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基于二维PCR技术的高危型人乳头瘤病毒及相关肿瘤抑制基因 p53和 RB1的分型检测方法

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中华检验医学杂志 2024年第4期47卷 391-400页

作者：张俊姚霜于洋喻妙梅罗光华苏州大学附属第三医院(常州市第一人民医院)临床医学研究中心常州213003

目的应用高通量二维PCR技术(2D-PCR), 建立一种单管一步法检测和鉴定宫颈细胞中16种高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)亚型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、73、82)、p53(rs1042522)和RB1(rs3092905)基因型的方法。方法根据16种不同亚型HR-HPV、p53及RB1基因DNA序列设计特异性引物, 同时将待测靶基因p53及RB1基因作为评判标本取样及PCR扩增成功与否的内参基因。在3个荧光检测通道中, 采用相应标签标记不同亚型HR-HPV、p53及RB1的上游引物, 并构建完善的2D-PCR检测体系。应用该方法检测804份来源于常州市第一人民医院2022年12月至2023年8月妇科门诊的宫颈刷样本, 将检测结果与PCR-反向点杂交法、流式荧光杂交法、单重实时荧光定量PCR法分别进行一致性比较;同时采用Sanger测序法检测p53和RB1的基因型。采用Kappa检验评价2D-PCR法和其他方法间的一致性。结果 2D-PCR可通过FAM、HEX和Alexa Fluor568通道的特征性熔解谷对16种HR-HPV型别和p53、RB1的基因型进行准确区分和鉴定。2D-PCR法与PCR-反向点杂交法具有较高的一致性(Kappa=0.699), 与流式荧光杂交法具有更高的一致性(Kappa=0.793), 和单重荧光定量PCR法的一致性Kappa=0.880(95%CI 0.862~0.907)。以Sanger测序法为金标准, 2D-PCR法检测p53、RB1基因型的准确度为100%。p53 rs1042522 位点3种基因型(G/G型、G/C型和C/C型)的分布频率为32.09%(258/804)、49.88%(401/804)和18.03%(145/804), RB1 rs3092905位点检出基因型均为A/A型。结论成功开发了一种2D-PCR方法, 用于高危型HR-HPV型别鉴定与宫颈癌相关肿瘤抑制基因p53和RB1的基因分型。

关键词：人乳头瘤病毒聚合酶链反应基因 p53

基于靶向代谢组学探讨葛根芩连汤对抗生素相关性腹泻大鼠粪便短链脂肪酸的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 189-196页

作者：苏钢杨光勇韩雪唐秋梅田维毅王文佳王平涂小华何光志贵州中医药大学基础医学院贵阳550025 清镇市第一人民医院贵州清镇551400

目的:通过靶向代谢组学探究葛根芩连汤对抗生素相关性腹泻(AAD)粪便短链脂肪酸(SCFAs)代谢的影响。方法:将240只SD大鼠随机分为空白组、模型组、丽珠肠乐组(0.15 g·kg^(-1))、葛根芩连汤高、中、低剂量组(10.08、5.04、2.52 g·kg^(-1... 详细信息

目的:通过靶向代谢组学探究葛根芩连汤对抗生素相关性腹泻(AAD)粪便短链脂肪酸(SCFAs)代谢的影响。方法:将240只SD大鼠随机分为空白组、模型组、丽珠肠乐组(0.15 g·kg^(-1))、葛根芩连汤高、中、低剂量组(10.08、5.04、2.52 g·kg^(-1)),每组40只(雌雄各半),除空白组外,其余各组每日均给予克林霉素(250 mg·kg^(-1))灌胃造模,连续7 d。造模成功后,各给药组按相应剂量灌胃药液,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续治疗14 d。分别在药物干预后0、3、7、14 d,从各组中随机抽取8只大鼠,气相色谱-飞行时间质谱法(GC-TOF-MS)对大鼠粪便中SCFAs进行靶向代谢组学分析,运用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)比较不同治疗时间组间代谢轮廓差异,并对大鼠粪便中SCFAs的组间含量变化进行比较。结果:PLS-DA结果显示,空白组与模型组可明显区分,在葛根芩连汤治疗7 d后逐渐趋近于空白组。进一步分析SCFAs组成后发现,与空白组比较,模型组中乙酸的占比增加,丁酸、戊酸、己酸和异戊酸的占比降低;葛根芩连汤治疗后,丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸占比增加,乙酸、丙酸和己酸占比降低。经差异分析显示,葛根芩连汤可明显改善丁酸含量,对戊酸、己酸含量具有一定回调作用。结论:葛根芩连汤中剂量组治疗7 d后可改善AAD粪便短链脂肪酸含量,这可能与改善SCFAs的组成比例及丁酸、戊酸、己酸等含量有关。

