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广东省不同稻区稻瘟病菌生理小种鉴定及无毒基因分析

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植物保护学报 2024年第3期51卷 645-653页

作者：汪文娟陈凯玲杨健源封金奇朱小源苏菁广东省农业科学院植物保护研究所广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

为明确广东省不同稻区稻瘟病菌Magnaporthe oryzae生理小种与无毒基因的类型与分布,利用7个中国鉴别品种、11个抗稻瘟病单基因系及3个广东省优质抗源稻种三黄占2号、青六矮和珍桂矮,采用苗期喷雾接种方法对2018—2019年分别从广东省不... 详细信息

为明确广东省不同稻区稻瘟病菌Magnaporthe oryzae生理小种与无毒基因的类型与分布,利用7个中国鉴别品种、11个抗稻瘟病单基因系及3个广东省优质抗源稻种三黄占2号、青六矮和珍桂矮,采用苗期喷雾接种方法对2018—2019年分别从广东省不同稻区感染稻瘟病的不同栽培稻品种上分离获得的368株稻瘟病菌单孢菌株进行生理小种鉴定与无毒基因分析。结果显示,利用中国鉴别品种共鉴定出6群30个生理小种,其中优势种群为ZB和ZC,出现频率分别为44.29%和43.48%,优势生理小种为ZB13和ZC13,出现频率分别为26.90%和29.35%。利用11个水稻抗稻瘟病单基因系鉴定出测试菌株对含有Pi9、Pi1、Pik-h和Pi50这4个水稻抗稻瘟病单基因系的无毒性频率均大于80.00%;来自粤北、粤西和珠三角3个稻区的稻瘟病菌对抗源稻种三黄占2号的毒性频率低于11.76%,对珍桂矮的毒性频率大于69.41%。表明2018—2019年广东省稻瘟病菌群体生理小种结构复杂,多样性丰富,在粤北、粤西和珠三角稻区可利用的抗性基因一致,可推广使用含抗性基因Pi9、Pi50、Pik-h和Pi1的水稻品种;三黄占2号抗性好,抗谱较宽,可作为广东省抗稻瘟病种质资源加以利用。

关键词：水稻稻瘟病菌生理小种优势小种无毒基因型

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水稻白叶枯病菌3-羟基脂酰ACP脱水酶基因XoofabZ的功能鉴定

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微生物学通报 2024年

作者：鄢明峰李信申孙杨华菊玲黄水金江西省农业科学院植物保护研究所

【背景】由水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae， Xoo)引起的白叶枯病是水稻生产中最严重的细菌性病害。脂肪酸合成是细菌最重要的基础代谢之一，对细胞生长、膜磷脂和生物活性物质合成尤为重要，但对于该菌脂肪酸合成相关... 详细信息

【背景】由水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae， Xoo)引起的白叶枯病是水稻生产中最严重的细菌性病害。脂肪酸合成是细菌最重要的基础代谢之一，对细胞生长、膜磷脂和生物活性物质合成尤为重要，但对于该菌脂肪酸合成相关基因的功能知之甚少。【目的】本研究旨在鉴定水稻白叶枯病菌Xoo PXO99A基因组中PXO＿01118 (XoofabZ)基因是否编码3-羟基脂酰ACP脱水酶并参与脂肪酸的从头合成，为防治水稻白叶枯病害提供新思路。【方法】通过异体遗传互补和体外酶学活性检测分析XooFabZ的蛋白活性；进一步利用同源重组原理进行XoofabZ基因的遗传学分析。通过剪叶法检测替换突变株对寄主水稻的致病力。【结果】利用异体遗传互补和体外酶学活性检测手段相结合证明了XooFabZ能在脂肪酸合成的起始反应和脱水反应中发挥3-羟基脂酰ACP脱水酶活性。本研究无法直接获得XoofabZ基因敲除突变株，证明XoofabZ是必需基因。大肠埃希氏菌EcfabZ基因替换突变株对寄主水稻的致病性显著降低。【结论】XoofabZ是水稻白叶枯病菌必需基因，编码3-羟基脂酰ACP脱水酶，参与Xoo脂肪酸从头合成反应和致病力的形成。

关键词：水稻白叶枯病菌 3-羟基脂酰ACP脱水酶脂肪酸合成

防治小菜蛾赤眼蜂蜂种和品系筛选与田间防治效果评价

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中国生物防治学报 2024年

作者：周淑香高芃赫思聪鲁新李小宇高月波吉林省农业科学院植物保护研究所

通过比较螟黄赤眼蜂、玉米螟赤眼蜂、松毛虫赤眼蜂、稻螟赤眼蜂4种赤眼蜂的17个品系对小菜蛾卵寄生能力的差异，筛选防治小菜蛾的优良赤眼蜂蜂种和品系，并通过田间试验验证其对小菜蛾的防治效果。结果表明，4种赤眼蜂均能寄生小菜蛾卵... 详细信息

