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硫代乙酰胺诱导的小鼠肝内胆管癌模型特点研究

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中国药理学通报 2024年第5期40卷 992-998页

作者：张玉梅琼沈玉先安徽医科大学基础医学院药理学教研室生物药物研究所安徽合肥230032

目的建立硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导的小鼠肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)模型并探讨该模型的特点及形成机制,为ICC的病理机制和治疗药物的研究提供实验基础。方法C57BL/6J小鼠分为正常对照组和TAA组,正常对... 详细信息

目的建立硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导的小鼠肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)模型并探讨该模型的特点及形成机制,为ICC的病理机制和治疗药物的研究提供实验基础。方法C57BL/6J小鼠分为正常对照组和TAA组,正常对照组小鼠饮用灭菌水,模型组小鼠饮用600 mg·L^(-1)的TAA溶液,连续饮用32周。眼球取血,检测血清中ALT、AST、DBIL和TBIL的水平;观察两组小鼠肝脏形态;HE、天狼猩红、Masson和普鲁士蓝染色观察肝脏组织病理改变;免疫组化检测CK7、CK19、Ki67、CD68、TNF-α和α-SMA的表达水平;RT-qPCR和Western blot检测ICC相关标志物mRNA和蛋白的水平;免疫荧光双标记检测肝脏组织中HNF4α+CK19+双阳性细胞。结果与正常对照组比较,TAA组小鼠肝脏表面呈细颗粒状、质硬,肝内呈肿块性病变;病理检查结果显示,肝组织有炎症细胞浸润,肿瘤细胞排列成管状,肝组织有明显的纤维化;血清中ALT、AST、DBIL和TBIL水平升高;肝脏组织中ICC标志物CK7、CK19及细胞增殖标志物Ki67表达上调;免疫细胞标志分子CD68和TNF-α表达增多,肝星状细胞活化标志物α-SMA的阳性染色增多;肝组织中出现HNF4α+CK19+双表型细胞。结论TAA可用于诱导小鼠ICC模型,该模型具有炎症免疫细胞浸润、纤维化及ICC分子标志物增高等特点,这与人类的ICC非常相似,可用于评价内源性分子和外源性药物对ICC作用的研究。

关键词：硫代乙酰胺肝内胆管癌小鼠模型肝纤维化炎症

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糖尿病诱导的小鼠室旁核催产素和加压素阳性神经元FOS表达

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神经解剖学杂志 2024年第1期40卷 35-42页

作者：王淑敏贾鹏任淑婷吕思婷张婷杨彦玲史娟延安大学医学院生理学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室西安710032 中国人民解放军94750部队医院龙岩366200 延安大学医学院解剖学教研室延安716000 延安大学医学院病原生物学教研室延安716000

目的:探索糖尿病(DM)不同状态下小鼠下丘脑室旁核(PVN)催产素和加压素阳性神经元的FOS表达变化。方法:腹腔注射溶媒或链脲佐菌素(STZ)制备对照组或糖尿病小鼠模型,根据机械痛测试区分糖尿病痛(DNP组)与非痛组(DWP组)。采用免疫组化和免... 详细信息

目的:探索糖尿病(DM)不同状态下小鼠下丘脑室旁核(PVN)催产素和加压素阳性神经元的FOS表达变化。方法:腹腔注射溶媒或链脲佐菌素(STZ)制备对照组或糖尿病小鼠模型,根据机械痛测试区分糖尿病痛(DNP组)与非痛组(DWP组)。采用免疫组化和免疫荧光染色技术检测PVN内FOS、催产素(OXT)和加压素(VP)阳性神经元的分布及双标情况,并进行计数和比较。结果:7 d时三组(Control组、DNP组和DWP组)小鼠PVN内均有较多的FOS表达,而28 d时DWP和DNP组FOS的表达几近于无,与7 d组相比差异显著(P<0.05或0.001)。与对照组相比,DNP组和DWP组动物的VP和OXT荧光染色同样存在随着造模时间延长染色强度减弱的趋势(P<0.05)。VP、OXT与FOS的双标染色计数结果显示,在DWP 7 d组,VP/FOS双标细胞数为74.33±22.10,占VP阳性细胞数的(56.64±7.52)%,而OXT/FOS的双标率则仅为(10.44±3.14)%。在DNP 7 d组,OXT/FOS双标细胞数为51.00±31.80,占OXT阳性细胞数的(18.50±9.51)%,而VP/FOS的双标率仅为(9.34±3.27)%。与此相对,28 d组FOS的表达锐减,几乎无双标细胞。结论:下丘脑PVN内的VP和OXT阳性神经元在糖尿病痛与非痛,疾病发展的不同阶段存在明显不同的可塑性变化特点,理解这些变化对于揭示糖尿病及其并发症的神经机制具有重要意义。

