检索结果-南通市图书馆

人tau蛋白N端结构域特异性单克隆抗体筛选及在血液检测中的应用

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生物工程学报 2024年第5期40卷 1571-1583页

作者：闫子迪张译文姜家龙刘振武王荷张莹何金生洪涛北京交通大学生命科学与生物工程研究院北京100044 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052

微管相关蛋白tau抗体在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)及其他tau蛋白病的基础和临床研究中发挥重要作用。采用重组人tau441作为免疫原,通过细胞融合及有限稀释法筛选并获得分泌抗人tau蛋白N端结构域(tau N-terminal domain,NTD-... 详细信息

微管相关蛋白tau抗体在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)及其他tau蛋白病的基础和临床研究中发挥重要作用。采用重组人tau441作为免疫原,通过细胞融合及有限稀释法筛选并获得分泌抗人tau蛋白N端结构域(tau N-terminal domain,NTD-tau)单克隆抗体杂交瘤细胞株,通过制备小鼠腹水及亲和层析获得纯化的单克隆抗体;分别采用间接ELISA检测其灵敏度,蛋白质印迹检测其特异性;建立并优化人tau蛋白双抗体夹心ELISA检测方法。结果显示,杂交瘤细胞克隆阳性率为83.6%,建立分泌ZD8F7单克隆抗体的稳定细胞株,细胞上清中抗体效价为1:16000;腹水中抗体效价高于1:256 000;纯化后单克隆抗体效价高于1:128 000;表位分析显示,ZD8F7单克隆抗体识别tau21-37位氨基酸,位于N端结构域;蛋白质印迹分析显示,ZD8F7单克隆抗体识别50-70 kDa重组人tau蛋白及转基因AD模型小鼠(APP/PS1/tau)脑组织中50 kDa的人tau蛋白;以ZD8F7单克隆抗体作为捕获抗体建立的人tau蛋白定量检测方法,线性范围在7.8-500.0 pg/mL,可以识别AD转基因小鼠脑组织以及血浆中的人tau蛋白,而不识别小鼠tau蛋白。综上,本研究制备的人NTD-tau特异性单抗和双抗体夹心ELISA检测方法灵敏度高,为神经退行性疾病中tau蛋白检测提供了有力工具。

关键词：阿尔茨海默病生物标志物微管相关蛋白tau 双抗体夹心ELISA 单克隆抗体

2017-2022年淄博市诺如病毒流行特征及病原学基因分析

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中国病原生物学杂志 2024年第5期19卷 562-565页

作者：张玲曹海霞郑加玉孙晓明陈梦迪傅忠燕靳淼山东省淄博市疾病预防控制中心山东淄博255026 山东省疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室

目的分析2017-2022年淄博市诺如病毒感染性疫情流行特征及优势基因型,为诺如病毒感染防控提供科学依据。方法用描述性流行病学方法,对2017-2022年淄博市诺如病毒感染性疫情流行病学资料和实验室检测资料进行统计分析。结果2017-2022年... 详细信息

目的分析2017-2022年淄博市诺如病毒感染性疫情流行特征及优势基因型,为诺如病毒感染防控提供科学依据。方法用描述性流行病学方法,对2017-2022年淄博市诺如病毒感染性疫情流行病学资料和实验室检测资料进行统计分析。结果2017-2022年淄博市共报告35起诺如病毒感染性疫情,其中托幼机构23起,中学7起,餐饮机构3起,小学和养老机构各1起,不同场所罹患率有统计学意义;报告发病917人,罹患率为8.30%,疫情总体呈上升趋势,年均增长率为10.76%;城市29起,农村6起,罹患率城市高于农村,差异有统计学意义;85.71%的诺如病毒感染性疫情与人传人传播有关,每年10月至次年3月是诺如病毒感染性疫情高峰期(68.57%,24/35);35起疫情中,以诺如病毒GⅡ组为主(阳性率80.00%,176/220),GI组检出率为13.641%(30/220),GⅨ组检出率低(6.36%,14/220);基因分型GⅡ.2[P16]占比最高(占35.71%,10/28),其次GⅡ.4[P16](占14.29%,4/28)、GⅡ.3[P12](占10.71%,3/28)和少数其他重组基因型。结论淄博市诺如病毒感染性疫情呈现上升趋势,托幼机构是发生诺如病毒感染性疫情的主要场所,诺如病毒感染性疫情主要为GⅡ组为主,GⅡ.2[P16]基因型为优势基因型,合并多种重组型的流行特征,加强诺如病毒分子流行病学监测,有利于掌握诺如病毒流行病学特征,为科学防控提供理论依据。

关键词：诺如病毒感染性疫情流行特征基因型

咖啡酸苯乙酯对朊病毒体外复制、扩增和纤维形成的抑制作用研究

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中华预防医学杂志 2024年第7期58卷 1011-1019页

