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鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白单克隆抗体的制备及其特性研究

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中国动物传染病学报 2025年

作者：崔利兵张志飞石晓娜许榜丰闫大为滕巧泱刘芹防李泽君焦培荣苑纯秀华南农业大学兽医学院中国农业科学院上海兽医研究所

为了制备识别鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）gD蛋白的单克隆抗体，本研究以ILTV作为免疫原，采用杂交瘤技术制备融合细胞，再用酶联免疫吸附（ELISA）与间接免疫荧光（IFA）技术筛选能分泌特异性识别ILTVgD蛋白抗体的杂交瘤细胞，并对所... 详细信息

为了制备识别鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）gD蛋白的单克隆抗体，本研究以ILTV作为免疫原，采用杂交瘤技术制备融合细胞，再用酶联免疫吸附（ELISA）与间接免疫荧光（IFA）技术筛选能分泌特异性识别ILTVgD蛋白抗体的杂交瘤细胞，并对所分泌的单抗进行特性研究。间接ELISA与IFA试验结果表明，本研究成功筛选到两株能分泌识别ILTVgD蛋白的杂交瘤细胞。细胞微量中和试验结果表明，两株杂交瘤细胞分泌的抗体均能中和ILTV。抗体亚型鉴定均为IgG1，轻链为 κ 链。ILTV gD蛋白单克隆抗体的制备与特性研究为ILTV gD中和表位的筛选与ILTV血清抗体检测方法的建立提供了基础。

关键词：鸡传染性喉气管炎病毒杂交瘤细胞技术单克隆抗体 gD蛋白

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林麝源肺炎克雷伯菌耐药性及毒力基因分析

中国畜牧兽医 2025年第1期52卷 411-421页

作者：廖慧群赵美曾国辉苏仁伟邓衔柏华南农业大学兽医学院广州510642 阳春市动物卫生监督所阳春529600

[目的]对广东地区某规模化林麝养殖场易导致成年林麝肺炎等疾病的肺炎克雷伯菌进行耐药性及毒力基因分析,为有效防控由肺炎克雷伯菌引发的疾病提供参考依据。[方法]采集广东某林麝场成年林麝粪便共81份,采用细菌分离培养、形态学观察、... 详细信息

[目的]对广东地区某规模化林麝养殖场易导致成年林麝肺炎等疾病的肺炎克雷伯菌进行耐药性及毒力基因分析,为有效防控由肺炎克雷伯菌引发的疾病提供参考依据。[方法]采集广东某林麝场成年林麝粪便共81份,采用细菌分离培养、形态学观察、生化分析和PCR扩增16S rRNA和溶血酵素基因的方法分离纯化肺炎克雷伯菌。通过血清型鉴定、药敏试验和PCR扩增耐药基因和毒力基因等方法研究分离菌株特性。[结果]分离菌在麦康凯平板上形成粉红色、光滑、湿润的单菌落;革兰染色镜检显示,菌体呈红色的短杆状,可判断为革兰阴性杆菌。通过生化试验选取与肺炎克雷伯菌生化特性一致的菌株进行PCR扩增。16S rRNA基因PCR扩增结果显示,获得大小约为1 542 bp的条带。共33株分离株与GenBank数据库肺炎克雷伯菌16S rRNA基因核苷酸序列相似性>98%,且特异性基因khe检测为阳性,即本研究从81份样品中成功分离鉴定出33株肺炎克雷伯菌。血清型检测结果显示,分离株中优势血清型是K57。药敏试验结果显示,分离株对青霉素类、氨基糖苷类、四环素类、磺胺类、氯霉素类、喹诺酮类、单环β-内酰胺类药物均有不同程度的耐药性;对头孢菌素类和碳青霉烯类药物敏感。检测的12种耐药基因中,bla_(SHV)和oqxA基因检出率均为96.97%;aac(6′)-Ⅰb-cr、rmtB、tetA、tetM、sul1、sul2、oqxB和floR基因检出率分别为57.58%、51.52%、78.79%、84.85%、72.73%、66.67%、87.88%和51.52%;未检测出bla_(KPC)和bla_(NDM)基因。检测的9种毒力基因中,wabG、uge、mrkD、entB和ureA基因检出率较高,分别为90.91%、96.97%、96.97%、100%和100%;aerobactin和allS基因检出率较低,分别为6.06%和18.18%;未检出ybtA基因。[结论]本研究成功分离鉴定出33株林麝源肺炎克雷伯菌,优势血清型是K57,存在多重耐药情况,耐药基因和毒力基因携带率高。本研究结果可为林麝源肺炎克雷伯菌所致疾病的防控提供数据支持。

