梗耳突曲叶病毒的一个新分离物，也是在中国大陆发现的第一个分离物，其基因组为单链环状DNA，全长为2 757 nt，编码6个ORF；该病毒分离物是引起广东省番茄曲叶、叶尖白化病的病原，可被烟粉虱MEAM1隐种高效传播。

关键词：洋桔梗耳突曲叶病毒番茄侵染性克隆致病性介体传毒效率烟粉虱

不同湿度下番茄潜夜蛾的年龄-龄期两性生命表

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昆虫学报 2024年第1期67卷 78-89页

作者：张博晨许双叶吴梓情张蕊郑卫峰李娅郝赤庾琴山西农业大学植物保护学院太原030031 山西省植物保护检疫总站太原030031

【目的】明确湿度变化对番茄潜夜蛾Tuta absoluta生长发育和繁殖的影响。【方法】在室内相对湿度15%,35%,55%,75%和95%下测定番茄潜夜蛾发育历期、产卵前期、世代周期、幼虫存活率、成虫存活率和单雌产卵量等,制定其年龄-龄期两性生命表... 详细信息

【目的】明确湿度变化对番茄潜夜蛾Tuta absoluta生长发育和繁殖的影响。【方法】在室内相对湿度15%,35%,55%,75%和95%下测定番茄潜夜蛾发育历期、产卵前期、世代周期、幼虫存活率、成虫存活率和单雌产卵量等,制定其年龄-龄期两性生命表,利用年龄-龄期两性生命表计算其种群存活率、繁殖力、寿命期望值、繁殖值等种群参数。【结果】在相对湿度15%~95%范围内,相对湿度15%和95%下番茄潜夜蛾卵历期均显著长于相对湿度35%,55%和75%下的;4龄幼虫期随相对湿度升高先缩短后延长;雄成虫寿命随相对湿度升高而增加,相对湿度95%时雄成虫历期最长;雌成虫寿命在相对湿度75%时达到最大值;相对湿度95%下世代周期显著长于其他相对湿度下的;单雌产卵量随相对湿度升高而增加。相对湿度影响了雌成虫初产卵时间,相对湿度15%,35%,55%,75%和95%下其初产卵时间分别为31,27,27,27和31 d;种群年龄-特征净繁殖率和年龄-龄期-特征繁殖值均随相对湿度升高而增加,在95%时达最大值;内禀增长率和周限增长率随相对湿度升高先增后降,净增殖率随相对湿度升高而增加,平均世代周期随相对湿度升高先减后增。根据种群生命表参数预测未来60 d内种群动态结果表明,相对湿度95%条件下有利于番茄潜叶蛾种群数量的增加,相对湿度15%和95%度条件不利于种群世代的增加。通过线性拟合,不同相对湿度对卵和幼虫的存活率影响显著。【结论】实验设置相对湿度范围内,番茄潜夜蛾生长发育最适相对湿度为55%和75%,繁殖最适宜相对湿度为95%。

关键词：番茄潜夜蛾相对湿度年龄-龄期两性生命表生长发育繁殖

饵剂投放站对田间红火蚁的饵剂搬运量及防控效果研究

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环境昆虫学报 2024年第2期46卷 397-404页

作者：陈婷石庆型陆嘉进陈洁关子盈齐国君广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

饵剂诱杀是防控红火蚁Solenopsis invicta Buren最广泛和最有效的措施。本研究利用一种新型饵剂投放站(简称饵剂站)对比分析红火蚁工蚁对0.08%茚虫威杀蚁饵剂及其载体的搬运量,并使用5 g/巢、10 g/巢、20 g/巢3种剂量的饵剂对田间红火... 详细信息

饵剂诱杀是防控红火蚁Solenopsis invicta Buren最广泛和最有效的措施。本研究利用一种新型饵剂投放站(简称饵剂站)对比分析红火蚁工蚁对0.08%茚虫威杀蚁饵剂及其载体的搬运量,并使用5 g/巢、10 g/巢、20 g/巢3种剂量的饵剂对田间红火蚁蚁巢进行单蚁巢处理,评价饵剂站对田间红火蚁的饵剂搬运量及防控效果的影响。结果表明,红火蚁工蚁对饵剂站内0.08%茚虫威饵剂及其载体的搬运量少于直接撒施处理方式的搬运量。施药24 h后,红火蚁工蚁对饵剂站内和直接撒施的0.08%茚虫威饵剂搬运量分别为14.84±3.18 g和17.71±5.88 g,差异不显著。使用饵剂站施用10 g、20 g饵剂处理28 d后,工蚁减退率、蚁巢减退率、蚁群级别降低率和综合防治效果均可达到90%以上,与直接撒施处理方式均无显著差异。虽然饵剂站会一定程度上降低红火蚁工蚁对饵剂的搬运量,但却不影响对红火蚁的防控效果,基于其防雨、防潮的优点,饵剂站可显著延长红火蚁防控的窗口期。

