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基于Wnt/β-catenin通路探究迷迭香酸对结直肠癌上皮-间质转化的抑制作用

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西安交通大学学报（医学版） 2024年第5期45卷 726-733页

作者：周锋沙德胜卢瑗瑗陈维如皋市人民医院普通外科江苏如皋226500 空军军医大学西京消化病医院消化内科陕西西安710032 如皋市人民医院肿瘤内科江苏如皋226500

目的探讨迷迭香酸(rosmarinic acid,RA)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)SW480细胞恶性行为的影响及机制。方法通过收集2019年1月至2020年12月在如皋市人民医院接受手术治疗的初诊未经治疗的CRC患者的肿瘤组织以及正常人的结肠组织,... 详细信息

目的探讨迷迭香酸(rosmarinic acid,RA)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)SW480细胞恶性行为的影响及机制。方法通过收集2019年1月至2020年12月在如皋市人民医院接受手术治疗的初诊未经治疗的CRC患者的肿瘤组织以及正常人的结肠组织,用免疫组化和Western blotting方法检测β-catenin的表达,分析与临床分期、预后和免疫浸润的关系。CCK-8检测10、15、20μmol/L的RA对SW480细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞的凋亡情况;Transwell和划痕实验分别检测细胞的侵袭和迁移能力变化;Western blotting检测凋亡、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及Wnt/β-catenin通路的相关蛋白表达情况。CRC SW480细胞系悬液皮下接种制作移植瘤小鼠模型,150 mL/kg RA溶液灌胃,观察RA对移植瘤生长的影响,ELISA检测了血清炎症因子变化。结果正常结肠组织中β-catenin的表达很低,而CRC组织中β-catenin的表达明显增高。在CRC患者β-catenin高表达组中,肿瘤大于5 cm的患者数显著高于低表达组,而患者总生存期却显著小于低表达组(P<0.05)。各浓度RA组细胞增殖显著抑制,且呈浓度依赖性降低(P<0.05)。移植瘤小鼠模型中,RA处理组凋亡蛋白Bax和Bad表达较对照组显著增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著减少(P<0.05)。同时可见SW480细胞的侵袭和迁移能力显著被抑制(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著增加,Snail、N-cadherin和Vimentin表达显著减少(P<0.05),而且Axin和GSK-3β表达增加,β-catenin表达减少(P<0.05)。结论RA可能通过干预Wnt/β-catenin通路介导的EMT抑制SW480的生物学活性。

关键词：迷迭香酸(RA) 结直肠癌(CRC) Wnt/β-catenin通路上皮-间质转化(EMT)

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槲皮素提高人结直肠癌细胞SW480和SW620对顺铂的敏感性

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西安交通大学学报(医学版) 2024年

作者：周锋沙德胜卢瑗瑗陈维南通大学附属如皋医院/如皋市人民医院普通外科空军军医大学西京消化病医院消化内科南通大学附属如皋医院/如皋市人民医院肿瘤内科

目的本研究旨在探究槲皮素对顺铂耐药人结直肠癌（colorectalcancer，CRC）细胞SW480和SW620的抑制作用及其可能的机制。方法培养SW480和SW620细胞的顺铂耐药亚型，并用MTT法测定槲皮素对细胞增殖和化疗敏感性的影响。流式细胞术用于... 详细信息

目的本研究旨在探究槲皮素对顺铂耐药人结直肠癌（colorectalcancer，CRC）细胞SW480和SW620的抑制作用及其可能的机制。方法培养SW480和SW620细胞的顺铂耐药亚型，并用MTT法测定槲皮素对细胞增殖和化疗敏感性的影响。流式细胞术用于检测细胞凋亡，蛋白质印迹法用于检测相关蛋白质的表达。结果MTT实验显示，80μmol/L和160μmol/L浓度的槲皮素显著抑制了SW480和SW620细胞的增殖。流式细胞术结果表明，顺铂联合槲皮素组的细胞凋亡率明显高于其他3组。蛋白质印迹法结果显示，顺铂联合槲皮素组的裂解型半胱天冬酶-3（cleaved-caspase-3）和半胱天冬酶-9（caspase-9）表达显著增加。化疗药物敏感性检测结果表明，耐药细胞的IC50升高，而在槲皮素给药后显著下降（P均＜0.05）。结论本研究明确了槲皮素能够提高人CRC细胞对顺铂的敏感性。这种效应可能与其影响细胞增殖、凋亡和自噬等方面的作用机制有关。