关键词：葛根芩连汤抗生素相关性腹泻代谢组学短链脂肪酸丁酸戊酸气相色谱-飞行时间质谱法(GC-TOF-MS)

高髋关节中心技术在CroweⅡ型和Ⅲ型发育性髋关节发育不良并重度髋关节炎全髋关节置换术中的应用

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中国骨伤 2024年第2期37卷 166-172页

作者：胡浩杨俊忠李亮黄传文万玲玲易莉艳武汉市江夏区第一人民医院协和江南医院骨科湖北武汉430299

目的:探讨高髋关节中心技术全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)治疗CroweⅡ、Ⅲ型发育性髋关节发育不良(developmental dysplasia of hip,DDH)并重度髋关节炎(hip osteoarthritis,HOA)的临床疗效。方法:2018年1月至2020年1月收治CroweⅡ、Ⅲ型DDH并重度HOA患者74例,37例行解剖型髋关节中心重建为对照组,其中男7例,女30例,年龄42~65(58.40±4.98)岁,身体质量指数(body mass index,BMI)18~29(23.02±2.21)kg·m^(-2)。37例行高髋关节中心技术重建为研究组,其中男5例,女32例,年龄41~65(57.31±5.42)岁,BMI 18~29(23.14±2.07)kg·m^(-2)。患者术前表现髋关节疼痛、功能及关节活动度受限、步态不稳等。比较两组围术期指标,术前及术后3、6、12个月分别评估患者髋关节功能、平衡功能及步态情况,术前及术后12个月测量双下肢长度差、旋转中心水平距离、旋转中心垂直距离、股骨偏心距。结果:术后随访12个月,研究组失访1例,对照组失访2例。研究组手术时间短于对照组,术中出血量少于对照组(P0.05);术后12个月,研究组旋转中心垂直距离大于对照组(P中心水平距离、股骨偏心距比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组均未出现并发症。结论:两种髋关节中心重建方式应用于DDH并重度HOA患者THA远期效果相当,安全性良好,且高髋关节中心技术重建可缩短手术时间,减少术中出血量,同时在早期恢复患者髋关节功能、平衡功能及步行功能方面具有一定优势。

关键词：高髋关节中心技术发育性髋关节发育不良重度髋关节炎全髋关节置换术

儿童近视发生前后的屈光度和眼生物参数变化：安阳儿童眼病研究

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中华实验眼科杂志 2024年第5期42卷 453-461页

作者：石梦海黄瑛李翯屠永芳李蕾康梦田魏士飞孙芸芸尹磊王宁利李仕明郑州大学人民医院眼科河南省人民医院眼科河南省立眼科医院郑州石梦海为首都医科大学附属北京同仁医院进修生首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心北京市眼科研究所北京市眼科学与视觉科学重点实验室北京安阳市眼科医院安阳郑州市第一人民医院郑州

目的分析小学生5年间的屈光度和眼生物参数变化趋势, 探讨其在近视发生前后的变化规律。方法采用队列研究方法, 以"安阳儿童眼病研究"中的1年级小学生为研究对象, 共纳入1 986人, 其中男生1 126人, 女生860人, 均取右眼数据进行分析。... 详细信息

