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调脂治疗的新视野:脂蛋白(a)的临床意义应受到关注

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中华心血管病杂志 2019年第5期47卷 347-350页

作者：李建军中国医学科学院北京协和医学院国家心血管中心阜外医院血脂异常与心血管病诊治中心 100037

低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)是冠心病的主要致病机制,而脂蛋白(a)[Lp(a)]作为主要的心血管残余风险已逐渐引起人们的兴趣。大规模孟德尔随机化研究和人类遗传流行病学研究的证据现在强烈支持升高的Lp(a)与心血管疾病存在因果关系,是冠心... 详细信息

低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)是冠心病的主要致病机制,而脂蛋白(a)[Lp(a)]作为主要的心血管残余风险已逐渐引起人们的兴趣。大规模孟德尔随机化研究和人类遗传流行病学研究的证据现在强烈支持升高的Lp(a)与心血管疾病存在因果关系,是冠心病的主要危险因素之一。本文基于2018美国国家心肺血液研究所的相关建议对Lp(a)的遗传学、分子结构、临床检测、动物模型、治疗等方面进行阐述,旨在推动Lp(a)相关的基础与临床研究。

关键词：脂蛋白(a) 心血管疾病危险因素

MUC1/Y特异表位肽在大肠杆菌中的可溶性表达及其抗体的制备

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生物工程学报 2003年第3期19卷 337-342页

作者：张立新李春海孙丽亚王淼路浩军军事医学科学院附属医院肿瘤分子生物室北京100039

为获得MUC1 Y的特异表位肽 ,制备抗体 ,用PCR扩增其编码序列 ,克隆到pGEX 2T中 ,转化DH5α感受态 ,0 2mmol LIPTG诱导表达 ,超声破碎或B PERTMⅡ试剂处理诱导菌 ,亲和层析和阴离子交换纯化目的蛋白 ,SDS PAGE及Westernblotting鉴定 ;... 详细信息

为获得MUC1 Y的特异表位肽 ,制备抗体 ,用PCR扩增其编码序列 ,克隆到pGEX 2T中 ,转化DH5α感受态 ,0 2mmol LIPTG诱导表达 ,超声破碎或B PERTMⅡ试剂处理诱导菌 ,亲和层析和阴离子交换纯化目的蛋白 ,SDS PAGE及Westernblotting鉴定 ;免疫家兔制备多抗 ,初步用于免疫组化分析。结果表明 ,转化菌经诱导后表达融合蛋白GST Y30 ,约占菌体总蛋白的 2 0 % ,大多以可溶形式存在 ,与诱导温度无关。免疫家兔获得多抗 ,效价为1∶32 0 0 0 0 ,纯化的抗体具有特异性 ,可识别肿瘤细胞表面的MUC1 Y蛋白。所得蛋白和抗体可用于MUC1 Y的表达特征及其生物学功能研究。

关键词：肽纯化抗体大肠杆菌可溶性表达

胶原-磺化羧甲基壳聚糖/硅橡胶皮肤再生材料的制备及其对小型猪烫伤创面全层皮肤缺损的修复研究

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高分子学报 2009年第2期19卷 111-117页

作者：黄爱宾郭瑞徐少骏马列高长有教育部高分子合成与功能构造重点实验室浙江大学高分子科学与工程学系杭州310027 杭州师范大学临床医学院杭州310036

制备了一种胶原-磺化羧甲基壳聚糖/硅橡胶皮肤再生材料,并以小型猪为模型,考察了其对烫伤全层皮肤缺损的修复性能.首先合成了磺化羧甲基壳聚糖,并对其结构进行了表征.制备了胶原-磺化羧甲基壳聚糖多孔支架,采用扫描电子显微镜(SEM)研究... 详细信息

