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CTX-M-14和CTX-M-24编码基因的检测及其功能表达

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中华医学杂志 2004年第17期84卷 1454-1459页

作者：熊自忠朱德妹汪复张婴元复旦大学华山医院抗生素研究所上海200040

目的　了解上海华山医院临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产生的超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)的基因型及其流行情况。方法　双纸片法和美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)表型确定实验检测产ESBL菌株并对产ESBL菌株进行接合实验 ;... 详细信息

目的　了解上海华山医院临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产生的超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)的基因型及其流行情况。方法　双纸片法和美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)表型确定实验检测产ESBL菌株并对产ESBL菌株进行接合实验 ;提取产ESBL菌株及其转移接合子中的质粒 ,进行电泳分析 ;采用琼脂稀释法 ,测定各种菌株对多种抗菌药物的敏感性 ;TEM、SHV、CTX M 1组、CTX M 13组、Toho 1组通用引物检测产ESBL菌株及其转移接合子 ;编码框以外设计引物、聚合酶链反应 (PCR)扩增转移接合子中的CTX M 13组全编码基因 ,克隆入 pHSG398质粒、表达 ,并对PCR产物进行测序 ,分析其基因型 ;对这些产ESBL菌株进行脉冲场电泳 (PFGE)检测。结果　产ESBL菌株对多种 β 内酰胺类和非 β 内酰胺类抗生素耐药 ;产ESBL菌株可通过接合转移方式传递其耐药性 ,转移频率多为 10 -4～ 10 -5,多数非 β 内酰胺类抗生素的耐药性可以和ESBL耐药性发生共转移 ,琼脂糖电泳显示接合子从供体菌得到了一个 >2 3 1kb的质粒 ;转移接合子中仅CTX M 13组通用引物检测为阳性 ;4株转移接合子中CTX M 13组全编码基因序列与CTX M 14编码基因序列的同源性为 10 0 % ,其余 6株转移接合子中CTX M 13组全编码基因序列与CTX M 2

关键词： CTX-M-14 CTX-M-24 编码基因功能表达 β内酰胺酶类头孢噻肟大肠杆菌克雷伯氏菌

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临床质谱实验室发展中的机遇与挑战

中华检验医学杂志 2024年第3期47卷 216-223页

作者：邱玲张钧周洲周伟燕刘华芬马晓丽潘柏申中国医学科学院、北京协和医院检验科北京100730 浙江大学医学院附属邵逸夫医院检验科杭州310016 国家心血管病中心、中国医学科学院、阜外医院实验诊断中心北京100037 北京医院、国家老年医学中心、国家卫生健康委临床检验中心、中国医学科学院老年医学研究院北京100730 杭州凯莱谱精准医疗检测技术有限公司杭州310000 复旦大学附属中山医院检验科上海200032

质谱技术凭借其高灵敏度、高特异性、可同时检测多个化合物等优势,备受临床检验专家的关注并广泛应用于临床检验实验室。近年来,质谱技术在病原微生物鉴定,微量元素及重金属、小分子激素、维生素、氨基酸、多肽和蛋白质的检测,治疗药物... 详细信息

质谱技术凭借其高灵敏度、高特异性、可同时检测多个化合物等优势,备受临床检验专家的关注并广泛应用于临床检验实验室。近年来,质谱技术在病原微生物鉴定,微量元素及重金属、小分子激素、维生素、氨基酸、多肽和蛋白质的检测,治疗药物监测以及中毒物质筛查等领域不断取得重要成果。为深入探讨质谱技术进入临床实验室所带来的机遇和挑战,中华检验医学杂志特邀来自检验医学领域的知名专家,围绕质谱技术在临床实验室中的定位、质谱技术对临床实验室的发展和改善、质谱检测结果解读面临的挑战、临床质谱实验室运营管理面临的挑战以及临床质谱实验室改进方法等议题发表他们的经验和看法。专家们一致认为,质谱技术的引入为临床实验室和科研带来了新的发展方向和机遇,同时也面临样本前处理难度大、质谱技术成本高且操作复杂、数据处理和解读复杂、标准和规范的缺乏及质谱收费问题等一系列挑战。

关键词：质谱分析法临床实验室技术

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细菌耐药性监测数据处理应注意的问题

中国感染与化疗杂志 2016年第5期16卷 667-672页

作者：胡付品朱德妹复旦大学附属华山医院抗生素研究所上海200040

我国的细菌耐药性监测工作已经进行了20多年。1983年世界卫生组织（WHO）细菌耐药监测协作组专家O＇BRIEN和STELLING教授来中国介绍如何开展细菌耐药性监测工作,并免费提供细菌耐药监测软件WHONET 3.0（现已升级至5.6）系统。1988年WHO... 详细信息