作者：晁志悦贾筱溪曾嘉锋武月章肖康高利萍石琦董小平陈操传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 中国疾病预防控制中心-中国科学院武汉病毒研究所新发传染病与生物安全联合研究中心、中国科学院生物安全大科学研究中心武汉430071

目的探究咖啡酸苯乙酯(CAPE)对朊病毒(PrPSc)复制、扩增及纤维形成的影响及可能的机制。方法通过CCK8实验检测CAPE处理3、7 d后朊病毒感染细胞模型SMB-S15的细胞活力,得出CAPE对SMB-S15的最大安全浓度;选取安全范围内的浓度处理细胞,利... 详细信息

目的探究咖啡酸苯乙酯(CAPE)对朊病毒(PrPSc)复制、扩增及纤维形成的影响及可能的机制。方法通过CCK8实验检测CAPE处理3、7 d后朊病毒感染细胞模型SMB-S15的细胞活力,得出CAPE对SMB-S15的最大安全浓度;选取安全范围内的浓度处理细胞,利用蛋白质免疫印迹方法分析CAPE处理前后细胞内PrPSc的含量变化。利用蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)技术和蛋白质免疫印迹方法检测CAPE处理前后扩增产物中PrP^(Sc)的含量变化。利用实时震动蛋白诱导扩增(RT-QuIC)技术检测CAPE处理前后朊蛋白纤维形成的变化情况。通过分子相互作用检测CAPE与小鼠重组全长朊蛋白的结合能力。结果 CCK8细胞活力实验结果显示:1 μmol/L CAPE处理细胞3、7 d时细胞存活率与对照组相比,差异无统计学意义(均P>0.05),当CAPE浓度超过1 μmol/L时,CAPE处理细胞3、7 d细胞存活率降低,与对照组之间差异均存在统计学意义(均P病毒感染细胞SMB-S15在反应中形成朊蛋白纤维(ThT峰值)均降低,且CAPE对不同种子朊蛋白纤维的抑制程度差异有统计学意义(均P<0.05),其中对ME7的抑制作用更明显。分子相互作用结果显示:CAPE与鼠源重组朊蛋白存在明显的分子结合,平衡解离常数KD为(2.92±0.41)×10^(-6) mol/L。结论 CAPE对PrPSc体外复制、扩增和纤维形成均具有抑制作用,可能与CAPE和朊蛋白特异性结合有关。

关键词：咖啡酸苯乙酯朊病毒朊蛋白

昆明市一起聚集性发热疫情中腺病毒3型Penton base、Hexon和Fiber基因遗传进化分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第3期44卷 241-248页

作者：刘艳艳古文鹏段忠文王钰龚娇茶琦雁吴林蔚侯敏昆明市疾病预防控制中心微生物检验科昆明650228 云南省疾病预防控制中心急性传染病防制所昆明650022 昆明市呈贡区疾病预防控制中心检验科昆明650500 玉溪市疾病预防控制中心卫生监测检验科玉溪678400

目的对昆明市一起聚集性发热疫情样本进行腺病毒检测和遗传进化分析。方法采集典型发热患者咽拭子标本,使用微流体芯片技术进行30种常见呼吸道传染病病原体核酸检测。对腺病毒核酸阳性标本使用Nanopore三代高通量测序技术进行Penton bas... 详细信息

目的对昆明市一起聚集性发热疫情样本进行腺病毒检测和遗传进化分析。方法采集典型发热患者咽拭子标本,使用微流体芯片技术进行30种常见呼吸道传染病病原体核酸检测。对腺病毒核酸阳性标本使用Nanopore三代高通量测序技术进行Penton base、Hexon和Fiber三个重要基因全长序列扩增、测定和分型鉴定,构建系统进化树,开展分子变异、遗传进化等分析。结果共采集5份标本,均检出呼吸道腺病毒及流感嗜血杆菌。对腺病毒进行Nanopore三代基因测序最终均获得Penton base、Hexon和Fiber基因全长编码区核苷酸序列,5份标本之间3个基因核苷酸相似性依次为100.0%、99.9%~100.0%和100.0%,氨基酸同源性均为100.0%;与HAdV3原型株(AY599834)核苷酸相似性最高,分别为98.6%、98.7%和98.9%。系统发育分析表明,3个基因系统进化树分析结果基本一致,人腺病毒3型(HAdV3)原型株单独一支,本研究中HAdV3序列均划分在同一进化分支上,与较早年份国外及中国台湾毒株亲缘关系较远,与近年国内外毒株亲缘关系较近,与2019年日本株(LC703523)和中国广州株(MZ540961)高度同源。与原型株比较分析昆明HAdV3氨基酸突变位点,Penton base有5处变异;Hexon有10处变异;Fiber有11处变异。结论本起疫情中的腺病毒在Penton base、Hexon和Fiber基因全长序列中型别分型结果一致,为P3H3F3型,与包括原型株在内的国内外HAdV3毒株显示出非常小的遗传变异。与原型株相比发生了多处氨基酸位点突变,并且多数氨基酸位点变异发生在蛋白质的高变区或功能区,其中Hexon蛋白中M7L为昆明序列独有氨基酸突变位点。