制备了一种胶原-磺化羧甲基壳聚糖/硅橡胶皮肤再生材料,并以小型猪为模型,考察了其对烫伤全层皮肤缺损的修复性能.首先合成了磺化羧甲基壳聚糖,并对其结构进行了表征.制备了胶原-磺化羧甲基壳聚糖多孔支架,采用扫描电子显微镜(SEM)研究了磺化羧甲基壳聚糖含量对支架微结构的影响.随着磺化羧甲基壳聚糖含量的增大,胶原-磺化羧甲基壳聚糖支架从纤维结构向片状结构转化,且支架的孔径相对变大.采用体外成纤维细胞培养实验证明胶原-磺化羧甲基壳聚糖支架无明显细胞毒性.进一步将胶原-磺化羧甲基壳聚糖支架与硅橡胶膜复合,构建具有双层结构的皮肤再生材料.以小型猪为模型,评价了其对深度烫伤创面的修复性能.大体观察和组织学分析结果显示,胶原-磺化羧甲基壳聚糖/硅橡胶皮肤再生材料具有更快的血管化性能,且经该材料处理的创面能有效支持薄自体皮片的移植成活,实现深度烫伤创面的全层修复.

关键词：磺化羧甲基壳聚糖胶原皮肤再生材料烫伤血管化

低氧诱导神经干细胞凋亡和miR-26a低表达

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中国病理生理杂志 2015年第1期31卷 81-86页

作者：李芳魏红艳邓宇斌李欣李恒杰胡春林卢远征廖晓星中山大学附属第一医院急诊科广东广州510080 中山大学附属第一医院转化医学中心广东广州510080

目的:初步探讨氯化钴(cobalt chloride,Co Cl2)是否诱导神经干细胞(neural stem cells,NSCs)凋亡及其机制,探讨NSCs凋亡是否引起microRNA-26a(miR-26a)表达变化。方法:用不同剂量的Co Cl2处理NSCs,CCK-8检测细胞活力;TUNEL检测细胞凋亡;建立Co Cl2诱导NSCs凋亡的模型,将NSCs分为对照组和凋亡组,real-time PCR检测miR-26a-3p、miR-26a-5p、GSK-3β、Bcl-2、Bax和caspase-3的表达;Western blotting检测Bcl-2和Bax的蛋白水平。结果:CCK-8结果显示不同浓度(200、400和600μmol/L)Co Cl2作用24 h,NSCs活力呈剂量依赖性下降(P<0.05)。TUNEL检测显示Co Cl2(200、400和600μmol/L)作用24 h后NSCs凋亡率呈剂量依赖性增加(P<0.05)。Real-time PCR和Western blotting结果表明凋亡组miR-26a、GSK-3β、Bax和caspase-3表达增加,Bcl-2、Bcl-2/Bax蛋白水平下降(P<0.05)。结论:Co Cl2(400μmol/L)作用24 h可建立NSCs凋亡模型,其机制可能与线粒体凋亡通路有关;NSCs凋亡时miR-26a表达减少。

关键词：氯化钴细胞凋亡神经干细胞 miR-26a

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利用胸腺类器官体外诱导小鼠T淋巴细胞分化

细胞与分子免疫学杂志 2021年第8期37卷 679-686页

作者：宫茂源傅国舒逸朱丹蒋婷婷王皓飚柳梓杨苏虹宇邹琳重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心儿童发育疾病研究教育部重点实验室国家儿童健康与疾病临床医学研究中心(重庆)儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地重庆市干细胞治疗工程技术研究中心重庆400014

目的体外构建胸腺类器官,模拟胸腺组织三维结构,诱导多种来源小鼠造血干祖细胞(HSPC)向T细胞分化。方法构建表达小鼠Delta样经典缺刻基因配体1(DLL1)及绿色荧光蛋白(GFP)的逆转录病毒载体;通过逆转录病毒感染OP9小鼠骨髓间充质细胞,构建... 详细信息