我国的细菌耐药性监测工作已经进行了20多年。1983年世界卫生组织（WHO）细菌耐药监测协作组专家O＇BRIEN和STELLING教授来中国介绍如何开展细菌耐药性监测工作,并免费提供细菌耐药监测软件WHONET 3.0（现已升级至5.6）系统。1988年WHO西太区办在上海和北京建立了2个细菌耐药性监测中心,分别是北京的卫生部中国药品生物制品检定所和上海的复旦大学附属华山医院抗生素研究所。

关键词：细菌耐药性监测药敏试验规范化存在问题

脾脏联合胰尾切除在上皮性卵巢癌肿瘤细胞减灭术中的临床观察

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复旦学报（医学版） 2024年第1期51卷 50-55页

作者：刘艺璇闫倩倩陈雨莲周颖江榕复旦大学附属中山医院妇科肿瘤科上海200032 中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)妇产科/公共科研平台合肥230001

目的探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)肿瘤细胞减灭术中行脾脏联合胰尾切除的安全性和疗效。方法选取2015年12月至2022年9月在复旦大学附属中山医院和中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)EOC肿瘤细胞减灭术中... 详细信息

目的探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)肿瘤细胞减灭术中行脾脏联合胰尾切除的安全性和疗效。方法选取2015年12月至2022年9月在复旦大学附属中山医院和中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)EOC肿瘤细胞减灭术中接受脾脏联合胰尾切除的患者共17例,回顾性分析患者的临床特点、手术信息、术后并发症及生存随访。结果17例患者包括13例初治和4例复发EOC患者。术前影像提示脾门转移的患者有11例(64.7%),术中发现6例脾门及胰尾肿瘤转移。术后脾窝放置负压引流管,监测引流液淀粉酶,引流管移除中位时间为8(3~12)天。术后4例患者发生生化漏(A级胰瘘),3例发生B级胰瘘,无C级胰瘘。2例行经皮穿刺引流后好转,其余持续引流、生长抑素、抗生素治疗后好转,无围手术期死亡,术后恢复至化疗中位时间为17.5(13~37)天。中位随访时间为14(4~64)个月,中位无进展生存期为10(5~32)个月。结论脾脏联合胰尾切除术在EOC肿瘤细胞减灭术中可行,通过适当的防治措施,术后并发症胰瘘可控。

关键词：上皮性卵巢癌(EOC) 肿瘤细胞减灭术胰尾切除脾脏切除

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左氧氟沙星药代动力学/药效学研究

中华医学杂志 2005年第27期85卷 1926-1932页

作者：张菁郁继诚施耀国周乐叶信予朱德妹张婴元复旦大学华山医院抗生素研究所上海200040

目的评价左氧氟沙星的治疗方案。方法给12名健康志愿者单剂静脉滴注200、300和500mg左氧氟沙星后测定其血、尿药物浓度,计算药代动力学(PK)参数。体外药效学(PD)研究系测定左氧氟沙星对近期823株临床分离菌的药敏参数[最低抑菌浓度(MIC... 详细信息

目的评价左氧氟沙星的治疗方案。方法给12名健康志愿者单剂静脉滴注200、300和500mg左氧氟沙星后测定其血、尿药物浓度,计算药代动力学(PK)参数。体外药效学(PD)研究系测定左氧氟沙星对近期823株临床分离菌的药敏参数[最低抑菌浓度(MIC)],并与其他相关抗菌药进行比较。根据上述研究结果计算左氧氟沙星血药峰浓度(Cmax)/MIC和血药浓度时间曲线下面积(AUC)/MIC的PK/PD参数,据此推荐左氧氟沙星用于不同病原菌感染的治疗方案。结果临床PK研究结果显示单剂静脉滴注左氧氟沙星200、300和500mg后,Cmax分别为3.4mg/L±0.8mg/L、4.8mg/L±1.4mg/L和7.6mg/L±1.1mg/L,AUC0∞分别为14.4mg·h/L±2.5mg·h/L、21.9mg·h/L±4.5mg·h/L和38.3mg·h/L±4.9mg·h/L,消除半衰期(T1/2β)分别为6.2h±0.4h、6.4h±0.9h和6.5h±0.6h,给药后24h内自尿中累积排出给药量的69%±5%、69%±6%和65%±4%。体外PD研究结果显示左氧氟沙星对溶血性链球菌、卡他莫拉菌具有高度抗菌活性,对肺炎链球菌(包括青霉素不敏感株)、流感嗜血杆菌、甲氧西林敏感金葡菌、肺炎克雷伯菌、嗜麦芽窄食单胞菌具有良好抗菌作用,对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌亦具有较好抗菌作用,甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)、肠球菌则对左氧氟沙星大多呈现耐药,而大肠埃希菌则半数以上对其呈现耐药。PK/PD参数计算结果显示以1次/d给药方案为宜。左氧氟沙星每日200mg治疗卡他莫拉菌感染预期可获良好效果,每日300mg治疗溶血性链球菌感染预期有效。治疗肺炎链球菌、流感嗜血杆菌所致呼吸道感染则需每日500mg预期可达良好疗效,而治疗对该药呈现敏感的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌所致呼吸道、尿路感染则至少每日500mg,而对MRSA、肠球菌感染,PK/PD参数预示疗效不佳。结论以PK/PD原理制定的左氧氟沙星给药方案用于临床可望获得良好的疗效。