关键词：糖尿病神经病理性痛下丘脑室旁核催产素加压素小鼠

基于Hippo/YAP通路探讨红花总黄酮对肝星状细胞活化增殖的作用机制研究

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海南医学院学报 2024年

作者：赵晓璐李明奇王映荷马月宏内蒙古医科大学基础医学院内蒙古自治区分子病理学重点实验室

目的:研究红花总黄酮（TFCTL）对肝星状细胞活化增殖的作用与机制。方法:培养对数生长期的HSC-T6细胞，用10 ng/mL的TGF-β1刺激诱导其活化，分为空白组、TGF-β组、TFCTL低浓度组（20 μg/mL）、TFCTL中浓度组（40 μg/mL）、TFCTL高... 详细信息

目的:研究红花总黄酮（TFCTL）对肝星状细胞活化增殖的作用与机制。方法:培养对数生长期的HSC-T6细胞，用10 ng/mL的TGF-β1刺激诱导其活化，分为空白组、TGF-β组、TFCTL低浓度组（20 μg/mL）、TFCTL中浓度组（40 μg/mL）、TFCTL高浓度组（60 μg/mL）；用CCK-8试剂盒和凋亡试剂盒检测红花总黄酮干预HSC-T6细胞后的增殖活性和凋亡率；免疫荧光染色法观察各组细胞中 α-SMA 、YAP表达及位置情况；RT-qPCR法检测α-SMA、Collagen Ⅰ、MST1、LATS、YAP mRNA表达水平，Western blot 检测α-SMA、Collagen Ⅰ、MST1、LATS1、p-YAP/YAP的蛋白表达量。结果:红花总黄酮可显著抑制活化的HSC-T6细胞的增殖，并促进其凋亡；RT-qPCR和Western blot检测结果发现，与空白组相比，TGF-β组中α-SMA、Collagen Ⅰ 、YAP mRNA水平和蛋白表达量显著增加（P<0.01），MST1、LATS1 mRNA水平和蛋白表达量明显降低（P<0.05）；与TGF-β组相比，TFCTL低、中、高浓度组中α-SMA、Collagen Ⅰ、YAP mRNA水平和蛋白表达量显著降低（P<0.01），MST1、LATS mRNA水平和蛋白表达量显著增加（P<0.01）；免疫荧光定量实验表明，TFCTL干预后，HSC-T6细胞中α-SMA的荧光强度逐渐降低，并促进了YAP的核转移。结论:TFCTL可能通过抑制Hippo/YAP通路各级激酶的表达，抑制肝星状细胞的活化增殖，进而减轻肝纤维化。

关键词：肝纤维化肝星状细胞红花总黄酮 Hippo/YAP通路 HSC-T6细胞

U-50488H抑制低氧诱导的原代肺动脉平滑肌细胞线粒体自噬

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心脏杂志 2024年 621-626页

作者：梁家兴梁郡梁薛峰张欣孔思涵高慧李娟杨彦玲延安大学医学院空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室

目的探讨低氧对肺动脉平滑肌细胞线粒体自噬的影响及κ-阿片受体激动剂U-50488H在其中的作用。方法培养原代肺动脉平滑肌细胞，随机分组后进行低氧联合给药处理，检测线粒体自噬蛋白Bnip3及Pink1及其mRNA水平变化。结果低氧处理1d后... 详细信息

目的探讨低氧对肺动脉平滑肌细胞线粒体自噬的影响及κ-阿片受体激动剂U-50488H在其中的作用。方法培养原代肺动脉平滑肌细胞，随机分组后进行低氧联合给药处理，检测线粒体自噬蛋白Bnip3及Pink1及其mRNA水平变化。结果低氧处理1d后，肺动脉平滑肌细胞Bnip3及Pink1蛋白水平显著上升(P<0.05),U-50488H处理可以抑制Pink1的表达(P<0.01)；低氧联合自噬激动剂ABT-737处理后肺动脉平滑肌细胞线粒体自噬通路显著激活(P<0.01)，但可被U-50488H显著抑制(P<0.01)。结论低氧处理1d后肺动脉平滑肌细胞线粒体自噬水平显著升高，应用U-50488H后可以显著抑制低氧刺激导致的肺动脉平滑肌细胞线粒体自噬相关蛋白转录与翻译。

