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高氧环境对肺动脉平滑肌细胞表型的影响

中华心血管病杂志 2024年第2期52卷 185-190页

作者：瞿珊珊李玉兰黄蓉蓉郭鸿王秀梅张俊妹杨传奇兰州大学第一医院生殖医学中心兰州730000 兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科兰州730000

目的探讨不同氧(O2)浓度环境对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)表型的影响及肺动脉高压的形成机制。方法采用酶解法分离培养大鼠原代PASMC,经鉴定后将稳定传代的PASMC分别置于正常O2含量(C组)及55%O2(H55组)、75%O2(H75组)、95%O2(H95组)的密... 详细信息

目的探讨不同氧(O2)浓度环境对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)表型的影响及肺动脉高压的形成机制。方法采用酶解法分离培养大鼠原代PASMC,经鉴定后将稳定传代的PASMC分别置于正常O2含量(C组)及55%O2(H55组)、75%O2(H75组)、95%O2(H95组)的密闭容器培养6 h。分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌22α蛋白(SM22α)、骨桥蛋白(OPN)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的mRNA和蛋白表达。结果H55组的α-SMA、SM22α、OPN、MMP-2的mRNA和蛋白相对表达量与C组差异均无统计学意义(P均>0.05);与C组和H55组比较,H75组和H95组α-SMA、SM22α的mRNA和蛋白相对表达量均更低,OPN、MMP-2的mRNA和蛋白相对表达量均更高(P均<0.05);与H75组相比,H95组MMP-2的mRNA相对表达量更高(P<0.05)。结论O2浓度75%以上环境可通过诱导PASMC表型转化,使PASMC获得较强分泌能力,形成肺动脉高压病理基础,并且这种诱导作用呈现O2浓度依赖性。

关键词：高氧肺动脉平滑肌细胞表型转化肺动脉高压

柚皮苷通过P2X7受体抑制非经典焦亡减轻腹腔感染小鼠肠黏膜损伤

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陆军军医大学学报 2024年第2期46卷 139-146页

作者：马源段倩雯董旭鹏刘澈张铭马玉清兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科兰州730000

目的探究柚皮苷(naringin, Ng)在腹腔感染(intra-abdominal infection, IAI)小鼠肠黏膜损伤中的治疗作用及其机制。方法腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)建立IAI小鼠肠黏膜损伤模型。64只健康雄性小鼠采用随机数字表法分为4组... 详细信息

目的探究柚皮苷(naringin, Ng)在腹腔感染(intra-abdominal infection, IAI)小鼠肠黏膜损伤中的治疗作用及其机制。方法腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)建立IAI小鼠肠黏膜损伤模型。64只健康雄性小鼠采用随机数字表法分为4组(n=16):对照组(Control组,0.2 mL PBS),脂多糖组(LPS组,LPS 10 mg/kg),柚皮苷组(Ng组,Ng 50 mg/kg+LPS 10 mg/kg)和BzATP组(BzATP 5 mg/kg+Ng 50 mg/kg+LPS 10 mg/kg)。Ng和BzATP在造模前1 h进行腹腔注射,Control组予以等量PBS。各组于造模24 h随机选6只小鼠获取回肠。HE染色观察回肠黏膜病理学变化和Chiu’s评分;免疫荧光观察肠黏膜P2X7、焦亡效应蛋白GSDMD、巨噬细胞标记物CD68表达和分布情况;Western blot检测回肠组织P2X7和焦亡效应蛋白NLRP3、Caspase11、GSDMD及GSDMD-N表达量;ELISA检测回肠炎症因子IL-1β、IL-18和IL-10水平。记录7 d内小鼠脓毒症评分(mouse sepsis score, MSS)。结果 LPS组与Control组相比,MSS和Chiu’s评分增高(P一致且信号增强(P<0.05);促炎因子IL-1β、IL-18水平上升,抗炎因子IL-10水平下降(P<0.05);回肠组织P2X7、NLRP3、Caspase11、GSDMD和GSDMD-N蛋白表达增加(P<0.05)。Ng组与LPS组相比,MSS下降;HE染色和Chiu’s评分表明肠黏膜炎性损伤减轻;P2X7、GSDMD、CD68荧光信号减弱(P<0.05);IL-1β、IL-18水平下降(P<0.05),IL-10水平上升(P<0.05);P2X7、NLRP3、Caspase11、GSDMD和GSDMD-N蛋白表达下降(P<0.05)。BzATP组实验结果与Ng组相反。结论 IAI小鼠肠黏膜P2X7受体表达升高,Caspase11介导的非经典焦亡发生,加重其肠黏膜损伤;Ng可能通过抑制P2X7受体调控非经典焦亡,改善IAI小鼠肠黏膜损伤。

