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不同炮制白僵蚕中草酸铵和白僵菌素含量与外观性状的相关性研究

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蚕业科学 2024年第1期50卷 59-65页

作者：李臻阳封云铧顾潇商娟李雪娇胡雨邹建东许美娟南京中医药大学附属医院江苏省中医院南京210029 南京中医药大学南京210023

为探究不同炮制白僵蚕中草酸铵和白僵菌素含量与外观性状的相关性,采用HPLC-UV法分别测定不同批次白僵蚕与炒僵蚕中草酸铵和白僵菌素的含量,利用SPSS 26.0软件将白僵蚕和炒僵蚕的单体质量、长度、直径、丝腺环数与草酸铵和白僵菌素含量... 详细信息

为探究不同炮制白僵蚕中草酸铵和白僵菌素含量与外观性状的相关性,采用HPLC-UV法分别测定不同批次白僵蚕与炒僵蚕中草酸铵和白僵菌素的含量,利用SPSS 26.0软件将白僵蚕和炒僵蚕的单体质量、长度、直径、丝腺环数与草酸铵和白僵菌素含量进行相关性分析。结果表明,白僵蚕中草酸铵和白僵菌素含量呈显著正相关,且这两个成分含量与白僵蚕外观性状也均呈显著正相关;炒僵蚕中白僵菌素含量与外观性状呈显著正相关,而草酸铵含量与白僵菌素含量及各外观性状指标均无相关关系。该结果可为白僵蚕、炒僵蚕饮片质量评价提供参考,也可为炒僵蚕炮制工艺的规范提供线索。

关键词：白僵蚕草酸铵白僵菌素含量测定外观性状相关性分析

重组鼠IFN-γ腺病毒诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立和观察

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第2期31卷 128-134页

作者：杨箐张玮光黎陈铖刘细细胡中晓王风楠陈碧清田芳张晓丽热爱拉·加那提朱学军南京中医药大学附属医院、南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210029 南京中医药大学附属医院中心实验室江苏南京210029 南京中医药大学附属医院血液科江苏南京210029

目的:通过向C57Bl/6J小鼠腹腔注射IFN-γ腺病毒(Ad-mIFN-γ)建立细胞因子释放综合征(CRS)的动物模型。方法:构建Ad-mIFN-γ及对照Ad-lacZ腺病毒载体,分别以MOI=100体外转染小鼠腹腔巨噬细胞,流式细胞术检测其对细胞mIFN-γ分泌的影响。... 详细信息

目的:通过向C57Bl/6J小鼠腹腔注射IFN-γ腺病毒(Ad-mIFN-γ)建立细胞因子释放综合征(CRS)的动物模型。方法:构建Ad-mIFN-γ及对照Ad-lacZ腺病毒载体,分别以MOI=100体外转染小鼠腹腔巨噬细胞,流式细胞术检测其对细胞mIFN-γ分泌的影响。将40只雌性C57Bl/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、载体对照组、病毒低、中、高剂量组(每组8只),分别向各组小鼠腹腔注射PBS(200μL)、Ad-lacZ(2×10^(7)PFU/只)、Ad-mIFN-γ(5×10^(6)PFU/只)、Ad-mIFN-γ(1.5×10^(7)PFU/只)和Ad-mIFN-γ(2×10^(7)PFU/只)。每日观测小鼠的体质量及生存情况;第3天时采用流式细胞术检测小鼠外周血和脾内单核细胞(CD11b^(+))、巨噬细胞(CD11b^(+)/CD86^(+))比例,免疫荧光染色法检测脾内CD11b^(+)的单核细胞比例;第9天时采用流式细胞术检测小鼠血清中细胞因子的分泌水平;第14天,采用颈椎脱臼法处死小鼠,H-E染色法观察小鼠肝、脾、肺和肾的病理和组织学变化。结果:Ad-mIFN-γ体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,在第3天检测到巨噬细胞分泌mIFN-γ达到峰值(118.34±2.90)pg/mL,并在一周内持续高分泌mIFN-γ,Ad-lacZ对照组IFN-γ分泌水平较低后,第3天时为(0.17±0.08)pg/mL。小鼠腹腔注射Ad-mIFN-γ后,在14 d内病毒低、中剂量组无小鼠死亡,病毒高剂量组小鼠体质量持续减轻(P<0.001);第3天,病毒高剂量组小鼠外周血和脾组织内单核细胞、巨噬细胞比例较对照组和中剂量组均显著增加(P<0.05或P<0.01);第9天,病毒低、中、高剂量组小鼠血清中mIFN-γ、IL-6、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、IL-1、TNF-α等细胞因子的水平均显著升高(P<0.001);10 d内病毒高剂量组小鼠死亡率达100%。组织病理检测可见病毒高剂量组小鼠的肝、脾、肺、肾组织有明显损伤。结论:Ad-mIFN-γ体外感染小鼠原代腹腔巨噬细胞后,可以快速分泌mIFN-γ;腹腔注射高剂量(2×10^(7)PFU/只)Ad-mIFN-γ导致小鼠出现CRS典型表现,可作为CAR-T细胞治疗诱发CRS的动物模型。