关键词：肺动脉高压线粒体自噬 κ阿片受体肺动脉平滑肌细胞

亲子鉴定中23个常染色体STR基因座突变分析

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中国医科大学学报 2024年第4期53卷 363-366页

作者：郭振民武海鹏霍志鑫张科文赵旭东苏丽娟内蒙古医科大学基础医学院法医学教研室呼和浩特010059 内蒙古慧眼司法鉴定所法医物证实验室呼和浩特010070

收集2019年至2023年内蒙古医科大学司法鉴定中心1360份鉴定结果均为“认定”的亲子鉴定案例,分析案例中23个短串联重复序列(STR)位点的突变现象。在23个STR基因座总计1840次的遗传传递中,共观察到41例突变,包括40例一步突变和1例三步突... 详细信息

收集2019年至2023年内蒙古医科大学司法鉴定中心1360份鉴定结果均为“认定”的亲子鉴定案例,分析案例中23个短串联重复序列(STR)位点的突变现象。在23个STR基因座总计1840次的遗传传递中,共观察到41例突变,包括40例一步突变和1例三步突变;41例突变中,有1例突变来源不明;其余40例中,来自父系的突变32例,来自母系的突变8例,父源概率大于母源。本研究对亲子鉴定案件的检测结果进行统计分析,评价其在亲子鉴定中的应用价值,并探讨了STR基因座的突变现象、突变率及突变特征。

关键词：法医学遗传学突变分析亲子鉴定短串联重复序列

合作性情景式教学法在病理生理学教学中的应用

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心脏杂志 2024年 236-239页

作者：张博樊荣牛雯罗颖刘曼玲空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室

目的为了提高学生对病理生理学中心功能不全和呼吸功能不全等重要知识的理解和掌握，我们在教学过程中应用了合作性情景式教学法，即在教师的指导下，通过小组合作和模拟真实情境的方式进行学习，是一种以学生为中心的教学方法。方法 ... 详细信息

目的为了提高学生对病理生理学中心功能不全和呼吸功能不全等重要知识的理解和掌握，我们在教学过程中应用了合作性情景式教学法，即在教师的指导下，通过小组合作和模拟真实情境的方式进行学习，是一种以学生为中心的教学方法。方法以五年制临床医学专业本科教学中的两个案例即心功能不全和呼吸功能不全PBL案例为教改内容，将学生随机分为对照组和实验组进行实施。通过教师指导，学生模拟真实案例情境，表演相关临床表现和医生的诊治，让学生积极参与案例学习过程。然后采用综合评测和问卷调查两种方式评价合作性情景式教学的效果。结果对比传统教学模式，采用合作性情景式教学模式的学生平均成绩明显高于对照组（P生理学教学方法，能够提高学生的学习效果和实践能力。尽管存在一些挑战，但通过灵活调整和完善，可以提高教学质量和效果。

关键词：合作性教学法情景式教学法 PBL教学

基于整体观思维导图及PBL教学法在生理学局部整合教学中的应用

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科技风 2024年第15期 59-61页

作者：王丽凤雷冬玉迪力夏提·吾布力蒙克嘎勒李静魏媛媛新疆医科大学基础医学院生理学教研室新疆乌鲁木齐830011 成都大学医学院生理学教研室四川成都610106

目的:探讨基于整体观思维导图联合PBL教学法在生理学课程局部整合教学中的教学效果。方法:选取2021级临床医学专业186名学生作为观察组进行基于整体观思维导图联合PBL的教学模式(MM-PBL)。同级的临床医学专业209名学生作为对照组进行传... 详细信息

目的:探讨基于整体观思维导图联合PBL教学法在生理学课程局部整合教学中的教学效果。方法:选取2021级临床医学专业186名学生作为观察组进行基于整体观思维导图联合PBL的教学模式(MM-PBL)。同级的临床医学专业209名学生作为对照组进行传统的PBL教学(PBL)。学期结束后,对比两组学生期末考试成绩。同时,观察组学生发放改良的Likert调查问卷收集学生对联合教学模式的看法。结果:MM-PBL组期末考试平均成绩(83.7±7.2)明显高于PBL组平均成绩(78.6±12.5,p生理学的主动积极性,树立生理学学习的信心。结论:思维导图联合PBL教学法增强学生学习生理学自信心,提升教学效果,值得推广应用。

