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杀鱼爱德华氏菌新型抗酸系统GadBCD的抗酸作用与致病作用

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上海海洋大学学报 2024年第1期33卷 230-241页

作者：高博宫春光舒艾梅张杉杉李静林胡永华河北农业大学海洋学院河北秦皇岛066000 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101 海南省海洋生物资源功能性成分研究与利用重点实验室海南海口571101

本研究鉴定了鱼类重要致病菌杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)抗强酸系统GadBCD及其功能。通过序列分析和共转录实验表明:GadBCD系统由1个谷氨酸脱羧酶、1个谷氨酰胺酶和3个转运体组成,它们组成1个操纵子。qRT-PCR发现强酸和高... 详细信息

本研究鉴定了鱼类重要致病菌杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)抗强酸系统GadBCD及其功能。通过序列分析和共转录实验表明:GadBCD系统由1个谷氨酸脱羧酶、1个谷氨酰胺酶和3个转运体组成,它们组成1个操纵子。qRT-PCR发现强酸和高温刺激细菌时gadBCD表达基本不变,但过氧化氢和宿主血清刺激时gadBCD表达显著上调。利用同源重组构建了GadBCD系统缺失突变株ΔgadP,通过比较野生株和ΔgadP的生长曲线以及酸性压力下存活率等实验,发现GadBCD系统不仅是杀鱼爱德华氏菌抗中强酸的重要参与者,也是抗强酸所必需的;通过比较野生株和ΔgadP在生物膜形成、运动性、抗宿主血清杀伤、感染细胞等方面的差异,发现GadBCD参与了细菌的毒力。综上所述,GadBCD系统是杀鱼爱德华氏菌重要的抗强酸系统,并参与了细菌的致病作用。

关键词：杀鱼爱德华氏菌谷氨酸脱羧酶系统抗酸性致病作用

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海绵附生真菌Penicillium sp.G5A-11的次级代谢产物研究

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热带海洋学报 2024年

作者：梁学诚畅文军戴好富周丽华曾艳波湖南人文科技学院研究生教育教学部中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省海洋生物资源功能性成分研究与利用重点实验室

本文对南海海绵共附生真菌Penicillium sp.G5A-11的化学成分及其细胞毒活性进行了研究。综合运用薄层色谱、硅胶柱色谱、凝胶柱色谱以及半制备型高效液相色谱等多种分离技术对海绵共附生真菌Penicillium sp.G5A-11的大米发酵产物进行分... 详细信息

本文对南海海绵共附生真菌Penicillium sp.G5A-11的化学成分及其细胞毒活性进行了研究。综合运用薄层色谱、硅胶柱色谱、凝胶柱色谱以及半制备型高效液相色谱等多种分离技术对海绵共附生真菌Penicillium sp.G5A-11的大米发酵产物进行分离纯化,依据波谱数据和理化常数分析并结合相关的文献数据比对,确定所分离化合物的结构,并用MTT (methylthiazolyldiphenyltetrazolium bromide)法对所鉴定的化合物进行了细胞毒活性测定。从海绵共附生真菌Penicillium sp.G5A-11中共分离鉴定了17个化合物,其结构分别鉴定为:N-乙酰酪胺(1)、methyl 2-(6-hydroxybenzothiazol-4-yl) acetate (2)、R-甲羟内酯(3)、烟酸(4)、altechromone A (5)、2,5-dimethy-7-hydroxychromone (6)、methyl 7-hydroxy-2-methylchromone-5-carboxylate (7)、stagonoculiepine [(2S,5R)-1-formyl-1,2,3,4-tetrahydro-5H-2,5-epiminobenzo[b]azepin-5-yl acetates](8)、(4R,5S)-5-(hydroxymethyl)-5-methyl-4-(3-oxobutyl)dihydrofuran-2(3H)-one (9)、9α-hydroxy-1,2,3,4,5,10,19-heptanorergosta-7,22-diene-6,9-lact (10)、3β,5α,9α-trihydroxy-(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-6-one(11)、过氧化麦角甾醇(12)、(22E,24R)-24-methylcholesta-2,22-diene-3β,5α,6β-triol(13)、麦角甾醇(14)、豆甾醇/β-谷甾醇(15)、3β,5α-dihydroxy-(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-6-one (16)和3β,5α-dihydroxy-6β-methoxyergosta-7,22-diene (17)。其中,化合物7和9为新天然产物。肿瘤细胞毒活性测试结果表明,化合物10对肿瘤细胞K562(人慢性髓原白血病细胞)和SGC-7901(人胃癌细胞)显示出细胞毒活性,其IC50值分别为(12.07±0.12)μmol·L-1和(13.17 0.02)μmol·L-1。

