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脑缺血后N-乙基马来酰亚胺敏感因子ATP酶失活致神经元自噬流障碍的病理机制

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生物化学与生物物理进展 2024年第5期51卷 1034-1042页

作者：雷倩邓仪昊何红云昆明理工大学医学院人体解剖学教研室昆明650500 昆明理工大学附属安宁市第一人民医院昆明650399

缺血性脑卒中是由脑血管梗塞引起的急性脑血管病,具有较高的发病率、致残率和致死率。研究发现,过度自噬或自噬不足均可导致细胞损伤。自噬包括自噬体的形成和成熟、自噬体与溶酶体融合、自噬底物在自噬溶酶体内的降解和清除,这些过程... 详细信息

缺血性脑卒中是由脑血管梗塞引起的急性脑血管病,具有较高的发病率、致残率和致死率。研究发现,过度自噬或自噬不足均可导致细胞损伤。自噬包括自噬体的形成和成熟、自噬体与溶酶体融合、自噬底物在自噬溶酶体内的降解和清除,这些过程呈连续状态则称为自噬流。研究发现,脑缺血可导致自噬体与溶酶体间发生融合障碍,从而引发自噬流损伤。细胞内膜融合由3种核心组分介导,即N-乙基马来酰亚胺敏感因子(N-ethylmaleimide sensitive factor,NSF)ATP酶、可溶性NSF黏附蛋白(soluble NSF attachment protein,SNAP)及可溶性NSF黏附蛋白受体(soluble NSF attachment protein receptors,SNAREs)。当SNAREs介导自噬体与溶酶体融合后以非活性的复合体形式存留于自噬溶酶体膜,须被NSF再激活为单体后方可发挥新一轮的膜融合介导作用,而NSF是唯一可再激活SNAREs的ATP酶。新近研究表明,脑缺血可显著抑制NSF ATP酶活性,导致其对SNAREs再激活减少,这可能是自噬体与溶酶体间发生融合障碍并导致神经元自噬流损伤的病理机制。本文就NSF ATP酶失活导致SNAREs互作失调、自噬体与溶酶体融合障碍,以及蛋白水解酶向溶酶体的转运不足引发神经元自噬流障碍的病理机制进行阐述,并针对NSF ATP酶失活改善神经元自噬流的方法进行探讨,为提高脑卒中治疗提供参考并指明深入研究方向。

关键词：缺血性脑卒中 N-乙基马来酰亚胺敏感因子ATP酶自噬神经元自噬流障碍

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基于类淋巴系统帕金森病的MRI研究进展

放射学实践 2024年第8期39卷 1104-1110页

作者：撒璐王波成长鑫陈琳玉昆明理工大学医学院云南昆明650000 昆明理工大学附属医院/云南省第一人民医院磁共振科云南昆明650032

目前认为帕金森病(PD)的发病机制与脑内异常蛋白的沉积相关,但至今具体病因尚不明确。2012年人类在小鼠试验中首次证实了中枢神经系统中存在类似淋巴管的结构,将其命名为类淋巴系统,它是中枢神经系统清除细胞代谢废物的重要机制。帕金... 详细信息

目前认为帕金森病(PD)的发病机制与脑内异常蛋白的沉积相关,但至今具体病因尚不明确。2012年人类在小鼠试验中首次证实了中枢神经系统中存在类似淋巴管的结构,将其命名为类淋巴系统,它是中枢神经系统清除细胞代谢废物的重要机制。帕金森病的发生发展与类淋巴系统密切相关,借助影像学技术实现类淋巴系统的可视化将能极大地协助临床早期诊断和治疗帕金森病。本文总结了类淋巴系统的结构、功能及影响因素,以及基于类淋巴系统机制对帕金森病在磁共振影像学方面所做的研究进展及最新成果进行综述。

