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溃疡性结肠炎患者唾液外泌体内蛋白标志物筛选及功能分析

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北京大学学报(医学版) 2024年

作者：杨丛艺郑小雯陈静宜徐俊陈峰陈扬陈宁北京大学基础医学院精准医疗多组学研究中心北京大学人民医院消化内科北京大学口腔医院中心实验室

目的：筛选可能与溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)密切相关的蛋白标志物，探索UC患者唾液外泌体特异性高表达蛋白的功能及在UC发病中的作用。方法：从北京大学人民医院消化内科共招募初诊初治活动期UC患者37例，健康对照(healthy ... 详细信息

目的：筛选可能与溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)密切相关的蛋白标志物，探索UC患者唾液外泌体特异性高表达蛋白的功能及在UC发病中的作用。方法：从北京大学人民医院消化内科共招募初诊初治活动期UC患者37例，健康对照(healthy control，HC) 志愿者10人，收集全部受试者唾液后分别提取唾液外泌体，用于Shotgun质谱分析及后续实验，找出UC组和HC组之间差异表达的蛋白质。利用DAVID工具对差异表达蛋白的基因进行GO(gene ontology)、KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)富集分析。体外实验将UC组与HC组唾液外泌体分别与巨噬细胞共培养，实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR ，qPCR)检测细胞CD80＋、CD86＋水平；ELISA法检测细胞上清白介素-6(interleukin-6，IL-6)、白介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)分泌水平。结果：UC组与健康对照组唾液外泌体中共表达的蛋白质259种，其中有11种蛋白质在UC组中高表达，包括PDIA4、A2M、EEF2、C3、PSMA2、PSMB6、PSMA1、IGHG1、IGHG3、IGHG4、SERPING1，4种蛋白质在UC组中低表达，包括TCN1、SLPI、CTSZ、TFF3，将这15种蛋白质与仅存在于UC患者中的129种特异蛋白质，以及仅存在于健康对照组中的69种特异蛋白质共同进行GO/KEGG功能学分析，发现UC组唾液外泌体中蛋白酶体相关蛋白PSMA1，PSMA2，PSMB6表达升高以及补体级联通路中多种关键分子如C3等表达上调。体外共培养实验发现，与健康对照组相比，活动期UC患者唾液外泌体可以通过促进巨噬细胞向M1型转化并分泌炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α从而发挥促炎作用。结论：UC患者唾液外泌体可能具有促进炎症的功能，对UC患者及健康对照唾液外泌体内蛋白质进行分析，发现在两组共表达的蛋白质中有15种蛋白质表达量存在明显差异，其中UC组高表达的C3、PSMA2、PSMB6、PSMA1主要与免疫及炎症反应相关，提示UC患者唾液外泌体中特异性高表达的蛋白质有作为UC诊断疾病标志物的潜力，并可能在UC的发病中发挥作用。

关键词：溃疡性结肠炎唾液外泌体生物标志物肠道免疫

退变性胸腰椎后凸脊柱矢状位序列和平衡相关性及其影响因素

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中华医学杂志 2024年第13期104卷 1036-1042页

作者：格日勒梁彦徐帅北京大学人民医院创伤救治中心，北京100044 北京大学人民医院脊柱外科，北京100044

目的探讨退变性胸腰椎后凸(DTLK)对脊柱矢状位的影响及胸腰段后凸继发性改变对矢状位平衡的影响。方法病例对照研究。回顾性纳入2018年1月至2021年12月50岁以上于北京大学人民医院确诊的DTLK[胸腰椎后凸角(TLK)>15°]128例(DTLK组)患者... 详细信息