关键词：海洋真菌 Penicillium sp. 化学成分细胞毒活性

甘蔗ShHIPP35基因的克隆、表达分析及蛋白亚细胞定位

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分子植物育种 2024年

作者：冯小艳王健华尹慧祥余乃通中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省热带微生物资源重点实验室

重金属相关异戊二烯化植物蛋白(heavy-metal-associated isoprenylated plant protein， HIPP)参与植物-病原体的互作。为了探究甘蔗ShHIPP35基因的功能，本研究从甘蔗中克隆ShHIPP35基因，并对其进行生物信息学、组织表达、甘蔗线条花... 详细信息

重金属相关异戊二烯化植物蛋白(heavy-metal-associated isoprenylated plant protein， HIPP)参与植物-病原体的互作。为了探究甘蔗ShHIPP35基因的功能，本研究从甘蔗中克隆ShHIPP35基因，并对其进行生物信息学、组织表达、甘蔗线条花叶病毒(sugarcane streak mosaic virus， SCSMV)胁迫表达、蛋白亚细胞定位分析。结果显示，ShHIPP35基因开放阅读框全长1 008 bp，预测编码蛋白分子量为36.57 kD，含有1个重金属相关结构域和1个CaaX基序。系统发育分析显示ShHIPP35蛋白与狗尾草、谷子、柳枝稷和黍的HIPP35蛋白亲缘关系较近。在烟草叶片中的亚细胞定位表明ShHIPP35蛋白定位在细胞核和细胞膜。定量PCR结果显示ShHIPP35基因在甘蔗根、茎和叶中表达，表达量依次是根＞茎＞叶，且成熟茎和叶中ShHIPP35的表达水平分别高于未成熟茎和叶。SCSMV胁迫处理的第1， 3， 5和15天，甘蔗叶片中ShHIPP35基因表达水平显著升高，表明ShHIPP35基因响应SCSMV侵染。研究结果为解析ShHIPP35在甘蔗-SCSMV互作过程中的功能理论依据。

关键词：甘蔗 SCSMV HIPP 基因克隆表达分析蛋白定位

拟除虫菊酯类杀虫剂对养殖甲壳动物毒性影响的研究进展

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水产科学 2024年第5期43卷 843-852页

作者：栾可儿冼健安鲁耀鹏张泽龙张秀霞李军涛郑佩华王茜海南大学海洋学院海南海口570228 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省海洋生物资源功能性成分研究与利用重点实验室/海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室海南海口571101

菊酯是杀灭无脊椎动物害虫的有效成分,具有高效性、广谱性和低毒性等特点,可分为天然菊酯(除虫菊素)和合成菊酯(拟除虫菊酯)[1]。拟除虫菊酯类杀虫剂包括:氯菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、氯氟氰菊酯、胺菊酯、氰戊菊酯、醚菊酯、甲氰菊酯... 详细信息

菊酯是杀灭无脊椎动物害虫的有效成分,具有高效性、广谱性和低毒性等特点,可分为天然菊酯(除虫菊素)和合成菊酯(拟除虫菊酯)[1]。拟除虫菊酯类杀虫剂包括:氯菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、氯氟氰菊酯、胺菊酯、氰戊菊酯、醚菊酯、甲氰菊酯等[2]。目前,拟除虫菊酯类杀虫剂的应用范围逐渐扩大。作为开发的新型农药,其被广泛应用于我国农业种植、水产养殖以及相关日常生活用品生产中[3]。随着河流运输和大气沉降等迁移过程.

