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尿源干细胞来源外泌体治疗糖尿病性勃起功能障碍大鼠的实验研究

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中华男科学杂志 2022年第5期28卷 387-394页

作者：杨其运陈婉媚韩大愚冯鑫谢云孙祥宙邓春华中山大学附属第一医院泌尿外科广东广州510080 中山大学附属第一医院麻醉科广东广州510080

目的:探讨尿源干细胞来源的外泌体(USC-Exo)对糖尿病性勃起功能障碍(DED)大鼠海绵窦内皮功能和勃起功能的改善作用,并探讨其作用机制。方法:通过超速离心法从USC的培养基中提取USC-Exo,并进行鉴定。将SD大鼠海绵窦内皮细胞(CCEC)分为4组... 详细信息

目的:探讨尿源干细胞来源的外泌体(USC-Exo)对糖尿病性勃起功能障碍(DED)大鼠海绵窦内皮功能和勃起功能的改善作用,并探讨其作用机制。方法:通过超速离心法从USC的培养基中提取USC-Exo,并进行鉴定。将SD大鼠海绵窦内皮细胞(CCEC)分为4组:(1)正常组;(2)高糖组;(3)Exo组:高糖培养基中加入USC-Exo(10μg/ml);(4)3-MA组:高糖培养基中加入USC-Exo(10μg/ml)和3-MA(2 mmol/L)。将mRFP-GFP-LC3腺病毒转染CCEC后在荧光显微镜下检测细胞内自噬流的改变;通过CCK8实验检测细胞增殖能力的改变,通过Matrigel实验检测CCEC的成管能力。通过腹腔注射链脲佐菌素及阿扑吗啡实验筛选出DED大鼠,将其随机平均分为2组(n=5只/组):DED组和Exo组,另取5只同龄正常雄性大鼠作为正常组,其中正常组和DED组予阴茎海绵窦注射100μl PBS,Exo组予阴茎海绵体注射USC-Exo 100μl(浓度为1μg/μl)。治疗4周后测定大鼠最大海绵体内压(ICPmax)和平均动脉压(MAP),通过免疫荧光和Western印迹检测海绵窦内皮细胞标志物CD31,通过Western印迹检测自噬标志物Beclin1和LC3-I/II的蛋白表达,通过透射电镜检测海绵窦内皮细胞内自噬体的数量。结果:自噬流检测结果表明USC-Exo可以显著增加高糖培养CCEC内自噬体的数量(39.5±6.2 vs 12.5±5.4,P一作用。海绵体测压结果显示Exo组大鼠的ICPmax和ICPmax/MAP水平均较DED组显著升高[(86.6±12.6)mmHg vs(37.9±10.9)mmHg,89.3±14.1 vs 41.7±11.5,P<0.05]。Western印迹结果显示Exo组大鼠的海绵体内CD31、Beclin1和LC3-I/II的蛋白含量显著高于DED组大鼠(P<0.05)。透射电镜结果表明,Exo组大鼠阴茎海绵窦内皮细胞的自噬体数量显著多于DED组(3.7±0.6 vs 1.0±1.0,P<0.05)。结论:USC-Exo可以通过提高大鼠海绵窦内皮细胞的自噬水平,显著改善DED大鼠的海绵窦内皮功能和勃起功能。

关键词：糖尿病性勃起功能障碍尿源干细胞外泌体自噬大鼠

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原发性肾滑膜肉瘤伴下腔静脉癌栓1例报告

中华泌尿外科杂志 2024年第2期45卷 144-145页

作者：张俊隆陈羽梁月有曹明欣中山大学附属第一医院泌尿外科广州510080

本文报道1例原发性肾滑膜肉瘤合并下腔静脉癌栓病例。患者男,32岁,因反复右侧腹痛就诊。术前CT检查考虑右肾癌合并下腔静脉癌栓,行根治性右肾切除及下腔静脉癌栓取出术,术后病理诊断为肾滑膜肉瘤。患者行基因分子病理检查提示应用环磷... 详细信息

