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微酸性电解水-超声波并行联合处理对鲜切生菜表面大肠杆菌杀菌效果的影响

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食品科学 2024年第11期45卷 210-216页

作者：高晴刘培红冉苒范江平和劲松云南农业大学食品科学技术学院云南昆明650201

为探明微酸性电解水(slightly acidic electrolyzed water,SAEW)与超声波(ultrasonic,US)并行联合处理对鲜切生菜表面大肠杆菌(Escherichia coli)的杀菌效应,本研究在不同料液比(1∶5、1∶10、1∶15(g/mL))和不同温度(25、35、45℃)条件下采用SAEW-US并行联合处理鲜切生菜,并用平板计数法测定生菜表面***菌落数,对菌落数的变化情况进行协同效应分析及动力学分析。采用流式细胞术和双层培养计数法对处理后的***进行亚致死损伤检测。结果表明,SAEW-US并行联合处理的杀灭***效力高于SAEW单一作用时的杀灭***效力,随着处理时间的延长、溶剂用量的增加和温度的提高,杀灭***效果显著增强。SAEW-US并行联合处理对于杀灭***具有“1+1>2”的协同效应,且杀菌过程遵循一级动力学模型。SAEW-US并行联合处理比单独SAEW处理杀灭***效果强,并且能降低***亚致死损伤数量。综上可知,SAEW-US并行联合处理鲜切生菜表面***存在协同效应,相关结果可为鲜食农产品的杀菌提供理论依据。

关键词：微酸性电解水超声波并行联合处理大肠杆菌杀菌动力学协同效应

不同性别东乡绿壳蛋鸡血液全基因组甲基化差异分析

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中国饲料 2024年第15期 49-56页

作者：易兰兰徐维维李智鹏许宏杨明华黄英潘洪彬李卫真赵素梅云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 云南财经大学经济学院云南昆明650221 云南农业大学动物医学院云南昆明650201

通过对不同性别东乡绿壳蛋鸡的全基因组甲基化的差异分析,检测差异甲基化区域(DMR),分析KEGG通路,为东乡绿壳蛋鸡表观遗传学研究提供参考。试验选取6只120日龄的东乡绿壳蛋鸡,分为公鸡组(LE_COCK)和母鸡组(LE_HEN),每组3只鸡,采集血液提... 详细信息

通过对不同性别东乡绿壳蛋鸡的全基因组甲基化的差异分析,检测差异甲基化区域(DMR),分析KEGG通路,为东乡绿壳蛋鸡表观遗传学研究提供参考。试验选取6只120日龄的东乡绿壳蛋鸡,分为公鸡组(LE_COCK)和母鸡组(LE_HEN),每组3只鸡,采集血液提取DNA进行全基因组亚硫酸氢盐测序(WGBS)分析。结果表明:东乡绿壳蛋鸡全基因组上的mC率母鸡和公鸡分别为2.27%和2.03%,母鸡比公鸡高0.24个百分点(P>0.05);CG岛是发生甲基化的主要序列类型,母鸡比公鸡高4.33个百分点(P>0.05);CHG和CHH甲基化类型低于0.11%;CHG甲基化位点的第2位偏向于A;CHH甲基化位点的第2位偏向于A,第3位偏向于T;在CG类型序列中,内含子和3’UTR区域的甲基化水平均高于15%;5’UTR和外显子区域甲基化水平不足10%;16,25号常染色体和一条性染色体甲基化水平较高。东乡绿壳蛋母鸡甲基化水平更高的DMR相关基因在黏附斑,ECM受体互作通路,肌动蛋白细胞骨架的调控,MAPK信号通路等信号通路富集。东乡绿壳蛋公鸡甲基化水平更高的DMR相关基因主要在类固醇生物合成,Notch信号通路,泛素介导的蛋白降解等信号通路富集。研究表明不同性别东乡绿壳蛋鸡具有不同的DMR甲基化特征,母鸡骨骼肌生长发育通路DMR相关基因甲基化水平高于公鸡,而卵泡形成和雌激素相关通路的DMR相关基因甲基化水平低于公鸡。