关键词：腹腔感染肠黏膜损伤非经典焦亡胱天蛋白酶11 脓毒症

WIN55212-2通过调控AKT/mTOR/PFKFB3信号通路减轻脓毒症小鼠急性肾损伤

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陆军军医大学学报 2024年第10期46卷 1100-1106页

作者：董旭鹏段倩雯马源刘澈龚禹马玉清兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科兰州730000

目的探讨大麻素受体激动剂WIN55212-2(WIN)对脓毒症小鼠急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的影响及其作用机制。方法24只雄性健康小鼠分为4组(n=6):对照组(Control组)、脓毒症组(LPS组)、脓毒症+WIN55212-2组(LPS+WIN组)和脓毒症+WIN55212-2+mTOR激活剂MHY1485组(LPS+WIN+MHY组)。采用腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的方法构建脓毒症模型,造模24 h后取材,ELISA测定肾脏组织IL-1β、IL-18和乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)的含量以及血清Scr、肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)和乳酸的含量;HE染色观察肾脏组织病理改变并进行Paller评分,Western blot检测肾脏组织p-AKT、p-mTOR及6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)的表达。结果与Control组相比,LPS组HE染色显示肾脏组织受损,Paller评分升高(P<0.05),血清乳酸、Scr、KIM-1含量升高(P<0.05),肾脏组织LDHA、IL-1β、IL-18含量上调(P<0.05),肾脏组织p-AKT、p-mTOR、PFKFB3表达增加(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+WIN组肾脏组织病理损伤减轻,Paller评分降低(P<0.05),乳酸、Scr、KIM-1的含量降低(P<0.05),LDHA、IL-1β、IL-18含量下调(P<0.05),p-AKT、p-mTOR、PFKFB3表达减少(P<0.05)。与LPS+WIN组相比,LPS+WIN+MHY组Paller评分升高(P<0.05),乳酸、Scr、KIM-1的含量升高(P<0.05),LDHA、IL-1β、IL-18含量上调(P<0.05),p-AKT、p-mTOR、PFKFB3表达增加(P<0.05)。结论WIN可以减轻脓毒症AKI,其机制可能是通过抑制AKT/mTOR/PFKFB3信号通路,降低肾脏组织糖酵解水平,减轻炎症反应。

关键词：脓毒症急性肾损伤有氧糖酵解 AKT/mTOR

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过度劳累对小鼠脾脏造血功能的影响

陆军军医大学学报 2024年第5期46卷 427-433页

作者：邓三春陈苏衡于恺华郭鸿廖阅鲍振星李玉兰兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科兰州730000

目的探讨过度劳累(过劳)对小鼠脾脏造血功能的影响。方法C57BL/6J小鼠18只,按随机数字表法分为3组(n=6):对照(C)组、过劳15 d(W1)组、过劳30 d(W2)组。W1、W2组每日强迫水中站立8 h+束缚3 h,分别持续15、30 d,C组无特殊处理。观察测量... 详细信息