目的探讨退变性胸腰椎后凸(DTLK)对脊柱矢状位的影响及胸腰段后凸继发性改变对矢状位平衡的影响。方法病例对照研究。回顾性纳入2018年1月至2021年12月50岁以上于北京大学人民医院确诊的DTLK[胸腰椎后凸角(TLK)>15°]128例(DTLK组)患者的临床资料。同时,纳入同时期单纯诊断腰椎管狭窄或椎间盘突出症且无胸腰段后凸(TLK=0°±15°)的手术患者73例为对照组。在全脊柱X线侧位片上获得以下参数:TLK、胸椎后凸角(TK)、腰椎前凸角(LL),矢状位平衡参数为矢状位偏移距离(SVA),此外通过双能X线吸收法(DXA)测定有无骨质疏松(OP),在MRI上测定L 5/S 1椎间盘信号分级(Pfirrmann分级)。基于年龄差异,用于评定脊柱平衡Lafage公式SVA=2×(年龄-55)+25作为阈值,针对胸腰椎后凸畸形患者,按平衡状态(SVA)分为平衡组和失衡组,明确该人群整体矢状位平衡的特点和影响因素,并分析平衡状态下脊柱各部位之间的相互作用。结果DTLK组TK(30.0°±13.5°比24.2°±7.4°)和TLK(26.6°±9.7°比6.0°±6.6°)大于对照组(P<0.01),LL小于对照组(34.4°±17.7°比44.2°±10.3°),差异均有统计学意义(均P<0.001)。DTLK组TK与TLK(r=0.234,P=0.008)和LL(r=0.539,P<0.001)存在相关性;LL减低与L 5/S 1间盘信号减低有正相关性(r=0.253,P=0.044)。LL丢失[RR=1.04(1.01~1.08)]和存在OP[RR=3.970(1.09~14.50)]是TLK患者易发生失衡的影响因素。DTLK平衡组患者TK的影响因素为LL(β=0.572,P<0.001)和年龄(β=0.351,P=0.045)。失衡组患者TK的正性影响因素为LL(β=0.209,P=0.015),LL对TK影响程度弱于平衡组。结论DTLK患者中LL丢失和OP更易导致失平衡及后凸进展,近端脊柱和腰椎协同维持该人群矢状位平衡。

关键词：脊柱后凸退变性胸腰椎后凸脊柱矢状位序列矢状位平衡代偿机制

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北京冬奥会雪车雪橇项目医疗急救的保障

北京大学学报（医学版） 2024年第2期56卷 313-317页

作者：马勇杜昌郭维朱继红朱凤雪党育郭鹏北京大学人民医院急诊内科北京100044 北京大学人民医院创伤救治中心北京100044 北京大学人民医院创伤骨科北京100044 北京大学人民医院急诊外科北京100044

目的:对国家雪车雪橇中心的雪车、雪橇、钢架雪车赛道医疗保障情况进行分析及总结,为今后赛事举办及群众冰雪运动的医疗保障工作提供经验。方法:回顾性分析参加2021年10—11月雪车、雪橇、钢架雪车国际训练周和世界杯(以下简称“国际训... 详细信息

目的:对国家雪车雪橇中心的雪车、雪橇、钢架雪车赛道医疗保障情况进行分析及总结,为今后赛事举办及群众冰雪运动的医疗保障工作提供经验。方法:回顾性分析参加2021年10—11月雪车、雪橇、钢架雪车国际训练周和世界杯(以下简称“国际训练周”),及2022年2月北京冬奥会雪车、雪橇、钢架雪车项目(以下简称“北京冬奥会”)的运动员受伤、救治情况,参考和借鉴《冬季雪上运动项目医疗保障标准》制定具体的分类标准分析受伤部位、受伤类型、事故发生点位等。结果:参加国际训练周和北京冬奥会总计743名运动员,比赛期间共发生翻车、翻撬、碰撞事故58次,其中有28次(运动员28例)出现了运动员受伤,占事故总数的48.3%,占运动员总数3.8%,其中男性9例(32.1%),女性19例(67.9%),平均年龄(26.3±4.7)岁。28例受伤运动员中20例(71.4%)为Ⅰ类伤,在现场得到了救治处理,8例(28.6%)伤情较重的,其中Ⅱ类伤(7例)、Ⅲ类伤(1例)转诊至定点医院进行进一步处理。28例受伤运动员中有3例(10.7%)出现了多发损伤,其中2例为2部位受伤,1例为3部位受伤,最常见的受伤部位为脚踝及脚趾(10/32,31.3%)。28例受伤运动员中有1例(3.6%)同时出现了2种受伤类型,最常见的受伤类型为关节和(或)韧带损伤(11/29,37.9%)。赛道最容易发生事故的点位为第9弯道(18/58,31.0%)。结论:通过对医疗保障工作的分析和总结,能够更好地为今后我国开展雪车、雪橇、钢架雪车运动提供经验和参考,使国家雪车雪橇中心真正成为可持续发展的奥运资产。

