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基于UPLC-Q-Orbitrap-MS分析芪苈强心胶囊的物质基础及其体内分布

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：张建伟华杰凯李荣胜王琴常昕楠刘伟沈杰上海中医药大学附属曙光医院国家中医药管理局中药制剂三级实验室

目的：基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Orbitrap-MS），定性分析芪苈强心胶囊中的化学成分及其体内分布。方法：采用UPLC-Q-Orbitrap-MS对芪苈强心胶囊供试品溶液、灌胃给药后小鼠的血清及脑、心脏、肺脏... 详细信息

目的：基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Orbitrap-MS），定性分析芪苈强心胶囊中的化学成分及其体内分布。方法：采用UPLC-Q-Orbitrap-MS对芪苈强心胶囊供试品溶液、灌胃给药后小鼠的血清及脑、心脏、肺脏、脾脏、肝脏、肾脏中的化学成分进行检测，通过Thermo Xcalibur 2.2软件构建化合物信息数据库，并拟合准分子离子对应的化合物分子式，以保留时间、精确相对分子质量、碎片离子等信息，结合对照品和文献数据，鉴定芪苈强心胶囊中化学成分及其体内分布。结果：从芪苈强心胶囊中共鉴定或推测出233种化合物，包括萜类70种、黄酮类58种、有机酸类24种、生物碱类16种、甾类20种、香豆素类7种、其他类38种，其中73种通过对照品鉴定。组织分布结果显示，分别在血、脑、心脏、肺脏、脾脏、肝脏及肾脏中检测到移行成分71、17、38、33、32、58、43种。奎宁酸、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱等37种化学成分移行入血和心脏；毛蕊异黄酮、美迪紫檀烷、芒柄花素、泽泻醇B和泽泻醇A等14种化学成分在血和各组织中均有分布。结论：该研究较全面地分析了芪苈强心胶囊的物质基础及其体内分布情况，其中黄芪甲苷、丹酚酸B、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg3、毛蕊异黄酮苷和芥子碱等成分可能是治疗心力衰竭的重要成分，可为芪苈强心胶囊的质量控制和药效物质基础研究提供依据。

关键词：芪苈强心胶囊化学成分分析成分归属超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap-MS) 组织分布物质基础心力衰竭

基于网络毒理学结合网络药理学及实验验证探讨黄芪减雷公藤肾毒性机制

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中药药理与临床 2024年第9期 83-88页

作者：吴溪吴德玲魏良兵刘涛王紫柠孟楣高家荣安徽中医药大学第一附属医院国家中医药管理局中药制剂三级实验室安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室

目的:利用网络毒理学筛选雷公藤致肾毒性靶点，利用网络药理学与分子对接探讨黄芪减雷公藤肾毒性的作用机制，并进行动物实验验证。方法:在OMIM、PharmGKB、Gene Cards收集肾毒性相关靶点，在CTD检索雷公藤肾毒性靶点，Venny2.1.0获得... 详细信息

目的:利用网络毒理学筛选雷公藤致肾毒性靶点，利用网络药理学与分子对接探讨黄芪减雷公藤肾毒性的作用机制，并进行动物实验验证。方法:在OMIM、PharmGKB、Gene Cards收集肾毒性相关靶点，在CTD检索雷公藤肾毒性靶点，Venny2.1.0获得雷公藤肾毒性交集靶点;检索TCMSP、ETCM、以及文献补充收集黄芪成分，Swiss Target Prediction收集黄芪成分作用靶点，Venny2.1.0获得黄芪干预雷公藤肾毒性交集靶点;通过Cytoscape3.9.1构建网络图;利用Metascape对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集; Autodock4.2进行分子对接。根据预测结果进行动物实验验证。结果:收集黄芪化学成分46个、雷公藤致肾毒性靶点425个、黄芪干预雷公藤肾毒性潜在靶点83个。富集分析发现共同靶点主要参与细胞对化学应激的反应、细胞迁移、细胞运动等生物工程。KEGG信号通路排除广泛通路后主要富集于AGE-RAGE、HIF-1、C型凝集素受体、IL-17、PI3K/AKT等信号通路。PPI结果显示AKT1、IL6、VEGFA可能是黄芪干预雷公藤肾毒性的核心靶点，其中AKT1为最重要的核心靶点。“中药-成分-靶点-通路”结果显示异鼠李素、华良姜素、山柰酚、槲皮素、3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷可能是黄芪干预雷公藤肾毒性的核心成分。分子对接结果发现黄芪中以上核心成分与核心靶点结合后，均与AKT1结合最强。动物实验结果表明模型对照组大鼠出现急性肾损伤病理表现，血清SCr、BUN含量显著升高(P<0.01)，雷公藤水提物能够明显下调Pi3k、Akt mRNA表达，而配伍黄芪水提物后能够上调其表达。结论:黄芪中核心成分可能作用于AKT1核心靶点，通过调控PI3K/AKT通路发挥干预雷公藤肾毒性的作用。