目的分析小学生5年间的屈光度和眼生物参数变化趋势, 探讨其在近视发生前后的变化规律。方法采用队列研究方法, 以"安阳儿童眼病研究"中的1年级小学生为研究对象, 共纳入1 986人, 其中男生1 126人, 女生860人, 均取右眼数据进行分析。每年采用1%环戊通滴眼液进行睫状肌麻痹后电脑验光获得等效球镜度(SE), 采用眼生物测量仪测量眼轴长度(AL)、前房深度、晶状体厚度、平均角膜曲率(Km)等, 采用Bennett公式计算晶状体屈光力(LP)。根据随访时近视发生情况将受检者分为持续近视组、非近视组和新发近视组, 又根据发病年龄将新发近视组细分为8岁近视组、9岁近视组、10岁近视组、11岁近视组和12岁近视组, 比较各组屈光度和眼生物参数在不同随访时间点的差异。结果随着年龄增加, 所有儿童的屈光度均逐渐向近视漂移、眼轴逐渐增长, 各组内相邻随访年龄间SE和AL比较, 差异均有统计学意义(均P0.05)。结论 AL在儿童近视发生的前3年内开始加速增长, 在近视发生后增长速度逐渐变缓, 但仍明显快于非近视儿童;在此过程中, LP下降起到一定的代偿作用, Km无显著变化。相同年龄下男生发生近视时的AL比女生长。AL是近视防控的重要指标, 评估时要考虑性别差异, 更要关注AL的增长速度。

关键词：近视屈光度眼生物参数眼轴长度晶状体屈光力眼儿童纵向研究

来源：博看期刊

青藤碱可有效抑制白细胞介素1β介导的髓核细胞凋亡

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中国组织工程研究 2024年第2期28卷 224-230页

作者：王倩卢子昂李利和吕超亮王盟张存鑫济宁市第一人民医院脊柱外科山东省济宁市272000 济宁医学院临床医学院山东省济宁市272067 济宁市第一人民医院临床医学实验中心山东省济宁市272000

背景:椎间盘退变是导致脊柱退行性疾病的基础,然而目前尚无有效的治疗药物。目的:探讨青藤碱是否可以抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞凋亡及其分子机制。方法:采用胰酶联合Ⅱ型胶原酶消化法体外培养大鼠髓核细胞,并绘制细胞生长曲线,采... 详细信息

背景:椎间盘退变是导致脊柱退行性疾病的基础,然而目前尚无有效的治疗药物。目的:探讨青藤碱是否可以抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞凋亡及其分子机制。方法:采用胰酶联合Ⅱ型胶原酶消化法体外培养大鼠髓核细胞,并绘制细胞生长曲线,采用CCK-8法筛选合适的青藤碱药物浓度。将髓核细胞分为对照组、青藤碱组、白细胞介素1β组、青藤碱+白细胞介素1β组、锌原卟啉(血红素氧合酶1抑制剂)组、锌原卟啉+青藤碱组、锌原卟啉+白细胞介素1β组、青藤碱+锌原卟啉+白细胞介素1β组。分别检测各组髓核细胞增殖活性、活性氧含量、凋亡率及血红素氧合酶1的表达情况。结果与结论:①体外培养的大鼠髓核细胞呈现多角形、三角形、短楔形等形态,其呈现“S”型曲线生长,接种第1-3天生长缓慢,第4-6天生长迅速,第七八天生长速度缓慢,进入“平台期”,细胞数量不再增加;②当青藤碱的浓度≤80μmol/L时,髓核细胞的增殖活性不会受到显著影响(P>0.05);③白细胞介素1β可以显著降低髓核细胞的增殖活性,增加活性氧含量,导致细胞凋亡(P<0.01);④当采用青藤碱干预后,不仅可以促进血红素氧合酶1的表达(P<0.05),而且可以抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞增殖活性降低、活性氧含量和凋亡率增加(P<0.05),其作用可被锌原卟啉逆转(P<0.01)。

关键词：青藤碱白细胞介素1β 血红素氧合酶1 髓核细胞细胞增殖细胞凋亡活性氧椎间盘椎间盘退变

索磷布韦/维帕他韦单用或联合利巴韦林治疗3B型HCV/HIV感染者的效果及安全性

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临床肝胆病杂志 2024年第2期40卷 271-277页