关键词：人腺病毒3型五邻体基座蛋白六邻体蛋白纤维蛋白遗传进化

基于一体化系统非洲猪瘟病毒快速检测技术的建立

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病毒学报 2024年第3期40卷 555-562页

作者：韩卫芳侯美伶马晶郝彦哲李红霞刘京端孟号迪张晓光中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所生物安全研究中心北京100052 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室北京100052 北京润博福得生物科技发展有限公司北京101207

猪感染非洲猪瘟病毒后,发病率和病死率可高达100%,常造成巨大经济损失和社会影响。非洲猪瘟目前没有有效的预防性疫苗,主要防控手段为尽早发现传染源、切断传播途径。目前最常用的非洲猪瘟病毒检测方法是荧光定量PCR,但是该方法耗时长... 详细信息

猪感染非洲猪瘟病毒后,发病率和病死率可高达100%,常造成巨大经济损失和社会影响。非洲猪瘟目前没有有效的预防性疫苗,主要防控手段为尽早发现传染源、切断传播途径。目前最常用的非洲猪瘟病毒检测方法是荧光定量PCR,但是该方法耗时长、实验条件要求高,不利于在基层单位使用。本研究通过对非洲猪瘟病毒基因进行分析,针对其中p72基因设计和合成了多条引物探针,通过实验确定最优引物探针浓度、反应退火温度、延伸时间等条件,再结合一体化核酸检测系统,最终建立了基于即时检测(Point-of-care test, POCT)技术的非洲猪瘟病毒核酸快速检测方法。该方法可以在50min内完成核酸提取、扩增和结果判读的检测全流程,并可以有效检出大于1000拷贝/mL的标本,为非洲猪瘟病毒防控提供了技术手段。

关键词：非洲猪瘟病毒核酸检测即时检测

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免疫芯片检测技术应用研究进展

病毒学报 2024年第4期40卷 869-876页

作者：向钰洁马学军申辛欣中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室.国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室.中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

免疫芯片(Immune chips)是一种特殊的蛋白质芯片,该技术本质上是将抗原-抗体结合反应的特异性与电子芯片高密度集成的原理相结合,形成了一种新型的生物检测技术,具有高灵敏度、操作简便、反应速度快等优势。随着科学技术的进步和创新,... 详细信息

免疫芯片(Immune chips)是一种特殊的蛋白质芯片,该技术本质上是将抗原-抗体结合反应的特异性与电子芯片高密度集成的原理相结合,形成了一种新型的生物检测技术,具有高灵敏度、操作简便、反应速度快等优势。随着科学技术的进步和创新,免疫芯片技术正在不断突破原有的局限,向着更高的灵敏度、更宽的检测范围、更快的检测速度和更低的成本方向发展,成为检测领域强有力的工具。本文综述了几类免疫芯片的基本原理和技术特点,主要分析了其在病毒、细菌、疾病标志物、真菌、寄生虫等检测中的应用。

关键词：免疫芯片微流控液相芯片非核酸物质即时检测

长沙市1例人感染H5N6禽流感病毒遗传进化和基因特征

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中国热带医学 2024年第6期24卷 680-685页

作者：李灵之肖姗徐明忠欧新华姚栋裴瑞青黄政长沙市疾病预防控制中心湖南长沙410004

目的对长沙市1例人感染禽流感H5N6病毒A/Changsha/1/2022(H5N6)的遗传进化与分子特征进行分析,为防控人感染H5N6禽流感提供依据。方法运用第三代测序平台对样本进行全基因组测序,从美国国家生物技术信息中心(National Center for Biot... 详细信息