关键词：生理学整体观思维导图 PBL 整合课程

GPRC5A调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响

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Chinese Medical Sciences Journal 2024年第1期39卷 9-18,I0002页

作者：李鋆崔雯雯杨中法刘文豪边茂旺邓炯王彤山东第二医科大学基础医学院生理教研室潍坊市261021 滨州医学院附属医院医学研究中心滨州市256600

目的ATP结合盒B亚家族成员1(ATP binding cassette subfamily B member 1,ABCB1)的异常表达在多种癌症的发生发展中发挥关键作用。然而,G蛋白偶联受体C家族5组A型(G protein coupled receptor family C group5 type A,GPRC5A)调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响仍不清楚。本研究探讨了GPRC5A调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响。方法我们采用RT-PCR、Western-blot或免疫组化实验,分析ABCB1在肺腺癌细胞系、人肺腺癌组织以及GPRC5A基因敲除小鼠和野生型小鼠的气管上皮细胞和肺组织中的表达。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析GPRC5A基因敲除小鼠气管上皮细胞对化疗药物的敏感性。采用皮下肿瘤形成实验探讨下调ABCB1表达是否可抑制体内肺腺癌增殖。采用免疫荧光和免疫沉淀实验研究GPRC5A和ABCB1之间潜在的调控关系。结果ABCB1在肺腺癌细胞系和人类肺腺癌组织中表达上调。GPRC5A基因敲除小鼠的气管上皮细胞及肺组织的ABCB1表达高于野生型小鼠。与GPRC5A野生型小鼠的气管上皮细胞相比,GPRC5A基因敲除小鼠的气管上皮细胞对塔立奇达和多柔比星更敏感。注射移植细胞28天后,接受ABCB1基因敲除细胞移植的GPRC5A-/-C57BL/6小鼠的肺肿瘤的体积和重量均明显低于野生型细胞移植小鼠(P=0.0043,P=0.0060)。此外,免疫荧光和免疫沉淀实验表明,GPRC5A通过直接结合方式调控ABCB1的表达。结论GPRC5A通过抑制ABCB1表达降低肺腺癌增殖。GPRC5A调节ABCB1表达的途径有待研究。

关键词： ATP结合盒B亚家族成员1 G蛋白偶联受体家族C5组成员A 肺腺癌小鼠

外源性EPO通过激活JAK2-STAT5信号通路保护HT22细胞免受间歇性低氧诱导的损伤

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生理学报 2024年第05期 691-702页

作者：齐珂陈雪司建超刘青青杨胜昌河北中医药大学生理学教研室广州中医药大学基础医学院河北省中医药结合氢医学技术创新中心

本研究旨在探讨外源性促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）对间歇性低氧（intermittent hypoxia,IH）诱导的神经元损伤的作用及其机制。小鼠海马神经元HT22细胞暴露于不同时间的IH环境（1%O27 min/21%O23 min,10 min一次循环），用CC... 详细信息

本研究旨在探讨外源性促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）对间歇性低氧（intermittent hypoxia,IH）诱导的神经元损伤的作用及其机制。小鼠海马神经元HT22细胞暴露于不同时间的IH环境（1%O27 min/21%O23 min,10 min一次循环），用CCK-8检测细胞活性，用试剂盒检测细胞培养液上清中EPO含量，用Western blot检测细胞EPO蛋白表达水平，用免疫荧光染色法和Western blot检测EPO受体（EPOR）表达，用试剂盒检测细胞线粒体膜电位和凋亡水平，用DCFH探针检测细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量，用Western blot检测JAK2-STAT5通路相关蛋白表达水平。结果显示，IH暴露可显著降低HT22细胞活性；EPO及EPOR蛋白表达水平在IH暴露12 h时显著上调，而在24、48 h显著下调。在IH处理的HT22细胞中，外源性给予EPO可显著提高细胞活性和线粒体膜电位，降低细胞ROS和凋亡水平，上调Nrf-2、血红素氧合酶-1 （heme oxygenase1,HO-1）蛋白表达水平，降低Cleaved-Caspase-3/Caspase-3、Bax/Bcl-2比值，促进JAK2-STAT5通路相关蛋白磷酸化，而JAK2阻断剂AG490和STAT5阻断剂BD750均可逆转EPO的上述神经元保护作用。以上结果提示，外源性EPO可能通过激活JAK2-STAT5信号通路抑制IH诱导的氧化应激和细胞凋亡，从而发挥神经元保护作用。

关键词：间歇性低氧氧化应激细胞凋亡促红细胞生成素 JAK2-STAT5