目的体外构建胸腺类器官,模拟胸腺组织三维结构,诱导多种来源小鼠造血干祖细胞(HSPC)向T细胞分化。方法构建表达小鼠Delta样经典缺刻基因配体1(DLL1)及绿色荧光蛋白(GFP)的逆转录病毒载体;通过逆转录病毒感染OP9小鼠骨髓间充质细胞,构建OP9-DLL1细胞系;实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测OP9-DLL1细胞DLL1的mRNA和蛋白表达,免疫荧光细胞化学染色检测OP9-DLL1细胞DLL1的表达和分布;提取C57BL/6小鼠E13.5胎肝HSPC及骨髓HSPC,分别与OP9-DLL1细胞按适当比例混合后离心压实,置于气-液交面培养;利用荧光显微镜观察胸腺类器官生长,流式细胞术检测T细胞表面CD3、CD4、CD8、CD25、CD44、CD45、CD117、T细胞受体β(TCRβ)表达,免疫荧光组织化学染色观察造血细胞在胸腺类器官的分布。结果成功构建表达小鼠DLL1及GFP的逆转录病毒载体,逆转录病毒感染OP9细胞后,通过GFP筛选获得OP9-DLL1细胞,OP9-DLL1细胞DLL1 mRNA和DLL1蛋白表达明显增加,DLL1蛋白表达于OP9-DLL1细胞膜。诱导培养40 d内,胸腺类器官状态良好且体积逐渐增大。胸腺类器官诱导T细胞程序性分化,HSPC分化为CD3+T细胞。结论通过OP9-DLL1细胞成功构建胸腺类器官,体外诱导多种来源小鼠HSPC向T细胞分化。

关键词： T细胞分化体外胸腺类器官缺刻基因1(NOTCH1)

非酒精性脂肪性肝炎新药临床试验的难度与挑战

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临床肝胆病杂志 2021年第8期37卷 1948-1952页

作者：黄樱硕董瑞华尤红首都医科大学附属北京友谊医院研究型病房北京100050 首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心肝硬化转化医学北京市重点实验室国家消化系统疾病临床医学研究中心北京100050

近年来非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的发病率不断增长,且临床上缺乏有效的治疗药物。从NASH的异质性(如体质量、性别、年龄和代谢因素)、混杂因素的影响、量化指标的诊断一致性等方面分析了NASH新药临床试验开发的难度,提出可以通过分层分... 详细信息

近年来非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的发病率不断增长,且临床上缺乏有效的治疗药物。从NASH的异质性(如体质量、性别、年龄和代谢因素)、混杂因素的影响、量化指标的诊断一致性等方面分析了NASH新药临床试验开发的难度,提出可以通过分层分析、减弱混杂因素影响、提高诊断一致性等方式提高NASH新药临床试验的质量。包括生活方式改善在内的联合治疗可能是有效的NASH治疗策略,以改善NASH和抗纤维化及长期代谢获益为目标的治疗是未来药物研发的研究方向。

关键词：非酒精性脂肪性肝炎药物,临床试用治疗学

3D打印技术构建组织工程气管支架的研究进展

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中华胸心血管外科杂志 2019年第7期35卷 443-446页

作者：张博友王志豪张国中潘枢史宏灿扬州大学临床医学院胸外科扬州大学转化医学中心江苏省老年医学重点实验室 225001 中南大学湘雅二医院胸外科长沙410011

组织工程气管已经成为气管替代物的研究的重要方向,支架的构建是能否成功的关键因素之一。随着3D打印技术的日趋成熟及发展,拓宽了组织工程气管支架的设计及制造思路,不同类型的3D打印支架不断被研发。本文基于3D打印技术构建的组织工... 详细信息

组织工程气管已经成为气管替代物的研究的重要方向,支架的构建是能否成功的关键因素之一。随着3D打印技术的日趋成熟及发展,拓宽了组织工程气管支架的设计及制造思路,不同类型的3D打印支架不断被研发。本文基于3D打印技术构建的组织工程学气管支架最新的实验进展进行综述及评价。

