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母胎界面异常导致反复种植失败的免疫因素及治疗进展

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安徽医科大学学报 2024年第6期59卷 935-938页

作者：易海星蒋欢欢李彩华(综述) 周平(审校) 安徽医科大学第一附属医院妇产科合肥230022 国家卫生健康委配子及生殖道异常研究重点实验室合肥230032 生命资源保存与人工器官教育部工程研究中心合肥230032

随着辅助生殖技术的精进,反复种植失败(RIF)问题越来越不容忽视。近年来RIF已成为生殖领域的热点和难点。妊娠是“半同种异体移植物”胚胎成功侵入子宫内膜的过程,需要在母胎免疫耐受形成的背景下完成。子宫内膜各种免疫细胞或其分泌的... 详细信息

随着辅助生殖技术的精进,反复种植失败(RIF)问题越来越不容忽视。近年来RIF已成为生殖领域的热点和难点。妊娠是“半同种异体移植物”胚胎成功侵入子宫内膜的过程,需要在母胎免疫耐受形成的背景下完成。子宫内膜各种免疫细胞或其分泌的细胞因子失衡,会引起母胎界面免疫微环境的异常,不利于胚胎种植及妊娠维持。现对母胎界面中异常免疫微环境导致FIR的研究现状及治疗进展做一综述。

关键词：反复种植失败母胎界面免疫耐受细胞因子

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原代人胚成肌细胞体外培养增殖及分化特性

中国修复重建外科杂志 2001年第5期15卷 261-264页

作者：杨志明岑石强解慧琪李胜富华西医科大学附属第一医院骨科华西医科大学附属第一医院移植免疫实验室

目的　分离培养人胚胎成肌细胞 ,观察原代细胞体外增殖与分化特性。方法　选择健康妇女捐赠的胎儿骨骼肌标本 ,参照 Blau等的胰蛋白酶与胶原酶混合、多步消化法分离成肌细胞。经差速贴壁法纯化后 ,在含 2 0 %胎牛血清的生长培养基中培... 详细信息

目的　分离培养人胚胎成肌细胞 ,观察原代细胞体外增殖与分化特性。方法　选择健康妇女捐赠的胎儿骨骼肌标本 ,参照 Blau等的胰蛋白酶与胶原酶混合、多步消化法分离成肌细胞。经差速贴壁法纯化后 ,在含 2 0 %胎牛血清的生长培养基中培养 ,以生长曲线评价其增殖情况 ;含 5 %胎牛血清的融合培养基中培养 ,以磷酸肌酸激酶 - MM型合成量及成肌细胞融合率评价其分化能力。通过光镜、透射电镜、免疫细胞化学方法 (小鼠抗人肌球蛋白单克隆抗体 )鉴定所得细胞。结果　电镜下可见所得细胞含大量游离核糖体 ,肌球蛋白免疫细胞化学染色强阳性 ,能合成磷酸肌酸激酶 ,能融合形成肌小管 ,证明其为骨骼肌成肌细胞。在生长培养基中原代细胞倍增时间为4.8天 ,在融合培养基作用下 ,肌小管融合率及磷酸肌酸激酶合成量明显增加。结论　多步酶消化法与差速贴壁法能获得足量、纯净成肌细胞 ,所得细胞增殖能力强 ,能表达骨骼肌特异的收缩蛋白 ;

关键词：组织工程人胚成肌细胞体外培养细胞增殖细胞分化

缓释万古霉素三维支架修复兔感染性骨软骨缺损

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中国组织工程研究 2024年第22期28卷 3509-3516页

作者：李兴屿周杰李沙沙张天喜郭国宁喻安永邓江叶鹏遵义医科大学附属医院急诊科(急救创伤病区) 贵州省遵义市563003 遵义市第一人民医院骨科贵州省遵义市563003

背景:大量研究证实组织工程支架几乎可完全修复骨软骨缺损,但当骨软骨缺损合并感染时,即使前期经过彻底的清创,单纯骨软骨组织工程支架的修复效果往往不理想。目的:制备盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架,观察其... 详细信息

