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隔药饼灸干预TLR4/MyD88/NF-κB通路改善慢性疲劳综合征大鼠神经免疫炎症的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：翟春涛侯亚薇史林娟王一晓李玮田岳凤山西中医药大学第二临床学院

目的：基于Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子-κB（TLR4/MyD88/NF-κB）信号通路探讨经方逍遥散为药饼进行施灸改善慢性疲劳综合征（CFS）大鼠神经免疫炎症反应的作用机制。方法：50只6～8周龄SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组... 详细信息

目的：基于Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子-κB（TLR4/MyD88/NF-κB）信号通路探讨经方逍遥散为药饼进行施灸改善慢性疲劳综合征（CFS）大鼠神经免疫炎症反应的作用机制。方法：50只6～8周龄SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、假药饼灸组、中药灌胃组、隔药饼灸组，每组10只。除对照组外其余各组进行持续21 d的造模，造模后进行行为学检测，隔药饼灸组与假药饼灸组对“神阙”“关元”“足三里”“期门”穴进行干预，中药灌胃组给予逍遥散悬浊液灌胃干预，连续干预10 d后进行行为学检测，ELISA检测各组大鼠血清白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量及海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB含量，HE染色观察大鼠海马组织的形态变化，Real-time PCR检测大鼠海马组织中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA水平，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织中TLR4、MyD88、NF-κB、p65蛋白相对表达量；结果：与正常组比较，模型组旷场实验直立次数明显减少，（P<0.01），运动总距离、静止时间及中心区域持续时间明显缩短（P<0.01）；悬尾试验不动时间增加（P<0.01），挣扎次数减少（P<0.01）；血清、海马组织炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平，海马组织NF-κB水平及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。经治疗后，与模型组比较，各治疗组旷场实验运动总路程及直立次数明显增加（P<0.01），静止时间及中心持续时间明显延长（P<0.05，P<0.01）；悬尾实验不动时间明显缩短（P<0.01），挣扎次数明显增加（P<0.05）；血清、海马组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平，海马组织NF-κB水平及TLR4、NF-κB mRNA表达水平明显降低（P<0.05，P<0.01）。与假药饼灸组比较，隔药饼灸组旷场实验中心区域持续时间明显延长（P<0.05），直立次数明显增加（P<0.01）；悬尾试验不动时间缩短（P<0.01），挣扎次数增加（P<0.01）；中药灌胃组血清TNF-α水平明显降低（P<0.01），中药灌胃组及隔药饼灸组血清、海马组织IL-6水平、海马组织IL-1β、TNF-α、NF-κB水平及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达水平明显降低（P<0.01，P<0.05）。与中药灌胃组比较，隔药饼灸组旷场实验直立次数明显增加（P<0.01）；悬尾实验不动时间缩短（P<0.01），挣扎次数增加（P<0.01）；血清IL-1β、海马组织TNF-α水平及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达水平明显降低。结论：隔药饼灸能够有效改善CFS大鼠的疲劳状态与记忆功能，调控机体神经免疫炎性反应，其机制可能与调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。

关键词：隔药饼灸神经免疫炎症慢性疲劳综合征逍遥散

当归痛风方对小鼠高尿酸血症肾病的FTIR研究

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光谱学与光谱分析 2024年第3期44卷 800-806页

作者：刘必旺路荣荣曹越王秀文赵换郝渺马晓霞马艳苗王永辉山西中医药大学傅山学院山西榆次030619 山西中医药大学基础医学院山西榆次030619 山西中医药大学中药与食品工程学院山西榆次030619 山西中医药大学附属医院药剂科山西太原030024

傅里叶变换红外光谱(FTIR)是鉴别物质和分析物质结构的有效手段,可对样品进行定性和定量分析,广泛应用于医药化工等众多领域。FTIR作为一种操作简便、实用、准确率高和费用低的鉴别方法,如今已经普遍应用于各种药品检验中,而有关其应用... 详细信息