通过比较螟黄赤眼蜂、玉米螟赤眼蜂、松毛虫赤眼蜂、稻螟赤眼蜂4种赤眼蜂的17个品系对小菜蛾卵寄生能力的差异，筛选防治小菜蛾的优良赤眼蜂蜂种和品系，并通过田间试验验证其对小菜蛾的防治效果。结果表明，4种赤眼蜂均能寄生小菜蛾卵，但不同蜂种的寄生能力存在差异，整体表现为螟黄赤眼蜂＞玉米螟赤眼蜂＞松毛虫赤眼蜂＞稻螟赤眼蜂。17个品系中螟黄赤眼蜂Tc-1对小菜蛾卵的寄生能力最强，卵粒和卵卡寄生率分别为73.01%和98.89%，在小菜蛾卵上的羽化率和羽化雌蜂率均达到85%以上。田间试验结果表明，释放螟黄赤眼蜂Tc-1品系后西兰花田小菜蛾虫口数较对照显著降低，且波动较缓。随着放蜂次数增加小菜蛾虫口减退率增加，通过连续4次放蜂，收获时放蜂田中小菜蛾虫口数为278头/百株，比对照田（2740头/百株）降低了89.85%，证明螟黄赤眼蜂Tc-1品系是防治小菜蛾的优良品系，具有广阔的应用前景。

关键词：小菜蛾赤眼蜂寄生潜能田间防效评价

广东省番茄白尖曲叶病病原鉴定及其致病性分析

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中国农业科学 2024年第12期57卷 2350-2363页

作者：王愿都梦丹李正刚佘小漫于琳蓝国兵丁善文何自福汤亚飞华南农业大学植物保护学院广东省农业科学院植物保护研究所/农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室/广东省植物保护新技术重点实验室

【目的】洋桔梗耳突曲叶病毒（lisianthus enation leaf curl virus,LELCV）是2015年发现的菜豆金色黄花叶病毒属（Begomovirus）病毒新种。论文旨在探究入侵中国大陆的首个LELCV分离物Tomato-2022的分子特征、亲缘关系、致病性及有效... 详细信息

【目的】洋桔梗耳突曲叶病毒（lisianthus enation leaf curl virus,LELCV）是2015年发现的菜豆金色黄花叶病毒属（Begomovirus）病毒新种。论文旨在探究入侵中国大陆的首个LELCV分离物Tomato-2022的分子特征、亲缘关系、致病性及有效传播介体，为防控该病毒病提供理论依据。【方法】2022年，在广东省广州市增城区发生一种番茄新病害，病株表现叶小、卷曲、叶尖白化症状，采集两份病样提取总DNA，利用Begomovirus通用引物AV494/CoPR进行PCR检测。选取PCR检测为阳性的样品进行RCA扩增、酶切、克隆及测序，获得分离物Tomato-2022的基因组全长序列。采用BLASTn程序对病毒序列进行相似性检索并下载相似性较高的代表分离物序列，进一步用SDTv1.2的MUSCLE alignment方法进行序列相似性比对；利用软件MEGA7.0对获得的Tomato-2022基因组序列及已报道的相似性较高的代表分离物进行系统发育分析。应用酶切连接法构建Tomato-2022的侵染性克隆pGreenII0229-1.6A，通过农杆菌介导注射接种本氏烟叶片和番茄茎秆，测定其致病性。采取室内人工传毒方法，测定烟粉虱MEAM1隐种对分离物Tomato-2022的传播效率。利用LELCV的PCR特异引物对2021—2023年采集于广东省番茄主产区的135份番茄病样进行检测，明确该病毒在广东省的分布。【结果】PCR检测结果表明，两份表现叶小、卷曲、叶尖白化症状的番茄病样感染了菜豆金色黄花叶病毒属病毒。基因克隆与序列分析显示，该病毒分离物Tomato-2022基因组仅含DNA-A，大小为2 757 nt，含有6个ORF。序列相似性比较表明，分离物Tomato-2022基因组序列与已登录GenBank的LELCV各分离物相似性较高，其中与LELCV中国台湾洋桔梗分离物（LC091539、LC091538）相似性最高，为98.33%。系统发育分析显示，Tomato-2022与LELCV的19个分离物聚在一个独立的分支，亲缘关系较近。利用构建的Tomato-2022侵染性克隆pGreenII0229-1.6A，农杆菌介导注射接种本氏烟和番茄，10 dpi，本氏烟上部叶叶缘轻微上卷，1株番茄的新叶轻微卷曲；18 dpi，本氏烟和番茄植株均表现较为明显的卷曲症状；随着接种时间的延长，接种植株的症状越来越明显，30 dpi，本氏烟表现叶脉肿大、叶片严重卷曲，番茄植株的叶片表现卷曲、叶尖白化；PCR检测表明，在接种发病本氏烟和番茄植株中均能检测到LELCV。室内传毒试验证明，烟粉虱MEAM1隐种能高效传播Tomato-2022，当每株番茄接1、5、10头饲毒48 h的烟粉虱时，MEAM1的平均传毒效率分别为26.67%、93.33%、96.67%。PCR检测结果表明，采集的135份番茄病样中，8份样品检测到LELCV，说明LELCV已在广东省定殖。【结论】Tomato-2022是洋桔梗耳突曲叶病毒的一个新分离物，也是在中国大陆发现的第一个分离物，其基因组为单链环状DNA，全长为2 757 nt，编码6个ORF；该病毒分离物是引起广东省番茄曲叶、叶尖白化病的病原，可被烟粉虱MEAM1隐种高效传播。

