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基于特征图谱-网络药理学-多指标定量的辣木叶调血脂质量标志物(Q-Marker)研究

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中草药 2024年第5期55卷 1686-1698页

作者：宋亚南王云张村杨洪军中国中医科学院中药研究所北京100700 中国中医科学院北京100700

目的基于辣木Moringa oleifera叶的特征图谱并结合网络药理学,筛选辣木叶的质量标志物(quality markers,QMarker),建立其定量分析方法,为辣木叶的质量评价提供科学依据。方法采用HPLC法建立辣木叶的特征图谱,条件如下:Phenomenex Luna C... 详细信息

目的基于辣木Moringa oleifera叶的特征图谱并结合网络药理学,筛选辣木叶的质量标志物(quality markers,QMarker),建立其定量分析方法,为辣木叶的质量评价提供科学依据。方法采用HPLC法建立辣木叶的特征图谱,条件如下:Phenomenex Luna C_(18)(2)100A色谱柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相乙腈(A)-0.5%甲酸水溶液(B)梯度洗脱,检测波长254 nm,体积流量0.8 mL/min,柱温35℃,进样量5µL。应用化学计量学方法筛选不同产地的辣木叶差异标志物,基于网络药理学获取辣木叶特征成分的关键靶点及关键通路,绘制出“特征成分-关键靶点-关键通路”网络,以预测辣木叶的调血脂Q-Marker。再以15批辣木叶药材为研究对象,对质量标志物进行含量测定。以五原则为核心确定出最终的Q-Marker。结果建立了15批辣木叶药材的特征图谱,结合高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法(high performance liquid chromatographyquadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry,HPLC-Q-TOF-MS/MS)确认了8个共有峰,通过对照品指认出其中6个色谱峰,分别为新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、维采宁-2、异槲皮素、紫云英苷;经化学计量学分析,初步确认新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、异槲皮素、维采宁-2为不同产地的差异性标志物。经网络药理学确认新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、异槲皮素、维采宁-2为活性成分,可作用于白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP9)等5个核心靶点,影响3条关键通路[细胞因子-细胞因子受体相互作用、产生免疫球蛋白A(immunoglobulinA,IgA)的肠道免疫网络、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3 kinase-protein kinase B,PI3K-Akt)信号通路]发挥调血脂作用。结合“五原则”初步预测新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、异槲皮素、维采宁-2为辣木叶调血脂的潜在的Q-Marker,质量分数分别为5.81、1.91、2.23、6.59、0.94 mg/g。结论建立的质量评价方法准确可靠,在此基础上结合网络药理学所筛选出的质量标志物可为辣木叶的质量控制提供参考,为阐明其药效物质基础的作用机制奠定基础。

关键词：辣木叶质量标志物高效液相色谱法高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法特征图谱网络药理学新绿原酸 L-色氨酸隐绿原酸维采宁-2 异槲皮素紫云英苷

辣木叶标准汤剂的煎煮工艺优化及质量标准建立

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 151-159页

作者：宋亚南王云杨洪军贾哲张村中国中医科学院中药研究所北京100700 中国中医科学院北京100700

目的:基于响应面法结合主成分分析,优选辣木叶标准汤剂最佳煎煮工艺,建立其多指标质量评价体系,为辣木叶标准汤剂的质量控制提供科学依据。方法:采用响应面法结合主成分分析法,以8个特征峰的相对峰面积及出膏率作为评价指标,优选出最佳... 详细信息

目的:基于响应面法结合主成分分析,优选辣木叶标准汤剂最佳煎煮工艺,建立其多指标质量评价体系,为辣木叶标准汤剂的质量控制提供科学依据。方法:采用响应面法结合主成分分析法,以8个特征峰的相对峰面积及出膏率作为评价指标,优选出最佳煎煮工艺。在此基础上,以15批标准汤剂为研究对象,以高效液相色谱法(HPLC)特征图谱、多指标成分(新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、维采宁-2、异槲皮素、紫云英苷)含量测定、大类成分(总黄酮、总有机酸、总多糖、总α-氨基酸、总芥子碱)含量测定、出膏率、比重、pH等多指标开展其质量标准研究。结果:优化得到的最佳煎煮工艺是取辣木叶100.00 g,浸泡30 min,煎煮2次,头煎12倍量水,煎煮30 min;二煎10倍量水,煎煮20 min。以x±30%限定各数值范围,含生药量0.2g·mL^(-1)的辣木叶标准汤剂,其比重为0.722~1.340、pH为3.86~7.16、出膏率为23.1%~42.9%、醇溶性浸出物为8.26%~15.34%;按标准汤剂干燥品计,新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、维采宁-2、异槲皮素、紫云英苷的质量分数分别为1.99~3.69、1.20~2.22、1.44~2.67、0.53~0.99、2.45~4.55、1.22~2.26 mg·g^(-1),相对于药材的转移率分别为34.37%~63.83%、62.43%~115.94%、64.65%~120.06%、56.98%~105.82%、37.46%~69.57%、41.81%~77.64%;总黄酮、总有机酸、总多糖、总α-氨基酸、总芥子碱的质量分数分别为10.19~18.92、11.82~21.96、94.07~174.71、42.69~79.27、9.55~17.73mg·g^(-1),相对于药材的转移率为25.72%~47.77%、41.78%~77.59%、64.90%~120.54%、42.30%~78.57%、34.99%~64.99%。结论:优选的辣木叶标准汤剂煎煮工艺稳定可行,建立的多指标质量评价体系可为该标准汤剂的质量控制奠定基础。

