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先天性巨结肠组织蛋白质组成分的双向凝胶电泳分析

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中国医科大学学报 2009年第10期38卷 761-763页

作者：高红吕良英白伟良王大佳黄英张志波王维林中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院小儿外科沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院耳鼻喉科沈阳110004

目的分析先天性巨结肠(HD)狭窄段及正常段肠管组织双向凝胶电泳的蛋白质表达图谱,寻找差异表达的蛋白质。方法采用固相pH梯度双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)分离20例HD患者配对狭窄段及正常段肠管组织的总蛋白,银染显色,Image Master 2D ... 详细信息

目的分析先天性巨结肠(HD)狭窄段及正常段肠管组织双向凝胶电泳的蛋白质表达图谱,寻找差异表达的蛋白质。方法采用固相pH梯度双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)分离20例HD患者配对狭窄段及正常段肠管组织的总蛋白,银染显色,Image Master 2D Platinum 6.0软件分析差异表达的蛋白质点。结果获得了重复性较好的2-DE银染图谱。图像分析显示,狭窄段和正常段肠管组织凝胶的平均匹配率分别为78.1%和86.7%。差异分析共获得103个差异表达的蛋白质点。结论采用2-DE分离HD肠管组织的总蛋白可获得重复性较好的结果。获得的差异蛋白质点为寻找HD早期诊断的分子标记物提供了基础资料。

关键词：先天性巨结肠蛋白质组学双向凝胶电泳差异表达

胶质细胞源性神经营养因子对运动神经元发育及运动神经元性疾病的作用

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中国修复重建外科杂志 2005年第6期19卷 490-493页

作者：蔡炜嵩赵红宇袁正伟中国医科大学第二临床学院(盛京医院)小儿外科卫生部小儿先天畸形重点实验室沈阳110004 中国医科大学第二临床学院(盛京医院)神经外科沈阳110004

目的追溯近年国内外有关胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotropicfactor,GDNF)与运动神经元发育及疾病研究的进展。方法广泛查阅近期有关GDNF与运动神经元关系的文献,综述GDNF的分子结构、作用方式及治疗时给药方式... 详细信息

目的追溯近年国内外有关胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotropicfactor,GDNF)与运动神经元发育及疾病研究的进展。方法广泛查阅近期有关GDNF与运动神经元关系的文献,综述GDNF的分子结构、作用方式及治疗时给药方式。结果GDNF对运动神经元发育及运动神经元疾病有广泛的作用,对脊髓运动神经元的发育起一定调控作用,可以挽救出现损伤的运动神经元。结论GDNF在运动神经元疾病的治疗上,具有潜在的临床价值和不可估量的前途。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子运动神经元性疾病 GDNF 分子结构

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肾母细胞瘤BWR1A突变的筛查

中华小儿外科杂志 2003年第1期24卷 7-8页

作者：朱贝贝王维林王常林任舒月高红中国医科大学第二附属医院小儿外科沈阳110004 卫生部小儿先天畸形重点实验室

目的　探讨新发现的印迹基因BWR1A突变与胚胎性肿瘤发生的关系。方法　采用聚合酶链式反应单链构象多态性分析 (PCR SSCP)技术及DNA测序 ,对 55例肾母细胞瘤进行印迹基因BWR1A突变检测 ,以瘤旁组织为对照。结果　发现 6例肾母细胞瘤... 详细信息

目的　探讨新发现的印迹基因BWR1A突变与胚胎性肿瘤发生的关系。方法　采用聚合酶链式反应单链构象多态性分析 (PCR SSCP)技术及DNA测序 ,对 55例肾母细胞瘤进行印迹基因BWR1A突变检测 ,以瘤旁组织为对照。结果　发现 6例肾母细胞瘤标本第 9外显子有异常泳动带。DNA测序其中 1例 1 0 93位G缺失 ,产生终止密码TGA。

