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基于欠定盲源分离和深度学习的生猪状态音频识别

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华南农业大学学报 2024年第5期45卷 730-742页

作者：潘伟豪盛卉子王春宇闫顺丕周小波辜丽川焦俊安徽农业大学信息与人工智能学院安徽合肥230036 安徽喜乐佳生物科技有限公司安徽亳州233500

【目的】为解决群养环境下生猪音频难以分离与识别的问题,提出基于欠定盲源分离与E C A-EfficientNetV2的生猪状态音频识别方法。【方法】以仿真群养环境下4类生猪音频信号作为观测信号,将信号稀疏表示后,通过层次聚类估计出信号混合矩... 详细信息

【目的】为解决群养环境下生猪音频难以分离与识别的问题,提出基于欠定盲源分离与E C A-EfficientNetV2的生猪状态音频识别方法。【方法】以仿真群养环境下4类生猪音频信号作为观测信号,将信号稀疏表示后,通过层次聚类估计出信号混合矩阵,并利用lp范数重构算法求解lp范数最小值以完成生猪音频信号重构。将重构信号转化为声谱图,分为进食声、咆哮声、哼叫声和发情声4类,利用ECA-EfficientNetV2网络模型识别音频,获取生猪状态。【结果】混合矩阵估计的归一化均方误差最低为3.266×10^(−4),分离重构的音频信噪比在3.254~4.267 dB之间。声谱图经ECA-EfficientNetV2识别检测,准确率高达98.35%;与经典卷积神经网络ResNet50和VGG16对比,准确率分别提升2.88和1.81个百分点;与原EfficientNetV2相比,准确率降低0.52个百分点,但模型参数量减少33.56%,浮点运算量(FLOPs)降低1.86 G,推理时间减少9.40 ms。【结论】基于盲源分离及改进EfficientNetV2的方法,轻量且高效地实现了分离与识别群养生猪音频信号。

关键词：猪盲源分离声谱图音频识别稀疏重构卷积神经网络

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抗CD33单克隆抗体肽图分析方法的建立与验证

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中国药学杂志 2024年第16期 1495-1503页

作者：白露叶日平刘蒙蒙李雪琪张秀真赵永新杭州多禧生物科技有限公司

目的建立抗CD33单克隆抗体肽图分析方法并对方法进行验证。方法分别使用不同类型设备和不同流动相体系进行抗CD33抗体肽图检测。通过合成抗体CDR区域肽段进行特征肽段定位，并用质谱法对定位结果进行确认。以相对保留时间作为判断依... 详细信息

目的建立抗CD33单克隆抗体肽图分析方法并对方法进行验证。方法分别使用不同类型设备和不同流动相体系进行抗CD33抗体肽图检测。通过合成抗体CDR区域肽段进行特征肽段定位，并用质谱法对定位结果进行确认。以相对保留时间作为判断依据，根据《中国药典》2020年版完成方法验证。结果超高效液相色谱法（ultraperformance liquid chromotograph, UPLC）进行肽图检测比高效液相色谱法（high performance liquid chromotograph, HPLC）时间更短，三氟乙酸流动相体系相比甲酸流动相体系分离度更高。使用合成肽段的定位结果与质谱鉴定结果一致。方法专属性验证结果显示制剂空白、样品溶液空白对肽图特征峰检测无干扰，不同抗体肽图谱之间存在明显差异；重复性验证结果显示6份平行样品间特征肽段相对保留时间相对标准偏差（RSD）为0.01%～0.05%;中间精密度验证结果显示不同分析人员特征肽段相对保留时间RSD为0.04%～0.32%;耐用性验证结果显示不同酶处理条件[胰蛋白酶量为（1±0.2）μg、酶解温度为（37±1）℃、酶解时间为（4±1）h]特征肽段相对保留时间RSD为0.02%～0.09%,不同色谱条件[三氟乙酸占比（0.08±0.02）%、流速（0.3±0.05）mL·min-1、柱温（40±2）℃]、不同批次色谱柱特征肽段相对保留时间RSD为0.36%～1.43%。样品溶液在25 h内检测，特征肽段相对保留时间RSD为0.01%～0.04%。结论本研究采用合成肽段对液相肽图检测中的肽段进行定位，同时采用相对保留时间进行检测结果的判定，为生物药肽图检测提供了新的思路。

