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海马G蛋白偶联雌激素受体1参与癫痫调控的转录组学研究

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中国药理学通报 2024年第4期40卷 709-715页

作者：左娣郝世杰杨盼李苗任晓璠丁娜马文倩王盼盼王诗雨戎伟芳刘昆梅宁夏医科大学颅脑疾病重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学口腔医学院宁夏银川750004 上海交通大学基础医学院上海200025

目的本研究分别将野生型(WT)、Gper1敲低(Gper1-KD)大鼠海马组织进行转录组测序,探讨G蛋白偶联雌激素受体1(G-protein coupled estrogen receptor 1,GPER1)影响癫痫发病可能的信号通路和分子机制。方法海马组织进行RNA提取和cDNA文库构... 详细信息

目的本研究分别将野生型(WT)、Gper1敲低(Gper1-KD)大鼠海马组织进行转录组测序,探讨G蛋白偶联雌激素受体1(G-protein coupled estrogen receptor 1,GPER1)影响癫痫发病可能的信号通路和分子机制。方法海马组织进行RNA提取和cDNA文库构建,与NCBI数据库大鼠基因组及基因注释比对,通过FPKM值,筛选组别间差异表达基因(DEGs)。将DEGs进行GO富集、KEGG富集分析,构建蛋白互作网络,利用RT-qPCR法对关键DEGs进行验证。结果Gper1-KD组与WT组相比,筛选(Fold change>2且FDR<0.01)后,检测到DEGs 2253个,其中上调基因1380个,下调基因873个;GO结果显示,DEGs主要分布在淋巴细胞趋化性、细胞分泌、巨噬细胞趋化性、中性粒细胞趋化性、血管生成正向调控等生物过程;KEGG结果显示,DEGs相关分子信号通路主要有癌症信号通路、PI3K-Akt通路、癌症蛋白聚糖相关信号通路、细胞黏附相关通路、MAPK信号通路等;RT-qPCR结果表明,Mapk12、Pdpk1、Foxo3、Camk2d、Pik3cg等基因表达水平差异具有显著性。结论MAPK、TNF信号通路在GPER1影响癫痫发生中可能起关键作用,GABA能神经元和Pik3cg在GPER1影响癫痫易感性方面可能发挥重要作用。

关键词： GPER1 癫痫 DEGs GO富集 KEGG富集蛋白互作网络

SAPHO综合征累及骨及关节^(99)Tc^(m)-MDP SPECT/CT显像表现

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中国医学影像技术 2024年第3期40卷 420-424页

作者：曹小梅李佳苗李冬菊马小伟吴玉婷王蓉王莹杨吉琴宁夏医科大学总医院核医学科宁夏银川750000 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750000

目的观察^(99)Tc^(m)-MDP SPECT/CT显像所示滑膜炎、痤疮、脓疱病、骨肥厚及骨炎(SAPHO)综合征累及骨与关节表现。方法回顾性分析69例SAPHO综合征患者^(99)Tc^(m)-MDP SPECT/CT资料,以聚类分析法评估SAPHO综合征累及骨、关节模式。结果... 详细信息

目的观察^(99)Tc^(m)-MDP SPECT/CT显像所示滑膜炎、痤疮、脓疱病、骨肥厚及骨炎(SAPHO)综合征累及骨与关节表现。方法回顾性分析69例SAPHO综合征患者^(99)Tc^(m)-MDP SPECT/CT资料,以聚类分析法评估SAPHO综合征累及骨、关节模式。结果根据聚类分析,SAPHO所致骨与关节病变可分为肋骨型(n=19)、脊柱型(n=32)和胸锁关节型(n=18)。共于19例肋骨型检出145处病灶,包括60处肋骨病灶及95处其他病灶,半数以上呈低、中度摄取;半数呈溶骨性骨质破坏、边缘呈低度摄取;少数肋骨密度无明显改变。脊柱型多累及中轴骨(27/32,84.38%);椎体病变多累及一侧肋椎关节、呈连续性分布及低、中度摄取。胸锁关节型均累及胸锁关节,半数以上病灶位于胸锁关节并呈高度摄取,以“牛头征”和“半牛头征”为典型表现,多见骨质增生硬化、骨皮质肥厚。结论SAPHO综合征累及骨关节可分为肋骨型、脊柱型及胸锁关节型。全身骨显像缺乏“牛头征”或“半牛头征”等典型表现时,结合临床表现及SPECT/CT融合显像有助于诊断。