关键词：肾母细胞瘤 BWR1A突变筛查基因组印迹

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大鼠肛门直肠畸形的胚胎发育研究

中华小儿外科杂志 2003年第2期24卷 154-157页

作者：白玉作王维林王伟袁正伟中国医科大学第二医院小儿外科沈阳110004 卫生部小儿先天畸形重点实验室

目的　观察大鼠正常的和畸形的肛门直肠发育过程 ,探讨肛门直肠畸形的胚胎发生机制。方法　用乙烯硫脲 (ethylenethiourea ,ETU)致畸 2 1只孕鼠共生产泄殖腔畸形和无肛畸形胎鼠(2 0 4只 )。胎龄 12 .5～ 2 0d的正常 (n =2 2 3)及泄殖腔... 详细信息

目的　观察大鼠正常的和畸形的肛门直肠发育过程 ,探讨肛门直肠畸形的胚胎发生机制。方法　用乙烯硫脲 (ethylenethiourea ,ETU)致畸 2 1只孕鼠共生产泄殖腔畸形和无肛畸形胎鼠(2 0 4只 )。胎龄 12 .5～ 2 0d的正常 (n =2 2 3)及泄殖腔发育畸形的胎鼠正中矢状连续切片HE染色。连续动态对比观察泄殖腔及肛门直肠的发育过程。结果　泄殖腔发育过程中 ,胎龄 15d前的正常鼠胚 ,尿直肠隔将泄殖腔分为腹侧的尿生殖窦和背侧的直肠两部分 ,二者共同相通于泄殖腔管。尿直肠隔下降与泄殖腔膜的距离逐渐减小 ,直至胚胎 15d时与泄殖腔膜融合 ,直肠与膀胱分离。 16d时肛膜破裂 ,直肠与尾沟相通。ETU致畸的胎鼠泄殖腔发育中有以下特点 :①尿直肠隔始终未与泄殖腔膜融合 ;②泄殖腔构型异常 ;③泄殖腔膜过短 ;④没有尾沟形成。ETU致畸胎鼠中所有的无肛畸形均为泄殖腔畸形和直肠尿道瘘。结论　鼠胚胎 15d时尿直肠隔与泄殖腔膜融合。胚胎 16d肛膜完全破裂 ,直肠与外界相通。泄殖腔构型的变化以及尿直肠隔下降并与泄殖腔膜融合使直肠与膀胱分离。尿直肠隔与泄殖腔膜融合是直肠和膀胱分离的决定因素。肛门直肠畸形发生与泄殖腔构型异常以及尿直肠隔未与泄殖腔膜融合等因素有关。

关键词：消化系统畸形胚胎学泄殖腔大鼠

维甲酸致大鼠胚胎神经管畸形的组织形态学观察

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中华小儿外科杂志 2004年第5期25卷 434-437页

作者：蔡炜嵩袁正伟郭俊斌李勇王维林中国医科大学第二临床学院(盛京医院)小儿外科卫生部小儿先天畸形重点实验室沈阳110004

目的利用维甲酸制作先天性神经管畸形的动物模型已获得公认,但对于其导致神经组织错构瘤的发生却未见报道。本实验利用维甲酸口服制作大鼠神经管畸形动物模型,观察其出现神经组织畸胎瘤、脊髓裂开、脊柱裂等畸形形态学特点,探讨其发生... 详细信息

目的利用维甲酸制作先天性神经管畸形的动物模型已获得公认,但对于其导致神经组织错构瘤的发生却未见报道。本实验利用维甲酸口服制作大鼠神经管畸形动物模型,观察其出现神经组织畸胎瘤、脊髓裂开、脊柱裂等畸形形态学特点,探讨其发生机制。方法利用成熟未孕的Wistar大鼠,在妊娠10d时经胃管注入维甲酸,诱导产生神经管畸形动物模型,分别在妊娠15d、17d、19d时剖宫取出胎鼠,进行实体观察、畸形统计,同时对神经管畸形进行病理形态学研究。对照组仅给予橄榄油,剖宫时间及观察项目同致畸组。结果维甲酸致畸组共获得胎鼠99只,48.3%(48/99)孕鼠胚胎肉眼观察出现腰骶部显性脊柱裂。在48只显性脊柱裂胎鼠中,分别取不同胎龄(15d、17d、19d)各3只脊髓裂开的畸形胎鼠共9只,做石蜡切片,全部同时见到表现为多个神经管紊乱排列、骶尾部增生肿物,提示神经组织错构瘤的发生。结论维甲酸可以干扰神经发育,导致脊柱裂、脊髓裂开和神经错构瘤的发生。

