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噬菌体展示技术及其应用

植物检疫 2011年第4期25卷 70-74页

作者：厉艳陈长法赵文军封立平邵秀玲尼秀媚吴兴海山东出入境检验检疫局食品农产品中心青岛266002 青岛出入境检验检疫局中国检验检疫科学研究院

噬菌体展示技术是近年来兴起的一种基因表达筛选技术,以噬菌体或噬粒为载体,使外源肽或蛋白基因与噬菌体表面特定蛋白基因在载体表面进行融合表达,进而通过亲和富集法筛选表达有特异肽或蛋白质的噬菌体。该技术实现了表型与基因型的统一... 详细信息

噬菌体展示技术是近年来兴起的一种基因表达筛选技术,以噬菌体或噬粒为载体,使外源肽或蛋白基因与噬菌体表面特定蛋白基因在载体表面进行融合表达,进而通过亲和富集法筛选表达有特异肽或蛋白质的噬菌体。该技术实现了表型与基因型的统一,具有广泛的应用前景。本文介绍了噬菌体展示技术的基本原理类型、优势特点及其应用。

关键词：噬菌体展示技术类型应用

SD-PMA-ddPCR检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

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微生物学通报 2016年第10期43卷 2306-2313页

作者：王静刘玉敏李春喜赵丽青秦燕张慧敏威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心山东威海264205 山东出入境检验检疫局山东青岛266500

【目的】检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌活菌。【方法】利用脱氧胆酸钠(SD)对受损细胞预处理,然后使叠氮溴化丙锭(PMA)进入受损细胞与DNA发生共价交联,提取细菌基因组DNA进行微滴式数字PCR(dd PCR)检测。【结果】0.1%SD和5.0 mg/L PM... 详细信息

【目的】检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌活菌。【方法】利用脱氧胆酸钠(SD)对受损细胞预处理,然后使叠氮溴化丙锭(PMA)进入受损细胞与DNA发生共价交联,提取细菌基因组DNA进行微滴式数字PCR(dd PCR)检测。【结果】0.1%SD和5.0 mg/L PMA协同作用,可以有效抑制108 CFU/m L的单核细胞增生李斯特氏菌死菌DNA的PCR扩增。经过SD和PMA对样品预处理,dd PCR可以在死菌存在条件下,定量检测鸡肉中单核细胞增生李斯特氏菌活菌,消除了"假阳性"结果的出现。活菌灵敏度检测结果显示:SD-PMA-dd PCR的灵敏度为2.0 copies/20μL。SD-PMA-dd PCR方法精密度和稳定性良好。【结论】SD-PMA-dd PCR在检测食源性致病菌方面有巨大的发展空间。

关键词：叠氮溴化丙锭脱氧胆酸钠微滴式数字PCR 单核细胞增生李斯特氏菌

气相色谱-质谱法测定蔬菜和水果中193种农药的残留量

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色谱 2013年第9期31卷 885-893页

作者：崔淑华陈慰双钱家亮段浩刘同英张立东山东出入境检验检疫局食品农产品检测中心山东青岛266002 中国海洋大学环境科学与工程学院山东青岛266003 临沂出入境检验检疫局检验检疫技术中心山东临沂276034

在系统优化固相萃取吸附剂填料类型、洗脱溶剂种类及体积的基础上,建立了蔬菜和水果中193种农药残留的气相色谱-质谱(GC-MS)检测方法。样品经乙腈均质提取,C18/PSA固相萃取柱净化,乙腈洗脱,GC-MS选择离子监测(SIM)模式检测,以磷酸三苯... 详细信息

在系统优化固相萃取吸附剂填料类型、洗脱溶剂种类及体积的基础上,建立了蔬菜和水果中193种农药残留的气相色谱-质谱(GC-MS)检测方法。样品经乙腈均质提取,C18/PSA固相萃取柱净化,乙腈洗脱,GC-MS选择离子监测(SIM)模式检测,以磷酸三苯酯内标法定量。结果表明,130种农药在10～1 000μg/L、34种农药在20～1 000μg/L、26种农药在50～1 000μg/L、3种农药在100～1 000μg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.996 7～1.000 0,方法检出限(以信噪比为3计)为0.04～8.26μg/kg,添加回收率为71.6%～117.9%,相对标准偏差为3.0%～11.8%。该方法样品处理简单快速,相比其他多残留分析方法净化效果好,其灵敏度和选择性明显提高,适用于日常检测工作。

关键词：气相色谱-质谱农药残留蔬菜水果

抑制剂去除对冷冻草莓中诺如病毒RT-PCR检测的影响

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食品科学 2017年第4期38卷 296-300页

作者：徐文斐房保海林超王宫璞王群郑小龙梁成珠岳志芹山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心山东青岛266002

目的:设计对比实验,以冷冻草莓为材料,研究样品中所含抑制剂对诺如病毒荧光定量逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测结果的影响,优化提高检测灵敏度与准确率。方法:GⅡ型诺如病毒便悬液... 详细信息

目的:设计对比实验,以冷冻草莓为材料,研究样品中所含抑制剂对诺如病毒荧光定量逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测结果的影响,优化提高检测灵敏度与准确率。方法:GⅡ型诺如病毒便悬液的制备与RNA提取,已知阴性冷冻草莓样品进行前处理、病毒富集、病毒RNA提取纯化,分组(对照组、实验组),抑制剂去除,荧光定量RT-PCR检测。结果:随着病毒浓度的梯度递减,抑制剂影响作用呈明显增强趋势,导致在高于正常检测最低限度两个数量级的水平,即出现假阴性结果;抑制剂去除的实验组检测结果,随着病毒浓度梯度的递减明显优于未经处理的对照组;抑制剂去除的实验组稳定检出限为10-6(Ct值小于40),最低检出限为10-7(诺如病毒(norovirus,No V)浓度梯度检测最低检出限为10-5)。结论:抑制剂去除可明显优化冷冻草莓中No V荧光定量RT-PCR检测,提高检测方法的灵敏度,且操作简便快捷,检测成本浮动不大,期望应用于日常检测工作中。

