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他克莫司高产菌株选育及发酵配方优化

中国抗生素杂志 2024年第2期49卷 168-174页

作者：王会会赵建辉孙术超刘雨任风芝赵建强微生物药物国家工程研究中心石家庄市微生物药物技术创新中心华北制药集团新药研究开发有限责任公司石家庄052165 华北制药华胜有限公司石家庄052160

目的选育他克莫司高产菌株,优化培养基配方,提高发酵产量。方法采用原生质体融合技术对2株筑波链霉菌进行基因组重排,并经响应面设计对发酵培养基配方进行优化。结果以紫外灭活作为遗传标记经过4轮基因组重排育种后,摇瓶筛选获得3株... 详细信息

目的选育他克莫司高产菌株,优化培养基配方,提高发酵产量。方法采用原生质体融合技术对2株筑波链霉菌进行基因组重排,并经响应面设计对发酵培养基配方进行优化。结果以紫外灭活作为遗传标记经过4轮基因组重排育种后,摇瓶筛选获得3株高产菌株,其中菌株FK22-71菌丝球松散、椭圆状,发酵浸泡液颗粒状。该菌株稳定高产,采用响应面设计优化后的配方在50 L罐发酵产量平均达1684 mg/L。结论基因组重排技术应用于他克莫司高产菌株选育,可大幅提高发酵产量,为其工业化发酵生产奠定了基础。

关键词：基因组重排他克莫司响应面设计培养基优化

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他克莫司的分离提纯研究

中国抗生素杂志 2024年第2期49卷 175-180页

作者：王圆超赵辉王月谷岩翡高月麒李晓露微生物药物国家工程研究中心石家庄市微生物药物技术创新中心华北制药集团新药研究开发有限责任公司石家庄052165 华北制药华胜有限公司石家庄052160

目的开发一种他克莫司的分离提纯工艺。方法采用离子交换树脂脱色除杂、纳滤、结晶等手段得到高质量的他克莫司粗粉,再经反相色谱硅胶层析、复合溶液结晶,得到符合USP标准的他克莫司精粉。结果优选的脱色树脂为D002,所得他克莫司粗... 详细信息

目的开发一种他克莫司的分离提纯工艺。方法采用离子交换树脂脱色除杂、纳滤、结晶等手段得到高质量的他克莫司粗粉,再经反相色谱硅胶层析、复合溶液结晶,得到符合USP标准的他克莫司精粉。结果优选的脱色树脂为D002,所得他克莫司粗粉效价大于800μg/mg,二氢他克莫司含量小于4%;该粗粉经UniSil C8Ultra Plus层析纯化,精粉含量大于99.5%,最大单杂小于0.1%。结论该工艺操作简单、能耗低、收率高,适于他克莫司的产业化应用。

关键词：他克莫司分离提纯离子交换树脂层析结晶

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抗狂犬病病毒单克隆抗体研究进展

中华微生物学和免疫学杂志 2024年第4期44卷 363-367页

作者：刘茜高洁曹晨华朱武洋中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫健委生物安全重点实验室北京102206 华北制药集团新药研究开发有限责任公司质量检验部生物活性实验室石家庄052260

狂犬病作为一种可防不可治的烈性传染病,采取有效的暴露后处置措施至关重要。当人处于狂犬病Ⅲ级暴露下,接种狂犬病免疫球蛋白(rabies immunoglobulin,RIG)是暴露后处置中的重要环节。源于人或动物血浆的RIG存在产能不足、价格偏高等问... 详细信息

狂犬病作为一种可防不可治的烈性传染病,采取有效的暴露后处置措施至关重要。当人处于狂犬病Ⅲ级暴露下,接种狂犬病免疫球蛋白(rabies immunoglobulin,RIG)是暴露后处置中的重要环节。源于人或动物血浆的RIG存在产能不足、价格偏高等问题,选择有效的抗狂犬病病毒单克隆抗体代替RIG成为一种趋势。作为WHO推荐的、替代RIG的被动免疫制剂,抗狂犬病病毒单克隆抗体具有适应性强、安全性高等优点。鉴于此,本研究拟对已上市的和正在研发的抗狂犬病病毒单克隆抗体进行综述,为该领域的后续研发提供参考和借鉴。