关键词：类淋巴系统帕金森病磁共振成像磁共振增强扩散张量成像

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CMR在高血压心脏病中的应用进展

磁共振成像 2024年第2期15卷 208-212页

作者：成长鑫王波张艳陈琳玉撒璐张应从李琛蓉昆明理工大学医学院昆明650000 昆明理工大学附属医院/云南省第一人民医院磁共振科昆明650032

高血压作为各种心血管疾病的最重要诱因,会引起心脏结构变化、冠脉微循环障碍等一系列适应性改变,因此,对高血压患者心脏结构和功能的评价显得格外重要。临床上常用于评价心脏结构和功能的工具为超声心动图,但心脏磁共振(cardiac magnet... 详细信息

高血压作为各种心血管疾病的最重要诱因,会引起心脏结构变化、冠脉微循环障碍等一系列适应性改变,因此,对高血压患者心脏结构和功能的评价显得格外重要。临床上常用于评价心脏结构和功能的工具为超声心动图,但心脏磁共振(cardiac magnetic resonance,CMR)较其具有更好的软组织分辨率及多功能、多参数成像的优点,可通过电影序列、T2WI、灌注成像序列、早期强化序列以及延迟强化序列(late gadolinium enhancement,LGE)、增强前后T1 mapping对高血压心脏病(hypertensiveheartdisease,HHD)进行全方位评估。本文通过总结这些技术对高血压引起的左室肥厚(leftventricular hypertrophy,LVH)、心肌纤维化、收缩舒张功能降低、冠脉微循环障碍等方面进行的定量、定性分析,对指导临床决策、改善患者预后有重要意义,并有望为将来的研究提供参考方向。

关键词：磁共振成像心脏磁共振高血压心脏病左心室肥厚心肌纤维化心肌应变 T1 mapping

依赖于端粒延长替代机制的胶质瘤临床前模型及应用现状

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生物化学与生物物理进展 2024年第2期51卷 269-275页

作者：仝津恺闫思翔张艳多侯凯龙张科张昊楠常顺贾舒婷昆明理工大学医学院衰老与肿瘤分子遗传学实验室昆明650500 云南省第一人民医院神经外科昆明650032

胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,主要起源于神经胶质细胞。由于胶质瘤具有高度侵袭性的特点,其死亡率在各种癌症中名列前茅。因此,新的治疗方法和新的药物开发对于胶质瘤的治疗意义十分重大。在大约30%的胶质瘤中,端粒的维持并... 详细信息

胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,主要起源于神经胶质细胞。由于胶质瘤具有高度侵袭性的特点,其死亡率在各种癌症中名列前茅。因此,新的治疗方法和新的药物开发对于胶质瘤的治疗意义十分重大。在大约30%的胶质瘤中,端粒的维持并不是通过端粒酶的激活延长的,而是通过端粒延长替代机制(ALT)来维持和延长端粒。然而,由于目前对于ALT胶质瘤细胞系以及临床前的ALT胶质瘤模型的研究还比较匮乏,从而制约了ALT胶质瘤的机制研究。因此,本篇综述在此探讨了目前发现的ALT胶质瘤细胞系及ALT胶质瘤动物模型,以及这些模型在临床前研究中发挥的作用和最新的进展。

关键词：胶质瘤端粒延长替代机制临床前模型

狂犬病毒L蛋白加帽酶功能域的表达、纯化及多克隆抗体的制备与鉴定

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中国病原生物学杂志 2024年第9期19卷 993-998页

作者：张桃苹陈露徐瑞贤贾亭石文刚何淑桢胡腾王永博宋玉竹韩芹芹夏雪山张金阳昆明理工大学生命科学与技术学院云南省分子医学研究中心云南昆明650500 昆明理工大学附属云南省第一人民医院临床检验科

目的克隆狂犬病毒(RABV)L蛋白的加帽酶功能域基因,构建原核表达载体,制备了多克隆抗体,为病毒诊断和抗病毒药物研发提供了有效工具。方法利用基因工程技术,扩增L蛋白加帽酶功能域的基因序列,与双酶切的pET-32a载体连接,获得pET-32a-RAB... 详细信息