关键词：肽图分析超高效液相色谱法三氟乙酸质谱

酶解联合微生物发酵对弹性蛋白肽理化性质与功能特性的影响

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食品与发酵工业 2024年

作者：鲁杏茹智文博吕静曾贝贝李带根厦门元之道生物科技有限公司

为提高弹性蛋白肽（elastin peptide， EP）的理化性质与功能特性，该研究通过酶解联合微生物（副干酪乳杆菌YYS-K1）发酵制备弹性蛋白肽（EMEP），以单一蛋白酶解制备EP为对照，比较EMEP和EP的理化性质和功能特性的差异。结果表明：EME... 详细信息

为提高弹性蛋白肽（elastin peptide， EP）的理化性质与功能特性，该研究通过酶解联合微生物（副干酪乳杆菌YYS-K1）发酵制备弹性蛋白肽（EMEP），以单一蛋白酶解制备EP为对照，比较EMEP和EP的理化性质和功能特性的差异。结果表明：EMEP的糖胺聚糖的含量较EP提高了约1.73倍；2种EP中氨基酸组成和必需氨基酸占比无明显差异，而EMEP中的Gly和Leu含量占比明显高于EP；分子质量分布结果表明，EMEP中＜1 000 Da肽段占比为89.37%，单一酶解制备的EP占比为89.19%。抗氧化结果表明，2种EP均具有一定的抗氧化能力，在质量浓度为40 mg/mL时，EMEP的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和超氧阴离子自由基清除率较EP分别提高29.59%、2.74%和8.45%；EP与EMEP均表现出良好的功能特性，其中质量浓度为40 mg/mL的EMEP可有效抑制白蛋白变性、AGEs生成以及胰脂肪酶和弹性蛋白酶的活性，抑制率分别达到了92.11%，70.14%，81.14%和83.33%，与单一蛋白酶解EP相比分别提高20.25%、12.66%、81.14%和20.85%。总之，酶解联合微生物发酵制备法有利于进一步提高EP的理化性质和功能特性，为开发高质量的弹性蛋白肽产品提供理论依据。

关键词：弹性蛋白肽酶解联合微生物发酵蛋白酶解抗氧化活性生物活性

抗体偶联药物非临床安全性评价毒性病理学检查关注点

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药物评价研究 2024年第8期47卷 1678-1686页

作者：田爱军李佳霖汪春娅张浩琳李玲雷亚萍项玉李一昊李言川吕建军湖北天勤鑫圣生物科技有限公司

抗体偶联药物（ADC）是由抗体、有效载荷（细胞毒性小分子化合物）和连接子组成的新型特异性抗肿瘤药物。ADC具有高特异性和不良反应少等特点，但其安全性受到抗体特异性、连接子稳定性和有效载荷性质等因素的影响。ADC的剂量限制性毒... 详细信息

抗体偶联药物（ADC）是由抗体、有效载荷（细胞毒性小分子化合物）和连接子组成的新型特异性抗肿瘤药物。ADC具有高特异性和不良反应少等特点，但其安全性受到抗体特异性、连接子稳定性和有效载荷性质等因素的影响。ADC的剂量限制性毒性主要与有效载荷有关，且在临床和非临床研究中具有很好的相关性。ADC的毒性机制包括靶向毒性和脱靶毒性，靶向毒性主要由靶点的表达决定，脱靶毒性则由偶联不稳定和非特异性摄取等因素引起。简要概述ADC的毒性机制，重点介绍ADC非临床安全性评价中的毒性病理学检查关注点，以期为我国ADC非临床安全性评价提供一定参考。

关键词：抗体偶联药物非临床安全性评价靶向毒性脱靶毒性毒性病理学

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桑黄提取物抗炎和抗新冠病毒作用研究

菌物学报 2024年第1期43卷 90-102页

作者：马军成魏娟茹王雪茹陈刚孙贺春李宁安徽医科大学药学院安徽合肥230032 安徽省康美来大别山生物科技有限公司安徽金寨237300

本研究评估了不同极性部位的桑黄提取物(水、乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、萃取剩余水提取部位)对LPS刺激的RAW264.7细胞所产生的炎症细胞因子IL-6和TNF-α的抑制作用,并评估了桑黄乙醇提取物和水提取物抑制SARS-CoV-2复制和进入的... 详细信息