关键词：辣木叶标准汤剂高效液相色谱法(HPLC) 质量标准响应面法主成分分析(PCA) 煎煮工艺

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临床试验模拟中虚拟患者的概念和模型与案例

中国新药杂志 2024年第9期33卷 911-916页

作者：王思村陈亚飞顾浩党海霞刘骏王忠于亚南中国中医科学院中医临床基础医学研究所北京100700 中国中医科学院数据中心北京100700 中国中医科学院北京100700

虚拟患者是临床试验模拟中通过建模与模拟产生的受试者,用于预测评估干预措施的安全性和有效性,从而提供临床试验不同阶段发展的趋向性并预测成功率,避免资源的浪费,同时模拟的结果也可作为证据支撑临床决策。历经20年的发展,虚拟患者... 详细信息

虚拟患者是临床试验模拟中通过建模与模拟产生的受试者,用于预测评估干预措施的安全性和有效性,从而提供临床试验不同阶段发展的趋向性并预测成功率,避免资源的浪费,同时模拟的结果也可作为证据支撑临床决策。历经20年的发展,虚拟患者的构建和应用不断完善,获得了国际社会广泛的关注与认可。本文通过整理现阶段虚拟患者研究的相关文献,在总结构建虚拟患者的模型及分类的基础上,以临床试验模拟中不同生理学层级上的虚拟患者为例,探讨其构建的目的、应用及局限性,旨在帮助研究者更好地了解该技术及其在药物研发领域的价值和意义。

关键词：虚拟患者虚拟生理人模型临床试验模拟模型引导的药物研发

基于特征图谱-网络药理学-多指标定量分析的辣木叶调血脂质量标志物研究

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中草药 2024年

作者：宋亚南王云张村杨洪军中国中医科学院中药研究所中国中医科学院

目的基于辣木Moringaoleifera叶的特征图谱并结合网络药理学，筛选辣木叶的质量标志物(Q-Marker)，建立其定量分析方法，为辣木叶的质量评价提供科学依据。方法采用高效液相色谱法(HPLC)建立辣木叶的特征图谱，条件如下：PhenomenexLu... 详细信息

目的基于辣木Moringaoleifera叶的特征图谱并结合网络药理学，筛选辣木叶的质量标志物(Q-Marker)，建立其定量分析方法，为辣木叶的质量评价提供科学依据。方法采用高效液相色谱法(HPLC)建立辣木叶的特征图谱，条件如下：PhenomenexLunaC18(2)100A色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相乙腈(A)-0.5%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0～20min，5%～13%A；20～40min，13%～18%A；40～50min，18%～30%A；50～60min，30%～60%A；60～70min，60%～100%A；70～72min，100%A)，检测波长254nm，体积流量0.8mL/min，柱温35℃，进样量5μL。应用化学计量学方法筛选不同产地的辣木叶差异标志物，基于网络药理学获取辣木叶特征成分的关键靶点及关键通路，绘制出“特征成分-关键靶点-关键通路”网络，以预测辣木叶的调血脂质量标志物。再以15批辣木叶药材为研究对象，对质量标志物进行含量测定。以五原则为核心确定出最终的质量标志物。结果建立了15批辣木叶药材的特征图谱，结合高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法(HPLC-Q-TOF-MS/MS)确认了8个共有峰，通过对照品指认出其中6个色谱峰，分别为新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、维采宁-2、异槲皮素、紫云英苷；经化学计量学分析，初步确认新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、异槲皮素、维采宁-2为不同产地的差异性标志物。经网络药理学确认新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、异槲皮素、维采宁-2为活性成分，可作用于白细胞介素6(IL6)、白细胞介素2(IL2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)等5个核心靶点，影响3条关键通路[细胞因子-细胞因子受体相互作用、产生免疫球蛋白A(IgA)的肠道免疫网络、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路]发挥调血脂作用。结合“五原则”初步预测新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、异槲皮素、维采宁-2为辣木叶调血脂的潜在的质量标志物，含量分别为5.81、1.91、2.23、6.59、0.94mg/g。结论建立的质量评价方法准确可靠，在此基础上结合网络药理学所筛选出的质量标志物可为辣木叶的质量控制提供参考，为阐明其药效物质基础的作用机制奠定基础。

