检索结果-南通市图书馆

早期描述物种的模式标定及基因组解析——以中国第一个被描述的真菌新种五棱散尾鬼笔为例

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

菌物学报 2025年

作者：梁俊敏王科杜卓赵明君蔡磊戴玉成中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室中国科学院微生物研究所菌物标本馆北京林业大学生态与自然保护学院微生物研究所

五棱散尾鬼笔Lysurus mokusin (L. f.) Fr.，又名中华散尾鬼笔，于1774年由法国传教士西博特(Cibot PM)描述与发表，是首个被科学描述的中国真菌新物种，为稳定该名称的准确使用，本研究依照现用命名法规对该物种开展了模式标定和分类... 详细信息

五棱散尾鬼笔Lysurus mokusin (L. f.) Fr.，又名中华散尾鬼笔，于1774年由法国传教士西博特(Cibot PM)描述与发表，是首个被科学描述的中国真菌新物种，为稳定该名称的准确使用，本研究依照现用命名法规对该物种开展了模式标定和分类学研究，指定了后选模式和附加模式。利用HiFi测序技术组装了附加模式的双核基因组和线粒体基因组。五棱散尾鬼笔环状线粒体总长101.1 kb，含有26个tRNA和11个蛋白编码基因。每个单倍体大小为35 Mb，含有11条染色体，总长度达33 Mb，另含有片段contig 1.4 Mb。BUSCO评估核基因组完整度达88.5%，代表了一个染色体水平的较高质量基因组，这也是该属报道的第一个基因组。五棱散尾鬼笔重复序列占比较高，约占16%，2个单倍体分别预测获得8 637和8 572个蛋白编码基因，具有典型“双速基因组”特征。此外，共预测获得27个非冗余的生物合成基因簇(BGCs)，以NRPS/NRPS-like为主，主要分布于Chr01， Chr04和Chr06染色体，其中2个BGCs与合成xenotetrapeptide和rhizomide具有杀虫抑菌功效的基因簇100%同源。本研究为大量缺乏模式的早期描述物种的分类学和资源利用研究提供了参考与示范，稳定了名称的使用并提供了重要的模式材料和数据。

关键词：附加模式 DNA条形码 HiFi测序双速基因组生物合成基因簇

c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗免疫对小鼠白色脂肪的调节作用

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病学报 2025年

作者：董梦娟常宇骁宁唤唤路延之康健徐铭泽代婷李嘉玲郝乐冉张琳娜柏银兰宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学军事医学创新中心延安大学生命科学学院

目的研究c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗（rBCG）调节小鼠附睾白色脂肪（eWAT）代谢及免疫的作用及机制。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠经静脉免疫卡介苗（BCG）和重组卡介苗（rBCG），监测小鼠体重变化。分离并称重小鼠eWAT重量，血球仪计血... 详细信息

目的研究c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗（rBCG）调节小鼠附睾白色脂肪（eWAT）代谢及免疫的作用及机制。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠经静脉免疫卡介苗（BCG）和重组卡介苗（rBCG），监测小鼠体重变化。分离并称重小鼠eWAT重量，血球仪计血管基质成分（SVFs）数量。制备小鼠脂肪组织切片，HE染色后显微镜下观察和比较各组小鼠eWAT脂肪细胞大小、数量和形态以及冠状结构（CLS）形成等变化。qRT-PCR检测各组小鼠脂肪代谢相关因子、细胞因子和衰老相关基因的转录水平。结果BCG和rBCG免疫小鼠体重随时间逐渐增加，rBCG免疫诱导eWAT比重增加，SVFs数量降低。HE染色结果显示，BCG免疫促进eWAT脂肪细胞增生和rBCG免疫促进脂肪细胞肥大，BCG和rBCG免疫均可诱导eWAT中CLS形成。qRT-PCR检测结果显示，rBCG免疫可抑制eWAT脂肪分解和能量消耗相关基因表达。BCG免疫对细胞因子转录作用影响不大，而rBCG显著诱导IFN-γ和IL-1Ra，抑制IL-15和IL-2的转录，但不诱导衰老相关基因的表达。结论 rBCG免疫可诱导eWAT脂肪细胞肥大，其机制与抑制eWAT脂肪分解及调节细胞因子表达有关。