关键词：林麝肺炎克雷伯菌耐药性毒力基因抗菌药物

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侧流免疫层析测定在禽病监测和诊断中的应用

养禽与禽病防治 2025年第3期 5-7页

作者：张金玉曹伟胜华南农业大学兽医学院广州51064

侧流免疫层析测定(LFIA)是一种基于抗原、抗体免疫反应的经典快速检测技术。目前,该技术已被用于检测禽类疾病,包括禽流感、新城疫和鸡传染性支气管炎等重要病毒性和细菌性疾病,有助于早发现早诊断,快速采取控制措施以减少疾病传播。因... 详细信息

侧流免疫层析测定(LFIA)是一种基于抗原、抗体免疫反应的经典快速检测技术。目前,该技术已被用于检测禽类疾病,包括禽流感、新城疫和鸡传染性支气管炎等重要病毒性和细菌性疾病,有助于早发现早诊断,快速采取控制措施以减少疾病传播。因此,本文主要在侧向流免疫分析法的原理、组成、方法和最新进展的基础上,重点阐述了LFIA在禽病监测和诊断中的应用,为禽类疾病的快速检测和控制提供了有效的工具。

关键词：侧流免疫层析测定快速诊断测试禽病监测和诊断

食品级重组乳酸乳球菌强组成型分泌猪肠道益生的pEGF-p40

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畜牧兽医学报 2025年

作者：何容肖吴杨博张淑霞赵锃珏黄娟潘伟雄任芷欣黄浩滨吴佳辉吴海阳沈世彦孙崇军张玲华华南农业大学生命科学学院广东省农业生物发育与环境适应重点实验室

猪表皮生长因子（pEGF）与三叶因子协同给药已被证明能有效促进猪的肠道增殖与修复。本研究旨在构建食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统并将其用于融合表达pEGF以及对猪肠道有益生作用的鼠李糖乳杆菌衍生蛋白p40，以克服目前乳酸乳... 详细信息

猪表皮生长因子（pEGF）与三叶因子协同给药已被证明能有效促进猪的肠道增殖与修复。本研究旨在构建食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统并将其用于融合表达pEGF以及对猪肠道有益生作用的鼠李糖乳杆菌衍生蛋白p40，以克服目前乳酸乳球菌重组表达中组成型表达量低的现状以及避免抗生素使用的问题，并初步探索一种更强效的猪肠道益生制剂。首先，通过金黄色葡萄球菌核酸酶报告系统，以常用乳酸乳球菌组成型启动子P32为对照，从乳酸乳球菌NZ9000组成型高表达蛋白质的启动子以及前人研究发现的乳酸乳球菌强组成型启动子中，可视化地筛选出乳酸乳球菌NZ9000的伸长因子Tu的启动子（P1）活性最强。进一步地，将pNZ8148的氯霉素抗性基因替换为乳链菌肽抗性基因，成功构建了具有良好的乳链菌肽耐受性且完全失去氯霉素抗性的食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统NZ9000/pP1NR。同时，本研究利用该系统成功表达pEGF和融合蛋白pEGF-p40。细胞增殖试验结果显示，含有pEGF-p40的菌株培养上清更有效地促进猪小肠上皮细胞IPEC-J2的增殖。通过qRT-PCR检测了刺激后IPEC-J2细胞的SGLT-1、GLUT-2、SUC、EGFR和GLP2R，结果显示含有pEGF-p40的培养上清调节相关基因的表达情况不同于仅含有pEGF的培养上清。本研究构建了食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统，成功表达了对猪肠道具有益生作用的pEGF-p40，为其他益生物质的安全生产提供借鉴，为开发一种强效的猪肠道益生制剂做了先行探究。

关键词：乳酸乳球菌组成型表达 pEGF p40 肠道健康

诱导型表达H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白的乳酸乳球菌的构建及其对鸭的免疫原性分析

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畜牧兽医学报 2025年第2期56卷 774-787页

作者：吴佳辉沈世彦邓锦波吴海阳任芷欣吴杨博黄娟黄浩滨潘伟雄赵锃珏何容肖孙崇军张玲华华南农业大学生命科学学院广东省农业生物发育与环境适应重点实验室广州510642

禽流感是由禽流感病毒引起的高度传染性疾病,受到感染的雏禽死亡率高,给家禽健康和经济带来严重影响。尽管传统疫苗可以有效预防禽流感,但由于鸭类养殖方式多为散户散养,环境多变,在接种传统疫苗时存在操作繁琐和免疫应激强等问题。为... 详细信息