关键词：洋桔梗耳突曲叶病毒番茄侵染性克隆致病性介体传毒效率烟粉虱

36份河南省小麦品种（系）抗秆锈病评价及Sr31的分子检测

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植物保护 2024年

作者：孙振宇魏艺凡孙会言邹龙梅张功俊李天亚甘肃省农业科学院植物保护研究所沈阳农业大学植物保护学院

小麦秆锈病是最主要的小麦病害之一，含有抗病基因Sr31品种的推广利用可使该病害得到有效控制。为了明确河南省品种抗秆锈性及抗病基因Sr31在品种中的分布，本研究用我国小麦秆锈菌优势小种21C3CTHQM和34MKGQM，在2023年和2024年对收集... 详细信息

小麦秆锈病是最主要的小麦病害之一，含有抗病基因Sr31品种的推广利用可使该病害得到有效控制。为了明确河南省品种抗秆锈性及抗病基因Sr31在品种中的分布，本研究用我国小麦秆锈菌优势小种21C3CTHQM和34MKGQM，在2023年和2024年对收集的河南省36份小麦品种进行了成株期抗秆锈性评价，并选用全球广泛利用的抗秆锈病基因Sr31，对与其紧密连锁的分子标记Iag95和SCSS30.2576进行了检测。结果表明，在2年的抗性评价中没有同时对21C3CTHQM和34MKGQM表现免疫的品种，对21C3CTHQM表现为免疫仅有‘郑麦916’，对34MKGQM表现为免疫有‘百农成竹21’‘新麦78’‘郑麦28’‘平安20’等4份材料。在供品种（系）中有14份材料（38.9%）在2年间至少对供试的1个小种表现为中感或感病，其余材料表现为中抗-抗病。分子检测结果表明，17份材料携带抗病基因Sr31。供试的河南省小麦材料中约25%的品种对当前中国的2个优势小种表现感病，如菌源充足，小麦秆锈病可能会再次暴发。

关键词：小麦秆锈病抗性评价抗病基因Sr31 分子检测

在北迁与南迁更替期九种夜蛾的种群结构与迁飞轨迹分析

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应用昆虫学报 2024年

作者：郭森李丽莉吕素洪崔洪莹郭文秀宋莹莹于毅门兴元尹淑艳山东农业大学植物保护学院山东省农业科学院植物保护研究所

【目的】山东省地处粘虫Mythimna separata、棉铃虫Helicoverpa armigera等夜蛾类害虫南北季节性迁飞的重要通道，研究明确夜蛾类害虫在山东省的迁飞规律对于害虫监测预警与防控具有重要意义。【方法】2021年7月11日-8月19日（害虫北迁... 详细信息