背景:大量研究证实组织工程支架几乎可完全修复骨软骨缺损,但当骨软骨缺损合并感染时,即使前期经过彻底的清创,单纯骨软骨组织工程支架的修复效果往往不理想。目的:制备盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架,观察其对兔股骨远端感染性骨软骨缺损的修复效果。方法:①采用乳化溶剂挥发法制备盐酸万古霉素缓释微球;将不同质量(7.5,10,12.5 mg)的缓释微球分别与丝素蛋白-壳聚糖-纳米羟基磷灰石溶液混合,利用化学交联法制备盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架,表征支架的孔隙率、吸水膨胀率、热水溶失率及体外药物缓释等。②将45只新西兰大白兔随机分为空白组、对照组、实验组,每组15只,均建立右后肢股骨远端骨软骨缺损并感染模型,空白组不作任何处理,对照组缺损处植入丝素蛋白-壳聚糖-纳米羟基磷灰石支架,实验组缺损处植入盐酸万古霉素缓释微球(10 mg)丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架。术后1周,检测血液样本C-反应蛋白、白细胞水平;术后4,8,12周取术区组织,分别进行大体观察与病理学观察。结果与结论:①随着缓释微球含量的增加,支架的孔隙率降低,组间比较差异有显著性意义(P0.05);3组支架体外均可持续释放盐酸万古霉素达30 d以上。②实验组兔血液样本C-反应蛋白、白细胞水平均低于空白组、对照组(P免疫组化染色显示,实验组兔术后各时间点的骨软骨修复效果明显优于空白组、对照组。③结果表明,盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架能有效促进开放性骨软骨缺损的修复。

关键词：载药微球万古霉素骨软骨缺损组织工程丝素蛋白壳聚糖纳米羟基磷灰石支架

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异种移植社会伦理问题

中国修复重建外科杂志 1998年第6期12卷 363-368页

作者：何秋明李幼平李胜富华西医科大学附属第一医院移植免疫实验室

同种供器官、供组织短缺已愈来愈明显，异种移植为最终解决这一世界性难题提供了可能。猪在很多方面与人相近，相对非人灵长类动物，社会、伦理方面的争议较少，已被公认为最理想的供体得以深入研究。但要最终用于临床，除解决免疫、遗... 详细信息

同种供器官、供组织短缺已愈来愈明显，异种移植为最终解决这一世界性难题提供了可能。猪在很多方面与人相近，相对非人灵长类动物，社会、伦理方面的争议较少，已被公认为最理想的供体得以深入研究。但要最终用于临床，除解决免疫、遗传、生理、解剖和人畜共患病防治外，还必须考虑伦理、经济、受者及其家庭以及社会的心理承受力和接受度。加之异种供体的商品属性及其生产、使用过程将遵循的市场规律，是对现行同种移植“自愿捐赠，统一分配”管理体制的极大冲击，有必要在统一认识的基础上。

关键词：异种移植社会伦理

肾移植与抗人巨细胞病毒感染的新药研发新进展

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江苏大学学报（医学版） 2024年第2期34卷 99-103,110页

作者：程远越陈一鼎蒋敏之陈敬贤王明丽张俊玲安徽医科大学第一临床医学院安徽合肥230032 安徽医科大学第一附属医院泌尿外科安徽合肥230022 安徽医科大学临床病毒研究所安徽合肥230032 芜湖天明生物技术有限公司安徽芜湖241000 安徽医科大学基础医学院安徽合肥230032

肾移植术是目前治疗大多数终末期肾脏疾病的最有效方法,但肾移植术后的患者易发人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)感染性疾病并严重影响移植后器官的功能。在免疫系统功能正常的人群中,HCMV感染常表现为无症状。但在免疫功能... 详细信息

肾移植术是目前治疗大多数终末期肾脏疾病的最有效方法,但肾移植术后的患者易发人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)感染性疾病并严重影响移植后器官的功能。在免疫系统功能正常的人群中,HCMV感染常表现为无症状。但在免疫功能低下人群中,如肾移植术后患者,HCMV感染易导致多器官功能衰竭甚至死亡。临床现有治疗药物如伐昔洛韦、更昔洛韦等虽可以有效地预防器官移植受者的HCMV感染,但该类抗病毒药物易产生耐药性、血液毒性、肾毒性、致癌性及生殖能力的损害等不良反应。本文针对HCMV UL97蛋白激酶的抑制剂及其第二代抑制剂、依赖宿主代谢途径的抗病毒药物以及早期的新型小分子合成抑制剂等新型抗病毒药物的研发和临床试验做一综述。