本研究评估了不同极性部位的桑黄提取物(水、乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、萃取剩余水提取部位)对LPS刺激的RAW264.7细胞所产生的炎症细胞因子IL-6和TNF-α的抑制作用,并评估了桑黄乙醇提取物和水提取物抑制SARS-CoV-2复制和进入的能力,以Vero作为宿主细胞,通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测病毒中核衣壳蛋白的表达水平。结果表明,桑黄的乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇以及水提取物均呈现较好的抗炎效果,并且随着浓度的增加抑制效果明显增强,显著降低LPS刺激的RAW264.7细胞产生的IL-6和TNF-α水平;桑黄乙醇提取物和水提取物能显著通过抑制SARS-CoV-2中核衣壳蛋白的表达水平从而达到抑制病毒复制的能力。

关键词：桑黄提取抗炎抗新冠病毒

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全球农业动物基因编辑基础研究发展动态分析

农业生物技术学报 2024年第1期32卷 220-233页

作者：张萌萌蒋颖李宁北京首农未来生物科技有限公司

基因编辑技术是一项可以对生物机体DNA序列进行精准修饰的技术。为了解全球该领域特别是针对农业动物基因编辑的发展趋势，本研究运用文献计量法，统计2015～2022年基因编辑技术领域论文数据，系统分析了该领域主要研发机构、研发团队... 详细信息

基因编辑技术是一项可以对生物机体DNA序列进行精准修饰的技术。为了解全球该领域特别是针对农业动物基因编辑的发展趋势，本研究运用文献计量法，统计2015～2022年基因编辑技术领域论文数据，系统分析了该领域主要研发机构、研发团队、研究前沿热点以及农业动物基因编辑技术研究现状。结果表明，我国基因编辑技术在论文层面处于国际领先地位，2015～2022年统计基因编辑技术相关论文量居全球第2，全球排名前20机构中，中国机构含8个，占40%。但与发达国家(美国)相比，我们还存在差距，主要体现在底盘核心技术创新不足，基因编辑系统开发、优化及Cas蛋白发现等均在国外；国际顶级学术期刊发表论文虽居全球第2，但远不及美国，中国在《自然-生物技术》(Nature Biotechnology)期刊中发文量最多(31篇)，仅占美国发文量的五分之一；基因编辑技术在农业动物中的研究报道整体数量较少，但呈逐年增多趋势，其在农业动物育种领域的应用存在巨大的潜力；最后结合自身国情，展望基因编辑技术前景以及在农业动物育种领域的发展趋势，以期为利用基因编辑技术解决农业动物育种特别是抗病育种中重大难题提供参考。

关键词：基因编辑农业动物文献分析全球

猪链球菌溶血素双抗体夹心酶联免疫吸附测定方法的建立

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疾病监测 2024年

作者：陈志萍陈益吴梦邓晓雨高雅晴葛良鹏杜华茂西南大学蚕桑纺织与生物质科学学院重庆金迈博生物科技有限公司

目的建立猪链球菌溶血素（SLY）的双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，通过对SLY进行定量检测来评价猪链球菌产生SLY的能力与致病力。方法用4种胆固醇依赖性溶细胞毒素的类毒素（CDC）免疫BALB/c鼠、新西兰大白兔制备高免血清... 详细信息