关键词：维甲酸神经管畸形脊柱裂胎鼠观察错构瘤裂开提示实体

COL1a1 COL3a1在发育性髋脱位患儿关节囊的表达

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中国当代儿科杂志 2008年第4期10卷 493-496页

作者：王恩波赵群李连永史立伟高红中国医科大学附属盛京医院小儿外科辽宁沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室辽宁沈阳110004

目的发育性髋脱位(developmental dislocation of the hip,DDH)的病因目前不明,但其与髋关节松弛密切相关。该研究通过比较DDH患儿与正常儿童关节囊中Ⅰ,Ⅲ型胶原在mRNA及蛋白水平的表达差异,以探索DDH患儿髋关节松弛的原因。方法选取... 详细信息

目的发育性髋脱位(developmental dislocation of the hip,DDH)的病因目前不明,但其与髋关节松弛密切相关。该研究通过比较DDH患儿与正常儿童关节囊中Ⅰ,Ⅲ型胶原在mRNA及蛋白水平的表达差异,以探索DDH患儿髋关节松弛的原因。方法选取性别相同年龄相近的9对发育性髋脱位患者及正常儿童配对比较。采用半定量RT-PCR及Western-Blot法检测COL1a1 COL3a1在mRNA及蛋白水平的表达。图像分析软件进行量化分析,并经统计学处理。结果COL1a1在DDH组mRNA及蛋白水平表达均较正常对照组降低(P0.05)。结论DDH患儿关节囊中Ⅰ型胶原在mRNA及蛋白水平表达较正常同性同龄儿降低,可能是导致DDH患儿髋关节松弛的原因。DDH患儿髋关节松弛可能与Ⅲ型胶原含量无关。

关键词：发育性髋脱位关节松弛关节囊胶原儿童

Wnt1和Wnt8a基因在先天性巨结肠中的表达

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中华实验外科杂志 2012年第10期29卷 2022-2024,I0002,F0003页

作者：高红伍美弭杰张娟贾慧敏王维林中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿外科沈阳110004 辽宁省锦州市妇婴医院小儿外科

目的观察Wnt1和Wnt8A基因在先天性巨结肠症（HD）中的表达，探讨其在HD发生、发展中的作用。方法对60例HD正常肠段（神经节细胞）和狭窄肠段（无神经节细胞）组织肠管中Wnt1和Wnt8a mRNA和蛋白表达进行定量与比较。结果Wnt1和Wnt8a在HD... 详细信息

目的观察Wnt1和Wnt8A基因在先天性巨结肠症（HD）中的表达，探讨其在HD发生、发展中的作用。方法对60例HD正常肠段（神经节细胞）和狭窄肠段（无神经节细胞）组织肠管中Wnt1和Wnt8a mRNA和蛋白表达进行定量与比较。结果Wnt1和Wnt8a在HD狭窄段肠管中mRNA表达水平分别为17．66±1．28和29．61±3．23，正常段肠管中mRNA表达水平分别为31．77±2．21和15．01±1．29，差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot检测结果显示，Wnt1和WntSa在HD狭窄段肠管中蛋白含量为19．51±1．57和33．17±2．09，正常段肠管中蛋白含量分别为37．05±1．23和17．35±0．87，差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组织化学结果显示，Wnt1在正常段肠管中高表达（呈棕黄色），Wnt8a在狭窄段肠管中高表达（呈棕黄色）；Wnt1在狭窄段肠管中低表达（无色或淡黄色），WntSa在正常段肠管低表达（无色或淡黄色）。结论Wnt1和Wnt8amRNA与蛋白在HD的异常表达，提示Wnt1和Wnt8a与HD的发生密切相关，可能在先天性消化道畸形的肠道发育中具有重要作用。