关键词： γ-干扰素腺病毒巨噬细胞细胞因子释放综合征动物模型 C57Bl/6J小鼠

论通脉法在慢性心力衰竭治疗中的理论依据与应用

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世界中医药 2024年第11期19卷 1649-1652页

作者：赵菁严士海王令谆严冬南京中医药大学附属医院南京210029

慢性心力衰竭是大部分心血管疾病的最终结局,其5年生存率与恶性肿瘤相当甚至更低。中医学对慢性心力衰竭治疗有多种认识,心病不仅在心,也在血液与血管。致病之“祸”源自血管,血液内的“毒素”长期在血管中运行,逐渐导致血管壁增厚、失... 详细信息

慢性心力衰竭是大部分心血管疾病的最终结局,其5年生存率与恶性肿瘤相当甚至更低。中医学对慢性心力衰竭治疗有多种认识,心病不仅在心,也在血液与血管。致病之“祸”源自血管,血液内的“毒素”长期在血管中运行,逐渐导致血管壁增厚、失去弹性、逐渐硬化,血管通路不畅与心室重塑形成正反馈,不利于慢性心力衰竭的康复。中医学无“血管”之名,只有“脉”。无论气虚、气滞、血瘀、痰浊、寒凝乃至血浊等诸因素,皆可造成脉道痹阻,从而发病。相比传统的强心、养心法,通脉法从整体观的角度,调整气血,通达五脏,有防治慢性心力衰竭的作用。综合运用益气通脉、温阳通脉、理气通脉、化瘀通脉、化浊通脉、利水通脉及解毒通脉等方法,减轻心脏负荷,同时改善血循环,达到开源引流、疏通脉络的目的,以改善慢性心力衰竭的临床症状及延缓病情进展。

关键词：慢性心力衰竭心主血脉血浊通脉法

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美沙拉嗪在炎症性肠病应用中的不良反应分析

中国新药杂志 2024年第15期33卷 1628-1632页

作者：张梦媛刘怡婧朱磊南京中医药大学附属医院消化内科南京210029

炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)是一种原因不明的慢性非特异性肠道炎症性疾病,大多数患者需要长期服药。美沙拉嗪是临床治疗IBD的一线药物,属于5-氨基水杨酸(5-aminosalicylic acid, 5-ASA)衍生物,用于减轻肠道炎症反应... 详细信息

炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)是一种原因不明的慢性非特异性肠道炎症性疾病,大多数患者需要长期服药。美沙拉嗪是临床治疗IBD的一线药物,属于5-氨基水杨酸(5-aminosalicylic acid, 5-ASA)衍生物,用于减轻肠道炎症反应的诱导和维持治疗,通常适应性良好,但另一方面,美沙拉嗪也暴露出一些不良反应如胃肠道不良反应、白细胞减少、肝功能损伤、胰腺炎、肺毒性及肾毒性等,涉及多个系统,并且不易与IBD自身并发症相区别。本文旨在总结美沙拉嗪不良反应及相应临床特征,为临床应用中正确识别及规避不良事件的发生提供参考,以达到保障治疗安全性的目的。