目的探讨过度劳累(过劳)对小鼠脾脏造血功能的影响。方法C57BL/6J小鼠18只,按随机数字表法分为3组(n=6):对照(C)组、过劳15 d(W1)组、过劳30 d(W2)组。W1、W2组每日强迫水中站立8 h+束缚3 h,分别持续15、30 d,C组无特殊处理。观察测量小鼠一般情况、进食量和体质量,造模结束后取血、处死小鼠,分离脾脏和心脏,测量脾脏指数;检测血常规;脾脏行HE染色;采用RT-qPCR法检测小鼠脾脏趋化因子CXC配体12(C-X-C motif chemokin ligand 12,CXCL12)、干细胞因子(stem cell factor,SCF)和心脏间隙连接蛋白45(connexin 45,Cx45)mRNA表达水平;采用ELISA检测脾脏CXCL12、SCF蛋白表达水平;免疫组化法行心脏Cx45蛋白定量。结果①一般情况:与C组相比,W1组、W2组小鼠毛发粗糙,活跃程度先增加后下降,扎堆、精神状态差;小鼠进食量:W1、W2组显著高于同时间C组;C组小鼠体质量随喂养时间增加而增加,W1、W2组体质量无明显增长;W2组小鼠脾脏指数显著下降(P一。

关键词：过度劳累髓外造血脾脏心肌梗死

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瘤周MRI在乳腺癌中的应用进展

中华放射学杂志 2024年第4期58卷 454-459页

作者：冯雯刘欣然屈孟孟卢星如雷军强兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院放射科兰州730000

乳腺癌是全球女性发病率最高的恶性肿瘤。目前对于乳腺癌的研究始终聚焦于肿瘤本身,故瘤周影像学研究也逐渐受到重视。该文总结了瘤周MRI(peri-MRI)技术在乳腺癌的应用现状及研究热点,并主要讨论了peri-MRI征象与其病理学机制的对应关系... 详细信息

乳腺癌是全球女性发病率最高的恶性肿瘤。目前对于乳腺癌的研究始终聚焦于肿瘤本身,故瘤周影像学研究也逐渐受到重视。该文总结了瘤周MRI(peri-MRI)技术在乳腺癌的应用现状及研究热点,并主要讨论了peri-MRI征象与其病理学机制的对应关系,peri-MRI预测乳腺癌预后的因素及新辅助化疗反应的价值以及基于peri-MRI影像组学和人工智能诊断乳腺癌的价值,同时展望了peri-MRI未来的发展需求和方向。

关键词：乳腺肿瘤磁共振成像瘤周

2型糖尿病患者非酒精性脂肪肝及肝纤维化与骨骼肌质量关系的研究

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中华内分泌代谢杂志 2024年第8期40卷 660-668页

作者：郭馨远韩梅马邓荣昝晓晖赵阳婷吕小羽李凯陈重阳王亚雯刘靖芳兰州大学第一临床医学院兰州兰州大学第一医院内分泌科兰州

目的探讨2型糖尿病患者(type 2 diabetes mellitus, T2DM)非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)及肝纤维化与骨骼肌质量之间的关系。方法 2022年4月至2023年5月兰州大学第一医院内分泌科确诊的685例T2DM患者... 详细信息