关键词：红火蚁饵剂饵剂投放站搬运量防控效果

非编码RNA调控真社会性昆虫品级分化和个体分工的研究进展

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环境昆虫学报 2024年第3期46卷 551-560页

作者：陈洁关子盈陈婷石庆型吕利华齐国君广东省农业科学院植物保护研究所广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

真社会性昆虫是最具代表性的表型可塑性的研究对象之一,其个体之间分工协作的社会性生活方式增强了整个群体的环境适应性和繁殖力。真社会性昆虫虽然具有相同的遗传背景,个体之间却表现出明显的品级分化和个体分工,这是由环境和遗传共... 详细信息

真社会性昆虫是最具代表性的表型可塑性的研究对象之一,其个体之间分工协作的社会性生活方式增强了整个群体的环境适应性和繁殖力。真社会性昆虫虽然具有相同的遗传背景,个体之间却表现出明显的品级分化和个体分工,这是由环境和遗传共同影响的。表观遗传被认为是应对环境条件下重塑基因表达的主要机制,非编码RNA作为一类广泛参与机体生命活动的不编码蛋白的功能性RNA,在真社会性昆虫的品级分化、个体分工等方面起着重要的调控作用。本文从微小RNA、长链非编码RNA、环状RNA、与PIWI蛋白相作用的RNA等非编码RNA,对蜜蜂、蚂蚁及白蚁等真社会性昆虫的非编码RNA调控机制研究进展进行了综述,以加深对真社会性昆虫内在遗传分子基础的理解和认识,也为害虫防治领域提供新的研发视角。

关键词：非编码RNA 真社会性昆虫品级分工

侵染构树的菜豆金色黄花叶病毒属病毒的鉴定及基因组序列分析

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植物病理学报 2024年第1期54卷 59-68页

作者：汤亚飞李正刚佘小漫于琳蓝国兵丁善文何自福广东省农业科学院植物保护研究所/农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室/广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

从广东省河源市连平县采集3份疑似双生病毒侵染引起的叶片表现黄花叶症状构树样品,提取总DNA,利用Bego-movirus通用引物AV494/CoPR进行PCR检测表明,疑似病样中均检测到菜豆金色黄花叶病毒属病毒。进一步选取PCR检测为阳性的样品进行RCA... 详细信息

从广东省河源市连平县采集3份疑似双生病毒侵染引起的叶片表现黄花叶症状构树样品,提取总DNA,利用Bego-movirus通用引物AV494/CoPR进行PCR检测表明,疑似病样中均检测到菜豆金色黄花叶病毒属病毒。进一步选取PCR检测为阳性的样品进行RCA扩增、酶切、克隆及测序,获得侵染广东构树的病毒分离物基因组全长序列。广东构树分离物(GS-2021)为一个双组分病毒,包含DNA-A和DNA-B两组分。DNA-A组分(GS-2021-A)全长为2777 nt,编码7个ORFs;DNA-B组分(GS-2021-B)为2742 nt,编码2个ORFs。GS-2021与已报道的中国大青金色花叶病毒(clerodendrum golden mosaic China virus,ClGMCNV)各分离物的DNA-A、DNA-B均有较高的一致性,全长序列的一致性分别为93.0%~93.9%和86.3%~89.6%,其中与福建Fz7分离物DNA-A(GenBank登录号:FJ011668)和DNA-B(GenBank登录号:FJ011669)的相一致性最高,为93.9%和89.6%。GS-2021与ClGMCNV福建、浙江、江苏和美国的5个分离物亲缘关系近,同属一个分支,其中与福建Fz7分离物聚集在一个小分支,亲缘关系最近。基因重组分析显示,GS-2021无明显的基因重组事件存在。根据ICTV对菜豆金色黄花叶病毒属病毒最新分类标准,GS-2021属ClGMCNV的一个新株系。本研究首次在构树上检测到菜豆金色花叶病毒属病毒,获得其病毒基因组全序列,明确其为ClGMCNV的新株系。因此,构树是菜豆金色黄花叶病毒属病毒的新自然寄主。

关键词：构树菜豆金色黄花叶病毒属中国大青金色花叶病毒病毒基因组新寄主

广东烟粉虱传双生病毒的发生种类、分布及动态

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植物保护 2024年第4期50卷 255-263,275页

作者：汤亚飞李正刚蓝国兵佘小漫于琳丁善文何自福广东省农业科学院植物保护研究所农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

为了监测烟粉虱传双生病毒在广东的发生与扩散动态,2003年-2021年,本课题组对全省烟粉虱传双生病毒进行了长期调查与监测。结果表明,在广东省广州、湛江、惠州等14市均有烟粉虱传双生病毒病的发生,危害的寄主植物有番茄、南瓜、甘薯等24... 详细信息

