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机械力对间充质干细胞向成骨细胞分化的力学响应机制研究

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生物化学与生物物理进展 2007年第7期34卷 718-723页

作者：赵红斌吕同德马敬马慧张西正兰州军区兰州总医院兰州730050 军事医学科学院卫生装备研究所天津300161

间充质干细胞的分化受多种因素的影响,其中力学是重要因素之一.为了探讨力学信号在间充质干细胞分化中的传导机制,利用力学加载装置在成骨细胞诱导体系条件下,对小鼠骨髓间充质干细胞系(D1细胞)加载不同拉伸应变,运用RT-PCR方法、Flou-3... 详细信息

间充质干细胞的分化受多种因素的影响,其中力学是重要因素之一.为了探讨力学信号在间充质干细胞分化中的传导机制,利用力学加载装置在成骨细胞诱导体系条件下,对小鼠骨髓间充质干细胞系(D1细胞)加载不同拉伸应变,运用RT-PCR方法、Flou-3-AMCa2+染色技术、激光共聚焦显微镜技术及5种信号阻断剂,SB203580(p38MAPK特异抑制剂)、PD98059(MEK-1/2MAPK特异抑制剂)、LY294002(PI3Ks特异抑制剂)、细胞松弛素B(微丝结构阻断剂)、EGTA(Ca2+螯合剂),探讨力学信号的基本传导途径.结果显示:3%的拉伸应变能明显提高细胞内Ca2+水平;细胞微丝结构破坏后,延迟了3%拉伸应变对细胞内Ca2+水平增加的影响;细胞外Ca2+螯合后,拉伸应变不能促进细胞内Ca2+水平的升高,该结果提示,拉伸应变对细胞内Ca2+水平的影响主要通过细胞外Ca2+的内流实现.5种信号阻断剂能完全阻断干细胞向成骨细胞分化过程中关键基因骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和OSX mRNA的表达.p38MAPK途径、MEK-1/2MAPK途径被阻断后,拉伸应变激活了OCN和Osterix(OSX,与成骨细胞分化相关的关键基因)mRNA的表达;PI3Ks途径阻断后,拉伸应变部分激活了OCN和OSX mRNA的表达;细胞微丝破坏及胞外Ca2+螯合后,拉伸应变不能促进OCN和OSXmRNA的表达.上述结果表明:力学信号通过Ca2+信号、细胞微丝结构以及PI3Ks信号途径引起细胞的应答反应和生物学效应.

关键词：应变间充质干细胞成骨细胞 Ca^2+ 力学信号

淫羊藿苷调节成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收的机制

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中国医学科学院学报 2013年第4期35卷 432-438页

作者：马小妮葛宝丰陈克明周建石文贵谢艳芳郭晓宇吕享成魁高玉海兰州军区兰州总医院骨科研究所兰州730050

目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、... 详细信息

目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因表达,Westernblotting检测OPG、RANKL和Ⅰ型胶原蛋白表达。加入10-5mol/LICA作用10～90min,流式细胞仪测定细胞内钙离子浓度。结果与对照组相比,ICA能明显促进骨形成,表现为OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达量及Collagen Ⅰ蛋白表达量明显增加(P均<0.01),同时提高细胞内钙离子浓度。ICA也能明显抑制骨吸收,表现为提高OPG及OPG/RANKL基因和蛋白水平的表达量。结论 ICA可能是通过促进OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达,提高CollagenⅠ蛋白表达量及细胞内钙离子浓度来促进成骨细胞骨形成;并通过促进OPG及OPG、RANKL基因和蛋白水平的表达量来抑制破骨细胞骨吸收。

关键词：成骨细胞核因子κB受体活化因子配体骨保护素淫羊藿苷流式细胞仪

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紫外光核黄素交联胶原/PVA复合膜的表征

生物医学工程学杂志 2013年第5期30卷 1015-1021页

作者：赵红斌马慧甄平刘阳张全伟兰州军区兰州总医院骨科研究所兰州730050

探讨紫外光核黄素交联前后胶原/PVA复合生物膜的结构和特征及其生物相容性。利用胶原蛋白和聚乙烯醇(PVA)按照1∶1和2∶1混合制备胶原/PVA复合膜,采用紫外光核黄素进行交联,经万能材料机、IR、SEM、吸水率、透气性、体外降解实验测试,... 详细信息

探讨紫外光核黄素交联前后胶原/PVA复合生物膜的结构和特征及其生物相容性。利用胶原蛋白和聚乙烯醇(PVA)按照1∶1和2∶1混合制备胶原/PVA复合膜,采用紫外光核黄素进行交联,经万能材料机、IR、SEM、吸水率、透气性、体外降解实验测试,对交联前后膜材料的结构和特征进行了表征,免疫荧光化学方法评价大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)与不同膜复合7d和14d后,细胞与膜的生物相容性。结果表明:制备的生物膜具有良好的均一性,交联后胶原/PVA(2∶1)复合膜的力学性能、体外降解速率、吸水率、透气性高于未交联膜(P<0.01)和交联的胶原/PVA(1∶1)膜(P<0.05),交联后胶原/PVA(2∶1)膜的生物相容性明显优于其它膜。因此,紫外光核黄素法交联的胶原/PVA生物膜具有潜在的应用价值。