关键词：美沙拉嗪 5-氨基水杨酸炎症性肠病不良反应

基于SIRT1和PI3K/Akt信号通路探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面大鼠模型修复愈合的影响及作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 101-108页

作者：崔梦迪高加巍朱吕群陈贵生陈奕粮南京中医药大学南京210023 南京中医药大学附属南京中医院南京210000 南京市第二医院南京210003

目的:探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面修复愈合的促进作用及其机制。方法:60只雄性SD大鼠背部构建全层皮肤缺损创面,除正常组外,其余大鼠构建难愈性创面模型,随机分为模型组、黄芪甲苷低、高剂量组、黄芪甲苷+LY294002[磷酸肌醇3-激酶(PI... 详细信息

目的:探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面修复愈合的促进作用及其机制。方法:60只雄性SD大鼠背部构建全层皮肤缺损创面,除正常组外,其余大鼠构建难愈性创面模型,随机分为模型组、黄芪甲苷低、高剂量组、黄芪甲苷+LY294002[磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂]组和黄芪甲苷+EX527[沉默调节蛋白1(SIRT1)抑制剂)]组。观察各组大鼠创面造模后第2、4、6、8天的伤口面积占比;免疫荧光检测创面组织Ⅰ型胶原α1(COL1A1)和α-肌动蛋白(α-SMA)表达;苏木素-伊红(HE)染色检测创面组织病理结构;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测创面炎症因子mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测创面SIRT1/核转录因子(NF)-κB和PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白表达。结果:与模型组比较,黄芪甲苷低、高剂量组大鼠术后伤口面积占比均随时间逐渐降低,且黄芪甲苷高剂量组疗效更佳。与正常组比较,模型组创面组织COL1A1荧光强度降低而α-SMA表达升高;上皮组织破损严重,厚度增加,可见大量炎性细胞浸润;肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达升高;NF-κB p65、磷酸化(p)-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt蛋白表达升高,而SIRT1表达降低(P<0.05)。与模型组比较,黄芪甲苷治疗后COL1A1和α-SMA荧光强度增高;上皮细胞数量增多,厚度降低,炎性细胞减少,胶原数量增多;TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS的mRNA表达降低;NF-κB p65、p-PI3K/PI3K和pAkt/Akt蛋白表达降低,SIRT1升高,且高剂量组效果更佳(P<0.05)。与黄芪甲苷高剂量组比较,LY294002和EX527抑制PI3K/Akt和SIRT1通路可阻止黄芪甲苷对慢性难愈性创面的治疗效力。结论:黄芪甲苷外用对大鼠慢性难愈性创面愈合有明显促进作用,其机制可能与激活PI3K/Akt通路和SIRT1/NF-κB通路有关。

关键词：黄芪甲苷磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt) 沉默调节蛋白1(SIRT1) 慢性难愈性创面

基于定性、定量方法的浮小麦与小麦差异成分分析

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中国药房 2024年第11期35卷 1296-1302页

作者：李雪娇胡雨陈赟商娟李臻阳封云铧邹建东姚卫峰卢苏许美娟南京中医药大学附属医院南京210029 南京中医药大学第一临床医学院南京210023

目的分析浮小麦和小麦的成分差异,为二者的鉴定及质量控制提供参考。方法收集20批浮小麦和3批小麦药材,采用高效液相色谱法,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)绘制指纹图谱并进行相似度评价,应用聚类分析(CA)、主成分分... 详细信息