关键词：卡介苗重组卡介苗环二腺苷酸白色脂肪脂肪代谢细胞因子

结核分枝杆菌c-di-AMP磷酸二酯酶的重组腺病毒的构建及其诱导的体液免疫应答

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病学报 2025年

作者：胡家豪宁唤唤董梦娟路延之代婷张从玥徐子晴王姝予周正言柏银兰空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学基础医学院学员队空军军医大学军事医学创新中心宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系延安大学生命科学学院

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达... 详细信息

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达。重组pcADV-CnpB与骨架质粒共转染HEK293T细胞包装获得重组腺病毒rAd-CnpB，以HEK293T细胞扩增rAd-CnpB，Westernblot和免疫荧光检测rAd-CnpB表达目的蛋白。以rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，收集小鼠血清与肺泡灌洗液（BALF），ELISA检测抗原特异性抗体水平。结果酶切和测序鉴定表明重组质粒pcADV-CnpB构建成功，该质粒能够在真核细胞中表达。在HEK293T细胞内包装并获得rAd-CnpB，大量扩增并纯化获得滴度为5.53×1010PFU/mL的rAd-CnpB。rAd-CnpB可在HEK293T细胞中表达目的蛋白CnpB。rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，可诱导BALF中CnpB特异性IgG与分泌型IgA水平的增加，同时诱导血清中产生高水平的CnpB特异性IgG。结论成功构建表达Mtb c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒rAd-CnpB，并且rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导抗原特异性体液免疫与黏膜免疫应答，可用于结核病新疫苗策略的研究。

关键词：结核分枝杆菌重组腺病毒 c-di-AMP 磷酸二酯酶黏膜免疫

新型中性粒细胞响应性发光纳米胶束的构建及其在小鼠烧伤模型成像中的应用

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

陆军军医大学学报 2025年

作者：胡涛郭嘉伟张建祥重庆大学生物工程学院陆军军医大学（第三军医大学）药学与检验医学系药物分析学教研室陆军军医大学（第三军医大学）药学与检验医学系药剂学教研室

目的基于发光材料鲁米诺（Luminol）构建中性粒细胞响应性发光纳米胶束，并考察其在小鼠烧烫伤模型早期炎症中的成像能力。方法以六氯三聚磷腈（hexachlorotripolyphosphazene，HCCP）为骨架材料，化学键合鲁米诺（Luminol）和聚乙二... 详细信息