【目的】山东省地处粘虫Mythimna separata、棉铃虫Helicoverpa armigera等夜蛾类害虫南北季节性迁飞的重要通道，研究明确夜蛾类害虫在山东省的迁飞规律对于害虫监测预警与防控具有重要意义。【方法】2021年7月11日-8月19日（害虫北迁与南迁更替期）在山东省莒南地区用高空灯对迁飞性昆虫进行了诱捕监测，分析了9种主要夜蛾（棉铃虫、斜纹夜蛾Spodoptera litura、甜菜夜蛾Spodoptera exigua、银纹夜蛾Plusiaagnata、小地老虎Agrotisipsilon、黄地老虎Agrotissegetum、粘虫、二点委夜蛾Athelis lepigone、白条银纹夜蛾Argyrogrammaalbostriata）的种群动态，对雌蛾进行卵巢解剖并分析种群结构变化，结合高空气流解析迁飞轨迹。【结果】7月份西南季风为夜蛾向北迁飞提供了气流条件，7月下旬-8月上旬大约2周的时间内气流发生了快速转变，季风开始南下，为其提供了南迁气流条件，受高空气流的影响，棉铃虫、甜菜夜蛾、粘虫等9种夜蛾类昆虫均有明显的南北迁飞过程，大部分种类在北迁期以迁入种群和本地种群混合发生，在南迁期为外地远距离迁入虫源为主。【结论】充分表明了山东地区既是夜蛾类害虫的春夏繁殖区和东北地区的虫源地，又是从东北回迁虫源的越冬地和继续南迁的通道。

关键词：昆虫迁飞夜蛾种群结构轨迹分析

橘小实蝇抗高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素品系之间的交互抗性

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昆虫学报 2024年 2-12页

作者：李豆豆姚其齐易香陆永跃华南农业大学植物保护学院海南省农业科学院植物保护研究所

[目的]目前化学防治是果树重大害虫橘小实蝇Bactrocera dorsalis的主要防治措施。本研究旨在明确橘小实蝇抗高效氯氰菊酯、抗敌百虫和抗阿维菌素品系成虫对高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素3种药剂的交互抗性及其抗性遗传规律,为果园轮... 详细信息

[目的]目前化学防治是果树重大害虫橘小实蝇Bactrocera dorsalis的主要防治措施。本研究旨在明确橘小实蝇抗高效氯氰菊酯、抗敌百虫和抗阿维菌素品系成虫对高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素3种药剂的交互抗性及其抗性遗传规律,为果园轮换用药开展防治和抗性治理等工作提供理论支持。[方法]从野外采集橘小实蝇幼虫,在实验室内饲养52代以上,应用药膜法测定明确成虫对杀虫剂的敏感度;采用群体筛选法逐代汰选至52代,建立橘小实蝇抗药性品系;采用药膜法测定橘小实蝇高效氯氰菊酯抗性品系、敌百虫抗性品系和阿维菌素抗性品系分别对高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素的交互抗性水平;将高效氯氰菊酯抗性品系、敌百虫抗性品系和阿维菌素抗性品系进行正反两两杂交,通过对各处理F1代进行生物测定以判定抗性遗传规律。[结果]研究发现橘小实蝇高效氯氰菊酯、抗敌百虫和阿维菌素抗性品系成虫对另外两种药剂均存在一定程度的交互抗性。其中,高效氯氰菊酯抗性品系成虫对敌百虫存在中等水平的交互抗性,抗性倍数（resistance multiple,Rm）为15.61,高效氯氰菊酯抗性品系成虫对敌百虫的致死中浓度(median lethal concentration,LC50)值为54.58 mg/L,抗性倍数为15.61;对阿维菌素则为低水平交互抗性,Rm为6.70,高效氯氰菊酯抗性品系成虫对阿维菌素的LC50值为25.30 mg/L。敌百虫抗性品系成虫对高效氯氰菊酯和阿维菌素均存在低水平交互抗性,Rm分别为9.15和6.18,敌百虫抗性品系成虫对高效氯氰菊酯和阿维菌素的LC50值分别为43.12和23.35 mg/L。阿维菌素抗性品系成虫对高效氯氰菊酯和敌百虫同样存在低水平交互抗性,Rm分别为8.74和3.58,阿维菌素抗性品系对高效氯氰菊酯和敌百虫的LC50值分别为41.18和12.52 mg/L。橘小实蝇高效氯氰菊酯抗性品系与敌百虫抗性品系进行正反交时抗性衰退率分别为33.52%和56.42%,与阿维菌素抗性品系正反交时抗性衰退率分别为8.49%和84.25%。敌百虫抗性品系与高效氯氰菊酯抗性品系正反交时抗性衰退率分别为21.41%和81.47%,与阿维菌素抗性品系正反交时抗性衰退率则为38.00%和79.00%。阿维菌素抗性品系与高效氯氰菊酯抗性品系、敌百虫抗性品系正交时F1代的抗性与亲本相比抗性衰退率变化不大,分别为3.62%和12.77%;反交时抗性衰退率分别为65.45%和62.29%。[结论]橘小实蝇高效氯氰菊酯抗性品系对敌百虫存在中等水平的交互抗性,对阿维菌素则为低水平交互抗性;敌百虫抗性品系对高效氯氰菊酯和阿维菌素均存在低水平交互抗性;阿维菌素抗性品系对高效氯氰菊酯和敌百虫同样存在低水平交互抗性。橘小实蝇对高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素的抗性遗传明显偏向母系遗传规律。本研究测定和明确了橘小实蝇对高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素3种药剂的抗性程度、交互抗性水平及抗性遗传规律,对延缓该虫抗药性、指导田间杀虫剂使用提供了理论依据,对抗药性治理工作具有实践指导意义。