目的探讨2型糖尿病患者(type 2 diabetes mellitus, T2DM)非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)及肝纤维化与骨骼肌质量之间的关系。方法 2022年4月至2023年5月兰州大学第一医院内分泌科确诊的685例T2DM患者根据是否伴有NAFLD分为NAFLD组和Non-NAFLD组, NAFLD人群根据天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)/丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)水平分为肝纤维化和无肝纤维化组, 比较各组之间四肢骨骼肌质量(appendicular skeletal muscle mass, ASM)、四肢骨骼肌质量指数(appendicular skeletal muscle mass index, ASMI)水平及肌肉质量减少患病率的差异。二元logistic回归分析T2DM患者ASMI与NAFLD、肝纤维化的独立相关性。结果男性T2DM患者NAFLD组ASMI水平低于Non-NAFLD组, 肌肉质量减少患病率高于Non-NAFLD组;女性NAFLD组ASM、ASMI水平均低于Non-NAFLD组, 肌肉质量减少患病率高于Non-NAFLD组。男性、女性T2DM患者ASMI水平与NAFLD患病风险独立负相关(OR=-0.696, 95%CI 0.579～0.837;OR=-0.757, 95%CI 0.629～0.911)。NAFLD患者肝纤维化组ASM、ASMI水平低于无肝纤维化组;肌肉质量减少患病率差异无统计学意义。男性NAFLD患者肝纤维化组ASM水平、ASMI水平低于无肝纤维化组, 女性患者ASM及ASMI水平组间差异无统计学意义。男性NAFLD患者ASMI水平与肝纤维化患病风险独立负相关(OR=-0.726, 95%CI 0.537～0.983), 女性患者ASMI水平与肝纤维化患病风险无相关性。结论男性或女性T2DM患者肌肉质量减少与T2DM患者NAFLD患病风险独立相关。男性T2DM患者肌肉质量减少与其肝脏纤维化患病风险独立相关。

关键词：糖尿病, 2型四肢骨骼肌质量非酒精性脂肪肝肝纤维化

miR-182-5p调控初级纤毛的缺失增加甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1的迁移

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中华内分泌代谢杂志 2024年第2期40卷 158-163页

作者：马承旭马小妮马丽华傅松波兰州大学第一临床医学院兰州大学第一医院内分泌科兰州730000

目的探讨miR-182-5p调控初级纤毛的缺失对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞系TPC-1迁移的影响。方法收集10例兰州大学第一医院PTC组织和癌旁组织,qPCR检测癌旁组织、PTC组织和TPC-1细胞中miR-182-5p的表达量,免疫荧光检测初级纤毛的形成;过表达m... 详细信息

目的探讨miR-182-5p调控初级纤毛的缺失对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞系TPC-1迁移的影响。方法收集10例兰州大学第一医院PTC组织和癌旁组织,qPCR检测癌旁组织、PTC组织和TPC-1细胞中miR-182-5p的表达量,免疫荧光检测初级纤毛的形成;过表达miR-182-5p,qPCR和Western blot检测TPC-1细胞中PI3K的表达量,Transwell实验检测TPC-1细胞迁移数量,免疫荧光检测初级纤毛的形成;siRNA-IFT88干扰TPC-1细胞,Transwell实验检测TPC-1细胞迁移数量,免疫荧光检测初级纤毛的形成,吉姆萨染色检测形态学变化,Western blot检测E-cadherin和N-cadherin的蛋白表达量。结果与癌旁组织相比,PTC组织中初级纤形成受损;miR-182-5p表达量显著上调。与Nthy-ori3-1相比,TPC-1细胞中初级纤毛的频率减少;miR-182-5p表达量显著上调(P=0.001);miR-182-5p mimic治疗后的TPC-1细胞中PI3K的表达量降低,迁移数量增加(P=0.001),初级纤毛频率降低为27%(P=0.002);siRNA-IFT88治疗后的TPC-1细胞表面初级纤毛变短变细,频率减少(P=0.001),迁移数量增加(P<0.001)。结论miR-182-5p通过PI3K通路调控初级纤毛的缺失有助于TPC-1细胞的迁移,初级纤毛的丢失对PTC预后具有不利的影响。

关键词：甲状腺乳头状癌迁移初级纤毛 miR-182-5p TPC-1

黄芪甲苷调控细胞焦亡减轻肠缺血再灌注损伤的分子作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第19期30卷 116-123页

作者：常利娅冷玉芳赵紫岑王玉邢阳李东斌兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院兰州730000

目的:采用网络药理学和体内实验结合的方法研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)调控细胞焦亡(Pyroptosis)减轻肠缺血再灌注损伤(IRI)的作用机制。方法:首先从中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)数据库和Swiss Target Prediction数据库中检索获得AS-... 详细信息