关键词：狂犬病抗狂犬病病毒单克隆抗体狂犬病免疫球蛋白

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雷莫拉宁的提取精制工艺研究

化学与生物工程 2024年第9期41卷 48-52,56页

作者：周站云彭亮周博李敏张雪霞郭月玲微生物药物国家工程研究中心河北省工业微生物代谢工程技术创新中心石家庄市微生物药物技术创新中心华北制药集团新药研究开发有限责任公司河北石家庄052165

研究了雷莫拉宁的提取精制工艺。雷莫拉宁发酵液经预处理、树脂HZ801富集纯化、乙醇-1%磷酸二氢钠水溶液(酒精度80%)解吸、500D有机纳滤膜浓缩和丙酮结晶,得到雷莫拉宁粗粉;再通过轴向压缩技术(洗脱剂为乙腈-3‰乙酸水溶液,体积比50∶50... 详细信息

研究了雷莫拉宁的提取精制工艺。雷莫拉宁发酵液经预处理、树脂HZ801富集纯化、乙醇-1%磷酸二氢钠水溶液(酒精度80%)解吸、500D有机纳滤膜浓缩和丙酮结晶,得到雷莫拉宁粗粉;再通过轴向压缩技术(洗脱剂为乙腈-3‰乙酸水溶液,体积比50∶50)分离、浓缩、2.0%活性炭脱色和丙酮重结晶,得到雷莫拉宁精粉。该工艺绿色环保、易操作,适合工业化放大生产。

关键词：雷莫拉宁树脂轴向压缩纳滤膜结晶精制

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纳米疫苗载体材料的研究进展

中国生物制品学杂志 2024年第9期37卷 1140-1145,1151页

作者：尚金梦赵静(综述) 常亮翟丽丽(审校) 华北制药集团新药研究开发有限责任公司抗体药物研制国家重点实验室河北石家庄052165

疫苗是一种预防传染病和治疗疾病的重要手段。近年,有研究采用分子生物学方法将病原体的多肽蛋白或核酸整合至载体上,构建新型疫苗。其中纳米材料具有生物相容性高、毒性低、抗原装载效率高、靶向性强等优势,已成为纳米疫苗制备中的常... 详细信息

疫苗是一种预防传染病和治疗疾病的重要手段。近年,有研究采用分子生物学方法将病原体的多肽蛋白或核酸整合至载体上,构建新型疫苗。其中纳米材料具有生物相容性高、毒性低、抗原装载效率高、靶向性强等优势,已成为纳米疫苗制备中的常用载体。目前,用于制备纳米疫苗的载体材料包括蛋白质/肽、脂质体、聚合物和无机物等,可用于多种疾病相关纳米疫苗的研发及制备。本文就各种纳米疫苗的优势及纳米疫苗载体材料的研究进展作一综述,以期为纳米疫苗的设计、研发及应用提供新的思路和策略。

关键词：纳米疫苗载体蛋白质脂质体聚合物无机物

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小核酸药物的研究进展

微生物学免疫学进展 2024年第5期 77-85页

作者：杨明明陈忱华北制药集团新药研究开发有限责任公司抗体药物研制国家重点实验室抗体药物河北省工程研究中心

小核酸药物作用于细胞内致病靶基因和RNA片段，通过改变宿主遗传信息的方式和调控蛋白表达达到治疗疾病的目的。其主要包括小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)、微核苷酸(microRNA,miRNA)和反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide... 详细信息

小核酸药物作用于细胞内致病靶基因和RNA片段，通过改变宿主遗传信息的方式和调控蛋白表达达到治疗疾病的目的。其主要包括小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)、微核苷酸(microRNA,miRNA)和反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides, ASO)。小核酸药物在临床上的应用较为广泛，包括罕见病、慢性病和肿瘤等。现就小核酸药物的主要分类、作用机制和临床应用等作一阐述。

关键词：小干扰核苷酸微核糖核酸反义寡核苷酸罕见病慢性病肿瘤

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诺如病毒疫苗研究概况

生物技术进展 2024年第1期14卷 17-25页

作者：焦红燕李国超常亮李岩异翟丽丽华北制药集团新药研究开发有限责任公司抗体药物研制国家重点实验室抗体药物河北省工程研究中心石家庄052160 华北制药金坦生物技术股份有限公司石家庄050035