关键词：拟除虫菊酯养殖甲壳动物毒性杀虫剂

环境因子和污染物对凡纳滨对虾毒性效应的研究进展

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水产科学 2024年第3期43卷 483-490页

作者：孟泳岐鲁耀鹏郑佩华张秀霞李军涛张泽龙顾志峰冼健安海南大学海洋学院海南海口570228 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省海洋生物资源功能性成分研究与利用重点实验室海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室海南海口571101

凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)是全球水产养殖产量最高的虾类之一,具有极高的经济价值.2021年,我国凡纳滨对虾产量已达127万t,超过全国对虾海水养殖总产量的80%[1].但近年来,随着凡纳滨对虾养殖规模扩大,其养殖业也出现诸多问题,比... 详细信息

凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)是全球水产养殖产量最高的虾类之一,具有极高的经济价值.2021年,我国凡纳滨对虾产量已达127万t,超过全国对虾海水养殖总产量的80%[1].但近年来,随着凡纳滨对虾养殖规模扩大,其养殖业也出现诸多问题,比如养殖环境恶化、种质退化、虾病泛滥和病菌耐药性增强等.

关键词：凡纳滨对虾环境因子毒性污染物生长性能免疫

CRISPR/Cas9基因编辑技术在鱼类养殖应用的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2024年第1期 23-28页

作者：陈俊祥郑佩华鲁耀鹏李军涛张秀霞张泽龙冼健安河北农业大学海洋学院河北秦皇岛066000 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省海洋生物资源功能性成分研究与利用重点实验室/海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室海口571101

随着生活水平的提高,人们对水产品的需求量也不断增加。鱼类养殖是水产养殖的重要组成部分,提高养殖鱼类的产量已成为当前亟待解决的问题。育种为提高养殖鱼类产量做出了重大贡献,为满足全球对优质蛋白日益增长的需求,亟需应用新技术加... 详细信息

随着生活水平的提高,人们对水产品的需求量也不断增加。鱼类养殖是水产养殖的重要组成部分,提高养殖鱼类的产量已成为当前亟待解决的问题。育种为提高养殖鱼类产量做出了重大贡献,为满足全球对优质蛋白日益增长的需求,亟需应用新技术加速育种进程,以进一步提升鱼类产量。基因编辑技术(包括ZFNs、TALLENS和CRISPR/Cas9)是目前加快遗传改良进程的重要工具,其中CRISPR/Cas9技术在编辑基因方面具有速度快、成本低、精度高等优点,因此在养殖鱼类基因编辑中的应用不断扩大。目前研究人员已对20多个鱼类养殖品种进行优良性状改良。文章总结了CRISPR/Cas9技术及其在鱼类养殖业中的应用及现状,并展望了未来的发展方向,以期为CRISPR/Cas9技术在鱼类养殖中的应用提供一定参考。

关键词：鱼类养殖 CRISPR/Cas9 基因编辑育种性状

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环境因素对克氏原螯虾生长与繁育的影响

中国饲料 2024年

作者：苏禹王力玄孟泳岐马源潮鲁耀鹏张泽龙郑佩华李军涛冼健安刘存歧王冬梅河北大学生命科学学院中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省海洋生物资源功能性成分研究与利用重点实验室/海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室

近年来,克氏原螯虾(Procambams clarkii)的养殖技术在国内外迅速发展,且发展前景十分广阔。克氏原螯虾的生长繁殖与养殖环境有着重要的关系,不适宜的环境及变化会影响克氏原螯虾的生长、繁殖及胚胎发育等活动。本文对养殖中涉及的环境因... 详细信息