关键词： SAPHO综合征体层摄影术,发射型计算机,单光子

甘草酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞炎性因子及纤维化因子的影响

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解放军医学杂志 2024年第2期49卷 214-219页

作者：李媛王珍曹雪侯绍章宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学护理学院宁夏银川750004

目的探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞(SV40 MES13)炎性因子及纤维化因子的影响。方法将培养的小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES13)分为对照(NG)组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)及HG+GA组(30 mmol/L葡萄糖+200... 详细信息

目的探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞(SV40 MES13)炎性因子及纤维化因子的影响。方法将培养的小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES13)分为对照(NG)组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)及HG+GA组(30 mmol/L葡萄糖+200μmol/L GA)。采用Western blotting检测各组细胞炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-8及纤维化因子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平,免疫荧光检测各组IL-1β、TNF-α、α-SMA在细胞内的荧光表达强度,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组细胞培养上清中IL-1β、TNF-α、IL-6及IL-8的表达水平。结果Western blotting检测结果显示,与NG组比较,HG组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及α-SMA蛋白的表达水平明显升高(P系膜细胞的炎性因子及纤维化因子的表达均具有不同程度的抑制作用,可能在糖尿病肾病的预防方面发挥重要作用。

关键词：糖尿病肾病高糖甘草酸肾小球系膜细胞炎性因子纤维化

枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响

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中国药理学通报 2024年第3期40卷 490-498页

作者：田瑞莹邢莎莎虎娜马文欣刘畅刘自钰马彪李佳阳刘虎军白长财陈冬梅马会明宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学药学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室宁夏银川750004

目的探索枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响。方法将60只8周龄♂SD大鼠中的50只(空白组10只)颈部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg^(-1),持续8周建立亚急性衰老大鼠模型,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)观... 详细信息

目的探索枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响。方法将60只8周龄♂SD大鼠中的50只(空白组10只)颈部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg^(-1),持续8周建立亚急性衰老大鼠模型,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)观察衰老细胞,HE观察睾丸形态,ELISA检测血清中睾酮(testosterone,T)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平,免疫组化和Western blot检测衰老、氧化损伤和Nrf2/ARE通路相关因子表达。结果模型鉴定成功后,经枸杞籽油干预,改善了睾丸形态,下调β-gal和γH2AX表达;升高血清中SOD、GSH以及T、FSH水平及降低MDA和LH水平(P<0.05);上调睾丸组织Nrf2、GCLC、NQO1和SOD2蛋白表达水平(P<0.05)以及支持细胞中Nrf2核表达。结论枸杞籽油激活亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE信号通路表达,降低其氧化损伤,改善其激素水平。

关键词：枸杞籽油 Nrf2/ARE信号通路亚急性衰老氧化应激生殖激素睾丸

慢性阻塞性肺疾病CT定量参数改变及其与肺功能指标的关系

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中国医学影像技术 2024年第1期40卷 62-67页

作者：杨晓娜高婷周嘉鑫孙潇张怀瑢王一帆朱力宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院放射科宁夏银川750003

目的观察未经治疗COPD患者CT定量参数变化及其与肺功能指标的关系。方法回顾性分析99例未经治疗COPD患者资料;根据气流受限程度分为A组(GOLD 1级,轻度受限,36例)、B组(GOLD 2级,中度受限,37例)及C组(GOLD 3、4级,明显受限,26例);分析首... 详细信息