目的克隆狂犬病毒(RABV)L蛋白的加帽酶功能域基因,构建原核表达载体,制备了多克隆抗体,为病毒诊断和抗病毒药物研发提供了有效工具。方法利用基因工程技术,扩增L蛋白加帽酶功能域的基因序列,与双酶切的pET-32a载体连接,获得pET-32a-RABV-L重组表达质粒。经过测序确认无碱基突变,将含pET-32a-RABV-L重组表达质粒的菌液扩大培养后,IPTG诱导表达重组蛋白。通过Ni-NTA亲和层析填料进行纯化,改变不同咪唑洗脱浓度,摸索出适合的洗脱条件。将纯化的蛋白与弗氏佐剂混合免疫小鼠,获得的小鼠多克隆抗体进行间接ELISA检测、Western blot检测、IFA检测。结果成功构建pET-32a-RABV-L原核表达质粒。RABV-L重组蛋白在大肠埃希菌中成功表达,大小约40 ku,且与His-tag的单克隆抗体发生特异性反应。免疫小鼠64 d后,采取的小鼠血清制备多克隆抗体,其工作效价达到25600,在Western blot检测和IFA检测中显示能特异性识别天然病毒L蛋白。结论成功表达、纯化RABV-L蛋白加帽酶功能域的重组蛋白,并成功获得特异性识别天然表位的多克隆抗体。

关键词：狂犬病毒(RABV) L蛋白重组表达多克隆抗体

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4例原发性骨膜增生厚皮症的临床分析

临床皮肤科杂志 2024年第6期53卷 352-353页

作者：陆炳团陈相山吕天富朱滢尹晓明云南省第一人民医院、昆明理工大学附属医院全科医学科云南昆明650200

骨膜增生厚皮症(pachydermoperiostosis,PDP),也称为厚皮性骨膜病、厚皮性骨膜增生症、皮肤骨膜增殖症、肢端骨膜肥厚症及原发性肥大性骨关节病,是一种罕见的常染色体显性遗传性疾病,临床主要表现为皮肤肥厚、骨膜增生、杵状指(趾)及回... 详细信息

骨膜增生厚皮症(pachydermoperiostosis,PDP),也称为厚皮性骨膜病、厚皮性骨膜增生症、皮肤骨膜增殖症、肢端骨膜肥厚症及原发性肥大性骨关节病,是一种罕见的常染色体显性遗传性疾病,临床主要表现为皮肤肥厚、骨膜增生、杵状指(趾)及回状头皮[1-2]。本研究回顾性分析近10年来我科收治的4例PDP患者的临床资料,为临床诊断和治疗提供参考。1病例与方法1.1病例资料2012年9月—2022年9月在我科诊断为骨膜增生厚皮症的患者共4例,所有患者均行胸部X线片或胸部CT检查排除肺部疾病。其中男3例,女1例,发病年龄12~25岁,平均19.75岁,病程4~12年,平均7.5年。4例中1例父母为近亲结婚,其余3例无家族史。

关键词：骨膜增生厚皮症原发性临床分析

单孔和小三孔腹腔镜袖状胃切除术治疗肥胖症的临床疗效

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中华消化外科杂志 2024年第8期23卷 1057-1064页

作者：周福庆唐欣刘阳陈文辉吴边王存川董志勇暨南大学附属第一医院胃肠外科、减重中心广州510630 云南省第一人民医院普外二科、昆明理工大学附属医院普外二科昆明650032

目的探讨单孔和小三孔腹腔镜袖状胃切除术(LSG)治疗肥胖症的临床疗效.方法采用倾向评分匹配及回顾性队列研究方法.收集中国肥胖代谢外科数据库2016年7月至2023年12月暨南大学附属第一医院收治的364例肥胖症患者的临床资料;男79例,女285... 详细信息