本文报道1例原发性肾滑膜肉瘤合并下腔静脉癌栓病例。患者男,32岁,因反复右侧腹痛就诊。术前CT检查考虑右肾癌合并下腔静脉癌栓,行根治性右肾切除及下腔静脉癌栓取出术,术后病理诊断为肾滑膜肉瘤。患者行基因分子病理检查提示应用环磷酰胺类药物预后较好,免疫负相关基因阴性。术后参考基因检测结果行一线异环磷酰胺和表柔比星化疗。术后1年患者出现肺转移,更换派安普利单抗、安罗替尼、吉西他滨、多西他赛综合治疗,患者完全缓解。基因检测在此类恶性肿瘤辅助治疗上可能有一定的参考价值。

关键词：肾肿瘤滑膜肉瘤下腔静脉瘤栓基因检测

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男性生殖衰老特征的多角度认识

中山大学学报（医学科学版） 2022年第6期43卷 871-877页

作者：李湘平邓春华中山大学附属第一医院泌尿外科广东广州510080

随着婚育年龄推迟,大龄夫妇生育需求逐渐增加,生殖衰老成为社会发展面临的重要公共卫生问题。研究表明40~55岁可能为男性生育力的“分水岭”。然而,相比女性生殖衰老,男性生殖衰老特征缺乏鲜明特征,对机体的复杂影响表现为多方面。本篇... 详细信息

随着婚育年龄推迟,大龄夫妇生育需求逐渐增加,生殖衰老成为社会发展面临的重要公共卫生问题。研究表明40~55岁可能为男性生育力的“分水岭”。然而,相比女性生殖衰老,男性生殖衰老特征缺乏鲜明特征,对机体的复杂影响表现为多方面。本篇综述中,我们从男性生殖内分泌、生殖腺,以及生殖附属性腺的衰老性变化角度,阐述对男性生殖衰老特征的认识。

关键词：男性生殖衰老生育力生殖内分泌附属性腺

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钬激光在泌尿系腔道模型中热效应的实验研究

中华泌尿外科杂志 2021年第3期42卷 220-225页

作者：蒋双键莫承强桂程鹏唐一鸣潘金成吴荣佩中山大学附属第一医院泌尿外科广州510080

目的观察钬激光在泌尿系腔道模型中的局部热效应。方法本研究于2019年3—12月进行。建立静态介质模型:在常压、25℃恒温、50%湿度的环境下,将内径为1 cm、装有1 ml工作介质的玻璃试管置入300 ml 37℃恒温水浴烧杯中,将550μm激光光纤置... 详细信息

目的观察钬激光在泌尿系腔道模型中的局部热效应。方法本研究于2019年3—12月进行。建立静态介质模型:在常压、25℃恒温、50%湿度的环境下,将内径为1 cm、装有1 ml工作介质的玻璃试管置入300 ml 37℃恒温水浴烧杯中,将550μm激光光纤置入试管内工作介质中,连续激发激光60 s。利用电子温度测定仪连续记录试管内水温变化。激光工作模式分别设置为粉末化、碎块化、"爆米花"模式,功率设置为10~20 W,工作介质分别为生理盐水、蒸馏水、5%甘露醇溶液,记录不同模式、不同介质光纤周围温度变化。建立流动介质模型:在常压、25℃恒温、50%湿度的环境下,将相同光纤和温度探头置入内径为6 mm冲洗管,以生理盐水持续灌流,灌流量为100~1200 ml/h。记录不同灌流量下激光发射期间局部水温变化。分析不同模式、不同介质、不同灌流量光纤周围实时温度变化情况。结果在工作介质为生理盐水的静态介质模型中,钬激光连续激发(6.0±1.2)s即超过43℃安全温度,激发(27.6±2.1)s达到平台期温度,停止激发后(38.2±2.4)s可降至安全温度;平台期温度粉末化组>"爆米花"组>碎块化组(P<0.01),其中20 W粉末化组最高,为(78.67±0.45)℃,10 W碎块化组最低,为(55.67±0.22)℃。在静态介质模型中,以5%甘露醇溶液作为工作介质的平台期温度[(73.92±0.44)℃]较蒸馏水组[(75.57±0.14)℃]和生理盐水组[(78.67±0.45)℃]低(粉末化模式,20 W)。在流动介质模型中,灌流量达到800 ml/h时,连续激发钬激光即可保持在安全温度(40.96±0.36)℃,停止激发后仅需(7.0±1.0)s降至初始温度。结论钬激光在相同的总功率下,碎块化模式热效应相对较低;相同总功率时,5%甘露醇溶液环境下钬激光激发时的热效应较低;≥800 ml/h的灌流量,可以有效降低钬激光热效应导致的局部高温。