目的观察未经治疗COPD患者CT定量参数变化及其与肺功能指标的关系。方法回顾性分析99例未经治疗COPD患者资料;根据气流受限程度分为A组(GOLD 1级,轻度受限,36例)、B组(GOLD 2级,中度受限,37例)及C组(GOLD 3、4级,明显受限,26例);分析首检及随访胸部CT定量参数、肺功能指标的差异及其相关性。CT定量参数包括全肺容积、低衰减区百分比(LAA%)、肺血管总计数与肺表面积比值(N_(total)/LSA)、截面积_(<5 mm^(2))的肺血管计数与肺表面积比值(N_(<5 mm^(2))/LSA)、理论气道内周长为10 mm的管壁面积平方根(Pi10)、全肺气道壁体积、壁厚及壁面积百分比(WA%)等,而肺功能指标包括吸入支气管舒张剂后第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)及二者比值(FEV_(1)/FVC)和FEV_(1)率(FEV_(1)%)。结果相比首检各项指标,随访时各组FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC,以及N_(total)/LSA、N_(<5 mm^(2))/LSA均降低(P均<0.05),而LAA%、Pi10及全肺气道壁体积均升高(P均<0.05)。相比A组,B、C组LAA%降低而Pi10升高,且幅度随气流受限程度加重而增加(P均<0.05)。LAA%、Pi10及全肺气道壁体积与肺功能指标呈负相关(P均<0.05);N_(total)/LSA、N_(<5 mm^(2))/LSA与肺功能指标呈正相关(P均<0.05)。结论定量CT参数LAA%、N_(total)/LSA、N_(<5 mm^(2))/LSA、Pi10及全肺气道壁体积均与肺功能相关,能较好反映COPD气道及血管纵向变化。

关键词：肺疾病,慢性阻塞性体层摄影术,X线计算机呼吸功能试验纵向研究

miR-204-3P对二氧化硅粉尘所致大鼠矽肺纤维化的干预作用

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环境与职业医学 2024年第4期41卷 367-374页

作者：胡文选俞静陈芳皮洋阳焦子铭王发选宁夏医科大学公共卫生学院宁夏银川750004

[背景]长期暴露于游离二氧化硅颗粒会导致肺组织的纤维化,微小核糖核酸(miRNA)的异常表达可以影响纤维化的发生和进程。[目的]通过非暴露气管滴入二氧化硅粉尘悬液构建大鼠矽肺模型,通过尾静脉注射miR-204-3p过表达腺病毒观察其对二氧... 详细信息

[背景]长期暴露于游离二氧化硅颗粒会导致肺组织的纤维化,微小核糖核酸(miRNA)的异常表达可以影响纤维化的发生和进程。[目的]通过非暴露气管滴入二氧化硅粉尘悬液构建大鼠矽肺模型,通过尾静脉注射miR-204-3p过表达腺病毒观察其对二氧化硅粉尘所致矽肺纤维化的干预作用。[方法] 40只SD大鼠随机分为4组:对照组、矽肺模型组、miRNA-NC组和miR-204-3p干预组。在乙醚麻醉下,矽肺模型组、miRNA-NC组和miR-204-3p干预组的大鼠一次性气管非暴露注入游离二氧化硅粉尘悬液1 mL(50 mg·mL-1),而对照组则注入相同体积的生理盐水。染尘30 d时,miR-204-3p干预组尾静脉注射包装rno-mir-204的腺病毒载体过表达miR-204-3p,miRNA-NC组给予空病毒载体,并在正常饲养30 d后使用水合氯醛麻醉处死动物,取肺组织进行后续实验。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组大鼠肺组织中miR-204-3p的相对表达水平,苏木精伊红染色、马森染色、天狼星红染色进行病理学观察,免疫组织化学法检测纤连蛋白(Fibronectin)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)在各组大鼠肺组织中的表达情况,RTqPCR检测各组大鼠肺组织中纤维化标志物Fibronectin、波形蛋白(Vimentin)、Collagen Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)的mRNA相对表达水平,采用Western blot法检测各组大鼠肺组织中纤维化标志物Fibronectin、Vimentin、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的蛋白表达水平。[结果]肺组织大体解剖结果显示:正常肺组织呈粉红色,质地柔软表面光滑,而矽肺模型组织呈灰白色,质地较硬,表面可见瘢痕和灰白色的矽结节。与矽肺模型组相比miR-204-3p干预组肺组织的颜色变得红润,表面较为光滑,质地也变得柔软。染色结果显示:正常肺组织组织肺泡壁薄、肺泡内有少量的毛细血管、肺泡结构清晰完整;矽肺模型组肺组织中肺泡壁变厚、肺间隔部分断裂、肺泡结构缺损并伴随大量胶原纤维的沉积;miR-204-3p干预组的肺组织肺泡结构比较清晰且有少量胶原纤维的沉积。RT-qPCR结果显示:与对照组相比,矽肺模型组和miRNA-NC组肺组织中miR-204-3p的相对表达水平均降低(P <0.05),miR-204-3p干预组肺组织中miR-204-3p的相对表达水平明显升高(P <0.05)。免疫组织化学结果显示:与对照组相比矽肺模型组肺组织中Fibronectin和Collagen Ⅰ的表达水平均升高(P <0.05),与矽肺模型组相比,miR-204-3p干预组大鼠肺组织中Fibronectin和Collagen Ⅰ的相对表达水平明显降低(P <0.05)。RT-qPCR和Western blot结果显示:与对照组相比矽肺模型组大鼠肺组织中纤维化因子Fibronectin、Vimentin、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的基因相对表达水平和蛋白相对表达水平上升(P <0.05),与矽肺模型组相比,miR-204-3p干预组大鼠肺组织中纤维化因子Fibronectin、Vimentin、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的基因相对表达水平和蛋白相对表达水平均有所降低(P <0.05)。[结论]二氧化硅粉尘可引起大鼠肺组织纤维化,体内过表达miR-204-3P可以减轻二氧化硅粉尘引起的大鼠矽肺纤维化。