目的对长沙市1例人感染禽流感H5N6病毒A/Changsha/1/2022(H5N6)的遗传进化与分子特征进行分析,为防控人感染H5N6禽流感提供依据。方法运用第三代测序平台对样本进行全基因组测序,从美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)和全球共享禽流感数据倡议组织(Global Initiative on Sharing All Influenza Data, GISAID)数据库下载参考序列进行比对,利用Mega7软件构建遗传进化树并分析关键氨基酸变异位点。结果对序列进行分析发现,本研究毒株属于H5亚型Clade2.***.4.4b分支。PB1与湖南省A/duck/Hunan/S40199/2021(H5N6)同源性为99.69%;PB2与A/Whooper swan/Sanmenxia/Y36/2020(H5N8)同源性为98.58%;其余序列与2021年广州发现的毒株A/Guangdong/1/2021(H5N6)高度同源。以上结果表明该病例是由重组的H5N6亚型禽流感病毒感染导致。对毒株序列的氨基酸位点分析发现,裂解位点氨基酸组成为RERRRKR↓GLF,符合高致病性禽流感特征。HA序列中Q226L和G228S位点未发生突变,提示病毒保留结合禽类受体的特征,然而S127P、S137A、T160A、T192R、A267T的突变增加了病毒对人类的亲和性。NA蛋白茎部59-70位点缺失,提示该毒株能增强病毒在哺乳动物体内的毒力。内部基因PB1发生S622G突变,PB2发生K389R和V598T突变,PA发生N409S突变,M1发生N30D和T215A突变,NS1发生P42S突变,这些突变会增强禽流感病毒感染小鼠的毒力。结论本研究的长沙市人感染H5N6病毒为高致病性禽流感病毒,倾向于结合禽类受体,但关键氨基酸位点存在多处变异进而易于感染人类,应持续加强对禽流感H5N6病毒的监测与研究。

关键词： H5N6 禽流感病毒基因特征遗传进化

2022-2023年常熟市急性呼吸道感染病例常见病毒病原谱系分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2024年第3期38卷 252-257页

作者：关亚柯周正元梅国勇高晋懿杜海军韩俊徐翠玲中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室北京102206 常熟市疾病预防控制中心常熟215500

目的了解江苏省常熟市急性呼吸道感染(acute respiratory infection,ARI)病例的常见病毒病原谱构成。方法收集2022年1月至2023年10月常熟市5家哨点医院门诊和住院患者的鼻咽拭子样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应的方法检测流感病毒(... 详细信息

目的了解江苏省常熟市急性呼吸道感染(acute respiratory infection,ARI)病例的常见病毒病原谱构成。方法收集2022年1月至2023年10月常熟市5家哨点医院门诊和住院患者的鼻咽拭子样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应的方法检测流感病毒(influenza virus,Flu)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)、腺病毒(adenovirus,AdV)、人鼻病毒(human rhinovirus,HRV)、人副流感病毒(human parainfluenza virus,HPIV)、肠道病毒(enterovirus,EV)、人冠状病毒(human coronavirus,HCoV)、人偏肺病毒(human metapneumovirus,HMPV)和人博卡病毒(human bocavirus,HBoV)的核酸。结果1936份ARI病例中,350份(18.1%)病毒核酸检测为阳性。Flu检出率最高,占7.1%,其次为HBoV(3.7%)、AdV(1.9%)和RSV(1.6%)等。病毒检出率在不同年龄组和季节间具有明显差异,2023年3月总病毒检出率最高(47.6%),以Flu为主;Flu呈现春季和冬季单峰流行;HBoV和HCoV流行趋势一致,且前者检出率(5.43%)高于后者(2.45%),均在夏季出现高峰;RSV在秋季出现流行高峰(4.5%)。0~5岁儿童组检出率最高,可达33.3%。结论常熟市2022—2023年ARI病例感染的病毒以Flu、HBoV、AdV、RSV等病毒为主。

关键词：急性呼吸道感染病毒病原谱流行病学

噬菌体作为载体传递CRISPR系统的应用研究进展

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中国抗生素杂志 2024年

作者：陈曦文远汐阚飙樊粉霞中国疾病预防控制中心传染病预防控制所山东大学公共卫生学院

噬菌体作为能够裂解细菌的病毒，是地球上数量最多、种类最丰富的生物实体。噬菌体研究曾推进生物学和分子生物学许多领域的发展。基于目前因抗生素过度使用和滥用引发细菌耐药，导致威胁人群健康的全球卫生问题，作为潜在疗法的噬菌体... 详细信息

噬菌体作为能够裂解细菌的病毒，是地球上数量最多、种类最丰富的生物实体。噬菌体研究曾推进生物学和分子生物学许多领域的发展。基于目前因抗生素过度使用和滥用引发细菌耐药，导致威胁人群健康的全球卫生问题，作为潜在疗法的噬菌体再次引起重视。噬菌体治疗有其优越性，也存在一定的局限性。利用基因工程改造和合成生物学技术，把CRISPR系统与噬菌体基因组整合到一起，让噬菌体作为传递载体，最终形成噬菌体精准靶向特定病原菌和CRISPR精准靶向特定基因的双重靶向清除策略。本文介绍噬菌体与CRISPR序列的重组整合的相关改造策略及应用研究报道，同时也讨论了噬菌体作为传递载体的优缺点，对于噬菌体-CRISPR的应用进行了展望。

关键词：温和性噬菌体烈性噬菌体裂解改造 CRISPR-Cas 靶向治疗