关键词：胶原蛋白聚乙烯醇制备表征

西北五省区苯丙酮尿症患者苯丙氨酸羟化酶基因外显子11突变分析

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国际遗传学杂志 2015年第6期38卷 295-301页

作者：何江杨曦王瑞邹红云余伍忠兰州军区乌鲁木齐总医院临床医学研究所

目的研究分析西北五省区苯丙酮尿症患者苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子11的突变特征,为该地区苯丙酮尿症(PKU)的产前诊断和遗传咨询提供理论依据。方法应用PCR产物直接测序法对276例PKU患儿及其父母的PAH基因启动子、第1-13外显子及其... 详细信息

目的研究分析西北五省区苯丙酮尿症患者苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子11的突变特征,为该地区苯丙酮尿症(PKU)的产前诊断和遗传咨询提供理论依据。方法应用PCR产物直接测序法对276例PKU患儿及其父母的PAH基因启动子、第1-13外显子及其旁侧内含子区域进行基因突变分析。结果①在西北五省区276例PKU患者552条染色体PAH基因外显子11中共检测出47个突变等位基因,突变等位基因检出率为8.5%,检出7种PAH基因突变,其中,错义突变5种(71.4%)、无义突变1种(14.3%)、剪切位点突变1种(14,3%),常见的3种突变是Y356X(3.8%)、V399V(2.2%)和R400T(1.1%);②苯丙酮尿症患者PAH基因外显子11突变检出率由高到低依次为甘肃(19.0%)、青海(13.3%)、新疆(7.4%)、宁夏(6.0%)和陕西(4.8%),Y356X突变在新疆、宁夏和青海三省区中突变检出率最高(分别为4.1%、3.3%和7.1%),而陕西、甘肃检出率最高的突变分别为R400T(2.4%)、V399V(12.1%);③Y356X和V399V是西北及国内大多数地区PAH基因外显子11最为常见的两种突变,Y356X和V399V突变在西北地区中的检出率低于内蒙古、北京、河南、河北、天津等国内省区(P<0.05),V388M突变的检出率也分别低于韩国、西班牙和葡萄牙等国家(P<0.05)。西北地区检出的F392I突变在中国南方尚未见报道,F392I可能是中国西北地区独有的PAH基因突变。结论①西北地区PAH基因外显子1 1突变以Y356X和V399V为主,有别于韩国、日本等以Y356X和V388M为主。中国Y356X和V399V突变基因频率的高处分别在内蒙古和天津地区;②西北五省区PAH基因外显子11突变特点有别于中国其他地区,表现出多民族聚居地区基因突变特有的多样性和复杂性。

关键词：苯丙酮尿症苯丙氨酸羟化酶突变

非克隆cDNA文库与RACE技术克隆小剂量辐射诱导新基因RIG1

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中华放射医学与防护杂志 2001年第6期21卷 407-409页

作者：罗瑛隋建丽铁轶张元平周平坤孙志贤北京放射医学研究所 100850 兰州军区总医院临床试验科

目的　在获得了低剂量辐射诱导新基因RIG1EST片段的基础上 ,简便、有效地获得其全长cDNA ,进行下一步的基因功能研究。方法　结合应用非克隆cDNA文库技术及增强RACE技术 ,设计了巢式RACEPCR、生物素磁性分离、生物素标记探针杂交、再次... 详细信息

目的　在获得了低剂量辐射诱导新基因RIG1EST片段的基础上 ,简便、有效地获得其全长cDNA ,进行下一步的基因功能研究。方法　结合应用非克隆cDNA文库技术及增强RACE技术 ,设计了巢式RACEPCR、生物素磁性分离、生物素标记探针杂交、再次磁性分离的纯化流程。结果　成功地克隆到RIG1EST片段 3′端约 1kb的序列 ,该序列 3′端具有明显的polyA加尾信号 ,有编码区的终止密码子。进一步的分析明确了RIG1EST的正、负链及其蛋白编码方向 ,为RIG15′端的克隆提供了大量可靠的信息 ,目前RIG15′端的克隆已得到很好的进展。结论　所得结果与我们的设计完全一致 ,说明这一技术路线是简便可行的 ,为下一步研究RIG1基因在细胞辐射应激反应中的功能及被辐射诱导表达的调控模式奠定了基础。

关键词：非克隆cDNA文库增强RACE 探针杂交 RIG1基因

BMSCs联合去细胞肌肉生物支架修复大鼠脊髓半切损伤的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2012年第11期26卷 1362-1368页

作者：魏祥科文益民张涛李含兰州军区兰州总医院骨科中心兰州710050 兰州大学第二临床医学院临床系

目的以去细胞肌肉生物支架(acellular muscle bioscaffolds,AMBS)接种BMSCs,同种异体移植修复大鼠脊髓半切损伤,观察两者联合移植对脊髓损伤的修复作用。方法取8周龄雌性SD大鼠,采用改良化学方法制备AMBS,并进行复合冷灭菌;密度梯度离... 详细信息