关键词：黄芪雷公藤网络毒理学和网络药理学肾毒性机制

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基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS的佛耳草多成分定量分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 148-155页

作者：曹春艳张家祺赵振铎沈沁戚胜兰刘伟张立超上海中医药大学附属市中医医院上海200071 上海中医药大学附属曙光医院国家中医药管理局中药制剂三级实验室肝肾疾病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

目的:建立一种快速稳定的液质联用方法同时分析佛耳草中17种化学成分的含量,为完善佛耳草质量标准提供实验依据。方法:采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)对15批不同产地佛耳草中的17种成分进... 详细信息

目的:建立一种快速稳定的液质联用方法同时分析佛耳草中17种化学成分的含量,为完善佛耳草质量标准提供实验依据。方法:采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)对15批不同产地佛耳草中的17种成分进行定量分析,使用ACQUITY UPLC?BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱(0~1.0min,8%A;1.0~4.0min,8%~26%A;4.0~9.0min,26%A;9.0~14.0min,26%~34%A;14.0~14.5min,34%~45%A;14.5~15.0min,45%~60%A;15.0~18.0min,60%~90%A;18.0~19.0min,90%A;19.0~19.01min,90%~8%A;19.01~20.0 min,8%A),流速0.3 mL·min^(-1),柱温40℃,进样量2μL;运用电喷雾离子源,正、负离子模式全扫描,扫描范围m/z 100~1000。结果:所建立的测定方法经方法学验证良好,能够用于17种成分的同时定量。15批佛耳草样品中奎宁酸、没食子酸、原儿茶酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、异槲皮苷、1,5-O-二咖啡酰奎宁酸、大波斯菊苷、紫云英苷、异绿原酸C、木犀草素、芹菜素、高车前素的质量范围依次为39.60~179.12、0.17~0.84、2.41~8.38、4.33~31.50、13.63~180.38、2.43~14.75、1.16~19.68、0.49~5.63、55.77~445.16、0.23~10.26、62.04~530.10、1.11~18.01、11.36~90.61、12.22~65.98、7.22~69.84、3.37~45.65、0.30~2.59μg·g^(-1),其中有机酸类成分在佛耳草中含量比黄酮类成分更高,以1,5-O-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、奎宁酸、绿原酸含量较高,同时,贵州产地佛耳草样品中黄酮类成分含量高于江苏产地样品,江苏产地佛耳草样品中有机酸类成分含量则高于贵州产地样品。结论:建立的检测方法可用于佛耳草中17种成分含量的快速、准确测定,明确了佛耳草主要成分的含量范围,可为佛耳草质量控制标志物的选择提供参考。

关键词：佛耳草定量分析黄酮类有机酸类超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS) 质量控制质量标志物

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地高辛血药浓度和不良反应影响因素分析

中国临床药理学与治疗学 2024年第11期 1280-1287页

作者：肖雷曹灿刘加涛安徽医科大学第一附属医院药剂科/国家中医药管理局中药化学三级实验室

目的：探讨影响地高辛血药浓度的危险因素以及地高辛血药浓度水平与不良反应间的关系，为地高辛的安全、合理使用提供依据。方法：通过酶放大免疫测定技术监测地高辛血药浓度，并通过病案系统收集患者的基本资料、实验室指标、合并用药... 详细信息