关键词：激光钬热效应工作模式介质灌流量

FOXO1a/3a/4/6在人睾丸中的表达规律及其在睾丸衰老的作用初探

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中华男科学杂志 2022年第2期28卷 114-121页

作者：李砚青张弛吕林艳谢云夏凯叶云林陈海城梁晓燕邓春华刘贵华中山大学附属第六医院生殖医学中心广东广州510000 中山大学附属第三医院泌尿外科广东广州510000 中山大学附属第一医院男科广东广州510000 中山大学附属肿瘤医院泌尿外科广东广州510000

目的:揭示FOXO1a、FOXO3a、FOXO4和FOXO6在人类睾丸中的表达规律,并分析其在睾丸衰老发生、发展中的作用。方法:2018年1月至2020年12月共收集来自睾丸癌旁正常睾丸组织4例(患者年龄分别为28、31、32、46岁)、前列腺癌睾丸去势手术后睾... 详细信息

目的:揭示FOXO1a、FOXO3a、FOXO4和FOXO6在人类睾丸中的表达规律,并分析其在睾丸衰老发生、发展中的作用。方法:2018年1月至2020年12月共收集来自睾丸癌旁正常睾丸组织4例(患者年龄分别为28、31、32、46岁)、前列腺癌睾丸去势手术后睾丸组织2例(患者年龄分别为66、81岁)。采用Western印迹检测人睾丸中FOXO1a、FOXO3a、FOXO4和FOXO6的表达变化规律,免疫荧光明确检测FOXO1a、FOXO3a、FOXO4和FOXO6在睾丸组织中的细胞定位,并通过imageJ软件进行半定量分析,采用SPSS 23.0软件进行统计分析。结果:睾丸中FOXO1a和FOXO3a的表达水平在年老人群中表达下降(P一步探索。

关键词：叉头框O(FOXO)家族睾丸衰老睾丸间质细胞生精细胞

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干细胞移植治疗睾丸衰老的现状与思考

器官移植 2023年第3期14卷 319-326页

作者：莫嘉辉李欣禹陈志宏张敏邓春华中山大学附属第一医院泌尿外科与男科广州510080 中山大学附属第一医院转化医学研究中心广州510080

睾丸衰老的主要特点为睾酮合成能力以及生精功能逐渐下降,不仅会影响男性生育力,也与衰老相关慢性疾病关系密切。因此,延缓睾丸衰老对于改善中老年男性健康和生活质量至关重要。干细胞是具有强大的自我更新能力和多向分化潜能的细胞群体... 详细信息

睾丸衰老的主要特点为睾酮合成能力以及生精功能逐渐下降,不仅会影响男性生育力,也与衰老相关慢性疾病关系密切。因此,延缓睾丸衰老对于改善中老年男性健康和生活质量至关重要。干细胞是具有强大的自我更新能力和多向分化潜能的细胞群体,近年来,其基础与临床应用研究不断深化,推动了细胞疗法的发展。干细胞移植目前已被用于治疗多种疾病,在衰老与再生医学领域也受到广泛关注。干细胞移植在治疗睾丸衰老中也具有巨大的应用前景。本文将回顾干细胞移植治疗睾丸衰老的相关研究历程与进展,并探讨临床转化面临的瓶颈以及疗效优化策略,以期为睾丸衰老的干细胞疗法研发及临床转化提供新思路。

关键词：干细胞移植睾丸衰老睾丸间质干细胞精原干细胞间充质干细胞诱导多能干细胞睾酮

尿液DNA甲基化在上尿路尿路上皮癌无创诊断中的应用价值

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中华泌尿外科杂志 2023年第10期44卷 725-730页