目的探讨单孔和小三孔腹腔镜袖状胃切除术(LSG)治疗肥胖症的临床疗效.方法采用倾向评分匹配及回顾性队列研究方法.收集中国肥胖代谢外科数据库2016年7月至2023年12月暨南大学附属第一医院收治的364例肥胖症患者的临床资料;男79例,女285例;年龄为(31±9)岁.364例患者中,67例行单孔LSG,设为单孔组,297例行小三孔LSG,设为小三孔组.倾向评分匹配选用1:1最近邻匹配法,卡钳值设定为0.1.正态分布的计量资料以(x)±s表示,组间比较采用t检验.偏态分布的计量资料以M(Q1,Q3)表示,组间比较采用秩和检验.计数资料以绝对数表示,组间比较采用x2检验或Fisher确切概率法.结果(1)倾向评分匹配情况及匹配后两组患者一般资料比较.364例患者中,126例配对成功,其中单孔组和小三孔组各63例.倾向评分匹配后,消除性别、体质量、体质量指数(BMI)、腰围、腰臀比因素混杂偏倚,具有可比性.(2)术中和术后情况.两组患者均顺利完成LSG,倾向评分匹配后单孔组63例患者手术时间为101(90,120)min,术中出血量为10(10,10)mL,术后止痛药使用次数为1.0(1.0,2.5)次,术后止吐药使用次数为3.0(1.0,5.0)次,术后住院时间为4(3,5)d,总住院时间为7(5,8)d,手术费用为4.1(3.5,4.3)万元,总住院费用为(6.4±0.8)万元;小三孔组63例患者手术时间为100(90,120)min,术中出血量为10(10,15)mL,术后止痛药使用次数为2.0(1.0,4.0)次,术后止吐药使用次数为4.0(3.0,5.0)次,术后住院时间为3(3,4)d,总住院时间为5(5,6)d,手术费用为3.2(2.8,4.2)万元,总住院费用为(5.8±0.8)万元;两组患者术后止吐药使用次数、术后住院时间、总住院时间、总住院费用比较,差异均有统计学意义(Z=-2.39、-3.93、-3.03,t=4.04,P0.05).(3)随访情况.364例患者中,195例完成术后1个月随访,其中单孔组和小三孔组分别为25例和170例,无患者发生胃漏、感染、切口疝等并发症.两组患者手术切口均恢复良好.倾向评分匹配后,单孔组24例患者BMI变化(ΔBMI)、总体质量减轻百分比(%TWL)、多余体质量减少百分比(%EWL)分别为(3.7±1.4)kg/m^(2)、11.0%±3.0%、52.6%±30.0%;小三孔组40例患者上述指标分别为(4.1±1.3)kg/m^(2)、11.1%±2.8%、41.8%±19.1%.术后12个月,单孔组和小三孔组完成随访患者例数分别为21例和131例,倾向评分匹配后,单孔组20例患者ΔBMI、%TWL、%EWL分别为(8.7±4.1)kg/m^(2)、26.2%±9.8%、130.0%±45.1%;小三孔组36例患者上述指标分别为(9.8±4.0)kg/m^(2)、27.2%±8.7%、107.1%±40.7%.结论单孔和小三孔LSG用于治疗肥胖症均可取得满意的短期效果.

关键词：肥胖症腹腔镜袖状胃切除术单孔腹腔镜小三孔腹腔镜倾向评分匹配

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手术器械预处理时机与清洗质量的关联

中华医院感染学杂志 2024年第8期34卷 1268-1271页

作者：李彦琼陈耐寒胡星辉撒亚莲杨红兰云南省第一人民医院昆明理工大学附属医院消毒供应中心云南昆明650032 云南省第一人民医院昆明理工大学附属医院临床医学研究中心云南昆明650032 中国人民解放军联勤保障部队第九二六医院消毒供应中心云南开远661600