目的分析浮小麦和小麦的成分差异,为二者的鉴定及质量控制提供参考。方法收集20批浮小麦和3批小麦药材,采用高效液相色谱法,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)绘制指纹图谱并进行相似度评价,应用聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对不同产地浮小麦及小麦样品进行差异分析,筛选差异成分,并测定浮小麦和小麦中6个指认成分的含量。结果浮小麦指纹图谱的相似度为0.928~0.996,小麦与浮小麦的相似度为0.761~0.773;在浮小麦和小麦中共标定19个共有峰,指认出了6个成分,分别为亚麻酸、亚油酸、5-十七烷基间苯二酚、5-十九烷基间苯二酚、5-二十一烷基间苯二酚和5-二十三烷基间苯二酚。CA、PCA结果显示,浮小麦和小麦能明显区分;产地为安徽的浮小麦的分布较为集中。OPLS-DA结果显示,亚麻酸、亚油酸及其他6个未知化合物为浮小麦和小麦的差异成分。浮小麦中上述6个指认成分的平均含量分别为0.100 9、1.094 0、0.005 1、0.030 9、0.098 2、0.024 8 mg/g,且浮小麦中亚麻酸、亚油酸的含量均显著高于小麦(P<0.05)。结论所建定性、定量测定方法操作简单、结果可靠,可用于浮小麦和小麦的鉴别及质量评价。亚麻酸、亚油酸等差异成分可为浮小麦和小麦的鉴别及药效学差异研究提供线索。

关键词：浮小麦小麦指纹图谱含量测定化学计量学分析差异成分高效液相色谱法

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温经通络汤含药血清对小鼠软骨细胞损伤及IκB-ζ/HIF-1α/LDHA轴的影响研究

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南京中医药大学学报 2024年第5期40卷 469-478页

作者：魏伟彭晨健顾任钧颜习武叶嘉鹏黄桂成孙鲁宁南京中医药大学附属医院江苏南京210029 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023 南京中医药大学附属南京中医院江苏南京210001

目的研究温经通络汤含药血清对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的小鼠原代软骨细胞损伤的影响及机制。方法采用IL-1β诱导小鼠原代软骨细胞损伤模型,检测细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α,软骨降解相关蛋白酶基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP9... 详细信息

目的研究温经通络汤含药血清对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的小鼠原代软骨细胞损伤的影响及机制。方法采用IL-1β诱导小鼠原代软骨细胞损伤模型,检测细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α,软骨降解相关蛋白酶基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP9、MMP13、ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)以及糖酵解相关酶乳酸脱氢酶A(LDHA)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)、还原型辅酶Ⅱ氧化酶2(NOX2)、还原型辅酶Ⅱ氧化酶4(NOX4)的mRNA表达;测定细胞内MMP3、MMP13、P65、IκB-ζ、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)以及LDHA蛋白表达水平;进一步检测细胞上清液中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和乳酸的浓度,测定细胞内辅酶Ⅰ(NAD)的还原态(NADH)和氧化态(NAD+)的比率,以及细胞内活性氧(ROS)水平。结果温经通络汤含药血清可显著抑制IL-1β软骨细胞内IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达(P<0.01),降低细胞上清液中NO浓度(P<0.05,P<0.01),下调IκB-ζ(P<0.05)和P65蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。温经通络汤含药血清可显著下调MMP3、MMP9、MMP13以及ADAMTS4 mRNA表达(P<0.01),抑制MMP13(P<0.05,P<0.01)和MMP3(P<0.05)的蛋白表达。氧化应激方面,它可显著抑制软骨细胞内ROS的产生,提高NADH/NAD+比率,降低上清液中MDA浓度,下调HIF-1α蛋白表达(P<0.01)。温经通络汤含药血清可显著降低乳酸浓度,下调LDHA、PKM2、NOX2、NOX4的表达,降低细胞内糖酵解水平(P<0.05,P<0.01)。结论温经通络汤含药血清可通过抑制炎症、软骨降解、氧化应激和糖酵解,缓解IL-1β诱导的小鼠原代软骨细胞损伤,其机制可能与调控IκB-ζ/HIF-1α/LDHA轴有关。