关键词：橘小实蝇高效氯氰菊酯敌百虫阿维菌素交互抗性

硅藻土介导的截形叶螨成螨爪哇虫草菌敏感性提升和表皮特征变化

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昆虫学报 2024年第5期67卷 651-658页

作者：赵冬晓张志春牛洪涛郭慧芳江苏省农业科学院植物保护研究所南京210014

【目的】截形叶螨Tetranychus truncatus抗药性演化快,防治难度不断加大,研发微生物杀螨剂迫在眉睫。杀虫真菌爪哇虫草菌Cordyceps javanica JS001菌株已开发为防烟粉虱Bemisi tabaci等害虫的生防药剂。本研究旨在探索爪哇虫草菌对截形... 详细信息

【目的】截形叶螨Tetranychus truncatus抗药性演化快,防治难度不断加大,研发微生物杀螨剂迫在眉睫。杀虫真菌爪哇虫草菌Cordyceps javanica JS001菌株已开发为防烟粉虱Bemisi tabaci等害虫的生防药剂。本研究旨在探索爪哇虫草菌对截形叶螨的致病力以及其理想助剂材料,以挖掘爪哇虫草菌对截形叶螨的生防潜力。【方法】采用喷雾法测定爪哇虫草菌JS001菌株1.0×106孢子/mL孢子悬浮液侵染后截形叶螨卵、若螨以及成螨的累计死亡率;分别用硅藻土(0.025 g/L)溶液以及添加了硅藻土的爪哇虫草菌JS001菌株孢子悬浮液(1.0×106孢子/mL)喷施截形叶螨2日龄成螨,观察记录成螨的感染死亡情况;以硅藻土溶液(0.025 g/L)喷施截形叶螨2日龄成螨,扫描电子显微镜下观察并计算截形叶螨2日龄成螨表皮褶皱间距和单位距离(10μm)内褶皱数。【结果】爪哇虫草菌JS001菌株对截形叶螨的卵未表现出致病力,造成成螨的死亡率为81.75%,显著高于若螨的死亡率(40.91%)。硅藻土能加速爪哇虫草菌JS001菌株对成螨的致死作用,平均存活时间缩短0.6 d。扫描电子显微镜观察结果表明,与对照比较,硅藻土处理能疏松成螨表皮的微阵列结构,相邻褶皱之间的平均距离显著变大,且单位距离(10μm)内的平均褶皱数目显著下降。【结论】爪哇虫草菌JS001菌株对截形叶螨成螨具有较高致病力,硅藻土能改变成螨表皮物理结构并提升爪哇虫草菌JS001菌株的杀螨活性。

关键词：截形叶螨爪哇虫草菌致病力硅藻土表皮生物防治

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细胞色素P450介导的杂草抗药性研究进展

植物保护 2024年第4期50卷 1-15页

作者：谷涛张自常曹晶晶李贵娄远来王红春江苏省农业科学院植物保护研究所南京210014

细胞色素P450(cytochrome P450)是一类重要的亚铁血红素-硫醇盐蛋白超家族,属于单加氧酶,广泛分布于生物界中。研究发现P450主要具有“生物合成”和“生物解毒”两大功能,被誉为“万能的生物催化剂”。大多数除草剂在植物体内代谢的初... 详细信息

细胞色素P450(cytochrome P450)是一类重要的亚铁血红素-硫醇盐蛋白超家族,属于单加氧酶,广泛分布于生物界中。研究发现P450主要具有“生物合成”和“生物解毒”两大功能,被誉为“万能的生物催化剂”。大多数除草剂在植物体内代谢的初始阶段即涉及植物细胞色素P450的作用。近些年,由P450介导的抗药性杂草呈多发态势,其复杂的抗性谱,给杂草化学防除带来了新的挑战。本文对P450分类命名、P450与除草剂代谢的关系、P450抗性鉴定手段、P450介导抗性杂草发生情况、与除草剂代谢有关的植物细胞色素P450基因克隆等内容进行了综述,旨在为该领域的相关研究提供参考。

关键词：细胞色素P450 除草剂鉴定手段抗性杂草 P450基因