傅里叶变换红外光谱(FTIR)是鉴别物质和分析物质结构的有效手段,可对样品进行定性和定量分析,广泛应用于医药化工等众多领域。FTIR作为一种操作简便、实用、准确率高和费用低的鉴别方法,如今已经普遍应用于各种药品检验中,而有关其应用于药理研究中还非常少,目前仅有采用红外光谱分析法对各种肿瘤组织进行研究的报道。高尿酸血症肾病是人体血尿酸升高后,过高的尿酸负荷超过肾脏的清除能力,尿酸结晶沉积于集合管、肾盂和尿道等。采用FTIR技术评价高尿酸血症肾病模型,并评价药物的药效,具有一定的可行性。该实验为探讨FTIR评价高尿酸血症肾病模型和当归痛风方疗效的科学性,将60只KM小鼠随机分为6组,正常对照组、模型组、阳性对照组和当归痛风方低、中、高组,采用氧嗪酸钾复制高尿酸血症肾病模型,灌胃当归痛风方,检测血清UA、尿液UA、血清CRE、尿液CRE、血清IL-1β和肾脏IL-1β、肾脏FTIR谱图等,并观察肾脏的病理变化。结果表明模型组各项指标与正常组比较有统计学意义(p<0.05),当归痛风方高剂量组的血清UA、血清CRE、血清IL-1β和肾脏IL-1β等与模型组比较且有统计学意义(p<0.05)。当归痛风方高剂量组肾脏的病理变化有所改善,无炎性细胞浸润,管腔内无管型,说明对肾损伤具有保护作用。各组FTIR谱有明显的差异,模型组的强度均低于正常组,阳性对照组和当归痛风方高剂量组谱接近正常组,进一步说明当归痛风方对肾损伤具有保护作用。研究表明FTIR可以作为一种简便快捷灵活经济的评价动物模型及药物疗效的方法之一,也为高尿酸血症肾病模型及有效药物的筛选提供了一个有意义的技术手段。该实验拓展了FTIR检测方法的使用范围。

关键词：高尿酸血症肾病当归痛风方尿酸肌酐傅里叶变换红外光谱仪

“秩边透水道”针法对卵巢低反应小鼠Notch1/Hes1/JAG1信号通路的影响

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时珍国医国药 2024年第5期 1264-1268页

作者：常博雅任佳金旭高珍曹玉霞王海军山西中医药大学第二临床学院

目的通过观察针刺对卵巢低反应(poor ovarian response, POR)小鼠卵巢组织神经源性基因Notch同源蛋白1(notch receptor 1,Notch1)/Hes家族BHLH转录因子1(hes family bHLH transcription factor 1,Hes1)/锯齿状典型Notch配体1(Anti-JAG1antibody-CD339,JAG1)通路的影响，探讨“秩边透水道”针法治疗POR的可能机制。方法筛选动情周期正常的36只小鼠，按随机数字表分为空白组、模型组、针刺组；模型组和针刺组连续14天给予雷公藤混悬液灌胃以制备POR小鼠模型，空白组采用生理盐水等剂量灌胃，造模完成后针刺组取“秩边透水道”针刺治疗，每日1次，每次20 min,连续治疗14 d,随后三组同时促排，次日取材检测相应指标。阴道涂片法观测小鼠动情周期变化；比较各组小鼠卵巢指数；ELISA法检测小鼠血清中抗缪勒管激素(anti-mullerian hormone, AMH)、促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone, FSH)、雌二醇(estradiol, E2)、促黄体生成激素(luteinizing hormone, LH)的含量；HE染色法检测卵巢形态；TUNEL染色观察卵巢颗粒细胞凋亡情况；荧光定量PCR法和Western blot法测Notch1、Hes1、JAG1、BCL-2关联X的蛋白(Bcl-2 associated X,BAX)、B淋巴细胞瘤-2(b-cell lymphoma-2,Bcl-2) mRNA和蛋白表达变化。结果与空白组相比，模型组小鼠动情周期紊乱率升高(P<0.01);卵巢组织形态变差，闭锁卵泡增多；获卵数、卵巢湿重和卵巢指数不同程度降低(P<0.01);血清中AMH、E2含量下降，FSH、LH含量升高(P<0.01);卵巢细胞凋亡面积增加(P<0.01),卵巢组织Bax mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01),Notch1、Hes1、JAG1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较，针刺组小鼠动情周期紊乱率降低(P<0.01),卵巢组织形态得到改善，闭锁卵泡减少，获卵数、卵巢湿重升高(P<0.01),卵巢指数升高(P<0.05);血清中AMH、E2含量提高，FSH、LH含量下降(P<0.01);卵巢细胞凋亡面积减少(P<0.01);卵巢组织Bax蛋白表达水平降低(P<0.01),Notch1、Hes1、JAG1和Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平提高(P<0.01,P<0.05)。结论 “秩边透水道”针法可以改善POR小鼠卵巢反应低下，提高卵巢功能，其机制可能与调节Notch信号通路上的关键因子有关。