目的:采用网络药理学和体内实验结合的方法研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)调控细胞焦亡(Pyroptosis)减轻肠缺血再灌注损伤(IRI)的作用机制。方法:首先从中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)数据库和Swiss Target Prediction数据库中检索获得AS-Ⅳ的对应靶点基因,并从GeneCards数据库中检索得到肠IRI和Pyroptosis相关的靶点基因,通过解螺旋网站绘制Venn图,获得三者的共同靶点基因。通过STRING数据库、Cytoscape软件构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络筛选共同靶基因并导入Cytoscape软件获得核心靶基因。微生信平台用于基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析并预测AS-Ⅳ调控Pyroptosis减轻肠IRI的作用机制。然后采用随机数字表法,将C57/BL6J小鼠随机分为5组,正常组、模型组、给药组(IR+AS-Ⅳ)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)激动剂NSS组(IR+AS-Ⅳ+NSS)、NLRP3抑制剂MCC950组(IR+AS-Ⅳ+MCC950)。模型组、给药组、NLRP3激动剂NSS组、NLRP3抑制剂MCC950组采用夹闭肠系膜上动脉45 min恢复灌注2 h建立肠IRI模型,正常组仅分离血管不夹闭。给药组、NLRP3激动剂NSS组、NLRP3抑制剂MCC950组于造模前连续3 d灌胃溶于0.1%二甲基亚砜的黄芪甲苷(50 mg·kg^(-1)),末次灌胃时间为造模前2 h,其余2组灌胃等量的生理盐水。NLRP3激动剂NSS组于造模前1 h腹腔注射4 mg·kg^(-1)的NSS,NLRP3抑制剂MCC950组于造模前1 h腹腔注射10 mg·kg^(-1)的MCC950。再灌注2 h处死小鼠,获取肠组织。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测白细胞介素(IL)-18,IL-1β水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)、NLRP3、胱天蛋白酶(Caspase)-1、焦孔素D(GSDMD)蛋白表达,Chiu's评分评估小鼠肠组织病理学变化。结果:网络药理学分析表明肠IRI的靶点有1599个,AS-Ⅳ的作用靶点有199个,Pyroptosis的靶点有197个,三者共同靶点有20个。核心靶点有10个,包括NLRP3、TXNIP、沉默信息调节因子1(SIRT1)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、IL-18、GSDMD、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)等。共同靶点的KEGG富集筛选出的通路相关性最大的是NOD样受体通路。体内实验结果表明,与正常组比较,模型组Chiu's评分升高,小鼠肠组织IL-18,IL-1β炎症因子水平明显升高(P一致,黄芪甲苷通过TXNIP/NLRP3信号通路抑制细胞焦亡以减轻IRI。

关键词：黄芪甲苷肠缺血再灌注损伤硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路细胞焦亡网络药理学

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肝移植术后继发急性早幼粒细胞白血病1例

中国肿瘤临床 2024年第1期51卷 49-50页

作者：吴庭恺杨晓晓张婉婉任崇崇刘蓓兰州大学第一临床医学院兰州市730000 兰州大学第一医院血液科

患者男性,50岁。2014年3月因乙肝肝硬化失代偿期于外院行同种异体原位肝移植术,移植过程顺利,移植后化验肝功能、血常规正常。移植后规律口服他克莫司(1.5 mg/d)、吗替麦考酚酯(0.25 g 1/12 h)预防排斥反应;口服恩替卡韦(0.5 mg/d)联合... 详细信息

患者男性,50岁。2014年3月因乙肝肝硬化失代偿期于外院行同种异体原位肝移植术,移植过程顺利,移植后化验肝功能、血常规正常。移植后规律口服他克莫司(1.5 mg/d)、吗替麦考酚酯(0.25 g 1/12 h)预防排斥反应;口服恩替卡韦(0.5 mg/d)联合肌肉注射乙型肝炎人免疫球蛋白(400 IU/月)抗乙肝病毒。定期随访复查。

关键词：肝移植术后急性早幼粒细胞白血病免疫抑制