关键词：左氧氟沙星药代动力学药效学研究嗜麦芽窄食单胞菌肺炎克雷伯菌甲氧西林耐药金葡菌 PK/PD 溶血性链球菌感染流感嗜血杆菌铜绿假单胞菌卡他莫拉菌感染肺炎链球菌大肠埃希菌最低抑菌浓度甲氧西林敏感治疗方案

类风湿关节炎达标治疗人群临床特点及风险因素评估预测模型建立与验证

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中国中西医结合杂志 2024年第6期44卷 684-691页

作者：郭梦如杜星辰李晖姜婷范晓蕾章渊源沈杰朱琦薛愉何东仪汪荣盛上海中医药大学附属光华医院关节内一科上海200052 复旦大学附属华山医院风湿免疫科上海200040 上海市长宁区卫生健康委员会上海200050 上海中医药大学附属光华医院关节内二科上海200052 上海中医药大学附属光华医院信息科上海200052 上海市中医药研究院中西医结合关节炎研究所上海200052 上海中医药大学附属光华医院风湿病科上海200052

目的通过分析真实世界研究中达标治疗人群的临床特点,筛选影响达标治疗的独立危险因素,建立并验证中国类风湿关节炎(RA)患者临床达标治疗的评估预测模型。方法纳入2015年1月-2021年12月于国内10家医院就诊的类风湿关节炎患者3 310例,... 详细信息

目的通过分析真实世界研究中达标治疗人群的临床特点,筛选影响达标治疗的独立危险因素,建立并验证中国类风湿关节炎(RA)患者临床达标治疗的评估预测模型。方法纳入2015年1月-2021年12月于国内10家医院就诊的类风湿关节炎患者3 310例,均为接受传统改善病情的抗风湿药物治疗的患者。从中筛选出进入队列规范随访24周且有完整临床资料的患者876例。采用单因素及多因素逻辑(Logistic)回归分析,筛选出影响治疗结局达标,28处关节疾病活动度评估(DAS)-红细胞沉降率(ESR)评分检验、卡方检验及多因素Logistic回归分析筛选出体重指数、患者休息痛自评、血红蛋白、遇寒加重、肢体麻木、少气乏力6个变量为RA达标治疗的独立危险因素。(2)R语言构建风险预测的诺模图,并通过内部抽样验证,计算出C-index=0.712;通过多因素构建受试者工作特征曲线,曲线下面积=0.729,说明模型具有良好的区分性。(3)calibration校准图形中标准曲线与校准预测曲线贴合,表明模型的校准度良好;霍斯默莱梅肖拟合度检验DCA曲线显示模型具有良好的潜在临床应用价值。结论本研究建立的临床预测模型有助于医生在基线期及早识别影响RA患者达标治疗结局的风险因素,从而能够及时采取更加积极地治疗策略进行干预,以获得更好的临床治疗效果。

关键词：类风湿关节炎达标治疗风险预测模型模型验证真实世界研究

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耐氟喹诺酮类大肠埃希氏菌药敏及临床调查

中国抗生素杂志 2002年第3期27卷 177-180页

作者：胡子鉴张婴元吴培澄周乐吴菊芳复旦大学附属华山医院抗生素研究所上海200040

目的　了解大肠埃希氏菌对氟喹诺酮类耐药性及其感染概况。方法　收集 2 0 0 0年 3月～ 2 0 0 1年 2月间华山医院大肠埃希氏菌临床分离株 ,以琼脂对倍稀释法测定细菌药敏 ,调查氟喹诺酮类耐药大肠埃希氏菌 (FREC)及氟喹诺酮类敏感大肠... 详细信息