目的以去细胞肌肉生物支架(acellular muscle bioscaffolds,AMBS)接种BMSCs,同种异体移植修复大鼠脊髓半切损伤,观察两者联合移植对脊髓损伤的修复作用。方法取8周龄雌性SD大鼠,采用改良化学方法制备AMBS,并进行复合冷灭菌;密度梯度离心法提取、贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用Hoechst 33342荧光标记,采用注射法制备BMSCs-AMBS复合支架,14 d后扫描电镜及荧光显微镜观察其生物相容性。取成年雌性SD大鼠48只,制备T9～11脊髓半切损伤模型后随机分为4组(n=12),A组于缺损处移植BMSCs-AMBS复合支架,B组单独移植BMSCs,C组单独移植AMBS,D组注射PBS作为空白对照组,分别于术后1、2、3、4周行运动功能评分,术后4周行HE染色观察及免疫荧光检测。结果 Masson染色及HE染色示AMBS内部呈平行结构,主要为胶原纤维,几乎无肌纤维。BMSCs-AMBS复合培养14 d后荧光显微镜观察示Hoechst 33342标记BMSCs大量存活,扫描电镜可见BMSCs贴附于支架内表面生长。术后2～4周,大鼠BBB评分A组均高于其余3组(P<0.05),D组明显低于其余3组(P<0.05);术后4周B组明显高于C组(t=10.352,P=0.000)。术后4周,HE染色示脊髓空洞面积A组明显小于其余3组,免疫荧光染色示A组神经丝蛋白200、巢蛋白阳性细胞表达量高于其余3组,神经胶质原酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)则明显低表达。A、B组荧光示踪的BMSCs移植到体内后主要迁移至对侧灰质前角,部分分化为神经元样细胞。A、B、C、D组GFAP荧光半定量分析积分吸光度(IA)值分别为733.01±202.04、926.42±59.46、1 069.37±33.42、1 469.46±160.53,A组明显低于其余3组,D组高于其余3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 AMBS具有相对规则的内部结构,与BMSCs有良好生物相容性,能抑制胶质瘢痕,促进BMSCs存活、迁徙、分化,是细胞移植理想的天然载体。两者联合移植修复大鼠脊髓损伤能发挥协同作用,促进运动功能恢复。

关键词： BMSCs 去细胞肌肉生物支架联合移植脊髓损伤大鼠

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3D打印在骨科领域中的应用进展及发展方向

创伤外科杂志 2024年第6期26卷 466-471页

作者：黄晓夏刘俊乌日开西·艾依提刘涛滕勇新疆医科大学研究生院乌鲁木齐830011 中国人民解放军新疆军区总医院脊柱外科乌鲁木齐830099 新疆大学乌鲁木齐830046

3D打印技术是一门将科学信息学与医学技术相融合的新兴学科,其在骨科领域中的优点已逐渐呈现出欣欣向荣之势,但如何更好应用3D打印技术一直困扰着我们。本文通过对3D打印技术在技术制备、临床应用、生物材料、医学教育以及实践过程中遇... 详细信息

3D打印技术是一门将科学信息学与医学技术相融合的新兴学科,其在骨科领域中的优点已逐渐呈现出欣欣向荣之势,但如何更好应用3D打印技术一直困扰着我们。本文通过对3D打印技术在技术制备、临床应用、生物材料、医学教育以及实践过程中遇到的问题等概括,展现出3D打印技术应用于骨科领域中的特有优点,进一步阐明如何规避该技术在实际操作中的难点,并探讨未来其发展方向,为今后3D打印技术更好服务社会提供宝贵经验。

关键词： 3D打印骨科临床应用发展

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黏性骨在口腔种植及牙周领域中的研究进展

国际口腔医学杂志 2024年第4期51卷 433-440页

作者：张婧周思颖张新铎冯玉霞李健学联勤保障部队第940医院口腔科兰州730050 新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔正畸科乌鲁木齐830011 兰州市第一人民医院麻醉科兰州730000

黏性骨由自体血小板浓缩物与颗粒骨移植材料交联而成,具有良好的可塑性和稳定性,可以适应多种骨缺损区形态并维持成骨空间;同时,源于自体血小板浓缩物的白细胞和多种生长因子的释放促进了血管生成和组织愈合。目前,黏性骨已逐渐应用于... 详细信息

黏性骨由自体血小板浓缩物与颗粒骨移植材料交联而成,具有良好的可塑性和稳定性,可以适应多种骨缺损区形态并维持成骨空间;同时,源于自体血小板浓缩物的白细胞和多种生长因子的释放促进了血管生成和组织愈合。目前,黏性骨已逐渐应用于口腔种植和牙周领域并取得了积极效果。本文阐述了黏性骨的组成、制备方式和作用机制,并对其在牙槽骨增量、即刻种植、牙槽嵴保存、上颌窦底提升以及牙周手术中的应用进行综述,旨在为进一步的机制研究和临床应用提供参考。

关键词：黏性骨血小板浓缩物颗粒骨材料骨增量牙龈退缩

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新疆伊宁市哈、汉民族儿童尿碘的比较分析

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