目的基于发光材料鲁米诺（Luminol）构建中性粒细胞响应性发光纳米胶束，并考察其在小鼠烧烫伤模型早期炎症中的成像能力。方法以六氯三聚磷腈（hexachlorotripolyphosphazene，HCCP）为骨架材料，化学键合鲁米诺（Luminol）和聚乙二醇（Polyethylene Glycol，PEG）合成两亲性发光材料LHP，并采用红外光谱、核磁氢谱等方法对LHP的化学结构进行表征；将LHP溶于去离子水自组装形成纳米胶束LHP NM，同时测定其粒径大小和电位，并采用透射电镜（transmission electron microscope， TEM）观察纳米胶束的形态；使用光纤光谱仪、微弱发光测量仪和小动物活体成像仪对纳米胶束的光谱学性质、化学发光规律和体外发光成像能力进行详细评价。使用70、80和90 ℃热水按简单随机抽样法分组对雌性Balb/c小鼠进行烫伤处理以建立Ⅰ度至深Ⅱ度小鼠烧烫伤模型，各组样本数n=10，通过H&E染色结果判断模型小鼠皮肤烫伤深度，采用荧光定量qPCR测定烫伤皮肤组织TNF-α，IL-1β、IL-6和髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）的mRNA表达水平，ROS检测试剂盒考察烧伤小鼠皮肤组织活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平随烫伤时间和深度变化的情况；采用FITC-Ly6G抗体标记中性粒细胞，观察模型小鼠皮肤组织中性粒细胞数量的变化；使用小动物活体成像系统考察纳米胶束LHP NM在小鼠烧烫伤模型中的成像能力，分析发光强度改变与中性粒细胞募集数量变化的相关性，对发光纳米胶束在小鼠烧烫伤模型早期炎症反应监测及烧烫伤深度能力诊断中的效果进行评价。结果核磁谱图解析证实一个HCCP分子上约键合了5个鲁米诺单元和一个聚乙二醇（PEG）链，TEM和粒径测定结果表明所制备纳米胶束形态呈空心球形，粒径约为120.000 nm。体外发光实验中，在不同浓度活性氧和MPO条件下，纳米胶束能实现高亮且持续的化学发光，发光强度与活性氧水平及纳米胶束浓度呈现良好的剂量依赖性。细胞实验表明纳米胶束能够实现中性粒细胞响应性成像，发光强度与中性粒细胞数量和LHP NM剂量呈正相关，线性相关系数分别为r = 0.98、0.99。动物实验结果表明，烧烫伤模型小鼠皮肤损伤组织中的中性粒细胞数量和活性氧水平显著升高（P<0.05）。实验发现，在24 h时间点，80 ℃与70 ℃处理组对比，中性粒细胞募集数量增加约86.4%，发光成像强度增加约71.5%，证明烧伤深度与损伤局部中性粒细胞募集数量具有相关性，且LHP NM可在模型小鼠中实现中性粒细胞响应性成像，其成像强度变化与皮肤损伤组织中的中性粒细胞数量和活性氧水平密切相关。结论成功构建中性粒细胞响应性发光纳米胶束LHP NM，基于LHP NM可实现小鼠烧烫伤模型皮肤损伤组织的响应性成像，其发光强度可准确反映烧烫伤模型中的中性粒细胞浸润程度及ROS水平变化，从而实现小鼠烧烫伤模型早期炎症反应的实时监测，并为烧烫伤深度的诊断提供方法和策略。

关键词：烫伤纳米胶束中性粒细胞活性氧

希金斯炭疽菌自噬相关基因ChAtg3的功能研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

华南农业大学学报 2025年

作者：段灵涛何九卿王莉陈炜伦祝一鸣周而勋华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室

【目的】研究希金斯炭疽病菌Colletotrichum higginsianum中自噬相关基因ChAtg3的作用。【方法】对ChAtg3进行序列、系统发育和表达模式分析，并观察其在C. higginsianum侵染拟南芥后的表达变化。通过根癌农杆菌介导的遗传转化技术，进... 详细信息

【目的】研究希金斯炭疽病菌Colletotrichum higginsianum中自噬相关基因ChAtg3的作用。【方法】对ChAtg3进行序列、系统发育和表达模式分析，并观察其在C. higginsianum侵染拟南芥后的表达变化。通过根癌农杆菌介导的遗传转化技术，进行ChAtg3基因的敲除和回补。【结果】拟南芥接种C. higginsianum 8 ～ 40 h内ChAtg3基因表达量显著上升。敲除该基因后的突变体（ΔChAtg3）自噬过程受抑制，其黑色素含量、产孢量、附着胞形成率和致病力均显著下降，但与野生型相比，菌丝生长和孢子萌发率并无显著变化。而通过基因回补，突变体CΔChAtg3在生物学表型和致病性上得以恢复。【结论】结果揭示了ChAtg3基因在希金斯炭疽病菌自噬过程、孢子产生和附着胞形成中的关键作用，是该病原菌致病力的关键调节因子。

关键词：希金斯炭疽菌自噬相关基因ChAtg3 基因功能分析致病力

3种铝硅酸盐类吸附剂及甘露低聚糖对5种霉菌毒素的吸附效果评价

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧兽医 2025年 195-204页

作者：余英英王彩蝶臧长江李梦飞徐子皓孙龙侯敏李晓斌李凤鸣新疆农业大学动物科学学院新疆肉乳用草食动物营养实验室新疆农业科学院微生物应用研究所新疆特殊环境微生物实验室