关键词：东乡绿壳蛋鸡血液 WGBS技术 DNA甲基化

黄芩素固体分散体对犊牛生长性能、抗氧化能力及肠道菌群的影响

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动物营养学报 2024年第8期36卷 5130-5140页

作者：师鑫潮高建亭张雨路晨月曹皓何欣河北农业大学动物医学院保定071000

本试验旨在研究黄芩素固体分散体对犊牛生长性能、抗氧化能力及肠道菌群的影响。选取(7±5)日龄、体重(45.82±3.37)kg的健康荷斯坦犊牛36头,随机分为3组,每组12个重复,每个重复1头。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,黄芩素组(BAI组)和固体... 详细信息

本试验旨在研究黄芩素固体分散体对犊牛生长性能、抗氧化能力及肠道菌群的影响。选取(7±5)日龄、体重(45.82±3.37)kg的健康荷斯坦犊牛36头,随机分为3组,每组12个重复,每个重复1头。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,黄芩素组(BAI组)和固体分散体组(SD组)在饲喂基础饲粮的基础上分别添加0.4%黄芩素和含有0.4%黄芩素的黄芩素固体分散体。试验期为30 d。结果表明:1)与CON组相比,BAI组、SD组的第30天体重显著提高(P<0.05),SD组的平均日增重(ADG)显著提高(P<0.05)。与BAI组相比,SD组的第30天体重和ADG显著提高(P<0.05)。2)与CON组相比,BAI组和SD组的血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著提高(P<0.05),血清丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05)。与BAI组相比,SD组的血清GSH-Px、SOD活性和T-AOC显著提高(P<0.05),血清MDA含量显著降低(P<0.05)。3)与CON组相比,BAI组和SD组的肠道菌群Chaol指数和Shannon指数显著提高(P<0.05)。与BAI组相比,SD组的肠道菌群Chaol指数和Shannon指数显著提高(P<0.05)。在门水平上,与CON组相比,BAI组和SD组的肠道厚壁菌门相对丰度显著提高(P<0.05),肠道拟杆菌门、变形菌门和梭杆菌门相对丰度显著降低(P<0.05)。与BAI组相比,SD组的肠道厚壁菌门相对丰度显著提高(P<0.05)。在属水平上,与CON组相比,SD组的肠道拟杆菌属相对丰度显著降低(P<0.05),BAI组和SD组的肠道粪杆菌属和罕见小球菌属相对丰度显著提高(P<0.05)。由此可见,在基础饲粮中添加黄芩素固体分散体可提高犊牛生长性能和抗氧化能力,提高肠道中有益菌的相对丰度,减少有害菌的相对丰度,改善肠道菌群结构。

关键词：黄芩素固体分散体犊牛生长性能抗氧化肠道菌群

保山猪精子获能相关基因ABHD2的分子特征及转录调控研究

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中国畜牧杂志 2024年第8期60卷 155-162页

作者：张霞袁清婷赵加鼎龚绍荣富国文霍金龙赵桂英吕梁学院生物与食品工程系云南农业大学动物科学技术学院云南省保山市保山猪研究所云南农业大学动物医学院

本文旨在研究保山猪2-酰基甘油脂肪酶（Abhydrolase Domain-Containing Protein 2,ABHD2）在精子获能过程中的转录调控特征及生物学功能。对12月龄保山猪的睾丸进行转录组测序；利用转录组测序数据构建ABHD2的ceRNA调控网络分析图；分析... 详细信息

本文旨在研究保山猪2-酰基甘油脂肪酶（Abhydrolase Domain-Containing Protein 2,ABHD2）在精子获能过程中的转录调控特征及生物学功能。对12月龄保山猪的睾丸进行转录组测序；利用转录组测序数据构建ABHD2的ceRNA调控网络分析图；分析ABHD2的氨基酸序列在多个物种间的同源性和蛋白质功能特性，并构建多物种蛋白质进化树和互作网络。结果表明，ABHD2基因的CDS长度为1 278 bp，编码425个氨基酸，定位在7号染色体，含有11个外显子。疏水性分析结果发现ABHD2蛋白质N端和C端均亲水，其二级结构中α螺旋的占比最大，所占比例达到44.47%。系统进化分析表明ABHD2的氨基酸序列在多物种中相似度高达98%，较为保守。对ABHD2及其邻近基因分析发现其邻近基因在各物种中以高度保守的形式分布。蛋白互作网络分析结果中发现了多个与ABHD2互作的蛋白，互作强度从高到低依次为SPA17、ZPBP、PRKAR2A、CATSPER1、ABHD16A、ABHD4，这些蛋白主要参与精子获能、顶体反应、阳离子通道络合物、精子鞭毛、细胞识别、羧酸酯水解酶活性、钙调蛋白结合、钙活化阳离子通道活性等相关通路。ceRNA调控网络揭示ABHD2基因受ssc-miR-151-3p调控，ABHD2可与2个lncRNA竞争ssc-miR-151-3p。本研究从多个角度分析了ABHD2的分子特征和转录调控功能，为进一步研究ABHD2基因在保山猪睾丸精子获能中的作用奠定了基础。