目的：探讨影响地高辛血药浓度的危险因素以及地高辛血药浓度水平与不良反应间的关系，为地高辛的安全、合理使用提供依据。方法：通过酶放大免疫测定技术监测地高辛血药浓度，并通过病案系统收集患者的基本资料、实验室指标、合并用药和不良反应等资料。结果：55例患者中分别有12.73%、76.36%和10.91%的患者使用<0.125 mg/d、0.125 mg/d和0.25 mg/d的地高辛，血清药物浓度随剂量递增而增加。有11例（20%）患者出现不良反应，最常见的是心律失常，发生不良反应的患者血清地高辛浓度为（2.55±1.59）ng/mL，显著高于无不良反应组的（0.93±0.63）ng/mL(P<0.000 1)。血肌酐升高者地高辛血药浓度高于肌酐正常者。重度肾功能损害患者血清地高辛浓度显著高于肾功能正常患者（P<0.05），不良反应发生率也高于肾功能正常患者。未观察到合并用药对地高辛血药浓度的影响。结论：地高辛血药浓度个体差异大，其血药浓度受给药剂量、肾功能等的影响，血药浓度越高，不良反应发生率越高。因此，应加强地高辛血药浓度监测，提高个体化给药水平。

关键词：地高辛治疗药物监测血药浓度不良反应个体化治疗

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75例药物超敏反应综合征的特点及不同诊断标准的再评价

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中国医院药学杂志 2024年第18期44卷 2154-2158页

作者：孙继敏夏泉杨培培方会慧安徽医科大学第一附属医院药剂科/国家中医药管理局中药化学三级实验室

目的：分析药物超敏反应综合征（drug-induced hypersensitivity syndrome, DIHS）的临床特征并比较在不同的诊断标准下预后的差异，为临床早期诊断及安全、合理用药提供参考。方法：回顾性分析安徽医科大学第一附属医院2017-2021年期... 详细信息

目的：分析药物超敏反应综合征（drug-induced hypersensitivity syndrome, DIHS）的临床特征并比较在不同的诊断标准下预后的差异，为临床早期诊断及安全、合理用药提供参考。方法：回顾性分析安徽医科大学第一附属医院2017-2021年期间根据RegiSCAR标准诊断为DIHS的住院患者，总结临床特点，并应用J-SCAR标准和RegiSCAR评分，比较患者预后的差异。结果：75例DIHS患者中，致敏药物主要是抗癫痫药物（26例）、别嘌醇（17例）、抗感染药物（16例），潜伏期多在10～30 d(78.7%)。主要临床表现有皮疹（100%）、发热（94.7%）、肝脏损害（96.0%）以及嗜酸性粒细胞升高（49.3%），其中有10例使用别嘌醇的患者HLA-B*58:01基因检测阳性。治疗主要应用糖皮质激素或联合静注人免疫球蛋白，最终70例患者好转，5例死亡。有27例（36.0%）符合J-SCAR标准非典型的DIHS,63例（84.0%）符合RegiSCAR评分可能/很可能DIHS。患者RegiSCAR评分≥3分病死率明显高于<3分（P<0.05）。结论：DIHS病情重、易反复、死亡率高，有可疑用药史时，建议尽早进行RegiSCAR评分，及时发现危重症患者，降低病死率。

关键词：药物超敏反应综合征药源性疾病别嘌醇 RegiSCAR评分

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中药质量标志物(Q-Marker)的科学计量分析

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中草药 2024年第4期55卷 1297-1308页

作者：徐园园王明慧魏永利李峰辛义周山东中医药大学药学院山东济南250355 聊城市人民医院药学部山东聊城252000 山东中医药大学附属医院国家中医药管理局中药制剂三级实验室山东济南250011 山东中医药大学附属医院中药饮片分子鉴定与生物评价实验室山东济南250011