【目的】饲料在贮存过程中因水分含量、环境温度、湿度等因素的影响,极易发生霉变并产生霉菌毒素,如何减少霉菌毒素对饲料的污染是目前亟待解决的问题。试验旨在研究凹凸棒石粉、沸石和蒙脱土3种铝硅酸盐类吸附剂及甘露低聚糖对黄曲霉毒... 详细信息

【目的】饲料在贮存过程中因水分含量、环境温度、湿度等因素的影响,极易发生霉变并产生霉菌毒素,如何减少霉菌毒素对饲料的污染是目前亟待解决的问题。试验旨在研究凹凸棒石粉、沸石和蒙脱土3种铝硅酸盐类吸附剂及甘露低聚糖对黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol,DON）、玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEN）、赭曲霉毒素A（ochratoxins A,OTA）和T-2毒素5种毒素的体外吸附效果。【方法】通过酶联免疫吸附法（ELISA）测定凹凸棒石粉、沸石、蒙脱土和甘露低聚糖在添加量为0.25%、0.5%、1%和2%时对5种毒素的吸附率,以及在不同pH条件下各吸附剂对5种毒素的吸附率及解吸率。【结果】（1）添加量、吸附剂及二者之间的互作对5种毒素吸附率均有极显著影响（P沸石>凹凸棒石粉>甘露低聚糖;4种吸附剂在pH 10.0且添加量为1%时对AFB1、DON和ZEN的吸附率较高;将pH 4.0的吸附环境改为pH 7.0或甲醇后,3种吸附剂对DON、ZEN、OTA和T-2毒素的解吸率从低到高为蒙脱土>沸石>凹凸棒石粉。

关键词：吸附剂甘露低聚糖霉菌毒素酶联免疫吸附法

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

细菌外膜囊泡亚群的分离与蛋白质组学分析

色谱 2025年

作者：尤柏儒邹迅吴言李荪涛肖华微生物代谢国家重点实验室上海交通大学生命科学技术学院

外膜囊泡(OMVs)是革兰氏阴性细菌分泌的20～400 nm的具膜囊泡状小体,在毒性物质传递和免疫逃逸等过程中发挥重要功能。尽管许多研究已经揭示了OMVs的关键作用,但是OMVs自身存在的异质性限制了我们对其蛋白质组成和功能的深入研究。因此,... 详细信息

外膜囊泡(OMVs)是革兰氏阴性细菌分泌的20～400 nm的具膜囊泡状小体,在毒性物质传递和免疫逃逸等过程中发挥重要功能。尽管许多研究已经揭示了OMVs的关键作用,但是OMVs自身存在的异质性限制了我们对其蛋白质组成和功能的深入研究。因此,对OMVs异质性亚群的组成及其生物学功能开展研究具有重要意义。本研究采用超速离心结合密度梯度离心,对大肠杆菌DH5α和铜绿假单胞菌PAO1分泌的OMVs进行了系统的分离和表征,并结合定量蛋白质组学技术对其进行了全面分析。首先,我们对超速离心得到的两种菌株OMVs粗提物进行了碘克沙醇密度梯度离心,得到了F1～F6 6个组分。接着,通过纳米颗粒追踪分析,确认了DH5α-OMVs和PAO1-OMVs粒径分布,DH5α-OMVs各亚群的平均粒径为131.0～161.0 nm, PAO1-OMVs各亚群的平均粒径为140.0～169.0 nm;通过透射电子显微镜观察到囊泡呈经典的茶托结构;蛋白质的银染和免疫印迹结果共同验证了密度梯度组分中OMVs亚群的分布,同时确定了DH5α-OMVs和PAO1-OMVs亚群的有效组分分别为F1a～F4a和F1b～F5b。然后,我们从DH5α-OMVs和PAO1-OMVs的各亚群中分别鉴定到2 388种和905种蛋白质。通过k-means聚类和GO富集分析,我们揭示了不同密度亚群在能量代谢、物质运输、核糖体合成等生物学功能上的异质性。最后,通过对大肠杆菌DH5α-OMVs和铜绿假单胞菌PAO1-OMVs亚群的比较分析,我们发现两种菌株虽然在OMVs的基本功能上具有共性,但在各自的亚群中也展现出了不同的功能特征。DH5α-OMVs的F1a亚群富集了与氨基酸代谢和蛋白质合成相关的功能,而PAO1的F2b亚群则表现出显著的生物大分子合成功能。本研究揭示了细菌OMVs亚群具有不同的生物学功能,进而为理解细菌的致病机制和与宿主的相互作用提供新的理论基础,有利于拓展其生物学应用。