关键词： “秩边透水道” 针刺卵巢低反应 Notch通路凋亡

白藜芦醇调控Hippo信号通路对卵巢低反应小鼠卵巢保护作用的机制研究

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中国中药杂志 2024年第3期49卷 744-753页

作者：郝健亨常博雅任佳王海军冀来喜成都中医药大学针灸推拿学院四川成都610075 山西中医药大学第二临床学院山西晋中030619

观察白藜芦醇(resveratrol,Res)通过调控Hippo信号通路对卵巢低反应(poor ovarian response,POR)小鼠卵巢功能的保护作用,探析Res抑制卵巢细胞凋亡的可能机制。将筛选后动情周期规律的雌性小鼠随机分成空白组,模型组以及Res低、高剂量组... 详细信息

观察白藜芦醇(resveratrol,Res)通过调控Hippo信号通路对卵巢低反应(poor ovarian response,POR)小鼠卵巢功能的保护作用,探析Res抑制卵巢细胞凋亡的可能机制。将筛选后动情周期规律的雌性小鼠随机分成空白组,模型组以及Res低、高剂量组(20、40 mg·kg^(-1)),每组20只。空白组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,模型组以及Res低、高剂量组小鼠给予雷公藤多苷混悬液(50 mg·kg^(-1))灌胃2周,造模完成后,Res低、高剂量组小鼠连续灌胃治疗2周,空白组和模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,于治疗结束次日对各组雌鼠进行促排操作。最后每组随机选取12只雌鼠进行取材,将每组剩余的8只雌鼠与雄鼠1∶1合笼。采用阴道脱落细胞涂片观察小鼠的动情周期变化,检测小鼠获卵数、卵巢湿重、卵巢指数和妊娠率,通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中抗缪勒管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)、促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)、雌二醇(estradiol,E_(2))、促黄体生成激素(luteinizing hormone,LH)的含量;通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和脱氧核苷酸转移酶dUTP末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL)染色法观察卵巢组织形态和卵巢细胞凋亡情况;通过免疫组化法检测Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)1和带有PDZ结合基序的转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)的蛋白表达,通过Western blot法检测哺乳动物Ste-20样激酶(mammalian sterile 20-like kinase,MST)1/2、大型肿瘤抑制因子(large tumor suppressor,LATS)1/2、YAP1、TAZ、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2关联X的蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)蛋白表达水平的变化。结果发现,与空白组比较,模型组小鼠动情周期紊乱率升高,卵巢组织各级正常发育卵泡数量减少,闭锁卵泡增多,卵巢颗粒细胞凋亡量提高,获卵数下降,卵巢湿重与卵巢指数降低,血清中FSH和LH含量升高,AMH和E_(2)含量下降,卵巢组织YAP1、TAZ蛋白表达水平降低,MST1/2、LATS1/2和Bax蛋白相对表达升高,YAP1、TAZ和Bcl-2蛋白相对表达降低,合笼后每胎胚胎数显著降低;与模型组比较,Res低、高剂量组小鼠动情周期紊乱率降低,卵泡数量和形态得到不同程度改善,卵泡闭锁量降低,卵巢颗粒细胞凋亡程度得到改善,获卵数升高,卵巢湿重与卵巢指数升高,血清中FSH和LH含量降低,AMH和E_(2)含量升高,卵巢组织YAP1、TAZ蛋白表达水平升高,MST1/2、LATS1/2和Bax蛋白相对表达降低,YAP1、TAZ和Bcl-2蛋白相对表达升高,合笼后每胎胚胎数不同程度升高。综上,Res可以有效抑制小鼠卵巢细胞凋亡,改善卵巢反应性,其机制可能与调节Hippo通路中的关键分子有关。