关键词：保山猪 ABHD2基因精子获能顶体反应转录调控

全反式视黄酸对小鼠卵泡发育、繁殖性能和生殖激素水平的影响

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动物营养学报 2024年第4期36卷 2623-2632页

作者：赵明李琳王桦彪陈秀文王水莲张虹亮湖南农业大学动物医学院长沙410128

本研究旨在探讨全反式视黄酸(ATRA)对昆明小鼠卵泡发育、繁殖性能和生殖激素水平的影响。试验选取7周龄雌性昆明小鼠24只,适应性饲养5~7 d后,随机分为4组,每组6个重复,每个重复1只,分别为对照组(灭菌蒸馏水)、低剂量组(0.1 mg/kg ATRA)... 详细信息

本研究旨在探讨全反式视黄酸(ATRA)对昆明小鼠卵泡发育、繁殖性能和生殖激素水平的影响。试验选取7周龄雌性昆明小鼠24只,适应性饲养5~7 d后,随机分为4组,每组6个重复,每个重复1只,分别为对照组(灭菌蒸馏水)、低剂量组(0.1 mg/kg ATRA)、中剂量组(1.0 mg/kg ATRA)和高剂量组(10.0 mg/kg ATRA),连续灌胃14 d。各组分别取6只昆明小鼠采样,测定血清雌激素(E_(2))、孕酮(P_(4))和促卵泡生成素(FSH)水平,同时分离卵巢并计算卵巢系数,制作卵巢组织石蜡切片,并进行卵泡计数。选择未发情的昆明小鼠64只,随机分为4组,每组16个重复,每个重复1只。剂量同上。连续灌胃ATRA 1个发情周期(5 d)。将发情小鼠各组取6只采样,测定血清激素水平,其余10只与雄性小鼠合笼,妊娠期间每周称量1次体重,分娩之后统计窝产仔数、出生窝重与出生个体重。结果表明:1)昆明小鼠连续灌胃ATRA 14 d,与对照组相比,ATRA对小鼠的体重与卵巢系数均没有显著影响(P>0.05)。2)与对照组相比,高剂量组初级卵泡的数量显著提高(P0.05)。4)高剂量组昆明小鼠窝产仔数显著高于对照组(P0.05)。5)昆明小鼠连续灌胃ATRA 5 d,高剂量组血清中E_(2)、P_(4)和FSH水平均显著高于对照组(P<0.05),且高剂量组的E_(2)水平显著高于低剂量组和中剂量组(P<0.05),同时中剂量组的P_(4)水平也显著高于对照组和低剂量组(P<0.05);昆明小鼠连续灌胃ATRA 14 d,高剂量组血清中E_(2)、P_(4)和FSH水平均显著高于对照组(P<0.05),同时高剂量组P_(4)水平也显著高于低剂量组(P<0.05)。综上所述,ATRA可促进昆明小鼠E_(2)、P_(4)和FSH生殖激素的分泌,减少小鼠卵泡闭锁,促进卵泡发育,添加10.0 mg/kg ATRA能显著提高昆明小鼠的繁殖性能。