目的建立猪链球菌溶血素（SLY）的双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，通过对SLY进行定量检测来评价猪链球菌产生SLY的能力与致病力。方法用4种胆固醇依赖性溶细胞毒素的类毒素（CDC）免疫BALB/c鼠、新西兰大白兔制备高免血清，以间接ELISA方法检测高免血清与重组猪溶素（rSLY）、重组肺溶血素（rPLY）、重组李斯特菌溶血素O（rLLO）和重组产气荚膜梭菌溶血素O（rPFO）的反应性。以全人单克隆抗体1-10F（专利号CN113957057B）为捕获抗体、高免血清为检测抗体，经正交试验优化两类抗体的工作浓度，建立双抗体夹心ELISA方法，并对猪链球菌、肺炎球菌、单增李斯特菌、产气荚膜梭菌、溶血性大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的培养液进行特异性试验。结果间接ELISA方法显示兔抗rSLYP353L血清与rPLY有交叉反应，鼠抗rPLY血清与rSLY、rLLO有交叉反应，四联血清与rPLY、rSLY、rLLO有较强反应，rPFO与3种血清的反应性较弱。经优化，双抗体夹心ELISA方法的捕获抗体包被量为100 ng，检测抗体为鼠抗rPLY血清（1:1 000），在此条件下，检测25～800ng/mL的rSLY呈线性关系，R2值为0.986；对猪链球菌培养液为强阳性反应，对肺炎球菌培养液为弱阳性反应，其他为阴性反应。结论本研究建立的双抗体夹心ELISA方法能定量检测SLY，将为诊断高致病性猪链球菌感染提供新手段。

关键词：胆固醇依赖性溶细胞素猪链球菌肺炎球菌双抗体夹心酶联免疫吸附法

全球基因编辑技术产业化发展分析及其在农业动物育种中的应用

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农业生物技术学报 2024年第3期32卷 691-700页

作者：张萌萌蒋颖李宁北京首农未来生物科技有限公司

为了解全球农业动物基因编辑技术专利及其产业化态势，本研究利用专利计量法，统计2015～2022年基因编辑技术领域专利数据，对该领域主要研发机构、主要研发团队、研究前沿热点及针对不同农业动物基因编辑技术的概况进行系统分析。结果... 详细信息

为了解全球农业动物基因编辑技术专利及其产业化态势，本研究利用专利计量法，统计2015～2022年基因编辑技术领域专利数据，对该领域主要研发机构、主要研发团队、研究前沿热点及针对不同农业动物基因编辑技术的概况进行系统分析。结果显示，全球基因编辑技术专利在近8年呈上升趋势；中国申请公开的基因编辑技术专利数量排全球第1，但就整体而言，美国在基因编辑技术领域领跑全球；我国核心技术创新、论文专利质量、顶级研发机构和团队、知识成果转化及产业化机制等方面有待进一步提高。我国基因编辑技术专利在农业动物育种领域中数量较少，有些相关企业已完成千万级首轮融资。本研究对全球农业动物基因编辑产业化发展动态进行系统分析，为我国利用基因编辑技术破解农业动物育种重大难题提供参考。

关键词：基因编辑农业动物专利分析产业化

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蓝莓多糖的结构解析、抗氧化及抗菌活性

食品科学 2024年

作者：乔艳艳蒋洪洲李冬男李斌沈阳农业大学食品学院安徽紫约生物科技有限公司

采用柠檬酸辅助提取、DEAE-52纤维素和Sephadex G-100柱层析从蓝莓中纯化得到中性多糖BPN1。通过高效尺寸排阻色谱-多角度激光光散射系统分析BPN1的重均分子质量mw为2.991×104Da，多分散系数为1.163，分子质量分布范围较窄。采用1-苯基... 详细信息

采用柠檬酸辅助提取、DEAE-52纤维素和Sephadex G-100柱层析从蓝莓中纯化得到中性多糖BPN1。通过高效尺寸排阻色谱-多角度激光光散射系统分析BPN1的重均分子质量mw为2.991×104Da，多分散系数为1.163，分子质量分布范围较窄。采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生及高效液相色谱检测BPN1主要由葡萄糖、半乳糖、木糖及阿拉伯糖组成。通过红外光谱、甲基化和气相色谱-质谱法分析BPN1的糖苷键构型和连接方式；结合二维核磁谱图解析，推断BPN1结构为由1→4连接的葡聚糖构成主链，部分葡萄糖6位取代有阿拉伯聚糖、木糖、半乳寡聚糖等侧链。体外抗氧化实验表明BPN1有较好的1，1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2，2′-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）阳离子自由基和羟自由基清除能力，且强于热水提取法所得蓝莓多糖。抑菌实验表明BPN1对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度均介于2.5 mg/mL和5 mg/mL之间，且能够破坏金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的细胞膜，发挥抗菌活性。本研究将为蓝莓多糖的结构解析及进一步活性开发利用提供研究基础。

关键词：蓝莓多糖结构解析抗氧化抗菌