关键词：先天性巨结肠症 Wnt1 Wnt8a 基因表达

DNA拓扑异构酶Ⅱα、Ki-67、PCNA在人脑胶质瘤中的表达及与生存状况的相关性研究

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中国医科大学学报 2007年第6期36卷 728-730页

作者：赵宏宇蔡炜嵩王成林陈铎关俊宏中国医科大学附属盛京医院神经外科辽宁沈阳110004 中国医科大学卫生部先天畸形重点实验室

目的:研究DNA拓扑异构酶Ⅱα(Topo-Ⅱα)、Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA)在人脑胶质瘤中的表达,探讨其与肿瘤恶性程度及生存状况的关系。方法:应用SABC免疫组化技术,检测32例胶质瘤Topo-Ⅱα、Ki-67、PCNA的表达,并对其与肿瘤恶性程度及... 详细信息

目的:研究DNA拓扑异构酶Ⅱα(Topo-Ⅱα)、Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA)在人脑胶质瘤中的表达,探讨其与肿瘤恶性程度及生存状况的关系。方法:应用SABC免疫组化技术,检测32例胶质瘤Topo-Ⅱα、Ki-67、PCNA的表达,并对其与肿瘤恶性程度及预后生存状况的关系比较进行统计学分析。结果:胶质瘤Topo-Ⅱα、Ki-67、PCNA的表达在低度恶性组与高度恶性组之间的差异有统计学意义(P<0.01);Log-rank检验及Kaplan-Meier生存曲线分析显示,Topo-Ⅱα、Ki-67、PCNA的表达强度与胶质瘤的预后生存时间呈显著的负相关性,Topo-Ⅱα、Ki-67、PCNA的表达水平反映了胶质瘤患者的预后情况。结论:Topo-Ⅱα、Ki-67、PCNA在人脑胶质瘤中的表达与其恶性程度相关,与患者的预后生存相关。联合检测三者的表达水平对判断肿瘤的恶性程度有一定的参考意义,同时,这3个因子可作为判断与预测人脑胶质瘤患者预后的重要指标。

关键词：胶质瘤拓扑异构酶Ⅱα Ki-67 增殖细胞核抗原预后

表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱技术在神经管缺陷胎儿母亲血清、尿液和羊水蛋白质标志物筛查中的研究

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中国现代医学杂志 2010年第5期20卷 738-746页

作者：刘振江袁正伟赵群中国医科大学附属盛京医院小儿外科辽宁沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院(卫生部小儿先天畸形重点实验室) 辽宁沈阳110004

目的探讨利用表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术结合分类与回归树分析(classification and regression tree analysis,CART)在筛选神经管缺陷胎儿母亲血清和尿液蛋白质标志物的应用。方法孕母血清样本31例,尿液样... 详细信息

目的探讨利用表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术结合分类与回归树分析(classification and regression tree analysis,CART)在筛选神经管缺陷胎儿母亲血清和尿液蛋白质标志物的应用。方法孕母血清样本31例,尿液样本35例和羊水样本20例用于检测。采用PBSIIC型蛋白质芯片阅读机读取数据。SELDI数据结果采用分类与回归树分析(CART)建立血清和尿液诊断模型,用于区分神经管缺陷组与正常对照组。结果与正常组比较,神经管畸形组血清中有8种蛋白质高表达,4种蛋白质低表达;尿液中有4种蛋白质高表达,1种蛋白质低表达;羊水中有6种蛋白质高表达,1种蛋白质低表达。4种蛋白质峰用于建立决策分类树诊断模型,血清诊断灵敏度88.20%,特异度100%;尿液诊断灵敏度80.00%,特异度93.33%。结论血清和尿液蛋白质谱的高灵敏度和特异度提示表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱结合分类与回归树分析能够筛选神经管缺陷胎儿和正常对照。

关键词：神经管缺陷表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱分类与回归树分析蛋白质标志物