目的　了解大肠埃希氏菌对氟喹诺酮类耐药性及其感染概况。方法　收集 2 0 0 0年 3月～ 2 0 0 1年 2月间华山医院大肠埃希氏菌临床分离株 ,以琼脂对倍稀释法测定细菌药敏 ,调查氟喹诺酮类耐药大肠埃希氏菌 (FREC)及氟喹诺酮类敏感大肠埃希氏菌 (FSEC)所致感染情况。结果　共分离大肠埃希氏菌 42 6株 ,FREC 2 95株 ,FSEC 131株 ,FREC对头孢菌素类、氨基糖苷类、SMZ/TMP、呋喃妥因、四环素及氯霉素的耐药性显著高于FSEC ,且大部分呈多重耐药。临床调查资料完整者 30 1例 ,共 32 0例次 ,医院感染 134例次 ,社区获得性感染 130例次 ,带菌者 5 6例次 ,其中属FREC感染 2 14例次 ,FSEC感染 10 6例次。常见感染部位均主要为泌尿道 ,次为呼吸道及胆道等部位。先前应用广谱抗菌药 ,尤其是氟喹诺酮类为FREC感染的独立危险因素。结论　大肠埃希氏菌临床分离株对氟喹诺酮类耐药性严重 ,有指征地选用氟喹诺酮类等广谱抗菌药 ,是防治FREC感染的关键。

关键词：氟喹诺酮类大肠埃希氏菌耐药性感染危险因素

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肠球菌对利奈唑胺耐药机制研究进展

中国感染与化疗杂志 2018年第3期18卷 341-344页

作者：李培林东昉复旦大学附属华山医院抗生素研究所上海200040

肠球菌系革兰阳性球菌,广泛存在于人和动物的消化道及女性生殖道中,是重要的条件致病菌,多见于医院感染.由于细菌固有耐药和获得性耐药的双重特性,以及各类抗生素广泛应用于临床造成的高选择性压力,导致多重耐药（multiple drug resista... 详细信息

肠球菌系革兰阳性球菌,广泛存在于人和动物的消化道及女性生殖道中,是重要的条件致病菌,多见于医院感染.由于细菌固有耐药和获得性耐药的双重特性,以及各类抗生素广泛应用于临床造成的高选择性压力,导致多重耐药（multiple drug resistance,MDR）肠球菌增多,甚至出现耐万古霉素肠球菌（vancomycin-resistantenterococci,VRE）.2000年利奈唑胺上市,是首个应用于临床的唑烷酮类抗菌药物,用于治疗MDR革兰阳性菌感染,尤其是治疗VRE和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）.近年来,利奈唑胺耐药肠球菌的数量呈逐年增多趋势,同时新耐药机制的发现也使此药在临床上的使用遇到了挑战.

关键词：肠球菌利奈唑胺耐药机制

含qnrA基因质粒介导不同水平环丙沙星耐药性的机制研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第3期28卷 203-207页

作者：徐晓刚吴湜叶信予石万良张婴元王明贵复旦大学附属华山医院抗生素研究所上海200040

目的研究4个含qnrA基因质粒在大肠埃希菌接合子中介导环丙沙星耐药水平不同的发生机制。方法以大肠埃希菌J53作为受体菌，通过接合试验从4株qnrA阳性的临床菌株中获得4株接合子。采用Etest方法测定环丙沙星最低抑菌浓度（MIC）；以PCR... 详细信息

目的研究4个含qnrA基因质粒在大肠埃希菌接合子中介导环丙沙星耐药水平不同的发生机制。方法以大肠埃希菌J53作为受体菌，通过接合试验从4株qnrA阳性的临床菌株中获得4株接合子。采用Etest方法测定环丙沙星最低抑菌浓度（MIC）；以PCR法检测aac（6’）-Ib-cr基因，采用实时RT-PCR法测定qnrA的mRNA表达水平，通过启动子探针载体pKK232-8测定qnrA启动子强度，测定、比较启动子周边序列。结果环丙沙星对仅含qnrA质粒pHS4及pHS5的接合子的MIC为0．094μg/ml及0．125mCml，同时携带qnrA及aac（6’）-Ib-cr质粒pHS3及pUS6的接合子的环丙沙星MIC为0．25μg/ml及1．00μg/ml。含pHS6接合子qnrA相对表达水平较其他接合子高13～32．5倍，pHS6的qnrA上游序列启动子活性最强，比另3个质粒高12倍，序列分析发现与pHS3比较，pHS6中qnrA转录启始位点与启始密码之间有7bp（GTrAGCA）的缺失。结论1个质粒同时携带qnrA和aac（6’）-Ib-cr2个耐药基因及qnrA高表达是导致接合子对环丙沙星的耐药性不同的原因。

关键词：环丙沙星质粒介导耐药 qnrA