作者：陈旭吴宇财陈泽华黄健李学松林天歆中山大学孙逸仙纪念医院泌尿外科广州510120 北京大学第一医院泌尿外科北京100034

目的探讨尿液DNA甲基化技术用于上尿路尿路上皮癌(UTUC)无创诊断的性能和价值。方法回顾性分析2019年8月至2021年3月中山大学孙逸仙纪念医院和北京大学第一医院收治的107例UTUC患者(UTUC组)和121例上尿路良性疾病患者(对照组)的病例资料... 详细信息

目的探讨尿液DNA甲基化技术用于上尿路尿路上皮癌(UTUC)无创诊断的性能和价值。方法回顾性分析2019年8月至2021年3月中山大学孙逸仙纪念医院和北京大学第一医院收治的107例UTUC患者(UTUC组)和121例上尿路良性疾病患者(对照组)的病例资料。UTUC组男64例(59.8%),女43例(40.2%);年龄(67±10)岁;输尿管癌50例(46.7%),肾盂癌42例(39.3%),肾盂癌合并输尿管癌15例(14.0%);非肌层浸润性UTUC45例(42.0%),肌层浸润性UTUC51例(47.7%),分期不明确11例(10.3%);肿瘤分级低级别14例(13.1%),高级别93例(86.9%)。对照组男81例(66.9%),女40例(33.1%);年龄(52±14)岁;泌尿系结石104例(86.0%),输尿管狭窄或息肉13例(10.7%),单纯肾积水4例(3.3%)。UTUC组60例(56.1%)和对照组11例(9.1%)行尿脱落细胞学检查。UTUC组72例(67.3%)和对照组9例(7.4%)行尿液原位荧光杂交法(FISH)检查。对两组的尿沉渣样本行基于ONECUT2和VIM基因甲基化的定量PCR检测技术,≥1个基因阳性判定为阳性,2个均为阴性判定为阴性。以病理或临床诊断为标准,评估尿脱落细胞学、FISH、尿液DNA甲基化检查的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值。结果尿液DNA甲基化检查的总体敏感性为84.1%,特异性为90.9%,准确性为87.7%,阳性预测值为89.1%,阴性预测值为86.6%;敏感性显著高于尿脱落细胞学(43.3%,P0.05)。亚组分析结果显示,尿液DNA甲基化检查对不同部位肿瘤的诊断敏感性分别为输尿管癌74.0%(37/50例),肾盂癌90.5%(38/42例),肾盂癌合并输尿管癌100.0%(15/15例);对不同良性疾病的诊断特异性分别为泌尿系结石92.3%(96/104例),输尿管狭窄和息肉84.6%(11/13例),单纯肾积水75.0%(3/4例)。尿液DNA甲基化检查对低级别UTUC的诊断敏感性为64.3%,明显高于尿脱落细胞学的20.0%和FISH的36.4%(P中山大学孙逸仙纪念医院应用的敏感性和特异性分别为83.0%和92.0%,北京大学第一医院应用的敏感性和特异性分别为85.2%和85.7%。结论基于尿液ONECUT2和VIM基因甲基化技术用于UTUC诊断,具有较高的敏感性和准确性,优于尿脱落细胞学和FISH。

关键词：上尿路尿路上皮癌房尿液无创诊断 DNA甲基化术前定性诊断

“三联”保膀胱模式治疗肌层浸润性膀胱癌的疗效观察

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中华医学杂志 2018年第20期98卷 1614-1616页

作者：王建峰周晓峰方丹波吴志明丁振山陈星刘乃波中日友好医院泌尿外科北京100029 浙江大学附属第一医院泌尿外科中山大学附属肿瘤医院泌尿外科

目的观察根治性经尿道膀胱肿瘤切除术联合术后放化疗的“三联”模式在肌层浸润性膀胱癌（MIBC）保留膀胱治疗上的效果。方法回顾性分析2010年5月至2015年5月中日友好医院等3个中心收治的73例肌层浸润性膀胱癌患者资料。28例患者（TMT组... 详细信息