关键词：白藜芦醇卵巢低反应 Hippo信号通路凋亡

电针“肠病方”对急性溃疡性结肠炎大鼠NLRP3炎性小体和肠黏膜屏障的影响

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中国针灸 2024年第4期44卷 441-448页

作者：蒋子文武荣林徐慧超王海军董爱爱冀来喜山西中医药大学第二临床学院太原030619 成都中医药大学针灸推拿学院

目的:观察电针“肠病方”对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜屏障和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响,探讨电针“肠病方”治疗UC的作用机制。方法:将32只SPF级健康雄性SD大鼠随机分成空... 详细信息

目的:观察电针“肠病方”对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜屏障和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响,探讨电针“肠病方”治疗UC的作用机制。方法:将32只SPF级健康雄性SD大鼠随机分成空白组、模型组、西药组和电针组,每组8只。除空白组外,大鼠饮用5%DSS溶液7 d制备UC模型。造模后,西药组予美沙拉嗪混悬液(200 mg/kg)灌胃;电针组予针刺双侧“天枢”“上巨虚”和“中脘”穴,同侧“天枢”与“上巨虚”连接电子针疗仪电极,予疏密波,频率10 Hz/50 Hz,每次干预20 min。两组均每日1次,干预3 d。每天观察各组大鼠一般情况。干预后,计算大鼠疾病活动指数(DAI)评分;HE染色法观察大鼠结肠组织形态;ELISA法检测血清促炎性细胞因子[白细胞介素(IL)-18、IL-1β]含量;Western blot法检测大鼠结肠组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白表达;免疫荧光法检测结肠组织闭锁连接蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)阳性表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠一般状况较差,体质量增长缓慢,结肠长度缩短(P0.05)。与空白组比较,模型组结肠黏膜形态破坏,腺体排列紊乱,隐窝萎缩,有明显的炎性细胞浸润;与模型组比较,西药组和电针组大鼠结肠黏膜形态相对完好,腺体与隐窝结构得到了恢复与改善,炎性细胞浸润减少。结论:电针“肠病方”对DSS诱导的急性UC具有显著的改善作用,可能是通过调节NLRP3炎性小体和肠黏膜屏障相关蛋白的表达,从而减轻溃疡性结肠炎的症状。

关键词：溃疡性结肠炎电针针刺肠病方 NLRP3炎性小体肠黏膜屏障

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隔药饼灸操作规范中的影响因素

中华中医药杂志 2024年第6期39卷 3130-3138页

作者：马晨翟春涛田岳凤山西中医药大学第二临床学院太原030024

目的:对隔药饼灸现行标准中未有详细说明的赋形剂、调和剂、降温措施等与治疗效果密切相关的影响因素进行观察研究。方法:将不同比例赋形剂与药粉混合制成药饼,比较药饼的性状;在其他条件相同的情况下,分别采用不同的调和剂及降温措施,... 详细信息

目的:对隔药饼灸现行标准中未有详细说明的赋形剂、调和剂、降温措施等与治疗效果密切相关的影响因素进行观察研究。方法:将不同比例赋形剂与药粉混合制成药饼,比较药饼的性状;在其他条件相同的情况下,分别采用不同的调和剂及降温措施,用温度记录仪记录施灸过程中温度的变化,比较相应的指标。结果:药饼的制作需添加赋形剂,且药粉与赋形剂的比例为1∶1时制作的药饼性状最佳;不同调和剂对施灸总时长的差异具有统计学意义(P<0.01),不同调和剂下每壮的最高温均有显著性差异(P<0.01);是否采取降温措施对温度持续在43~48℃的时长有显著性差异(P<0.01)。结论:隔药饼灸药饼的制作需添加赋形剂,推荐比例为药粉∶赋形剂=1∶1;在调和剂的选择上推荐姜汁或黄酒;在施灸过程中,建议考虑加入适当的降温措施。

关键词：隔药饼灸操作规范赋形剂调和剂降温措施

针刺对抑郁大鼠炎性反应与氧化应激的调控作用

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针刺研究 2024年

作者：韩文华王文瑞董爱爱王维峰山西中医药大学第二临床学院山西省针灸医院

目的：观察针刺腧穴“解郁方”对慢性不可预知轻度应激（CUMS）引起的抑郁大鼠的炎性反应和氧化应激的影响。方法：SPF级雄性SD大鼠被随机分为正常组、模型组、西药组及针刺组，每组10只。采用CUMS应激刺激28 d建立抑郁模型。同时，西... 详细信息