作者：刘立常丽仙陈智勇李俊义刘春云昆明市第三人民医院云南省传染病临床医学中心昆明650041 枣阳市第一人民医院感染科湖北枣阳430000

目的观察索磷布韦/维帕他韦单用或联合利巴韦林方案对我国基因3B型HCV/HIV感染者的治疗效果和安全性。方法选取2017年1月—2020年12月于昆明市第三人民医院就诊的3B型HCV/HIV合并感染者299例,使用索磷布韦/维帕他韦单用或联合利巴韦林治... 详细信息

目的观察索磷布韦/维帕他韦单用或联合利巴韦林方案对我国基因3B型HCV/HIV感染者的治疗效果和安全性。方法选取2017年1月—2020年12月于昆明市第三人民医院就诊的3B型HCV/HIV合并感染者299例,使用索磷布韦/维帕他韦单用或联合利巴韦林治疗12周,停药后随访12周。评估治疗结束后12周的持续病毒学应答率(SVR12)和不良反应。计量资料两组间比较采用成组t检验或Mann-Whitney U检验。计数资料两组间比较采用χ^(2)检验。使用Agresti-Coull方法构建SVR12的95%CI。采用单因素和多因素非条件Logistic回归分析SVR的影响因素。结果299例3B型HCV/HIV感染者患者的平均年龄为(43.92±6.84)岁,男性占77.3%(231/299),肝硬化患者占36.5%(109/299),曾接受过抗病毒治疗者占13.4%(40/299),索磷布韦/维帕他韦联合利巴韦林治疗患者占27.8%(83/299)。患者总体SVR12为87.0%(260/299),其中索磷布韦/维帕他韦单用与联用利巴韦林SVR12比较,差异无统计学意义(87.5%vs 85.5%,χ^(2)=0.203,P=0.653);无肝硬化和肝硬化患者SVR12比较,差异有统计学意义(90.0%vs 81.7%,χ^(2)=4.256,P=0.039);抗病毒初治患者的SVR12明显高于经治患者(93.4%vs 45.0%,χ^(2)=71.670,P<0.001)。单因素和多因素Logistic回归分析结果显示,PLT(OR=0.957,95%CI:0.931~0.984,P=0.002)、肝硬度值(OR=1.446,95%CI:1.147~1.822,P=0.002)和经治(OR=13.807,95%CI:2.970~64.174,P=0.001)是3B型HCV/HIV感染者SVR的独立影响因素。出现严重不良反应事件41例,均在抗病毒治疗后2周内出现,28例在没有停药并积极处理后缓解;13例积极处理后仍未缓解,停用抗病毒药物2~5 d后缓解,缓解后再次使用未出现类似反应。结论索磷布韦/维帕他韦单用或联合利巴韦林对3B型HCV/HIV感染者有较好的治疗效果和安全性。

关键词：肝炎病毒属 HIV 索磷布韦维帕他韦利巴韦林

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我国主要眼底病慢病管理专家共识——基于改良版德尔菲法制订

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中华眼底病杂志 2024年第4期40卷 253-263页

作者：中华医学会眼科学分会眼底病学组中国医师协会眼科医师分会眼底病学组许迅黎晓新不详上海交通大学医学院附属第一人民医院眼科国家眼部疾病临床医学研究中心上海200080 厦门大学附属厦门眼科中心厦门361003 北京大学人民医院眼科北京100044

我国眼底病患者群体基数庞大,这一现象在人口老龄化的持续影响下显得尤为突出,患病人数呈现出不断增长的趋势。当前社会公众对眼底病的认知程度相对较低,基层筛查网络亟待完善,诊疗覆盖率不足,且疾病晚期治疗手段受限,这些因素共同导致... 详细信息

我国眼底病患者群体基数庞大,这一现象在人口老龄化的持续影响下显得尤为突出,患病人数呈现出不断增长的趋势。当前社会公众对眼底病的认知程度相对较低,基层筛查网络亟待完善,诊疗覆盖率不足,且疾病晚期治疗手段受限,这些因素共同导致了眼底病患者的视功能恢复情况欠佳,致盲率居高不下。同时,眼底慢性疾病的特性决定了其需要长期、系统化的管理与治疗,但现实中患者往往面临沉重的随访负担,较高的失访率又进一步限制了诊疗效果的充分实现。鉴于此,《“十四五”全国眼健康规划(2021-2025年)》明确提出了加强眼底病防控体系建设的要求。我们迫切需要构建一套符合中国国情的眼底病慢病管理模式,包括搭建科学高效的管理平台,优化医疗资源配置,提高患者对治疗方案的依从性,从而有效提升治疗成功率,从根本上降低因眼底病导致的视力丧失比例。为此,我国眼底病领域的权威专家通过组织深入全面的专题研讨,并运用改良版德尔菲法进行集体决策和意见征询,最终形成了一系列具有共识性的指导建议。这些宝贵的专业见解将有力推动我国建立适宜的眼底病慢病管理体系,保障眼底病慢病患者获得长期、规范的医疗服务,为改善眼底病整体防治状况奠定了坚实的基础。