近年来,克氏原螯虾(Procambams clarkii)的养殖技术在国内外迅速发展,且发展前景十分广阔。克氏原螯虾的生长繁殖与养殖环境有着重要的关系,不适宜的环境及变化会影响克氏原螯虾的生长、繁殖及胚胎发育等活动。本文对养殖中涉及的环境因素(温度、光周期、放养密度、盐度和干旱等)及其变化对克氏原螯虾的影响进行了研究,并对目前的研究进展进行简要分析,了解环境因素对克氏原螯虾生长繁殖等影响的趋势,以期为克氏原螯虾规模化养殖提供参考。

关键词：克氏原螯虾环境繁育

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两份海南地方木豆资源的核型分析

草业科学 2024年第7期41卷 1645-1649页

作者：程志号孙长君郭素霞曾学蔚严琳玲吴琼中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南省香蕉遗传改良重点实验室海南海口571101 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海南海口571101

木豆(Cajanus cajan)是我国热带亚热带地区重要的豆类作物,是一种集粮、饲料、药物为一体的多用途植物,同时,作为先锋植物,在水土保持、土壤改良等方面有重要功能。海南木豆种植时间长、资源多样性高,但细胞遗传学方面的报道目前较少。... 详细信息

木豆(Cajanus cajan)是我国热带亚热带地区重要的豆类作物,是一种集粮、饲料、药物为一体的多用途植物,同时,作为先锋植物,在水土保持、土壤改良等方面有重要功能。海南木豆种植时间长、资源多样性高,但细胞遗传学方面的报道目前较少。本研究以海南两个重要木豆产区‘保亭’和‘白沙’木豆地方资源为材料,通过核型分析发现,‘保亭’木豆核型公式为2n=2x=22=16m+6sm,其中10号染色体有一对随体,相对长度组成为2n=1L+5M2+3M1+2s,为1A型;‘白沙’木豆核型公式为2n=2x=22=20m+2sm,未发现随体,相对长度组成为2n=1L+4M2+5M1+1s,为2A型。本研究结果为木豆资源鉴定提供了新技术,也为种质创新和新品种选育提供参考。

关键词：木豆资源核型分析随体对称性

MeLAZY1c基因调控木薯株型的初步研究

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作物学报 2024年第6期50卷 1514-1524页

作者：望嘉翔郁雪婷李梦桃麦伟涛陈新王文泉海南大学热带农林学院/三亚南繁研究院海南三亚572000 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室海南海口571101 中国热带农业科学院三亚研究院海南三亚572000

IGT基因家族参与作物株型的调控,LAZY属于IGT的亚家族。以拟南芥6个LAZY成员氨基酸序列为“种子”在木薯基因组中进行比对,在木薯中共鉴定到8个LAZY基因,其中MeLAZY1c与调控分枝角度的AtLAZY1高度同源。基于此,本研究以MeLAZY1c为研究对... 详细信息

IGT基因家族参与作物株型的调控,LAZY属于IGT的亚家族。以拟南芥6个LAZY成员氨基酸序列为“种子”在木薯基因组中进行比对,在木薯中共鉴定到8个LAZY基因,其中MeLAZY1c与调控分枝角度的AtLAZY1高度同源。基于此,本研究以MeLAZY1c为研究对象,利用qRT-PCR分析发现MeLAZY1c在茎中转录水平最高,GUS染色显示pMeLAZY1c在维管束中染色较深。在MeLAZY1c启动子中发现8个光响应/调节元件,随后发现黑暗能显著抑制其表达水平。同时对MeLAZY1c进行基因编辑,获得纯合编辑株系19个,炼苗移栽后观测表型,发现melazy1c突变体植株与SC8野生型相比,其主茎呈现匍匐生长,并且弯曲部位茎外皮细胞形态扭曲变形且大小不一致,近地侧1 mm处细胞数目约是远地侧细胞数量的1.5倍,表明MeLAZY1c在木薯直立/匍匐生长建成方面发挥着重要作用。

关键词：木薯株型调控 LAZY 光响应匍匐基因编辑

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