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产姜黄素大肠杆菌工程菌的构建

生物工程学报 2021年第6期37卷 2077-2084页

作者：张乐丁宁海燕闫雅茹李娜李赛男屠鹏飞刘晓史社坡北京中医药大学中药现代研究中心

姜黄素是姜科植物的特征性成分,具有重要的药理活性。文中利用姜黄素生物合成关键酶β-酮酰辅酶A合酶(Diketide-CoA synthase,DCS)基因和姜黄素合酶(Curcumin synthase,CURS)基因构建非天然融合基因DCS::CURS,并将其与4-香豆酰辅酶A连接... 详细信息

姜黄素是姜科植物的特征性成分,具有重要的药理活性。文中利用姜黄素生物合成关键酶β-酮酰辅酶A合酶(Diketide-CoA synthase,DCS)基因和姜黄素合酶(Curcumin synthase,CURS)基因构建非天然融合基因DCS::CURS,并将其与4-香豆酰辅酶A连接酶(4-coumarate coenzyme A ligase,4CL)和乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl coenzyme A carboxylase,ACC)基因共同引入大肠杆菌Escherichia coli,构建由阿魏酸合成姜黄素的工程大肠杆菌,利用LB培养基和改良的M9培养基进行两步发酵。通过对生长培养阶段诱导蛋白表达方法和发酵培养阶段接种菌体量、培养基组成及发酵培养时间等条件的优化,并在发酵培养阶段加入大孔吸附树脂降低产物在培养液中的累积等方法,姜黄素的合成产率达到386.8mg/L。本研究首次将非天然融合基因DCS::CURS用于合成姜黄素工程菌的构建,得到了姜黄素产率较高的大肠杆菌菌株,为后续通过进一步复杂的代谢网络优化、构建姜黄素合成能力更强的工程菌提供参考。

关键词：大肠杆菌姜黄素非天然融合蛋白工程菌

多酶催化级联反应在天然产物酶法合成中的应用研究进展

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中国中药杂志 2023年第2期48卷 336-348页

作者：黄文倩王迎夏田维圣王娟屠鹏飞王晓晖史社坡刘晓北京中医药大学中药现代研究中心北京100029 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

酶作为一种生物催化剂,具有催化效率高、反应选择性强、目标产物专一、反应条件温和、环境友好等优点,是合成复杂有机分子的重要工具。且随着基因测序技术、分子生物学、遗传操作等技术的不断发展,酶的多样性稳步增加,可催化的反应类型... 详细信息

酶作为一种生物催化剂,具有催化效率高、反应选择性强、目标产物专一、反应条件温和、环境友好等优点,是合成复杂有机分子的重要工具。且随着基因测序技术、分子生物学、遗传操作等技术的不断发展,酶的多样性稳步增加,可催化的反应类型也逐步多元化。在酶催化合成过程中,大多数简单反应通过单酶催化即可完成,而很多复杂反应的发生往往需要2个或以上的酶参与催化。因此,将多个酶组合到一起,构建多酶催化级联反应已逐渐成为生物化学领域的一个研究热点。如今,越来越多结构复杂的天然产物的生物合成途径得到解析,具有新颖催化活性的次级代谢酶不断被鉴定、发现并组合应用于结构多样性天然/非天然小分子的酶法合成中。该文总结了一系列多酶催化级联反应的例子,着重介绍了级联催化方法在糖类、核苷类、黄酮类、萜类、生物碱类以及手性分子等化合物合成中的应用,并对多酶催化级联方法目前存在的问题、解决对策及未来发展方向进行了讨论与展望。

关键词：酶催化生物催化多酶催化级联反应

基于HPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术的异绿原酸A体内代谢产物分析

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中国中药杂志 2024年

作者：刘文静曹耘畅冯素香麻秋娟李军宋月林北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心河南中医药大学药学院河南中医药大学中医药科学院

异绿原酸A（ICA）为茵陈等多种中药的主要药效成分。该研究旨在鉴定口服给药ICA的大鼠血浆、尿液和粪便中的代谢产物，并推测其潜在的代谢途径。ICA灌胃大鼠后，收集不同时间点（段）的血浆、尿液和粪便样品，利用高效液相色谱-四极杆... 详细信息

异绿原酸A（ICA）为茵陈等多种中药的主要药效成分。该研究旨在鉴定口服给药ICA的大鼠血浆、尿液和粪便中的代谢产物，并推测其潜在的代谢途径。ICA灌胃大鼠后，收集不同时间点（段）的血浆、尿液和粪便样品，利用高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱（HPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS）技术，结合对照品比对保留时间、裂解规律总结和文献数据，对生物样品中代谢产物进行结构鉴定。从大鼠样品中初步鉴定了ICA的39个代谢产物（M1～M39），其中31个来自于血浆（M1～M10、M12～M24、M26～M28、M30、M34～M35、M38～M39）、34个来自于尿液（M1～M11、M13～M15、M19～M25、M27～M39）、11个来自于粪便（M2、M3、M6、M15、M21～M23、M32、M34、M36～M37），主要代谢途径包括水解、葡萄糖醛酸化、甲基化和磺酸化反应等。该研究揭示了ICA在大鼠血浆、尿液和粪便中的代谢情况，对深入阐明其药理活性成分提供参考。

关键词：异绿原酸A HPLC-Q Exactive Orbitrap-MS 代谢产物代谢途径

复方阿嗪米特肠溶片和复方消化酶胶囊治疗胆系相关消化不良的药物经济学评价

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中国新药杂志 2020年第10期29卷 1195-1200页