关键词：温经通络汤含药血清 IκB-ζ/HIF-1α/LDHA轴白细胞介素-1β 软骨细胞损伤

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不同工艺对养肝降草合剂整体质量的影响

中成药 2024年第7期46卷 2157-2163页

作者：刘玉鑫朱亚苹田立元吴磊南京中医药大学附属医院江苏南京210029 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210029

目的考察提取、浓缩、离心、灭菌工艺对养肝降草合剂整体质量的影响。方法分析采用菲罗门LunaC_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1mL/min;柱温20℃。建立HPLC指纹图谱,测定红景天苷、栀子苷、连翘... 详细信息

目的考察提取、浓缩、离心、灭菌工艺对养肝降草合剂整体质量的影响。方法分析采用菲罗门LunaC_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1mL/min;柱温20℃。建立HPLC指纹图谱,测定红景天苷、栀子苷、连翘酯苷A、特女贞苷、甘草酸、白术内酯Ⅲ的含量,并计算其转移率。结果15批不同工艺下样品指纹图谱中有20个共有峰,相似度大于0.950。6种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9990),平均加样回收率96.96%~106.69%,RSD0.97%~2.87%,转移率大于80%,总转移率大于90%。结论养肝降草合剂在不同工艺下均具有较好的稳定性。

关键词：养肝降草合剂提取工艺浓缩工艺离心工艺灭菌工艺 HPLC指纹图谱含量测定

补肾助孕方对黄体功能不全性不孕症大鼠Treg、Th17及其相关因子的影响

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南京中医药大学学报 2024年第2期40卷 129-136页

作者：阮芳周惠芳南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023 南京中医药大学附属医院江苏南京210029

目的探讨补肾助孕方对黄体功能不全(Luteal phase defect,LPD)性不孕症大鼠模型调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)及相关因子的影响。方法采用大鼠灌服米非司酮混合液(10 mL·kg^(-1))构建LPD性不孕症模型,分别给予阳性药地屈孕... 详细信息

目的探讨补肾助孕方对黄体功能不全(Luteal phase defect,LPD)性不孕症大鼠模型调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)及相关因子的影响。方法采用大鼠灌服米非司酮混合液(10 mL·kg^(-1))构建LPD性不孕症模型,分别给予阳性药地屈孕酮混合液(0.02 g·kg^(-1))和补肾助孕低(4.5 g·kg^(-1))、中(9 g·kg^(-1))、高(18 g·kg^(-1))剂量组干预。通过苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察子宫组织病理形态,流式细胞法和ELISA法检测大鼠外周血Treg、Th17细胞百分比和相关因子含量,Western blot和qPCR法检测大鼠Treg、Th17细胞转录因子蛋白水平及mRNA的表达。结果与空白组相比,模型组子宫内膜厚度明显变薄(P<0.01),Treg细胞百分比及抗炎因子白介素-10(IL-10)含量显著下降(P<0.01),Th17细胞百分比及炎症因子白介素-17A(IL-17A)明显升高(P<0.01),FOXP3蛋白及mRNA表达被抑制(P<0.05,P<0.001),RORγT蛋白及mRNA水平呈现高表达(P<0.01,P<0.001);与模型组相比,地屈孕酮及补肾助孕中、高剂量组能增加子宫内膜增厚(P<0.05,P<0.01),促进子宫内膜腺体的增生和发育;Treg细胞百分比及IL-10含量显著增加(P<0.01,P<0.001),Th17细胞百分比明显下降(P<0.01,P<0.001),FOXP3蛋白表达上调(P<0.01,P<0.001);补肾助孕中、高剂量组IL-17A含量及RORγT蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);地屈孕酮组和补肾助孕高剂量组FOXP3 mRNA水平显著升高(P<0.01,P<0.001),RORγT mRNA表达下调(P<0.001)。结论补肾助孕方可调节LPD性不孕症大鼠的免疫平衡,提高子宫内膜容受性,这可能是治疗不孕症的新的思路。

关键词：补肾助孕方调节性T细胞辅助性T细胞17 黄体功能不全性不孕症

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