关键词：人巨细胞病毒(HCMV) 新型药物耐药性肾移植抑制剂抗HCMV常规临床用药

流体切应力作用下中性粒细胞F-肌动蛋白的变化

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生物医学工程学杂志 1999年第4期16卷 399-405页

作者：田卫陈槐卿陈蕴颖雷松陈云爽步宏魏于全华西医科大学生物医学工程研究室成都610041 华西医科大学附属第一医院肿瘤生物治疗中心成都610041 华西医科大附属第一医院移植免疫实验室成都610041

中性粒细胞担负着机体的防御功能，其生理特点关系着功能实现。由于中性粒细胞的成熟储存与功能发挥是在不同的力学环境中完成的，因而也就存在着不同的环境适应。Ｆ－ａｃｔｉｎ的含量与细胞的力学性质有着密切关系。通过对不同切应... 详细信息

中性粒细胞担负着机体的防御功能，其生理特点关系着功能实现。由于中性粒细胞的成熟储存与功能发挥是在不同的力学环境中完成的，因而也就存在着不同的环境适应。Ｆ－ａｃｔｉｎ的含量与细胞的力学性质有着密切关系。通过对不同切应力下Ｆ－ａｃｔｉｎ含量及分布的观察，我们发现：在低切应力范围内随着切应力的升高Ｆ－ａｃｔｉｎ的含量下降，不同的剪切类型所产生的效果有所差异；切应力与ｆ－ＭＬＰ或ＴＮＦ联合作用会使Ｆ－ａｃｔｉｎ的含量比ｆ－ＭＬＰ或ＴＮＦ单独作用时下降，其趋势与单纯切应力作用相似。切应力作用后，细胞膜附近的Ｆ－ａｃｔｉｎ明显减少。ｆ－ＭＬＰ或ＴＮＦ使Ｆ－ａｃｔｉｎ含量升高则主要集中在细胞边缘，这时再施加切应力，细胞边缘的Ｆ－ａｃｔｉｎ含量也会显著下降。结果表明：中性粒细胞在流体切应力作用下通过Ｆ－ａｃｔｉｎ的解聚，降低细胞膜附近的硬度，增加细胞的变形能力，从而减少细胞在流体中的阻力，有利于细胞更好地通过循环，完成其功能。当切应力上升到较大值后，细胞内Ｆ－ａｃｔｉｎ含量会上升，以抵抗力学的破坏作用。可以得出的结论是：切应力作用下，中性粒细胞内Ｆ－ａｃｔｉｎ含量随所受切应力的大小呈现双向调节，表现出灵活的力学适?

关键词：中性粒细胞 F-actin 稳定剪切正弦振荡剪切

脑源性神经营养因子基因转染培养肌母细胞的表达

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中华实验外科杂志 2001年第5期18卷 459-460,T003页

作者：刘艳辉毛伯镛陈俊杰王若菡高立达程永忠张杰李胜富华西医科大学附属第一医院神经外科成都610041 华西医科大学基础医学院重组DNA室华西医科大学附属第一医院病理科成都610041 华西医科大学附属第一医院移植工程与移植免疫研究室成都610041

目的　了解含脑源性神经营养因子 (BDNF)基因的表达质粒PSVCEPBDNF CAT在培养肌母细胞中的表达情况及LipofectAMINE阳离子脂质体介导的转染效率。方法　按每 2 μg表达质粒PSVCEPBDNF CAT由 2 0 μlLipofectAMINE包裹后转染至细胞浓度... 详细信息

目的　了解含脑源性神经营养因子 (BDNF)基因的表达质粒PSVCEPBDNF CAT在培养肌母细胞中的表达情况及LipofectAMINE阳离子脂质体介导的转染效率。方法　按每 2 μg表达质粒PSVCEPBDNF CAT由 2 0 μlLipofectAMINE包裹后转染至细胞浓度为 2× 1 0 8个 /L的3 .5cm培养皿培养的肌母细胞中 ,连续观察细胞形态 ,48h后用免疫细胞化学和免疫电镜的方法来检测其表达情况。结果　培养肌母细胞在转染 6h吞噬脂质体最显著 ,转染 48h后 ,40 %的肌母细胞胞质内有BDNF基因表达 ,免疫电镜结果证实表达在细胞质近胞膜处。结论　含BDNF微基因的表达质粒PSVCEPBDNF CAT可以在培养肌母细胞中表达 ,脂质体转染的方法简便、有效。