关键词：冷冻草莓诺如病毒荧光定量RT-PCR 抑制剂

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二甲戊灵在大葱中的残留分析与消解动态

江苏农业科学 2013年第7期41卷 307-308,370页

作者：郭庆龙崔淑华张晓梅刘润珠宫萍刘婧婧黄岛出入境检验检疫局山东青岛266555 山东出入境检验检疫局食品农产品检测中心山东青岛266002

本研究采用气相色谱质谱法(GC-MS)测定了二甲戊灵在春季大葱中的残留消解动态和最终残留量。样品经乙腈提取,SAX/PSA固相萃取柱净化,气相色谱质谱选择离子(GC/MS/SIM)检测。建立的大葱中二甲戊灵残留量检测方法在0.01～0.10 mg/kg水平... 详细信息

本研究采用气相色谱质谱法(GC-MS)测定了二甲戊灵在春季大葱中的残留消解动态和最终残留量。样品经乙腈提取,SAX/PSA固相萃取柱净化,气相色谱质谱选择离子(GC/MS/SIM)检测。建立的大葱中二甲戊灵残留量检测方法在0.01～0.10 mg/kg水平的平均添加回收率为95.8%～103.7%,相对标准差为3.6%～5.8%,二甲戊灵检测限为0.88μg/kg,定量限为2.92μg/kg。二甲戊灵在大葱中消解较快,半衰期为3.8 d。33%二甲戊灵乳油按推荐剂量(有效成分含量742.5 g/hm2)和加倍剂量(有效成分含量1 485 g/hm2)封闭处理土壤,于大葱收获时(施药后80 d)均未在大葱中检出二甲戊灵。说明建立的大葱中二甲戊灵残留检测方法准确可靠。

关键词：二甲戊灵大葱消解残留

2013年欧盟食品和饲料快速预警系统RASFF通报中国产品情况

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对外经贸实务 2014年第4期 57-58页

作者：梁成彪闫庆博张明济宁出入境检验检疫局山东出入境检验检疫局

欧盟食品安全局（EFSA）在其官方网站通过欧盟食品和饲料快速预警系统（RASFF）向公众实时通报所发现的安全问题。2013年，RASFF系统共发布食品和饲料类产品通报3135项，比2012年通报的3425项下降了38.24%。其中，对中国通报436项，占比... 详细信息

欧盟食品安全局（EFSA）在其官方网站通过欧盟食品和饲料快速预警系统（RASFF）向公众实时通报所发现的安全问题。2013年，RASFF系统共发布食品和饲料类产品通报3135项，比2012年通报的3425项下降了38.24%。其中，对中国通报436项，占比13.91%，比2012年通报的5472项（占比15.98%）下降了2.07%。KASFF通报的中国产品包括食品、食品接触材料和饲料三大类，通报次数分别为274项（占比62.84%），152项（占比34.86%）以及10项（2.29%）。综合2013的数据，欧盟RASFF通报中国食品类产品情况值得我们关注和研究。

关键词：食品安全中国产品产品情况预警系统通报饲料欧盟食品接触材料

纸基食品接触材料中4-肉桂苯酚和水杨酸对叔丁基苯酯向干性食品模拟物Tenax TA的迁移

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色谱 2014年第12期32卷 1349-1355页

作者：韩伟于艳军李宁涛王利兵天津出入境检验检疫局工业产品安全技术中心天津300308 湖南出入境检验检疫局技术中心湖南长沙410004

以纸基食品接触材料中的4-肉桂苯酚(CP)和水杨酸对叔丁基苯酯(TBS)为模拟迁移物,对其向干性食品模拟物Tenax TA中的迁移规律采用超高效液相色谱结合荧光检测(UPLC-FLR)方法进行了研究。在不同温度下对CP和TBS的迁移动力学进行了考察,并... 详细信息

以纸基食品接触材料中的4-肉桂苯酚(CP)和水杨酸对叔丁基苯酯(TBS)为模拟迁移物,对其向干性食品模拟物Tenax TA中的迁移规律采用超高效液相色谱结合荧光检测(UPLC-FLR)方法进行了研究。在不同温度下对CP和TBS的迁移动力学进行了考察,并对其在封闭环境和敞开环境下的迁移率进行对比研究。通过设计不同质量的Tenax TA接触直径为3.5 cm圆片样品的迁移试验,探索了迁移试验中合适的模拟物质量/接触材料面积比条件。系列试验结果表明,迁移物迁移时间越长,迁移温度越高,相应的迁移率就越高;在高的迁移温度下,迁移物在Tenax TA上的解吸会导致迁移率的下降;在封闭条件下CP和TBS的迁移率要高于敞开条件下的迁移率;迁移试验中,4.16 g/dm2的模拟物质量/接触材料面积比是利用干性食品模拟物进行食品接触材料暴露评估的合适的迁移试验条件。密闭条件下市售的8种食品接触材料干性食品模拟物迁移实验研究表明,TBS存在于用于包装坚果类食品的包装纸中,含量为15.54 mg/kg。

关键词：超高效液相色谱荧光检测 4-肉桂苯酚水杨酸对叔丁基苯酯食品接触材料干性食品模拟物 TenaxTA 迁移