诺如病毒(norovirus,NoV)是引发急性胃肠炎疾病的主要病原体之一。NoV易发生突变产生多种毒株,对人类健康造成严重威胁。由于缺乏成功的动物模型,抗NoV药物和疫苗的后续评价受到了限制,目前尚没有上市的疫苗用于NoV的预防。对NoV疫苗的... 详细信息

诺如病毒(norovirus,NoV)是引发急性胃肠炎疾病的主要病原体之一。NoV易发生突变产生多种毒株,对人类健康造成严重威胁。由于缺乏成功的动物模型,抗NoV药物和疫苗的后续评价受到了限制,目前尚没有上市的疫苗用于NoV的预防。对NoV疫苗的研究进展进行了综述,重点阐述了病毒样颗粒(virus like particles,VLP)疫苗、病毒载体疫苗和基于P颗粒疫苗的研究现状和发展前景,以期为NoV疫苗的研发提供新思路。

关键词：诺如病毒胃肠炎病毒样颗粒疫苗病毒载体疫苗 P颗粒疫苗

微生物来源的人白细胞弹性蛋白酶抑制剂F01-221A的研究

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中国抗生素杂志 2006年第8期31卷 458-461页

作者：任晓郑智慧路新华董悦生林洁马瑛刘梅张华贺建功华北制药集团新药研究开发中心

应用白细胞弹性蛋白酶抑制剂高通量的筛选模型对数千株真菌进行筛选,发现了阳性菌株F01-221。对该菌株的发酵产物进行有机溶剂提取、硅胶柱色谱、SephadexLH-20柱色谱和ODSHPLC制备等分离纯化,得到单体活性化合物F01-221A,它对人白细胞... 详细信息

应用白细胞弹性蛋白酶抑制剂高通量的筛选模型对数千株真菌进行筛选,发现了阳性菌株F01-221。对该菌株的发酵产物进行有机溶剂提取、硅胶柱色谱、SephadexLH-20柱色谱和ODSHPLC制备等分离纯化,得到单体活性化合物F01-221A,它对人白细胞弹性蛋白酶有较强的抑制活性,其IC50为22.1μmol/L。通过对F01-221A的紫外、质谱、核磁等理化数据分析,确定其与化合物equisetin同质。

关键词：微生物人白细胞弹性蛋白酶抑制剂炎症结构鉴定

离子色谱法测定肝素钠总己糖胺中半乳糖胺含量的方法研究

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品牌与标准化 2024年第4期 13-15页

作者：米文强任风芝刘建芬张向彬王彩肖李乐乐华北制药集团新药研究开发有限责任公司河北石家庄052165 华北制药华坤河北生物技术有限公司河北石家庄050000 河北省多组分生化药物制备技术创新中心河北石家庄050000

目的:建立肝素钠总己糖胺中半乳糖胺含量的检测方法。方法:将标准品及供试品在100℃下水解6 h,使用戴安ICS5000型离子色谱仪,以14 mm氢氧化钠溶液为淋洗液在0.5 m L/min流速下,经戴安氨基酸捕集柱(50 mm×4 mm)、PA20型色谱柱(150 mm×3... 详细信息

目的:建立肝素钠总己糖胺中半乳糖胺含量的检测方法。方法:将标准品及供试品在100℃下水解6 h,使用戴安ICS5000型离子色谱仪,以14 mm氢氧化钠溶液为淋洗液在0.5 m L/min流速下,经戴安氨基酸捕集柱(50 mm×4 mm)、PA20型色谱柱(150 mm×3 mm)分离,进入配备Au工作电极、pH-Ag-AgCl参比电极的安培检测器中进行检测。结果:经不低于6 h水解,供试品充分水解,空白溶液无干扰峰,水解标准溶液色谱图中,理论板数、分离度、拖尾因子等均符合USP〈831〉的规定,半乳糖胺的检测限和定量限分别达到2 ng/mL、4 ng/mL,半乳糖胺在4~160 ng/mL浓度范围内线性良好,平均加样回收率达到101.2%,RSD为2.64%,水解标准溶液和水解供试品溶液放置24 h,检测结果的RSD为1.53%。结论:方法专属性、系统适用性、线性、灵敏度、回收率良好,适用于肝素钠总己糖胺中半乳糖胺含量的检测。

关键词：肝素钠离子色谱半乳糖胺