目的中药质量标志物(quality marker,Q-Marker)的确定是完善《中国药典》、促进中医药产业健康发展的关键内容,是中医药走向国际化和现代化需要迈出的重要一步,对Q-Marker的研究现状进行充分认识很有必要。方法采用科学计量分析方法,通... 详细信息

目的中药质量标志物(quality marker,Q-Marker)的确定是完善《中国药典》、促进中医药产业健康发展的关键内容,是中医药走向国际化和现代化需要迈出的重要一步,对Q-Marker的研究现状进行充分认识很有必要。方法采用科学计量分析方法,通过CNKI和Web of Science数据库检索中药Q-Marker相关文献,从论文的整体产出概况、研究国家和机构、研究热点及研究趋势等方面,借助VOSviewer、CiteSpace软件绘制可视化知识图谱。结果共纳入1030篇中、英文文献,分析可知中药Q-Marker研究正处于快速发展阶段,概念提出人刘昌孝院士的发文量最多,该研究领域在中药质量控制、药效物质基础、炮制机制研究、中药药理与安全性评价、中药资源种植等方向已取得大量研究成果。结论中药Q-Marker正处于研究的上升阶段,研究领域内各机构和团队之间的交流合作有待加强。通过全面、科学地总结中药Q-Marker研究领域的发展进程、研究近况,并探讨其研究热点趋势,可为中药Q-Marker的深入研究提供参考依据。

关键词：质量标志物中药科学计量分析 VOSviewer CiteSpace

基于肠道菌群探究一贯煎多糖的结构及改善小鼠肝纤维化作用

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中草药 2024年第4期55卷 1110-1123页

作者：魏霞王星星方勤勤徐莹秦路平刘平刘伟吴建军浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 上海中医药大学附属曙光医院药学部国家中医药管理局中药制剂三级实验室上海201203 上海中医药大学附属曙光医院肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

目的探究一贯煎多糖(YGJP-W)的基本结构特征以及其改善四氯化碳(CCl4)诱导小鼠肝纤维化的活性,分析YGJP-W抗肝纤维化活性与其调节肠道菌群结构变化关系。方法采用水提醇沉和弱阴离子交换色谱制备一贯煎多糖组分YGJP-W,依次采用苯酚-硫... 详细信息

目的探究一贯煎多糖(YGJP-W)的基本结构特征以及其改善四氯化碳(CCl4)诱导小鼠肝纤维化的活性,分析YGJP-W抗肝纤维化活性与其调节肠道菌群结构变化关系。方法采用水提醇沉和弱阴离子交换色谱制备一贯煎多糖组分YGJP-W,依次采用苯酚-硫酸法、间羟基联苯法、BCA蛋白定量分析试剂盒、高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)、FT-IR、离子色谱仪及扫描电镜法(scanning electron microscope,SEM)对一贯煎多糖的总糖含量、糖醛酸含量、蛋白含量、相对分子质量分布、官能团、单糖组成及形貌特征进行表征,采用CCl4诱导的小鼠模型,检测YGJP-W(50、100 mg/kg)干预3周后的小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及肝组织羟脯氨酸水平,并通过HE染色和天狼猩红染色观察肝脏组织学变化,评价YGJP-W改善肝纤维化活性;采用16S rDNA测序技术评价YGJP-W对小鼠肠道菌群的影响;采用抗生素联合YGJP-W干预,评价YGJP-W是否通过调节肠道菌群发挥药效作用。结果YGJP-W总得率为11.60%,总糖质量分数为92.48%,至少由相对分子质量为1.74×10^(5)和5.6×10^(3)的2种多糖组成,单糖组成包含半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖,其物质的量比为1.0∶2.8∶1.4∶1.6。YGJP-W干预3周后,能够显著改善CCl4引起的肝功能异常、肝组织病理损伤、胶原沉积和纤维化。YGJP-W在改善肝纤维化的同时能够引起小鼠肠道菌群结构变化,在门水平上,YGJP-W显著性降低拟杆菌门丰度[(57.4±14.6)%vs(79.3±8.1)%,P3,P3,P一贯煎抗肝纤维化的重要物质基础,YJGP-W发挥抗肝纤维化的作用可能与其调控肠道菌群相关。