作者：苑艺郭婉婕韩晟北京中医药大学北京100029 北京大学医药管理国际研究中心北京100191

目的:对于复方阿嗪米特肠溶片与复方消化酶胶囊治疗胆系相关消化不良进行药物经济学评价。方法:从医疗保健系统的角度出发,通过Meta分析获得有效率指标,对复方阿嗪米特肠溶片与复方消化酶胶囊治疗胆系相关消化不良进行成本效果分析,并... 详细信息

目的:对于复方阿嗪米特肠溶片与复方消化酶胶囊治疗胆系相关消化不良进行药物经济学评价。方法:从医疗保健系统的角度出发,通过Meta分析获得有效率指标,对复方阿嗪米特肠溶片与复方消化酶胶囊治疗胆系相关消化不良进行成本效果分析,并进行单因素敏感性分析和概率敏感性分析。结果:复方阿嗪米特肠溶片的有效率(93.89%)显著优于复方消化酶胶囊有效率(81.45%),复方阿嗪米特肠溶片的疗程费用(130.2元)低于复方消化酶胶囊(146.16元),因此可以得到复方阿嗪米特肠溶片为绝对优势方案。敏感性分析显示研究结果较为稳健。结论:复方阿嗪米特肠溶片相对于复方消化酶胶囊治疗胆系相关消化不良具有经济性。

关键词：复方阿嗪米特肠溶片复方消化酶胶囊消化不良 Meta分析成本效果分析

芪参益气滴丸治疗缺血性心力衰竭的多中心、前瞻性队列研究

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中医杂志 2022年第7期63卷 635-643页

作者：王帅赵志强王贤良阎小妍钟成梁尚美霞王聪林姗姗胡思源毛静远张伯礼天津中医药大学第一附属医院/国家中医针灸临床医学研究中心天津市300381 北京大学临床研究所北京大学第一医院天津中医药大学

目的基于真实世界评价芪参益气滴丸治疗缺血性心力衰竭(IHF)的临床疗效和安全性。方法采用多中心、前瞻性队列研究设计,纳入全国84家医院的IHF患者1228例,根据患者意愿分为治疗组644例和对照组584例。两组患者均参照相关规范接受西药... 详细信息

目的基于真实世界评价芪参益气滴丸治疗缺血性心力衰竭(IHF)的临床疗效和安全性。方法采用多中心、前瞻性队列研究设计,纳入全国84家医院的IHF患者1228例,根据患者意愿分为治疗组644例和对照组584例。两组患者均参照相关规范接受西药治疗方案,治疗组在西药治疗基础上加服芪参益气滴丸(每次0.5 g,每日3次)。两组疗程均为90天,访视点为治疗后30天、60天、90天,以美国纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级、明尼苏达心力衰竭生存质量量表(MLHFQ)评分为主要疗效指标,以中医四诊信息积分、左室射血分数(LVEF)及复合终点事件为次要疗效指标,并采用安全性数据集分析两组患者治疗期间不良事件的发生情况。结果治疗组最终纳入分析641例,对照组584例。治疗后30天治疗组与对照组NYHA心功能分级总有效率分别为50.55%(324例/641例)与35.10%(205例/584例),治疗后60天分别为58.66%(376例/641例)与40.07%(234例/584例),治疗后90天分别为71.45%(458例/641例)与48.63%(284例/584例),治疗组NYHA心功能分级总有效率均高于对照组(P中医四诊信息积分高于对照组、LVEF低于对照组(P中医四诊信息积分均降低、LVEF均提高(P中医四诊信息积分明显低于对照组(P0.05);研究过程中治疗组发生不良事件36例、对照组发生不良事件34例,均未判断为研究药物相关不良反应。结论在西药治疗基础上加服芪参益气滴丸可进一步改善IHF患者的心功能和生存质量,且临床应用安全性良好。

关键词：缺血性心力衰竭芪参益气滴丸心功能生存质量队列研究

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新生儿娩出后脐带处理的最佳证据总结

护理学杂志 2023年第13期38卷 93-98页

作者：孙瑞阳李俊英朱秀陆虹北京中医药大学护理学院北京102488 北京中医药大学JBI循证护理卓越合作中心北京大学护理学院北京大学医学部循证护理研究中心

目的总结正常足月新生儿出生后脐带处理的最佳证据,为临床实践决策提供参考。方法系统检索新生儿脐带处理相关的临床决策、临床实践指南、专家共识、证据总结和系统评价,分别对其方法学质量进行评价,随后对资料进行提取、分析并汇总成... 详细信息

目的总结正常足月新生儿出生后脐带处理的最佳证据,为临床实践决策提供参考。方法系统检索新生儿脐带处理相关的临床决策、临床实践指南、专家共识、证据总结和系统评价,分别对其方法学质量进行评价,随后对资料进行提取、分析并汇总成最佳证据。结果共纳入21篇文献,包括1篇临床决策、16篇指南、3篇专家共识和1篇系统评价。总结为脐带结扎、脐带挤压、脐带检查、脐带护理和尊重妇女意愿5个方面24条最佳证据。结论正常足月儿娩出后脐部处理最佳证据可为临床提供决策依据。临床应用时,应结合具体情境,并充分考虑妇女意愿,使母婴获益最大化。

关键词：新生儿脐带处理新生儿脐炎产科护理指南系统评价证据总结