关键词：外膜囊泡亚群大肠杆菌铜绿假单胞菌密度梯度离心蛋白质组学

双重核酸纸条快速检测单核细胞增生李斯特菌prfA和hly毒素基因方法的建立及试剂盒的研制

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2025年

作者：刘岩杨建宇周钰娇丁文博张先宇高林然潘蓓珍杨继飞赵云冬北华大学医学技术学院临床生化及分子生物学检验教研室

目的基于聚合酶链反应和胶体金技术相结合的双重核酸试纸条方法快速检测单核细胞增生李斯特菌prfA和hly两种毒素基因。方法采用加热煮沸法提取单核细胞增生李斯特菌DNA，以单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly为靶基因，分别用6-FAM标记p... 详细信息

目的基于聚合酶链反应和胶体金技术相结合的双重核酸试纸条方法快速检测单核细胞增生李斯特菌prfA和hly两种毒素基因。方法采用加热煮沸法提取单核细胞增生李斯特菌DNA，以单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly为靶基因，分别用6-FAM标记prfA上游引物5'端，Biotin标记prfA下游引物5'端，Digoxin标记hly上游引物5'端和Biotin标记hly下游引物5'端，建立单核细胞增生李斯特菌的毒素基因检测方法，通过克隆转化、测序分析，克隆阳性对照品，研发试剂盒并对试剂盒特异性、灵敏度、复现性及稳定性进行评价，并通过样品检测对试剂盒进行验证。结果水煮法提取的单核细胞增生李斯特菌浓度为148.81±0.97 ng/μL,A260/A280在1.8～2.0范围内；PCR产物经克隆转化、测序对比，与GenBank数据库中基因序列的同源性均为100%；特异性检测，仅单核细胞增生李斯特菌为阳性结果，与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、蜡样芽胞杆菌无交叉反应；灵敏度检测，最低检测限为10-2 ng/μL，比琼脂糖凝胶电泳高10倍；复现性检测，不同实验室不同人员分别对核酸试纸条进行验证，结果一致；稳定性检测，在第6、9、12月对核酸试纸条进行验证，稳定性较好。样品检测结果显示，本试剂盒可准确快速的检出样品中单核细胞增生李斯特菌。结论本研究所研发的单核细胞增生李斯特菌双重毒素检测试剂盒可同时检测单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly毒素基因，具有特异性强、灵敏度高、复现性好、稳定性好等优点，对保障食品安全具有现实意义。

关键词：单核细胞增生李斯特菌 prfA hly 双重核酸试纸条

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

药物临床试验的设计创新和技术创新

复旦学报(医学版) 2025年

作者：熊海燕罗剑锋王伟炳复旦大学公共卫生学院流行病学教研室-公共卫生安全教育部重点实验室复旦大学公共卫生学院生物统计学教研室

药物临床试验是评估药物有效性和安全性的关键实验流行病学研究方法。本文介绍了药物临床试验设计创新的类型和设计思路，为相关研究提供方法学参考。适应性设计是一类复杂创新型临床试验设计方法，依据适应性的目的可以分为：成组序贯... 详细信息

药物临床试验是评估药物有效性和安全性的关键实验流行病学研究方法。本文介绍了药物临床试验设计创新的类型和设计思路，为相关研究提供方法学参考。适应性设计是一类复杂创新型临床试验设计方法，依据适应性的目的可以分为：成组序贯设计，样本量重估计，无缝试验，富集设计、主方案设计（篮式试验、伞式试验、平台试验等）。适应性设计具备更大的调整灵活性，在一定程度上克服了常规临床试验的缺点，进而提高研究结果的有效性和论证强度。药物临床试验的设计创新与重塑将为实现精准医学目标提供更有力的循证证据。

关键词：药物临床试验适应性设计主方案设计人工智能