目的：观察针刺腧穴“解郁方”对慢性不可预知轻度应激（CUMS）引起的抑郁大鼠的炎性反应和氧化应激的影响。方法：SPF级雄性SD大鼠被随机分为正常组、模型组、西药组及针刺组，每组10只。采用CUMS应激刺激28 d建立抑郁模型。同时，西药组予以灌胃盐酸帕罗西汀混悬液；针刺组针刺“百会”“神门”“太冲”，留针20 min；两组均每日1次，连续干预28 d。观察各组大鼠体质量的改变，采用糖水偏好实验检测各组大鼠的糖水偏好指数，采用悬尾实验检测各组大鼠静止不动时间。采用ELISA法检测各组大鼠血清白细胞介素（IL）-6、IL-1β、IL-10的含量，以及海马组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）的活性。采用HE染色观察海马组织的形态变化；采用Western blot法检测核因子E-2-相关因子2(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白因子1(keap1)的蛋白相对表达量。结果：与正常组比较，模型组大鼠体质量增量显著下降（P<0.05），糖水偏好指数显著下降（P<0.01），悬尾实验静止不动时间显著上升（P<0.01），抑郁样行为明显；海马神经细胞受损严重，血清中IL-6、IL-1β含量显著升高（P<0.01）,IL-10含量显著下降（P<0.01），海马组织SOD、CAT、GSH-Px活性及Nrf2蛋白相对表达量显著下降（P<0.01）,MDA活性、keap1蛋白相对表达量显著上升（P<0.01）；与模型组相比，西药组和针刺组以上指标均呈相反趋势（P<0.05,P<0.01）。结论：腧穴“解郁方”可以显著改善CUMS抑郁大鼠抑郁样行为、抑制炎性反应和氧化应激，其机制可能与激活Nrf2/ARE信号通路有关。

关键词：腧穴“解郁方” 慢性不可预见性轻度应激炎性反应氧化应激 Nrf2/ARE通路

麦粒灸调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路减轻溃疡性结肠炎小鼠结肠损伤的机制研究

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针刺研究 2024年

作者：朱涛冀来喜任佳程艳婷冀雨芳高珍张静王海军成都中医药大学针灸推拿学院山西中医药大学第二临床学院山西中医药大学附属医院

目的：观察麦粒灸对溃疡性结肠炎小鼠Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子κB（NF-κB）信号通路的影响，探讨麦粒灸对溃疡性结肠炎（UC）结肠损伤的治疗机制。方法：C57BL/6雄性小鼠40只随机分为空白组、模型组、... 详细信息

目的：观察麦粒灸对溃疡性结肠炎小鼠Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子κB（NF-κB）信号通路的影响，探讨麦粒灸对溃疡性结肠炎（UC）结肠损伤的治疗机制。方法：C57BL/6雄性小鼠40只随机分为空白组、模型组、麦粒灸组、西药组，每组10只。采用连续7天自由饮用3%DSS溶液法制备UC小鼠模型。麦粒灸组予麦粒灸“中脘”“天枢”“上巨虚”治疗，每穴3壮，每壮时间约为30 s。西药组给予300 mg/kg美沙拉嗪肠溶片溶液灌胃。各组干预均1次/d，连续7 d。每隔2 d观察小鼠一般情况，计算小鼠疾病活动指数（DAI）评分；HE染色法观察小鼠结肠组织形态；ELISA检测血清白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、IL-6和IL-8的含量；免疫组织化学法检测小鼠结肠组织中TLR4、MyD88的阳性表达；实时荧光定量PCR法小鼠结肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA的表达水平。结果：与空白组比较，模型组小鼠出现不同程度的软便或稀便，结肠长度缩短、体质量下降（P<0.01），DAI评分升高、肠重指数及黏膜损伤评分增加、血清IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8含量增加（P＜0.01），结肠组织中TLR4、MyD88阳性表达及TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA的表达均升高（P＜0.01）；与模型组比较，麦粒灸组、西药组小鼠粪便性状得到了改善，结肠长度增加、体质量增加（P<0.01），DAI评分降低、肠重指数及黏膜损伤评分减少、血清IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8含量减少（P＜0.01，P＜0.05），结肠组织中TLR4、MyD88阳性表达及TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA的表达均下降（P＜0.05，P＜0.01）；麦粒灸与西药组相比，差异无统计学意义。结论：麦粒灸可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路，减轻炎性因子的释放，改善UC小鼠的结肠损伤。