为了监测烟粉虱传双生病毒在广东的发生与扩散动态,2003年-2021年,本课题组对全省烟粉虱传双生病毒进行了长期调查与监测。结果表明,在广东省广州、湛江、惠州等14市均有烟粉虱传双生病毒病的发生,危害的寄主植物有番茄、南瓜、甘薯等24种,其中番茄黄化曲叶病发生和危害尤为严重,广泛分布于全省各地;从14市采集的病样中共鉴定出烟粉虱传双生病毒21种,其中广东番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl Guangdong virus,TYLCGdV)、广东番茄曲叶病毒(tomato leaf curl Guangdong virus,ToLCGdV)、黄蝉曲叶病毒(Allamanda leaf curl virus,AllLCV)、广东雾水葛花叶病毒(Pouzolzia mosaic Guangdong virus,PouMGDV)、十萼茄黄花叶病毒(Lycianthes yellow mosaic virus,LyYMV)5种病毒为新种;同时,发现危害不同寄主的病毒种类存在差异,危害同一作物的病毒种类也存在动态变化。本文明确了广东烟粉虱传双生病毒分布广、种类多、危害重,为全省烟粉虱传双生病毒病的防控提供了科学依据。

关键词：烟粉虱传双生病毒广东发生分布种类

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广东番茄巨芽病植原体的分子鉴定

植物保护 2024年第1期50卷 203-210页

作者：汤亚飞李正刚佘小漫于琳蓝国兵何自福广东省农业科学院植物保护研究所农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

2022年,对在广东省湛江市廉江市田间发现的疑似番茄巨芽病病株,利用分子生物学方法对其相关植原体进行了鉴定。以番茄病株叶片总DNA为模板,利用植原体16S rRNA基因通用引物R16mF2/R16mR1进行PCR扩增,获得了广东番茄巨芽病植原体(TBB-GD-... 详细信息

2022年,对在广东省湛江市廉江市田间发现的疑似番茄巨芽病病株,利用分子生物学方法对其相关植原体进行了鉴定。以番茄病株叶片总DNA为模板,利用植原体16S rRNA基因通用引物R16mF2/R16mR1进行PCR扩增,获得了广东番茄巨芽病植原体(TBB-GD-2022)16S rRNA基因片段(1 430 bp, GenBank登录号为ON102780)。16S rRNA基因序列相似性分析显示,TBB-GD-2022与16SrⅡ组植原体菌株的相似性较高,为96.82%~100%,其中与隶属于16SrⅡ-V亚组的6个植原体株系相似性为100%。系统进化分析显示,TBB-GD-2022与16SrⅡ组各植原体株系聚类在一个大分支,并与16SrⅡ-V亚组成员聚类在一个小分支,亲缘关系较近。16S rRNA基因相似系数分析表明,TBB-GD-2022与16SrⅡ-V亚组的参照株系‘Praxelis clematidea’ phyllody phytoplasma (GenBank登录号:KY568717)的相似系数为1.00。上述研究结果表明,广东番茄巨芽病植原体隶属16SrⅡ-V亚组成员。本文首次报道在广东发现番茄巨芽病,通过其16S rRNA序列分析进一步确定了其相关植原体的分类地位,为该病害的防控提供了科学依据。

关键词：番茄巨芽病植原体 16S rRNA 分子鉴定

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香蕉枯萎和细菌性软腐病菌的多重PCR检测

植物保护 2024年第1期50卷 211-218,231页

作者：蒲小明张景欣沈会芳孙大元刘平平林壁润杨祁云广东省农业科学院植物保护研究所农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum ***和细菌性软腐病菌Dickeya zeae的复合侵染为害给香蕉产业发展带来严重挑战,有必要建立相关病害的多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction, multiplex PCR)检测技术。本文基于尖孢... 详细信息

香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum ***和细菌性软腐病菌Dickeya zeae的复合侵染为害给香蕉产业发展带来严重挑战,有必要建立相关病害的多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction, multiplex PCR)检测技术。本文基于尖孢镰刀菌古巴专化型1号生理小种(*** *** race 1,FOC1)基因组contig 438区间(35 631-37 693 bp)(GenBank:AMGP01000438.1)和4号生理小种(*** *** race 4,FOC4)基因组contig 195区间(4 028-6 126 bp)(GenBank:AMGQ01000195.1)存在160 bp插入序列差异设计特异扩增引物FOC-F/-R,同时以香蕉细菌性软腐病菌***的促旋酶B亚单位基因(the subunit B of gyrase gene)(GenBank:JQ284039)序列设计特异扩增引物gyrB-F/-R。多重PCR检测结果显示:本技术可在一次PCR扩增反应内同时检测香蕉枯萎病菌1号、4号生理小种和细菌性软腐病菌;多重PCR的灵敏度结果表明:检测香蕉枯萎病菌的DNA浓度最低限为0.1 ng/μL,细菌性软腐病菌的灵敏度为103cfu/mL;检测结果稳定可靠。因此,本研究建立的多重PCR检测方法可有效应用于检测香蕉发病组织中的香蕉枯萎病菌和细菌性软腐病菌,也可用于香蕉种苗和田间土壤带病菌的监测,为香蕉种植保驾护航。

关键词：香蕉尖孢镰刀菌古巴专化型1号生理小种尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种玉米迪基氏菌多重PCR 促旋酶B亚单位基因