关键词：脑源性神经营养因子基因转染免疫细胞化学肌母细胞 BDNF

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连续传代人胚骨骼肌成肌细胞生物学特性研究

中国修复重建外科杂志 2000年第6期14卷 372-376页

作者：岑石强杨志明解慧琪李胜富华西医科大学附属第一医院骨科成都610041 华西医科大学附属第一医院移植免疫实验室成都610041

目的　探讨成肌细胞连续传代能力 ,选择适宜肌组织工程研究的成肌细胞。方法　常规传代培养人胚骨骼肌成肌细胞 ,以生长曲线、融合率分别观察细胞增殖、分化能力 ,探讨成纤维细胞沾染对传代细胞的影响。结果　第 6代以内细胞成纤维细胞... 详细信息

目的　探讨成肌细胞连续传代能力 ,选择适宜肌组织工程研究的成肌细胞。方法　常规传代培养人胚骨骼肌成肌细胞 ,以生长曲线、融合率分别观察细胞增殖、分化能力 ,探讨成纤维细胞沾染对传代细胞的影响。结果　第 6代以内细胞成纤维细胞沾染轻 ,主要表现出成肌细胞的生长特性 ,增殖较旺盛 ,分化能力高。第 8代～第 16代细胞成纤维细胞沾染重 ,表现出成纤维细胞的生长特性 ,增殖速度明显加快但分化能力低。第 2 0代细胞退变明显 ,细胞增殖与分化能力均丧失。结论　第 6代以内细胞生长特性以成肌细胞为主 ,增殖能力强 ,肌小管形成率高 ,适宜于组织工程研究。

关键词：胚骨骼肌成肌细胞生物学特征传代培养

血管内皮细胞对体外培养成骨细胞生物学特性的影响

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中华实验外科杂志 2001年第4期18卷 67-68页

作者：余希杰杨志明解慧琪秦廷武李胜富华西医科大学附属第一医院移植免疫室 610041成都华西医科大学附属第一医院骨科

目的　通过血管内皮细胞与成骨细胞体外协同培养 ,探讨血管内皮细胞对成骨细胞生物学特性的影响。方法　用 12周自愿中止妊娠并捐赠的健康胚胎来源的成骨细胞和血管内皮细胞采取直接和间接协同培养的方法。倒置相差显微镜下观察细胞一... 详细信息

目的　通过血管内皮细胞与成骨细胞体外协同培养 ,探讨血管内皮细胞对成骨细胞生物学特性的影响。方法　用 12周自愿中止妊娠并捐赠的健康胚胎来源的成骨细胞和血管内皮细胞采取直接和间接协同培养的方法。倒置相差显微镜下观察细胞一般形态 ,细胞计数比较增殖能力 ,检测骨钙素和碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,研究成骨细胞成骨能力的改变。结果　血管内皮细胞与成骨细胞体外协同培养具有良好的细胞相容性 ,协同培养使细胞增殖加快 (P <0 .0 5 )。直接、间接协同培养ALP活性分别为 ( 8.2 0 0± 0 .75 5 ) μmol/(min·10 6 细胞 ) ,( 12 .30 0± 1.30 0 ) μmol/(min·10 6 细胞 ) ,较成骨细胞ALP活性 ( 4.90 0± 0 .80 0 ) μmol/(min·10 6 细胞 )明显增高 (P <0 .0 5 )。直接、间接协同培养骨钙素合成量分别为 ( 3.82 67± 0 .40 77) μg/L、( 5 .15 33± 0 .5 965 )μg/L ,较成骨细胞 ( 2 .5 0 83± 0 .5 5 30 ) μg/L明显增高 ( P <0 .0 5 )。结论　体外协同培养血管内皮细胞与成骨细胞 ,对成骨细胞的生物学特性具有良好的调控作用。

关键词：血管内皮细胞成骨细胞体外培养生物学特性组织工程