关键词：麦粒灸溃疡性结肠炎结肠损伤炎性反应 TLR4/MyD88/NF-κB信号通路

“秩边透水道”针刺对卵巢低反应小鼠PI3K/AKT/FOXO3a通路的影响

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中国针灸 2024年第7期 821-830页

作者：郝健亨王海军曹玉霞冀来喜成都中医药大学针灸推拿学院山西中医药大学第二临床学院

目的：基于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/叉头蛋白O3a（FOXO3a）通路观察“秩边透水道”针刺对卵巢低反应（POR）小鼠卵巢功能的保护作用，探析针刺抑制POR卵巢颗粒细胞凋亡的可能机制。方法：将动情周期规律的45只小鼠... 详细信息

目的：基于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/叉头蛋白O3a（FOXO3a）通路观察“秩边透水道”针刺对卵巢低反应（POR）小鼠卵巢功能的保护作用，探析针刺抑制POR卵巢颗粒细胞凋亡的可能机制。方法：将动情周期规律的45只小鼠随机分成空白组、模型组和针刺组，每组15只。模型组和针刺组小鼠予雷公藤多苷混悬液(50 mg·kg-1·d-1)灌胃2周制备POR模型。造模成功后针刺组小鼠予“秩边透水道”针刺干预连续2周，每日1次，每次20 min。干预结束次日开始促排卵，各组促排卵后完成取材。采用阴道脱落细胞涂片观察小鼠动情周期变化，记录小鼠取卵数、卵巢湿重、末次体质量与卵巢指数；ELISA法检测小鼠血清抗缪勒管激素（AMH）、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）、黄体生成素（LH）含量；HE染色法观察小鼠卵巢组织形态；TUNEL染色法观察小鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况；实时荧光定量PCR法检测小鼠卵巢组织PI3K、AKT、FOXO3a mRNA表达；Western blot法检测卵巢组织B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）关联X的蛋白（BAX），半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）和磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠动情周期紊乱率升高（P0.05）。与空白组比较，模型组小鼠血清FSH、LH含量升高（P<0.01），血清AMH、E2含量降低（P<0.01）；与模型组比较，针刺组小鼠血清FSH、LH含量降低（P<0.01,P<0.05），血清AMH、E2含量升高（P<0.01,P<0.05）。与空白组比较，模型组小鼠卵巢组织各级正常发育卵泡数量减少且形态较差，各级闭锁卵泡增多；与模型组比较，针刺组小鼠卵泡数量、形态和颗粒细胞结构有不同程度改善，各级闭锁卵泡减少。与空白组比较，模型组小鼠卵巢颗粒细胞凋亡率升高（P<0.01）；与模型组比较，针刺组小鼠卵巢颗粒细胞凋亡率降低（P<0.01）。与空白组比较，模型组小鼠卵巢组织FOXO3a mRNA及Caspase-3、BAX蛋白表达升高（P<0.01），卵巢组织PI3K、AKT mRNA及p-PI3K、p-AKT和p-FOXO3a蛋白表达降低（P<0.01）；与模型组比较，针刺组小鼠卵巢组织FOXO3am RNA及Caspase-3、BAX蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01），卵巢组织PI3K、AKT mRNA及p-PI3K、p-AKT、p-FOXO3a蛋白表达升高（P<0.01,P<0.05）。结论：“秩边透水道”针刺可以抑制POR小鼠卵巢颗粒细胞凋亡，改善卵巢功能，其机制可能与调节PI3K/AKT/FOXO3a通路中的关键因子有关。

关键词：卵巢低反应针刺秩边透水道卵巢功能 PI3K/AKT/FOXO3a信号通路细胞凋亡