关键词：北京冬奥会医疗保障国家雪车雪橇中心

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左半结肠癌中央组淋巴结分布特点及外科清扫

中华胃肠外科杂志 2024年第9期27卷 914-918页

作者：鲍予頔高志冬北京大学人民医院胃肠外科外科肿瘤实验室北京100044

淋巴结转移是结直肠癌的主要转移途径之一,也是决定患者预后的重要因素。引流区域的淋巴结清扫,尤其是肿瘤相关供血动脉根部的中央组淋巴结清扫是外科手术技术的要点和难点。目前,关于左半结肠癌淋巴回流及中央组淋巴结(第253组淋巴结)... 详细信息

淋巴结转移是结直肠癌的主要转移途径之一,也是决定患者预后的重要因素。引流区域的淋巴结清扫,尤其是肿瘤相关供血动脉根部的中央组淋巴结清扫是外科手术技术的要点和难点。目前,关于左半结肠癌淋巴回流及中央组淋巴结(第253组淋巴结)的分布规律尚不清楚,中央组淋巴结清扫的必要性及范围也未达成统一共识,导致实际临床工作中不同医师对淋巴结清扫程度差异较大,且缺乏外科手术质控标准,影响术后治疗方案的选择及患者远期预后。同时,对于淋巴结回流及转移的研究,目前多以传统解剖学为基础,仅基于尸体解剖的现象描述、归纳和推测,不能满足外科手术清扫淋巴结时的个体化和精准化要求;而以功能解剖学为前提的术前及术中的淋巴结显像技术在结直肠癌患者中的应用也在进一步探索中。

关键词：结肠肿瘤,左半中央组淋巴结 D3清扫功能解剖学

腹膜透析相关性腹膜炎拔管患者导管细菌生物膜的形成情况

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北京大学学报(医学版) 2024年

作者：刘爱春赵慧萍武蓓郑姝颖左力王梅北京大学人民医院肾内科北京大学人民医院电子显微镜实验室

目的：探讨维持性腹膜透析（peritoneal dialysis，PD）患者因PD相关性腹膜炎拔除PD导管后，导管细菌生物膜的形成情况及特征。方法：回顾性分析北京大学人民医院2007年6月至2022年1月期间规律随访的维持性PD患者，选取其中因PD相关性... 详细信息

目的：探讨维持性腹膜透析（peritoneal dialysis，PD）患者因PD相关性腹膜炎拔除PD导管后，导管细菌生物膜的形成情况及特征。方法：回顾性分析北京大学人民医院2007年6月至2022年1月期间规律随访的维持性PD患者，选取其中因PD相关性腹膜炎而退出PD、拔除PD导管且行导管扫描电镜检查的患者，总结患者的一般资料、拔管原因、PD导管扫描电镜检查结果以及腹膜透析液的细菌培养结果。结果：共纳入18例患者，其中女性11例（占61.1%），患者平均年龄(59.1±11.5) 岁，平均透析龄(80.1±47.4)个月。18例患者中，16例（88.9%）存在导管细菌生物膜，细菌生物膜形态均为球菌。腹膜透析液的细菌培养结果显示，最常见的3种病原体分别为大肠埃希菌（Escherichia coli）、甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（methicillin-sensitive Staphylococcus aureus，MSSA）、表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis）。13例患者（72.2%）既往曾经发生腹膜炎，其中9例患者既往腹膜炎的致病菌为球菌。结论：PD导管内细菌生物膜形成在因腹膜炎拔管的PD患者中比较常见，并非所有因腹膜炎拔除的PD导管上都有细菌生物膜存在，细菌生物膜与腹膜炎的致病菌可能不一致。