目的观察根治性经尿道膀胱肿瘤切除术联合术后放化疗的“三联”模式在肌层浸润性膀胱癌（MIBC）保留膀胱治疗上的效果。方法回顾性分析2010年5月至2015年5月中日友好医院等3个中心收治的73例肌层浸润性膀胱癌患者资料。28例患者（TMT组）接受了根治性TURB＋术后联合放化疗。其中男21例，女7例，年龄（68．9±8．9）岁。T2期16例，T3期12例。同期45例患者（RC组）接受了根治性膀胱切除＋尿流改道术，其中男32例，女13例，年龄（66．3±9．6）岁。T2期25例，T3期18例，T4a期2例。分析两种治疗模式对于MIBC预后及生活质量的影响。结果TMT组的总体生存率为64．3％，肿瘤特异性生存率为78．6％。RC的总体生存率为66．7％，肿瘤特异性生存率为82．2％。总体生存时间分别为（47．9±3．2）个月和（48．5±2．6）个月。两组数据比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。术后生活质量评分方面，TMT组优于RC组。结论在严格控制适应证，进行严密的术后随访，并及时进行挽救性膀胱切除术的前提下，“三联”保膀胱疗法可以作为根治性膀胱切除术之外的MIBC患者的一种选择。

关键词：肌层浸润性膀胱癌保留膀胱放化疗

45,X特纳综合征并发性腺母细胞瘤1例并文献复习

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中华儿科杂志 2022年第11期60卷 1202-1206页

作者：郑如江陈秋莉马华梅刘钧澄陈华东梁鉴波陈红珊张军李燕虹郭松王冰杜敏联中山大学附属第一医院儿科广州510080 中山大学附属第一医院小儿外科广州510080 中山大学附属第一医院医学检验科广州510080

目的总结性腺Y染色体嵌合的45,X特纳综合征(TS)并发分泌人绒毛膜促性腺激素(HCG)的双侧性腺母细胞瘤(Gb)诊治经验。方法回顾性分析2021年4月就诊于中山大学附属第一医院儿科的1例45,X TS并发分泌HCG双侧Gb患儿的临床资料和诊治过程,并... 详细信息

目的总结性腺Y染色体嵌合的45,X特纳综合征(TS)并发分泌人绒毛膜促性腺激素(HCG)的双侧性腺母细胞瘤(Gb)诊治经验。方法回顾性分析2021年4月就诊于中山大学附属第一医院儿科的1例45,X TS并发分泌HCG双侧Gb患儿的临床资料和诊治过程,并分别以“Turner syndrome”“Gonadoblastoma”“Y chromosome”“Human chorionic gonadotropin”“Precocious”及“特纳综合征”“性腺母细胞瘤”“Y染色体”“绒毛膜促性腺激素”“早熟”为检索词,分别检索建库至2022年3月Pubmed、中国知网、万方等数据库的相关文献,总结分析该病特点。结果患儿女,5岁3月龄,因“乳房增大27个月,发现血β-HCG升高8个月”就诊。患儿3岁时因乳房发育2个月外院就诊发现“心脏杂音”诊断“肺静脉畸形+房间隔缺损”即手术。乳房发育呈进行性,伴生长加速、骨龄显著进展。3岁7月龄当地医院查下丘脑-垂体-性腺轴功能部分发动,不能解释,予全外显子测序后发现染色体核型45,X。4岁6月龄发现血β-HCG升高(24.9 U/L),分泌HCG的病灶未明。5岁3月龄转诊中山大学附属第一医院儿科时,乳房及阴毛发育、阴蒂肥大,外周血睾酮1.96μg/L,β-HCG 32.3 U/L,SRY基因阴性。全身影像学检查未发现病灶。腹腔镜探查术示性腺左侧呈肿瘤外观及右侧条索状,双侧性腺及静脉采血(β-HCG、雌二醇和睾酮水平均左侧>右侧>外周静脉血)、性腺切除术(病理为双侧Gb)、双侧性腺组织SRY基因阳性。术后血雌二醇、睾酮和β-HCG降至正常。共检索到国外4例分泌HCG的Gb的病例报道,4例表型均为女性,有男性化或闭经表现,术前外周血β-HCG浓度分别为74.4、5.0、40456.0和42.4 U/L。结论含Y染色体成分的TS发生Gb的风险高,以乳房发育为主要临床表现的Gb少见,分泌HCG的Gb则很罕见。非典型临床表现的TS要注意嵌合型;有男性化特征的TS提示Y染色体成分的存在,并发生分泌雄激素的肿瘤。

关键词：特纳综合征性腺母细胞瘤 Y染色体绒毛膜促性腺激素早熟