目的对比手术器械手术中、手术后和清洗前三个时机的预处理效果和对器械清洗质量的影响。方法分别选取云南省第一人民医院2023年5月-8月手术时长不同的器械共180套,按照预处理时机分为三组,对器械进行预处理,同样操作进行后续清洗流程,... 详细信息

目的对比手术器械手术中、手术后和清洗前三个时机的预处理效果和对器械清洗质量的影响。方法分别选取云南省第一人民医院2023年5月-8月手术时长不同的器械共180套,按照预处理时机分为三组,对器械进行预处理,同样操作进行后续清洗流程,通过ATP生物荧光检测法、蛋白残留测定法评价不同预处理时机的器械清洗质量,通过蓝点试验法检测器械锈蚀变化情况。结果ATP生物荧光检测、蛋白残留量检测器械手术中、手术后预处理的清洗合格率均高于清洗前(P<0.001);蓝点试验检测器械手术中、手术后预处理的锈蚀合格率均高于清洗前(P<0.001);手术时间越长,器械的锈蚀率就越高,手术中预处理的器械锈蚀合格率高于手术后和清洗前(P<0.001)。结论手术器械在手术中、手术后立即进行预处理,能够提升清洗质量,减少器械锈蚀,尤其是使用于手术时长大于2h的器械,应在手术中就及时进行预处理。

关键词：预处理时机手术器械清洗质量蓝点试验关联

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昆明地区婴幼儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因突变分析

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中华检验医学杂志 2024年第3期47卷 293-300页

作者：陈国祺朱宝生贺静赵苑村镡颖林军岳周笑颜陈红章印红昆明理工大学附属医院昆明650500 昆明理工大学附属医院云南省第一人民医院医学遗传科国家卫生健康委西部优生与出生缺陷防控重点实验室云南省出生缺陷与遗传病研究重点实验室云南省出生缺陷与罕见病临床研究中心昆明650032

目的分析昆明地区婴幼儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的基因突变特点。方法选取2018年1月1日至2020年12月31日在昆明市出生的15533例(男7994例,女7539例)婴幼儿,年龄5(4,9)d,采用荧光定量法、多色熔解曲线分析法(MMCA)和Sanger测序... 详细信息

目的分析昆明地区婴幼儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的基因突变特点。方法选取2018年1月1日至2020年12月31日在昆明市出生的15533例(男7994例,女7539例)婴幼儿,年龄5(4,9)d,采用荧光定量法、多色熔解曲线分析法(MMCA)和Sanger测序对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性和基因突变类型进行检测。采用微滴式数字PCR技术(ddPCR)对一例新发变异家系进行定量分析,确定家系成员体细胞突变嵌合比例,同时对新发变异进行蛋白结构模型分析和致病性预测。采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析,不同性别间G6PD酶活性和基因突变阳性检出率采用χ^(2)检验,G6PD基因突变组间酶活性的比较采用单因素方差分析。结果15533例婴幼儿中G6PD酶活性检出阳性143例(男129例,女14例),检出率为0.92%(143/15533),男女检出率差异具有统计学意义(χ^(2)=96.76,P一步行Sanger测序,检出突变6份,均为男性。83例基因突变者中半合子突变78例,纯合突变1例,杂合突变4例。共检出12种突变类型,以G6PD c.487G>A、c.1024C>T、c.1388G>A和c.1376G>T 4种突变类型最为常见,占全部突变类型的74.70%(62/83)。c.1376G>T的平均酶活性最低,与另外3种突变的平均酶活性相比,差异均有统计学意义(P均一例G6PD c.242G>C新发变异男性患儿,预测为致病性变异。ddPCR证明患儿母亲为c.242G>C变异嵌合体,嵌合比例为6.66%。结论昆明地区G6PD缺乏症基因突变以c.487G>A为主,检出一例G6PD c.242G>C新发变异。ddPCR技术可辅助用于突变嵌合体比例检测。

关键词：葡糖磷酸脱氢酶缺乏葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 G6PD活性荧光定量法多色熔解曲线分析微滴式数字PCR 基因突变