关键词：全反式视黄酸小鼠卵泡发育繁殖性能生殖激素

激活鼠FcγRⅡb对天然免疫因子产生的影响

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中国生物工程杂志 2024年第5期44卷 10-19页

作者：赵睿杰孙杨杨李梦娟张晓晓张梦停张宜娜陈静夏平安河南农业大学动物医学院郑州450046

目的:了解FcγRIIb对小鼠巨噬细胞天然免疫及抗病毒免疫作用的影响。方法:构建鼠源FcγRIIb原核表达质粒pET28a-FcγRIIb,将其转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中进行诱导表达,采用镍柱亲和层析法对重组蛋白进行纯化。以纯化后的重组蛋白... 详细信息

目的:了解FcγRIIb对小鼠巨噬细胞天然免疫及抗病毒免疫作用的影响。方法:构建鼠源FcγRIIb原核表达质粒pET28a-FcγRIIb,将其转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中进行诱导表达,采用镍柱亲和层析法对重组蛋白进行纯化。以纯化后的重组蛋白作为抗原,免疫兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA法检测血清效价,利用Western blotting技术鉴定抗体特异性,高免血清经饱和硫酸铵溶液粗纯和ProteinG Sapharose精纯获得兔抗鼠FcγRIIb多克隆抗体。以该抗体激活小鼠腹腔巨噬细胞表面的FcγRIIb,利用荧光定量PCR技术检测MHV感染上述细胞后相关细胞因子的mRNA转录水平。结果:单独激活FcγRIIb 12~48 h时巨噬细胞中TLR3、IRF3、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TNF-α和IL-1β的mRNA转录水平上调,免疫抑制因子TGF-β的mRNA转录水平下调。此外,在MHV感染小鼠腹腔巨噬细胞12~48 h时,与未激活组相比,FcγRIIb激活后可上调细胞中TLR3、IRF3、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TNF-α和IL-1β的mRNA转录水平,下调TGF-β的mRNA转录水平,且其病毒拷贝数及病毒滴度低于未激活组。结论:研究证明FcγRIIb的活化能促进小鼠腹腔巨噬细胞天然免疫因子产生,同时具有一定抗病毒作用,为进一步探究FcγRIIb在MHV感染过程中的作用奠定了基础。

关键词： FcγRⅡb 多克隆抗体小鼠肝炎病毒细胞因子天然免疫

益生菌发酵复方中草药对妊娠后期奶牛血清生化、抗氧化和生殖激素指标的影响

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动物营养学报 2024年第4期36卷 2434-2444页

作者：马晓婉肖红波杨晓肖丽林梁孙圳谢欣欣李少旭张磊刘业君唐烨王水莲湖南农业大学动物医学院长沙410128

本研究旨在探究复方中草药经益生菌发酵后的效果以及益生菌发酵复方中草药对妊娠后期奶牛血清生化、抗氧化和生殖激素指标的影响。采用枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌制备发酵复方中草药。选取处于妊娠后期体况良好的荷斯坦奶牛24头,随机分为... 详细信息

本研究旨在探究复方中草药经益生菌发酵后的效果以及益生菌发酵复方中草药对妊娠后期奶牛血清生化、抗氧化和生殖激素指标的影响。采用枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌制备发酵复方中草药。选取处于妊娠后期体况良好的荷斯坦奶牛24头,随机分为3个组,每组8个重复,每个重复1头牛。各组分别在基础饲粮中添加0(对照组)、1%和2%的发酵复方中草药。预试期15 d,正试期45 d。结果表明:1)与未发酵复方中草药相比,发酵复方中草药的粗蛋白质和粗纤维含量极显著升高(P<0.01)。2)与未发酵复方中草药相比,发酵复方中草药的总多糖、总黄酮和总皂苷含量极显著升高(P<0.01),总多酚含量极显著降低(P<0.01)。3)与对照组相比,饲粮中添加1%发酵复方中草药显著提高奶牛血清高密度脂蛋白胆固醇含量(P<0.05),显著降低血清谷草转氨酶活性(P<0.05)。4)与对照组相比,饲粮中添加1%发酵复方中草药显著提高奶牛血清谷胱甘肽过氧化物酶活性(P<0.05);饲粮中添加1%和2%发酵复方中草药显著或极显著提高奶牛血清总抗氧化能力(P<0.05或P<0.01),显著降低血清丙二醛含量(P<0.05)。5)与对照组相比,饲粮中添加1%和2%发酵复方中草药奶牛显著提高奶牛血清孕酮含量(P<0.05),显著或极显著降低血清雌二醇含量(P<0.05或P<0.01);饲粮中添加2%发酵复方中草药显著提高奶牛血清促黄体生成素含量(P<0.05)。综上所述,复方中草药经益生菌发酵后具有更高的生物活性。饲粮中添加益生菌发酵复方中草药能调控妊娠后期奶牛的生殖激素含量,增强奶牛的抗氧化能力。