关键词：组织工程学气管支架打印气管替代物

血管内超声在准分子激光消蚀联合药物涂层球囊治疗下肢动脉硬化闭塞症中的应用价值

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中华外科杂志 2023年第2期61卷 150-155页

作者：乔冠宇蒋小浪陈斌蒋俊豪马韬林长泼方刚郭大乔徐欣董智慧符伟国复旦大学附属中山医院血管外科、国家放射与治疗临床医学研究中心上海200032

目的探讨血管内超声在准分子激光消蚀联合药物涂层球囊治疗下肢动脉硬化闭塞症治疗中的效果。方法本研究为前瞻性病例系列研究,纳入2021年9月至2022年3月在复旦大学附属中山医院接受血管内超声辅助的准分子激光消蚀联合药物涂层球囊治... 详细信息

目的探讨血管内超声在准分子激光消蚀联合药物涂层球囊治疗下肢动脉硬化闭塞症治疗中的效果。方法本研究为前瞻性病例系列研究,纳入2021年9月至2022年3月在复旦大学附属中山医院接受血管内超声辅助的准分子激光消蚀联合药物涂层球囊治疗的下肢动脉硬化闭塞患者的资料。记录患者病变特点、手术疗效和相关并发症。治疗前后资料的比较采用配对样本t检验。结果共10例患者纳入研究,男性8例,女性2例,年龄(72.0±5.9)岁(范围:61~81岁)。共11处病变,股浅动脉8处,腘动脉3处,病变长度(7.0±2.4)cm(范围:3.2~9.8 cm)。慢性闭塞病变4处,重度狭窄7处。患者均顺利完成手术,技术成功率为10/11,1处病变发生限流性夹层,行补救性支架植入。4处病变钙化分级为3~4级,9处病变钙化弧度≥180°。5处病变在血管内超声测量后选择更大直径的药物涂层球囊。随访(6.0±1.9)个月(范围:3~9个月),患者术后即刻踝肱指数(0.97±0.13比0.48±0.18,t=-7.60,P分子激光消蚀联合药物涂层球囊治疗下肢动脉硬化闭塞症的早期结果良好,手术安全。

关键词：动脉硬化,闭塞性血管成形术,激光血管内超声药物涂层球囊

亨廷顿氏病的神经兴奋和线粒体毒性发病机理与动物模型

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中国实验动物学报 2021年第4期29卷 553-562页

作者：唐文洁黄艳王力峰魏佑震谢元云同济大学附属东方医院转化医学研究中心教育部心律失常重点实验室上海200120 山东大学齐鲁儿童医院康复科济南250022 赣南医学院附属第一医院国家老年病临床研究中心江西赣州341000

亨廷顿氏病(Huntington’s disease,HD)作为一种显性遗传性神经退行疾病,表现为运动、智力、心理功能障碍。目前尚无有效的治疗或预防措施;针对各种HD症状的药物和控制措施效果不理想。1993年确认HD发病是由于HD基因(HTT)中CAG序列重复... 详细信息

亨廷顿氏病(Huntington’s disease,HD)作为一种显性遗传性神经退行疾病,表现为运动、智力、心理功能障碍。目前尚无有效的治疗或预防措施;针对各种HD症状的药物和控制措施效果不理想。1993年确认HD发病是由于HD基因(HTT)中CAG序列重复扩增超过36次或以上,翻译为突变的多聚谷氨酰胺,引起兴奋性神经毒性和线粒体能量代谢异常等,导致大脑皮质和基底核神经退行性变和功能障碍。为更全面认识HD发病机理、研究兴奋性神经毒性和线粒体能量代谢异常所致的脑组织及神经元损伤分子机制,研发相应的治疗性药物及方案,了解并掌控相应的动物模型十分重要。本文将介绍以HD组织病理学以及生物化学为发病机制而建立的HD动物模型,即兴奋性神经毒性模型和线粒体毒素模型。

关键词：亨廷顿氏病动物模型神经元线粒体兴奋性氨基酸