禽流感是由禽流感病毒引起的高度传染性疾病,受到感染的雏禽死亡率高,给家禽健康和经济带来严重影响。尽管传统疫苗可以有效预防禽流感,但由于鸭类养殖方式多为散户散养,环境多变,在接种传统疫苗时存在操作繁琐和免疫应激强等问题。为了解决此难题,本研究旨在开发一种便捷且安全的雏鸭血凝素(hemagglutinin,HA)口服生物制剂。我们通过构建系列锚定序列(pgsA、BmpA、cA和M6)-GFP报告表达系统,可视化地评估了不同类型锚定序列对乳酸菌乳球表面展示系统的效果,成功筛选出BmpA和cA作为乳酸菌乳球中的高效锚定序列。比较优化密码子前后的HA在乳酸乳球菌的表达效果后,选取优化密码子的HA基因序列与BmpA、cA连接,构建乳酸菌表达质粒。然后把构建好的表达质粒转入基因组整合HA 1基因的乳酸乳球菌中,从而得到诱导型分泌联合表面展示HA蛋白的重组乳酸乳球菌(NZB-HA1-pNZ8148-BmpA-HA1和NZB-HA1-pNZ8148-HA1-cA)。ELISA检测结果表明,与口服单一表达型的重组乳酸乳球菌相比,口服诱导型分泌-表面展示乳酸乳球菌能诱生雏鸭血清中更佳的HA特异性IgG水平。本研究成功构建了锚定序列-GFP乳酸菌筛选系统,利用其筛选出了适合乳酸乳球菌的高效锚定序列。并将HA蛋白通过分泌联合表面展示的方式在乳酸乳球菌进行复合表达,成功获得了对雏鸭具有良好HA免疫原性的口服生物制剂,为后续开发操作简便、安全的鸭禽流感口服疫苗提供可行的实践路径。

关键词：锚定序列乳酸乳球菌禽流感雏鸭 HA

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文化活化+社会服务:社会工作活化非物质文化遗产路径研究

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社会工作 2025年第1期 128-151,164-166页

作者：陈玉生黄滢滢华南农业大学公共管理学院社会工作系华南农业大学公共管理学院广州510642

社会工作活化非物质文化遗产是文化社会工作的重要内容,对丰富中国文化建设和实施文化活化战略具有特殊意义。本文从文化社会工作角度,分析了G市L社区社会工作机构开展的竹编工艺非物质文化遗产活化项目“筑福行动”案例。研究发现,社... 详细信息

社会工作活化非物质文化遗产是文化社会工作的重要内容,对丰富中国文化建设和实施文化活化战略具有特殊意义。本文从文化社会工作角度,分析了G市L社区社会工作机构开展的竹编工艺非物质文化遗产活化项目“筑福行动”案例。研究发现,社会工作在实施“筑福行动”时要兼顾文化传承和社会服务的策略,挖掘竹编工艺社会性功能。这种策略渗透在社会工作活化竹编文化的主体化、生活化、公共化、社会化四个发展方向,引起非遗传承人、青少年、社区居民、游客等社会大众对竹编工艺内在特质的欣赏和喜爱,激活人们关注非遗文化的内在价值和集体情感的社会责任性消费。由此可见,社会工作活化非物质文化遗产,是通过激发非物质文化遗产的社会性功能,达成激活非物质文化遗产的社会责任性消费价值。

关键词：文化社会工作非物质文化遗产文化活化社会责任性消费

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IL-23、VEGFA和TGF-β对小鼠肿瘤免疫微环境的影响

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中国兽医科学 2025年第2期 263-271页

作者：苏伟谦刘泳琪刘思颖何婷全锦雯黄江利李玙萌刘忠华华南农业大学兽医学院华南农业大学实验动物中心

为探究白介素-23（IL-23）、血管内皮生长因子（VEGFA）、转录生长因子β（TGF-β）过表达对于肿瘤生长以及肿瘤免疫微环境的影响，采用慢病毒转染构建稳定过表达IL-23、VEGFA、TGF-β的B16小鼠黑色素瘤和MC38小鼠结肠癌细胞株，建立小... 详细信息