关键词：腹膜透析导管相关性感染细菌生物膜腹膜炎

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北京冬奥会雪车雪橇项目医疗急救保障情况

北京大学学报(医学版) 2024年

作者：马勇杜昌郭维朱继红朱凤雪党育郭鹏北京大学人民医院急诊外科北京大学人民医院创伤骨科北京大学人民医院急诊内科北京大学人民医院创伤救治中心

目的：对国家雪车雪橇中心的雪车、雪橇、钢架雪车赛道医疗保障情况进行分析及总结，为今后赛事举办及群众冰雪运动的医疗保障工作提供经验。方法：回顾性分析参加2021年10月-11月雪车、雪橇、钢架雪车国际训练周和世界杯（以下简称“... 详细信息

目的：对国家雪车雪橇中心的雪车、雪橇、钢架雪车赛道医疗保障情况进行分析及总结，为今后赛事举办及群众冰雪运动的医疗保障工作提供经验。方法：回顾性分析参加2021年10月-11月雪车、雪橇、钢架雪车国际训练周和世界杯（以下简称“国际训练周”）及2022年2月北京冬奥会雪车、雪橇、钢架雪车项目（以下简称“北京冬奥会”）的运动员受伤、救治情况。参考和借鉴《冬季雪上运动项目医疗保障标准》制定具体的分类标准分析受伤部位、受伤类型、事故发生点位等。结果：参加国际训练周和北京冬奥会总计743名运动员，比赛期间共发生翻车、翻撬、碰撞事故58次，其中有28次（运动员28例）出现了运动员受伤，占事故总数的48.3%，占运动员总数3.8%，其中男性9例（32.1%），女性19例（67.9%），平均年龄（26.3±4.7）岁。28例受伤运动员中20例（71.4%）为I类伤，在现场得到了救治处理，8例（28.6%）伤情较重的，其中II类伤（7例）、III类伤（1例），转诊至定点医院进一步处理。28例受伤运动员中有3例（10.7%）出现了多发损伤，其中2例为2部位受伤，1例为3部位受伤，最常见的受伤部位为脚踝及脚趾（10/32，31.3%）。28例受伤运动员中有1例（3.6%）同时出现了2种受伤类型，最常见的受伤类型为关节和（或）韧带损伤（11/29，37.9%）。赛道最容易发生事故的点位为第九弯道（18/58，31.1%）。结论：通过对医疗保障工作的分析和总结，能够更好的为今后我国开展雪车、雪橇、钢架雪车运动提供经验和参考，使国家雪车雪橇中心真正成为可持续发展的奥运遗产。

关键词：北京冬奥会医疗保障国家雪车雪橇中心

外泌体负载的KV11通过VDAC1和自噬机制对角膜新生血管的抑制作用

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中华实验眼科杂志 2024年第2期42卷 108-116页

作者：陈文倩杜玮于文贞北京大学人民医院眼科北京大学人民医院眼视光中心北京大学人民医院眼病与视光医学研究所视网膜脉络膜疾病诊治研究北京市重点实验室北京大学医学部眼视光学院北京100044

目的探讨外泌体(EXO)负载的抗新生血管短肽KV11在角膜新生血管(CNV)中的作用及其机制。方法利用EXO锚定肽CP05将KV11结合到血管内皮来源的EXO膜表面,形成EXO-KV11。通过Apogee纳米流式分析EXO负载KV11的效率和最佳浓度比。选取8周龄SPF... 详细信息