关键词：槲皮素 SW480细胞 SW620细胞结直肠癌顺铂

双环醇联合益生菌治疗非酒精性脂肪肝的效果及对脂代谢、肝功能的影响

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肝脏 2024年第2期29卷 223-226页

作者：许映红凌大军吴元祥刘建如皋市中医院药剂科江苏226500 如皋市中医院消化内科江苏226500

目的观察双环醇联合益生菌治疗非酒精性脂肪肝(NAFLD)的效果及其对脂代谢、肝功能的影响。方法2019年6月至2022年6月我院收治NAFLD患者102例,随机分为观察组和对照组,各51例,对照组给予双环醇片,观察组给予双环醇片和双歧杆菌三联活菌... 详细信息

目的观察双环醇联合益生菌治疗非酒精性脂肪肝(NAFLD)的效果及其对脂代谢、肝功能的影响。方法2019年6月至2022年6月我院收治NAFLD患者102例,随机分为观察组和对照组,各51例,对照组给予双环醇片,观察组给予双环醇片和双歧杆菌三联活菌胶囊。检测治疗前后肝功能和脂代谢指标;比较两组临床疗效和安全性。结果观察组和对照组治疗总有效率分别为90.2%(46/51)、74.5%(38/51)(P0.05)。结论采用双环醇联合益生菌治疗NAFLD患者有利于缓解肠道菌群紊乱,调控血脂水平,改善患者的肝功能,安全性较好。

关键词：非酒精性脂肪肝双环醇益生菌脂代谢肝功能

双歧杆菌四联活菌辅助治疗对慢性乙肝肝硬化患者血清炎症因子和肠道菌群的影响

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中国微生态学杂志 2024年第8期36卷 938-942页

作者：宋晓伟赵小丽嵊州市中医院药剂科浙江312400 嵊州市中医院消化内科浙江312400

目的探究双歧杆菌四联活菌辅助治疗对慢性乙肝肝硬化患者血清炎症因子及肠道菌群的影响,为该类患者的治疗提供参考。方法选取2022年1月至2023年1月我院收治的慢性乙肝肝硬化患者100例,采用信封抽签法分为对照组(常规治疗)和观察组(常规... 详细信息

目的探究双歧杆菌四联活菌辅助治疗对慢性乙肝肝硬化患者血清炎症因子及肠道菌群的影响,为该类患者的治疗提供参考。方法选取2022年1月至2023年1月我院收治的慢性乙肝肝硬化患者100例,采用信封抽签法分为对照组(常规治疗)和观察组(常规治疗+双歧杆菌四联活菌片),各50例。比较两组患者肠道菌群数量、血清炎症因子水平、肝功能和肝纤维化指标水平、不良反应发生情况。结果观察组患者治疗后肠道厌氧菌和需氧菌数量分别下降和上升,且观察组患者菌群数量下降和上升幅度均超过对照组(均P0.05)。结论双歧杆菌四联活菌辅助治疗能够有效降低慢性乙肝肝硬化患者血清炎症因子水平,减轻机体炎症反应,改善肠道菌群情况。

关键词：益生菌慢性乙肝肝硬化血清炎症因子肠道菌群

番泻苷A对胆囊癌细胞恶性生物学行为的影响及相关机制

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中华肝胆外科杂志 2024年第7期30卷 537-543页

作者：李姗姗贾红玉闫丽丽徐梅梅秦皇岛市第一医院消化内科秦皇岛066000

目的探讨番泻苷A(SA)对胆囊癌细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解等恶性生物学行为的影响,并对其相关机制进行分析。方法体外培养人胆囊癌NOZ和SGC-996细胞,并分别将其分为空白对照组、SA低剂量组(25μmol/L)、SA中剂量组(50μmol/L)、SA高... 详细信息