为探究白介素-23（IL-23）、血管内皮生长因子（VEGFA）、转录生长因子β（TGF-β）过表达对于肿瘤生长以及肿瘤免疫微环境的影响，采用慢病毒转染构建稳定过表达IL-23、VEGFA、TGF-β的B16小鼠黑色素瘤和MC38小鼠结肠癌细胞株，建立小鼠皮下移植瘤模型，定期记录肿瘤生长情况，流式细胞仪检测肿瘤中免疫细胞浸润水平；HE染色检测肿瘤组织结构及病理；RT-qPCR法检测肿瘤中相关炎症因子的表达。结果显示，与对照组相比，IL-23过表达后，B16和MC38肿瘤生长速度下降并且CD8+T细胞与DC细胞浸润比例均显著上升；VEGFA过表达后，B16肿瘤生长速度显著下降，部分抗肿瘤作用的免疫细胞比例显著上升，微血管数量显著多于对照组；TGF-β过表达后，MC38肿瘤生长速度显著下降，CD8+T细胞及DC细胞的浸润比例显著上升，TNF-α表达水平与对照组相比显著下降。以上结果表明，IL-23、VEGFA和TGF-β过表达对B16肿瘤和MC38肿瘤的抑制程度有差异，VEGFA可能通过改变微血管数量的方式改变B16肿瘤免疫微环境从而显著抑制肿瘤生长，TGF-β可能通过直接作用于肿瘤免疫细胞改变免疫微环境与抑制TNF-α表达显著抑制MC38肿瘤生长，IL-23可能通过增加免疫微环境中部分免疫细胞浸润从而一定程度抑制B16和MC38肿瘤的生长。本研究为细胞因子免疫治疗提供了新的实验依据，同时也为不同恶性程度的肿瘤提供免疫治疗参考。

关键词：肿瘤肿瘤免疫微环境细胞因子肿瘤模型基因过表达

组学技术在奶牛乳腺炎发病机制和诊断上应用研究进展

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畜牧兽医学报 2025年

作者：范曼婷黄若婷佘远航郭建超刘建营郭勇庆华南农业大学动物科学学院广东省种畜禽质量检测中心广东省农业技术推广中心

乳腺炎是奶牛养殖中危害较大的疾病之一，严重影响奶牛健康和乳品安全，因此需要及时采取预防和控制措施。目前，奶牛乳腺炎存在诊断效率不高和发病机制解释不清晰等问题。随着高通量测序技术的快速发展，基因组学、表观组学、转录组学... 详细信息

乳腺炎是奶牛养殖中危害较大的疾病之一，严重影响奶牛健康和乳品安全，因此需要及时采取预防和控制措施。目前，奶牛乳腺炎存在诊断效率不高和发病机制解释不清晰等问题。随着高通量测序技术的快速发展，基因组学、表观组学、转录组学、蛋白质组学等组学技术已被逐步应用于奶牛乳腺炎相关研究上，推动了对该疾病的深入认知。本文综述了组学技术在奶牛乳腺炎发病机制和诊断上的应用现状及研究进展，旨在为科学认识和降低乳腺炎发病率提供参考。通过解析奶牛乳腺炎的多层面机制，揭示了关键调控通路、潜在生物标志物，如CHI3L1、LBP、GSN、GCLC、C4等蛋白质及乳酸、酪氨酸等代谢物，可为乳腺炎揭发提供知道，也为干预治疗提供了新的途径。但是，在生产中应用时，组学技术仍面临着成本和技术门槛高等挑战。随着多组学技术的深入整合和成本降低，将有助于发现更精确的生物标志物，深入了解特定信号通路，为奶牛乳腺炎的预防、诊断和治疗提供更为科学的依据。

关键词：组学技术奶牛乳腺炎发病机制诊断

粤东水系连通工程对练江流域水质改善效果研究

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四川水利 2025年第1期46卷 122-127页

作者：刘思琦杨海燕张钦城崔茂云詹鑫宇华南农业大学水利水电工程系广州510642

为科学评价平原河网上调水工程对水质的改善作用,以粤东地区韩江-榕江-练江连通调水治理练江水污染为背景,选取练江干流上游段至青洋山桥断面为研究对象,构建MIKE21水动力-水质耦合模型,模拟三江水系调补水情况,分析引水天数、引水水质... 详细信息

为科学评价平原河网上调水工程对水质的改善作用,以粤东地区韩江-榕江-练江连通调水治理练江水污染为背景,选取练江干流上游段至青洋山桥断面为研究对象,构建MIKE21水动力-水质耦合模型,模拟三江水系调补水情况,分析引水天数、引水水质及闸站调度方式对河流水系水质的影响作用,并选取氨氮(NH3-N)、总氮(TN)为研究因子,定量评估水系连通和闸站调度对练江流域水环境质量的改善效果。结果表明,增加引水天数和引水流量对练江水系水质影响显著;当引水口水质由劣转优时,浓度改善率增长最明显;多水源引水与闸站调度相结合可以提升水质改善的效果。

关键词：平原河网调水工程水质数值模型闸站调度

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