目的探讨外泌体(EXO)负载的抗新生血管短肽KV11在角膜新生血管(CNV)中的作用及其机制。方法利用EXO锚定肽CP05将KV11结合到血管内皮来源的EXO膜表面,形成EXO-KV11。通过Apogee纳米流式分析EXO负载KV11的效率和最佳浓度比。选取8周龄SPF级健康雄性SD大鼠100只,其中10只大鼠不做任何处理,为正常对照组;其余大鼠在建立碱烧伤诱导CNV大鼠模型后,采用随机数字表法随机将大鼠分为EXO-KV11组、KV11组和生理盐水组,每组各30只。从碱烧伤后第1天开始每隔1天,各组分别结膜下注射100μl EXO-KV11(25μg)、KV11(25μg)或生理盐水。观察第1、4、7、14天时CNV的生成情况;采用荧光素心室灌注、角膜血管造影法计算CNV面积;采用苏木精-伊红染色法观察各组CNV管腔数量;采用免疫组织化学法检测角膜组织中CD31的表达分布;采用Western blot法检测电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)和内质网应激、自噬及凋亡相关蛋白的表达水平。结果Apogee流式分析确定KV11与EXO最佳浓度比为4∶1,EXO负载KV11效率高达87.5%。碱烧伤后7 d和14 d,各组CNV面积总体比较差异均有统计学意义(F=4.613、15.590,均P<0.05),其中碱烧伤后7 d,EXO-KV11组CNV面积小于KV11组和生理盐水组;碱烧伤后14 d,EXO-KV11组和KV11组CNV面积均小于生理盐水组,EXO-KV11组CNV面积小于KV11组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。角膜荧光铺片定量分析结果显示,生理盐水组、KV11组和EXO-KV11组CNV相对荧光面积分别为(8.3±1.7)%、(5.2±1.6)%和(3.4±0.7)%,总体比较差异有统计学意义(F=11.735,P<0.01),其中KV11组和生理盐水组CNV相对荧光面积均大于EXO-KV11组,生理盐水组CNV相对荧光面积大于KV11组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。碱烧伤后14 d,生理盐水组基质内可见大量新生血管管腔;KV11组基质内新生血管管腔数量较生理盐水组少;EXO-KV11组角膜结构趋于正常,少见新生血管管腔。生理盐水组角膜基质内可见大量CD31染色阳性细胞,细胞围成大小不一的管腔结构;KV11组角膜基质内CD31染色阳性细胞围成的管腔数量较生理盐水组少,EXO-KV11组管腔数量较KV11组少。EXO-KV11组、KV11组、生理盐水组和正常对照组VDAC1、蛋白质激酶R样内质网激酶(PERK)、自噬接头蛋白(SQSTM1/p62)、活化半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase 3)相对表达量总体比较差异均有统计学意义(F=35.960、8.947、17.791、101.168,均P<0.01),其中EXO-KV11组VDAC1、PERK、p62、cleaved caspase 3相对表达量高于KV11组和生理盐水组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。各组自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)Ⅱ/LC3BⅠ蛋白相对表达量总体比较,差异无统计学意义(F=0.445,P=0.727)。结论与KV11相比,EXO-KV11可通过增加VDAC1表达、刺激PERK产生、抑制自噬流的发生等机制更有效地抑制CNV。

关键词：角膜新生血管自噬外泌体纤溶酶原kringle 5 电压依赖性阴离子通道1

同步应用戈舍瑞林对年轻乳腺癌患者新辅助化疗疗效的影响

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北京大学学报(医学版) 2024年

作者：刘苗雨王思源裴林王殊北京大学人民医院乳腺中心北京大学人民医院检验科

目的：探究在年轻乳腺癌患者中，同步应用戈舍瑞林保护卵巢功能对新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy ， NAC)病理完全缓解(pathologic complete response， pCR)率和客观缓解率(objective response rate， ORR)的影响。方法：该研究... 详细信息