目的探讨番泻苷A(SA)对胆囊癌细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解等恶性生物学行为的影响,并对其相关机制进行分析。方法体外培养人胆囊癌NOZ和SGC-996细胞,并分别将其分为空白对照组、SA低剂量组(25μmol/L)、SA中剂量组(50μmol/L)、SA高剂量组(100μmol/L)、H-SA+磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路激活剂(740Y-P)组。利用细胞计数实验、Transwell、流式细胞术和糖酵解试剂盒检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡和糖酵解能力;蛋白免疫印迹实验检测各组细胞中PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT的蛋白水平。使用NOZ细胞构建裸鼠成瘤模型,分别用生理盐水和10 mg/kg SA腹腔注射,比较两组小鼠的成瘤能力,免疫组化检测肿瘤中Ki-67的表达水平。结果与空白对照组细胞相比,各SA处理组细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解能力降低,而凋亡水平显著上调,差异均有统计学意义(均P<0.05)。SA处理胆囊癌细胞使p-PI3K和p-AKT水平明显降低;而740Y-P激活PI3K/AKT通路后细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解能力上调,凋亡水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。体内成瘤实验标明,第28天时与空白对照组相比,SA处理组小鼠的肿瘤体积降低[(1051.32±130.29)mm 3比(575.07±170.54)mm 3,P=0.0003],肿瘤重量减轻[(1.04±0.24)g比(0.58±0.13)g,P=0.0019],Ki-67表达平均光密度值降低[(77.00±7.00)比(33.33±7.51),P=0.0018]。结论SA通过调控PI3K/AKT通路抑制胆囊癌细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解等恶性生物学行为。

关键词：胆囊肿瘤番泻苷A 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路糖酵解

麦冬皂苷B调节Rho A/ROCK1信号通路对胃荷瘤大鼠肿瘤生长的抑制作用

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陆军军医大学学报 2024年第19期46卷 2180-2187页

作者：徐明星李子银姜红梅武汉市第三医院消化内科武汉430074

目的探讨麦冬皂苷B(ophiopogonin B,OP-B)对胃荷瘤大鼠肿瘤生长的影响及其作用机制。方法将66只体质量为180~200 g的6周龄SPF级SD大鼠(雌雄各半)按随机数字表法分为模型组,OP-B低、中、高剂量组,激活剂组,每组10只。采用原位移植Walke... 详细信息

目的探讨麦冬皂苷B(ophiopogonin B,OP-B)对胃荷瘤大鼠肿瘤生长的影响及其作用机制。方法将66只体质量为180~200 g的6周龄SPF级SD大鼠(雌雄各半)按随机数字表法分为模型组,OP-B低、中、高剂量组,激活剂组,每组10只。采用原位移植Walker-256肿瘤组织建立胃荷瘤模型,OP-B低、中、高剂量组大鼠分别灌胃17.5、35、70 mg/kg的OP-B并腹腔注射等量生理盐水,激活剂组灌胃70 mg/kg的OP-B并腹腔注射1 mg/kg的Rho A/ROCK1信号通路激活剂溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid, LPA),模型组灌胃和腹腔注射等量的生理盐水;记录移植瘤质量及体积,计算抑瘤率;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察肿瘤组织形态;原位末端转移酶标记技术(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling, TUNEL)染色检测肿瘤组织细胞凋亡;免疫组织化学染色检测肿瘤组织细胞核增殖抗原67(proliferating cell nuclear antigen, Ki-67)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Cleaved Caspase-3)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)法检测Ras同源基因家族蛋白A(Ras homologous gene family member A,Rho A)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(Rho-associated coiled-coil forming protein kinase1,ROCK1)的表达;Western blot检测Rho A、ROCK1蛋白表达。结果与模型组比较,OP-B低、中、高剂量组肿瘤质量和体积、Ki-67阳性率及Rho A、ROCK1 mRNA和蛋白表达显著降低,抑瘤率、肿瘤细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3阳性率显著升高(P<0.05);与OP-B高剂量组比较,激活剂组肿瘤质量和体积、Ki-67阳性率及Rho A、ROCK1 mRNA和蛋白表达显著升高,抑瘤率、肿瘤细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3阳性率显著降低(P<0.05)。结论 OP-B可能通过抑制Rho A/ROCK1信号通路的激活,抑制胃荷瘤大鼠肿瘤生长。

关键词：胃癌麦冬皂苷B Ras同源基因家族蛋白A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1信号通路增殖凋亡

艾司氯胺酮对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制实验研究

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陕西医学杂志 2024年第8期53卷 1041-1046,1050页

作者：吴洁田鑫越秦耐宇朱爱玲孙佳琦朱颖静如皋市人民医院消化内科江苏如皋226500

目的:探讨艾司氯胺酮对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及可能的作用机制。方法:收集26例肝癌患者的癌组织和癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝癌组织和细胞微小RNA(miR)-449b-5p和转化生长因子-β诱导因子同源盒2(TGIF2... 详细信息