关键词：一贯煎多糖肝纤维化 16S rRNA基因测序肠道菌群

基于CYP2C19基因多态性与治疗药物监测探讨伏立康唑与他克莫司的相互作用及不良反应

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安徽医科大学学报 2024年 1849-1855页

作者：陈雪利孙小姗宋帅苏涌夏泉刘加涛安徽医科大学第一附属医院药剂科国家中医药管理局中药化学三级实验室

目的根据CYP2C19基因多态性与血药浓度监测结果,分析伏立康唑(VRC)与他克莫司、环孢素等免疫抑制剂相互作用及CYP2C19基因多态性对二者相互作用和不良反应(ADR)的影响,为制定个体化VRC联合免疫抑制剂用药方案提供依据。方法采用二维... 详细信息

目的根据CYP2C19基因多态性与血药浓度监测结果,分析伏立康唑(VRC)与他克莫司、环孢素等免疫抑制剂相互作用及CYP2C19基因多态性对二者相互作用和不良反应(ADR)的影响,为制定个体化VRC联合免疫抑制剂用药方案提供依据。方法采用二维液相色谱法检测VRC血药浓度,焦磷酸测序法检测患者的CYP2C19基因多态性,并同时检测合并使用的免疫抑制剂浓度。分析CYP2C19基因多态性、VRC和免疫抑制剂血药浓度及ADR的关系。结果该研究共入组61例患者,CYP2C19*2和CYP2C19*3的突变率分别为54.1%(33/61)和9.84%(6/61)。CYP2C19快代谢、中间代谢和慢代谢者的VRC血药浓度分别为(4.44±3.46)、(3.62±3.02)和(10.05±1.46)μg/ml,差异有统计学意义(P制剂的患者VRC浓度低于未联合免疫抑制剂的患者[(3.81±3.48)μg/ml vs(5.84±3.71)μg/ml;P=0.032)],联合使用环孢素的患者血VRC浓度显著下降(P 制剂存在显著的相互作用。CYP2C19基因多态性联合治疗药物监测可提高他克莫司和VRC个体化用药水平,并有望最大限度地降低毒性和提高治疗效果。

关键词： CYP2C19 伏立康唑基因多态性免疫抑制剂治疗药物监测个体化治疗二维液相色谱

基于UPLC-Q-TRAP-MS分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后10个指标成分含量变化

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中华中医药学刊 2024年第5期42卷 190-195页

作者：吴溪许杨吴德玲赵想汪孰敏高家荣安徽中医药大学第一附属医院国家中医药管理局中药制剂三级实验室安徽合肥230031 安徽万邦医药科技股份有限公司安徽合肥230031 安徽中医药大学安徽合肥230031 皖南医学院安徽芜湖241002

目的分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后主要指标成分差异变化,并建立含量测定方法。方法采用Welch Ultimate XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,流速0.4 mL/min柱温40℃,梯度洗脱;质... 详细信息

目的分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后主要指标成分差异变化,并建立含量测定方法。方法采用Welch Ultimate XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,流速0.4 mL/min柱温40℃,梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测离子扫描模式(MRM)。分别对该药对单煎液、单煎合并液与合煎液中主要指标成分酸枣仁皂苷A、斯皮诺素、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、芦丁、槲皮素、山柰酚、山柰酚-3-O-云香糖苷进行含量测定,并分析药对配伍前后主要指标成分的含量变化差异。结果以上10种成分在一定浓度范围内均呈现良好的线性关系;精密度、重复性和稳定性RSD均良好;平均加样回收率在95.0%~102.1%,RSD为0.03%~3.7%。本次实验结果与前期试验认为酸枣仁与五味子在合煎后,主要指标成分降低保持一致性。结论多指标成分同时测定为该药对配伍质量全面控制提供新的方法并为其药效物质基础的深入研究提供依据。

关键词：酸枣仁-五味子药对 UPLC-Q-TRAP-MS 含量测定