目的：探究在年轻乳腺癌患者中，同步应用戈舍瑞林保护卵巢功能对新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy ， NAC)病理完全缓解(pathologic complete response， pCR)率和客观缓解率(objective response rate， ORR)的影响。方法：该研究从2016年1月至2020年5月入组18～45岁临床分期为IIA-IIIC期的乳腺癌患者，根据患者意愿选择是否在NAC期间同步应用戈舍瑞林保护卵巢功能，分为戈舍瑞林组及化疗组，比较两组pCR率和ORR，并对不同分子分型的患者进行亚组分析。结果：该研究共纳入93例患者（戈舍瑞林组31例，化疗组62例）。经过倾向评分加权（propensity score weighting， PSW）调整，两组患者年龄、术前临床分期、术后病理分期、病理类型、激素受体状态、人类表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2， HER2）和Ki-67的表达，分子分型和化疗方案等基线资料均匹配。戈舍瑞林组和化疗组患者的pCR率差异无统计学意义，分别为29.0％和25.8％(P = 0.741)；两组之间的ORR差异亦无统计学意义(90.3％vs. 87.1％， P = 0.746)。亚组分析表明，对于激素受体阳性的患者，戈舍瑞林组和化疗组之间的pCR率和ORR差异均无统计学意义(pCR率分别为6.3％和7.7％， P = 0.852；ORR分别为87.5％和82.1％， P =0.839)。对于激素受体阴性的患者，戈舍瑞林组和化疗组之间的pCR率和ORR差异亦无统计学意义(pCR率分别为53.3％和56.5％， P =0.847；ORR分别为93.3％和95.7％， P =0.975)。化疗结束后1年，戈舍瑞林组化疗诱导闭经(chemotherapy-induced amenorrhea， CIA）发生率明显低于化疗组（9.5% vs. 33.3%， P =0.036）。结论：对于临床分期为IIA-IIIC期的年轻乳腺癌患者，同步应用戈舍瑞林可能不影响NAC后的pCR率和ORR，但仍需扩大样本量并进行更久的随访以评估戈舍瑞林保护卵巢功能对年轻患者长期生存的影响。

关键词：乳腺癌,年轻新辅助化疗戈舍瑞林

不同病因继发噬血细胞综合征的临床及实验室特征分析

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中华急诊医学杂志 2024年第7期33卷 999-1005页

作者：裴源源姚然然曹灵杰杨烽涛梁人戈黄文凤朱继红北京大学人民医院急诊科北京100044 北京大学人民医院风湿免疫科北京100044

目的对继发性噬血细胞综合征(secondary hemophagocytic lymphohistiocytosis,sHLH)进行病因分类后,探讨其各自的临床、实验室及治疗特点,以深化疾病认识。方法连续收集北京大学人民医院2016年1月至2021年12月期间就诊的sHLH患者进行回... 详细信息

目的对继发性噬血细胞综合征(secondary hemophagocytic lymphohistiocytosis,sHLH)进行病因分类后,探讨其各自的临床、实验室及治疗特点,以深化疾病认识。方法连续收集北京大学人民医院2016年1月至2021年12月期间就诊的sHLH患者进行回顾性观察性研究,在排除年龄室分布及病因分布,收集sHLH的基线资料、临床特点、并发症与实验室资料、治疗及院内结局,然后将sHLH患者按照病因分为肿瘤组、巨噬细胞活化综合征(macrophage activation syndrome,MAS)组及其他病因(以感染为主)组,组间比较采用卡方检验或方差分析、Mann-Whitney检验等检验方法。结果共纳入169例sHLH患者,其中27.8%为肿瘤相关sHLH,47.9%为MAS患者,24.3%为其他病因相关HLH以感染为主。对病因分类后进行统计学分析发现,其他原因组临床特点与肿瘤组更为一致,表现为外周血细胞减少更多及更重,sCD25表达更高,合并EB病毒感染更多,预后亦趋于一致,均有50%以上院内死亡;其他病因组中噬血现象最为多见(65.9%);而MAS组病死率较低,仅为17.3%(P<0.05),且治疗上激素冲击比例增高,环孢素A及白介素-2治疗比例显著升高。结论肿瘤相关HLH与其他病因(以感染为主)继发HLH临床特点及预后上表现更为相近,而MAS相对而言,整体病情较轻,预后较好。

关键词：继发性噬血细胞综合征巨噬细胞活化综合征病因分布感染