目的:探讨艾司氯胺酮对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及可能的作用机制。方法:收集26例肝癌患者的癌组织和癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝癌组织和细胞微小RNA(miR)-449b-5p和转化生长因子-β诱导因子同源盒2(TGIF2)mRNA表达。选取上述基因变化最显著的细胞进行后续实验。将肝癌SK-Hep-1细胞分为对照组(正常培养)、艾司氯胺酮-L组(1 mmol/L艾司氯胺酮处理)、艾司氯胺酮-H组(2 mmol/L艾司氯胺酮处理)、艾司氯胺酮-H+inhibitor NC组(转染inhibitor NC+2 mmol/L艾司氯胺酮处理)、艾司氯胺酮-H+miR-449b-5p inhibitor组(转染miR-449b-5p inhibitor+2 mmol/L艾司氯胺酮处理)。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖。划痕实验检测细胞迁移能力。Transwell实验检测细胞侵袭能力。流式细胞术检测细胞凋亡情况。Western blot检测细胞中肿瘤增殖细胞核抗原(Ki-67)、半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、TGIF2蛋白表达量。双荧光素酶报告基因实验验证miR-449b-5p和TGIF2的靶向关系。结果:肝癌组织和细胞TGIF2 mRNA表达水平升高,miR-449b-5p表达水平降低(均P<0.05)。与对照组比较,艾司氯胺酮-L组、艾司氯胺酮-H组以及艾司氯胺酮-H+inhibitor NC组SK-Hep-1细胞中miR-449b-5p表达水平、细胞凋亡率及Cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,TGIF2 mRNA表达水平、OD_(450)值(24、48 h)、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数及Ki-67、MMP-9、VEGF-A、TGIF2蛋白表达水平降低(均P<0.05)。与艾司氯胺酮-H+inhibitor NC组比较,艾司氯胺酮-H+miR-449b-5p inhibitor组SK-Hep-1细胞miR-449b-5p表达水平、细胞凋亡率及Cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,TGIF2 mRNA表达水平、OD_(450)值(24、48 h)、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数及Ki-67、MMP-9、VEGF-A、TGIF2蛋白表达水平升高(均P<0.05)。miR-449b-5p mimic+TGIF2-WT组荧光素酶活性低于miR-NC+TGIF2-WT组(P<0.05)。结论:艾司氯胺酮通过上调miR-449b-5p/TGIF2轴抑制肝癌细胞的恶性生物学行为。

关键词：肝癌艾司氯胺酮微小RNA-449b-5p 转化生长因子-β诱导因子同源盒2 细胞增殖细胞迁移细胞侵袭细胞凋亡

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国际消化病杂志 2024年第2期44卷 113-118页

作者：袁宇婷吴小勤薛全胜如皋市人民医院消化内科 226500

目的探讨线粒体相关凋亡诱导因子2(AIFM2)和线粒体融合素2(MFN2)与代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)患者胰岛素抵抗及进展性肝纤维化的相关性。方法选择2020年12月至2022年12月在如皋市人民医院就诊的120例MAFLD患者作为研究对象(设为观察组)... 详细信息

目的探讨线粒体相关凋亡诱导因子2(AIFM2)和线粒体融合素2(MFN2)与代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)患者胰岛素抵抗及进展性肝纤维化的相关性。方法选择2020年12月至2022年12月在如皋市人民医院就诊的120例MAFLD患者作为研究对象(设为观察组),另选择同期于该院体检的120名健康体检者纳入研究(设为对照组)。收集2组的一般资料,采集空腹静脉血,测定空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)水平,以及血清AIFM2和MFN2表达水平。应用非酒精性脂肪性肝病纤维化评分(NFS)评估受试者的肝纤维化程度,将NFS≥0.676者纳入进展性肝纤维化组(n=31),将NFS<0.676者纳入非进展性肝纤维化组(n=89)。采用Pearson相关性分析探讨MAFLD患者的血清AIFM2和MFN2表达水平与胰岛素抵抗及肝纤维化指标的关系。采用多因素logistic回归模型分析MAFLD患者发生进展性肝纤维化的危险因素。结果与对照组相比,观察组的平均BMI和平均腰臀比(WHR)均较大,血清AIFM2和MFN2表达水平均较低,血清CⅣ、PCⅢ、LN和HA水平均较高,FPG、FINS水平及稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均较高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,MAFLD患者的血清AIFM2和MFN2表达水平均与HOMA-IR呈显著负相关(P均<0.05),血清AIFM2和MFN2表达水平均与血清CⅣ、PCⅢ、LN和HA水平呈显著负相关(P均<0.05)。进展性肝纤维化组的血清AIFM2和MFN2表达水平均显著低于非进展性肝纤维化组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素logistic回归模型分析结果显示,WHR、BMI、HOMA-IR、血清AIFM2和MFN2均是MAFLD患者发生进展性肝纤维化的独立危险因素(P均<0.05)。结论MAFLD患者的血清AIFM2和MFN2均呈低表达,且两者均与胰岛素抵抗和进展性肝纤维化密切相关,监测上述指标可为临床诊疗提供有效信息,对改善预后及预防并发症均具有重要意义。