关键词：益生菌中草药奶牛血清生化指标抗氧化指标

猪流行性腹泻病毒主要结构蛋白抗原表位研究进展

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中国兽医科学 2024年

作者：李云涛董雅琴刘晓君曲倩亿盖文燕张慧肖啸魏荣云南农业大学动物医学院中国动物卫生与流行病学中心青岛农业大学山东畜牧兽医职业学院甘肃农业大学动物医学院

猪流行性腹泻（PED）是影响养猪业发展的重要疫病之一，其病原为猪流行性腹泻病毒（PEDV）。该病毒基因型众多，毒株变异较快，不同基因型毒株交叉保护效果差，增加了疫病的防控难度。对病毒抗原表位的深入研究有助于治疗性抗体、疫苗... 详细信息

猪流行性腹泻（PED）是影响养猪业发展的重要疫病之一，其病原为猪流行性腹泻病毒（PEDV）。该病毒基因型众多，毒株变异较快，不同基因型毒株交叉保护效果差，增加了疫病的防控难度。对病毒抗原表位的深入研究有助于治疗性抗体、疫苗或诊断试剂的研发。笔者对PEDV主要结构蛋白抗原表位研究现状进行综述，以期为PED药物、疫苗及诊断试剂的研发提供参考。

关键词： PEDV 结构蛋白抗原表位

亚洲象不同组织来源成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究

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中国畜牧兽医 2024年第9期 3752-3761页

作者：李晋达彭自伟 Muhammad Ameen Jamal 角德灵魏红江云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室云南农业大学动物科学技术学院云南农业大学动物医学院

【目的】建立不同年龄、不同组织来源的亚洲象成纤维细胞系,并进行冷冻保存和细胞生物学特性研究,为实现濒危动物遗传资源保存和开发利用提供理论依据。【方法】分别采集6岁龄亚洲象耳缘组织(AE00)、新生亚洲象脐带组织(AE01)及死亡16h... 详细信息

【目的】建立不同年龄、不同组织来源的亚洲象成纤维细胞系,并进行冷冻保存和细胞生物学特性研究,为实现濒危动物遗传资源保存和开发利用提供理论依据。【方法】分别采集6岁龄亚洲象耳缘组织(AE00)、新生亚洲象脐带组织(AE01)及死亡16h后的4岁龄亚洲象耳缘组织(AE02)样品,分别建立成纤维细胞系并进行传代培养和冷冻保存,通过细胞形态学、增殖能力、衰老及凋亡水平分析不同年龄、不同组织来源成纤维细胞的生物学特性,并进行绿色荧光蛋白(GFP)转染筛选和核型检测,分析亚洲象成纤维细胞的遗传稳定性。【结果】成功建立了3头亚洲象成纤维细胞系并进行冷冻保存,复苏后细胞均能保持一定水平的活力,经连续传代培养后,细胞形态均呈梭形;AE02成纤维细胞冻存活力、细胞增殖能力均最佳,细胞凋亡率依次为AE01(16.7%)>AE00(6.4%)>AE02(3.8%),细胞衰老率依次为AE00(35.9%)>AE01(17.2%)>AE02(7.8%);AE02细胞经长达19次传代后,细胞染色体数目稳定,AE00进行GFP转染筛选可获得稳定表达GFP的亚洲象成纤维细胞系。【结论】本研究成功建立了不同年龄、不同组织来源的亚洲象成纤维细胞系,细胞形态均为梭形,不同年龄、不同组织来源的成纤维细胞系增殖能力、细胞衰老及凋亡水平均不同,经连续传代后细胞染色体数目稳定,能实现外源基因的稳定转染和长期筛选,可作为濒危动物遗传资源长期保存和复活个体的重要方法之一。

关键词：亚洲象成纤维细胞生物学特性