关键词：二氧化硅矽肺纤维化 miR-204-3p 干预

自动分割技术联合神经突方向离散度及密度成像观察海马硬化型内侧颞叶癫痫患者海马亚区体积与微结构改变

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中国医学影像技术 2024年第6期40卷 838-842页

作者：杨文蕊王旭聪李健闫梦楠李金芹张彦玲陈兵宁夏医科大学总医院放射科宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004

目的观察自动分割技术联合神经突方向离散度和密度成像(NODDI)显示海马硬化型内侧颞叶癫痫(mTLE-HS)患者海马亚区体积与微结构改变的价值。方法回顾性分析33例左侧mTLE-HS患者(mTLE-HS组)及35名健康成人(对照组)的头颅MRI,以FreeSurfer... 详细信息

目的观察自动分割技术联合神经突方向离散度和密度成像(NODDI)显示海马硬化型内侧颞叶癫痫(mTLE-HS)患者海马亚区体积与微结构改变的价值。方法回顾性分析33例左侧mTLE-HS患者(mTLE-HS组)及35名健康成人(对照组)的头颅MRI,以FreeSurfer软件自动分割海马亚区,测量阿蒙角(CA)1、CA2~3、CA4、颗粒细胞-齿状回(GC-DG)及下托体积,经后处理获取各亚区NODDI参数;比较组内及组间海马各亚区体积及NODDI参数,分析其间差异有统计学意义者与发病年龄及病程的相关性。结果mTLE-HS组左侧海马各亚区体积均低于对照组(P均<0.05)。mTLE-HS组左侧CA1及CA4亚区神经突密度指数(NDI)低于、而CA1亚区各向同性体积分数(fiso)均高于右侧(P均<0.05)。mTLE-HS组左侧CA1、CA2~3及CA4亚区ODI,CA1、CA4及GC-DG亚区NDI均低于对照组(P均<0.05),而左侧CA1、GC-DG及下托亚区fiso均高于对照组(P均<0.05)。mTLE-HS左侧海马各亚区体积均与发病年龄呈中度正相关(r=0.540~0.667,P均<0.001)而与病程呈低度负相关(r=-0.492~-0.386,P均<0.05);左侧海马CA4及GC-DG亚区NDI均与病程呈低度负相关(r=-0.418、-0.388,P均<0.05)。结论自动分割技术联合NODDI可显示mTLE-HS患者海马体积及微结构改变;NDI可能是评估mTLE-HS的较敏感的神经元进行性损伤生物学标志物。

关键词：癫痫颞叶磁共振成像海马微结构

4D flow心脏MRI测量左心室血流动力学参数的可靠性

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中国医学影像技术 2024年第2期40卷 221-225页

作者：马丽荣郭家璇李文玲马丽郑琰张怀瑢朱力宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院放射科宁夏银川750004

目的观察基于心脏MRI(CMRI)以局部区域性4D flow及全心4D flow技术测量左心室血流动力学参数的可靠性。方法前瞻性对31名健康体健者采用心脏超声、三腔心4D flow(基于左心室流入流出道层面)及全心4D flow CMRI测量左心室血流动力学参... 详细信息