关键词：代谢相关脂肪性肝病线粒体相关凋亡因子2 线粒体融合素2 胰岛素抵抗进展性肝纤维化

长链非编码RNA LINC00261通过调控miR-324-3p/EST1促进胃癌进展

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中国免疫学杂志 2024年第10期40卷 2101-2107页

作者：谢锐尹源滕俊梁红亮三六三医院消化内科

目的：探讨长链非编码RNA LINC00261通过干扰miR-324-3p表达调控E26转录因子1(EST1)水平促进胃癌（GC）的进展。方法：收集2018年6月至2020年10月在三六三医院接受手术治疗的GC患者（n=80）的癌组织及其相应癌旁正常组织作为研究样本，q... 详细信息

目的：探讨长链非编码RNA LINC00261通过干扰miR-324-3p表达调控E26转录因子1(EST1)水平促进胃癌（GC）的进展。方法：收集2018年6月至2020年10月在三六三医院接受手术治疗的GC患者（n=80）的癌组织及其相应癌旁正常组织作为研究样本，qRT-PCR检测LINC00261和miR-324-3p表达水平。分析LINC00261与临床病理参数之间的相关性。将siRNA(si-LINC00261)、miRNA模拟物（miR-324-3p）和miRNA抑制剂（miR-324-3p in）及其相应对照转染至MGC-803和SGC-7901细胞；克隆形成试验评估细胞增殖能力；Transwell试验评估细胞迁移和侵袭能力；Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和ETS1蛋白表达水平；肿瘤异种移植实验检测LINC00261在体内的肿瘤形成能力；荧光素酶报告、RNA沉淀分析LINC00261、miR-324-3p及EST1之间的作用关系。结果：与癌旁组织相比，GC组织中LINC00261表达明显上调，差异具有统计学意义（P<0.05）。LINC00261表达与患者TNM分期、组织分化程度淋巴结转移及微血管侵犯有关（P<0.05）；通过数据库预测、萤火虫荧光素酶实验及RNA免疫沉淀结果显示，LINC00261和miR-324-3p存在靶向作用关系；GC组织中miR-324-3p水平明显低于癌旁正常组织（P<0.05）;miR-324-3p水平与LINC00261表达呈负相关（P<0.05）；与in NC+si-NC组相比，in NC+si-LINC00261组细胞增殖、迁移和侵袭能力及N-cadherin表达明显被抑制（P<0.05）,E-cadherin表达明显升高（P<0.05）；与in NC+si-LINC00261组相比，siLINC00261+miR-324-3p in组细胞增殖、迁移和侵袭能力及N-cadherin表达明显提高（P<0.05）,E-cadherin表达明显降低（P<0.05）,Targetscan预测及萤火虫荧光素酶实验表明ETS1是miR-324-3p的下游结合位点；转染miR-324-3p后，ETS1蛋白水平显著下调（P<0.05），但转染miR-324-3p in后，ETS1蛋白水平显著上调（P<0.05）；在GC组织中ETS1表达明显高于癌旁正常组织（P<0.05）;miR-324-3p水平与ETS1呈负相关（P<0.05）；转染si-LINC00261的MGC-803细胞产生的肿瘤重量低于转染siNC的MGC-803细胞产生的肿瘤重量（P<0.05），在si-LINC00261来源的肿瘤中，ETS1的蛋白水平低于si-NC来源的肿瘤（P<0.05）。结论：LINC00261在GC组织中高表达，其可能通过调控miR-324-3p影响EST1表达促进GC进展。

关键词：胃癌侵袭增殖长链非编码RNA LINC00261 E26转录因子1