关键词：慢病管理眼底病专家共识改良版德尔菲法

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眼睛里也会长虫子

健康世界 2024年第6期31卷 15-16页

作者：窦雯玥上海市第一人民医院眼科中心

随着健康知识的普及,大家对眼睛的健康问题都有了一定程度的了解。我们知道,在平时不能揉眼睛,要注意眼睛的卫生、不能长时间町着电子屏幕等,都是爱护眼睛的好习惯。但很多人即使爱眼、护眼,为何眼睛的不适症状还是会不断出现呢?这时,... 详细信息

随着健康知识的普及,大家对眼睛的健康问题都有了一定程度的了解。我们知道,在平时不能揉眼睛,要注意眼睛的卫生、不能长时间町着电子屏幕等,都是爱护眼睛的好习惯。但很多人即使爱眼、护眼,为何眼睛的不适症状还是会不断出现呢?这时,我们要警惕,有可能“眼晴长虫”才是罪魁祸首!

关键词：电子屏幕健康知识眼睛罪魁祸首

地塞米松玻璃体内植入剂治疗非感染性葡萄膜炎黄斑水肿的效果

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中华眼外伤职业眼病杂志 2024年第4期46卷 283-288页

作者：林娜邓卫东李波洛阳市第一人民医院眼科洛阳471000

目的评价地塞米松玻璃体内植入剂(IDI)治疗非感染性葡萄膜炎黄斑水肿的效果。方法回顾性病例系列研究。纳入洛阳市第一人民医院2017年1月至2023年9月60例(78眼)非感染性葡萄膜炎黄斑水肿患者,均行IDI治疗。比较治疗前后最佳矫正视力(BCV... 详细信息

目的评价地塞米松玻璃体内植入剂(IDI)治疗非感染性葡萄膜炎黄斑水肿的效果。方法回顾性病例系列研究。纳入洛阳市第一人民医院2017年1月至2023年9月60例(78眼)非感染性葡萄膜炎黄斑水肿患者,均行IDI治疗。比较治疗前后最佳矫正视力(BCVA,logMAR)、眼压、黄斑中心区视网膜厚度(CMT),统计临床疗效及不良反应发生情况。结果术前患眼BCVA为0.63±0.14,术后1、2、4、6及12个月BCVA(logMAR)依次为0.43±0.12、0.42±0.14、0.47±0.12、0.49±0.11、0.52±0.13,与术前相比差异均有统计学意义(均P<0.05);术前患眼眼压为(15.14±0.92)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),术后1、2、4、6及12个月眼压依次为(17.23±1.22)、(22.36±1.28)、(17.05±1.15)、(15.31±0.82)、(15.05±0.88)mmHg,术后1、2及4个月眼压与术前相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。术前患眼CMT为(388.15±65.25)μm,术后1、2、4、6及12个月CMT依次为(301.05±61.05)、(258.72±25.54)、(293.56±22.84)、(266.75±35.15)及(243.74±24.53)μm,与术前相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。随访期末,显效39例,有效19例,无效2例,总有效率为96.67%(58/60)。术后出现1例白内障,2例眼压升高,2例结膜下出血,并发症发生率为8.33%(5/60)。结论非感染性葡萄膜炎黄斑水肿治疗中应用IDI植入治疗,可降低CMT,改善视力,且对眼压影响小,不良反应少。

关键词：葡萄膜炎,非感染性水肿,黄斑植入剂,玻璃体内,地塞米松视力眼压视网膜厚度,中心区,黄斑