目的观察基于心脏MRI(CMRI)以局部区域性4D flow及全心4D flow技术测量左心室血流动力学参数的可靠性。方法前瞻性对31名健康体健者采用心脏超声、三腔心4D flow(基于左心室流入流出道层面)及全心4D flow CMRI测量左心室血流动力学参数,以组内相关系数(ICC)评估其所测左心室血流动力学参数的一致性。结果心脏超声与三腔心4D flow CMRI所测收缩期主动脉瓣上/瓣下峰值流速、舒张期二尖瓣E峰流速、主动脉瓣上/瓣下压力及主动脉瓣跨瓣压差的一致性均良好(ICC均>0.75),所测舒张期二尖瓣A峰流速的一致性中等(ICC为0.718);心脏超声与全心4D flow CMRI所测收缩期主动脉瓣上/瓣下峰值流速、舒张期二尖瓣A峰流速及主动脉瓣上/瓣下压力的一致性均良好(ICC均>0.75),所测舒张期二尖瓣E峰流速及主动脉瓣跨瓣压差的一致性均为中等(ICC分别为0.600及0.628);三腔心4D flow CMRI与全心4D flow CMRI测量上述指标结果的一致性均良好(ICC均>0.75)。结论基于CMRI以局部区域性4D flow与全心4D flow技术测量左心室血流动力学参数可靠,与心脏超声测量结果具有良好一致性。

关键词：心室血流动力学磁共振成像

雷帕霉素对光诱导下视网膜色素上皮细胞自噬的影响

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海南医学院学报 2024年第9期30卷 658-664页

作者：师若迪徐晨俞洋宁夏医科大学中医学院宁夏银川750004

目的:探讨雷帕霉素对光诱导下视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)自噬的影响。方法:将自噬双标mRFP-eGFP-LC3质粒转染进ARPE-19细胞中获得稳定表达的转染细胞株,随后随机分为6 h对照组、6h模型组、6 h雷帕霉素组;12 h对照组、12 h模型组、12 ... 详细信息

目的:探讨雷帕霉素对光诱导下视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)自噬的影响。方法:将自噬双标mRFP-eGFP-LC3质粒转染进ARPE-19细胞中获得稳定表达的转染细胞株,随后随机分为6 h对照组、6h模型组、6 h雷帕霉素组;12 h对照组、12 h模型组、12 h雷帕霉素组和24 h对照组、24 h模型组、24 h雷帕霉素组。对照组避光培养,模型组受光照刺激;雷帕霉素组加入10μmol/L雷帕霉素后受光照刺激,光源采用LED冷光灯,在(16500±500)lx光照强度下照射细胞6、12、24 h。检测转染效率,MTT检测ARPE-19细胞存活率;激光共聚焦显微镜对自噬流变化进行定性分析,透射电镜观察细胞自噬形态;蛋白免疫印迹法对Beclin1、LC3、P62自噬相关蛋白表达量进行检测。结果:与对照组相比,模型组光照6、12、24 h后,细胞存活率显著下降(P<0.001);雷帕霉素组经光照后细胞存活率高于模型组(P<0.05)。光照6、12、24 h后模型组红色荧光斑点较对照组逐渐增多,绿色荧光斑点也随之增加,Merge图中从光照12 h开始黄色斑点数量增多明显。雷帕霉素组在光照6、12、24 h时红色荧光斑点较模型组加强,绿色荧光较模型组弱。透射电镜观察发现模型组胞内见较多的自噬泡,雷帕霉素组细胞见大量聚集分布自噬囊泡。蛋白免疫印迹结果发现光照6、12、24 h后,模型组中自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的相对表达水平均增加,P62蛋白表达较低。而采用雷帕霉素干预后,与模型组相比,雷帕霉素组在光照6 h时Beclin 1蛋白表达量差异不明显、在12、24h时Beclin 1蛋白表达量逐渐升高;LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值均高于模型组;P62蛋白表达量差异不显著。结论:光照可诱导ARPE-19细胞自噬现象的发生,且雷帕霉素能上调其自噬活性。

关键词：年龄相关性黄斑变性视网膜色素上皮细胞光损伤雷帕霉素自噬