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疫苗佐剂“益气增免方”组方配伍理论探析

中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 208-215页

作者：古欣怡佟琳唐仕欢李慧霍蕊莉中国中医科学院医学实验中心北京100700 中国中医科学院中医药信息研究所北京100700 中国中医科学院中药研究所北京100700 中国中医科学院中医药健康产业研究所北京100700 中国中医科学院北京100700

目的:为防控新型冠状病毒肺炎疫情提供中医药新的防范方案,探讨益气增免方作为一种疫苗佐剂的应用。该方剂由经典的补气剂四君子汤化裁而来,以药性配伍和功效剖析为基础,分析了益气增免方与疫苗的配伍效应及其影响机制。方法:该文章应... 详细信息

目的:为防控新型冠状病毒肺炎疫情提供中医药新的防范方案,探讨益气增免方作为一种疫苗佐剂的应用。该方剂由经典的补气剂四君子汤化裁而来,以药性配伍和功效剖析为基础,分析了益气增免方与疫苗的配伍效应及其影响机制。方法:该文章应用《古代经典名方数据库》对益气增免方方剂组成开展了相似度比对研究,并从药性、配伍、功效等不同方面剖析益气增免方的配伍理论基础,分析其与疫苗的配伍效应及其影响机制。结果:中药疫苗佐剂益气增免方作为一种中医药复方,聚焦于肺脾二脏,提升肺脾之气。肺为气之主,机体通过肺脏呼吸新鲜空气,并在肺内交换体内浊气,气在肺中交替循环,保证人体正常的呼吸;脾主运化,是气机升降之枢纽,而气正是代谢功能的具象。通过调节气机、增强气血功能,益气增免方可以增强免疫原性,为增强疫苗免疫效果提供理论依据。结论:益气增免方具有益气健脾,理气燥湿,增强免疫力的功效。通过对疫苗佐剂益气增免方中医理论的深度剖析,结合前期临床及基础实验研究结果,提示益气增免方可能具有增强疫苗接种后的免疫反应诱导和维持免疫记忆,而其是如何能对复杂的免疫调控网络进行有效调理的,还需进一步阐明。

关键词：疫苗佐剂益气增免方新型冠状病毒组方配伍

基于“脑-心-肾-精室”轴理论探讨早泄的生物学基础

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中国实验方剂学杂志 2024年第10期30卷 203-209页

作者：马东岳王安民杨九天骆第铖赵子维郭军王福中国中医科学院西苑医院北京100091

“脑-心-肾-精室”轴理论是基于中医基础理论、现代男科疾病发病特点,结合临床实践提出的中医男科理论。以该轴为切入点,认为脑、心和肾脏腑失调及精室失用为早泄的核心病机,精室失用导致精窍开阖失控是发病的最终环节。从“脑-心-肾-... 详细信息

“脑-心-肾-精室”轴理论是基于中医基础理论、现代男科疾病发病特点,结合临床实践提出的中医男科理论。以该轴为切入点,认为脑、心和肾脏腑失调及精室失用为早泄的核心病机,精室失用导致精窍开阖失控是发病的最终环节。从“脑-心-肾-精室”轴理论辨治早泄,更清晰地把握早泄中医发病观,治疗上突出对涉病脏腑的整体调控,同时注重心身同治。通过探讨“脑-心-肾-精室”轴与早泄的生物学基础,提出早泄与“脑-心-肾-精室”轴之间的生物学基础主要与局部脑区功能下降、神经调节失常、中枢神经递质失调、内分泌紊乱及阴茎感觉传入增强等有关,旨在为中医药防治早泄提供新的研究路径,并为开发更有效的治疗方法提供科学依据。

关键词：早泄 “脑-心-肾-精室”轴 5-羟色胺神经递质生物学基础

中医药干预糖尿病肾脏疾病的潜在途径:巨噬细胞极化

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中国中药杂志 2024年第15期49卷 4044-4053页

作者：王文茹王新慧闫蕾曾勤詹添展婧怡李纪新余仁欢中国中医科学院西苑医院北京100091

糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)作为2型糖尿病普遍且严重的微血管并发症,慢性微炎症状态是DKD个体肾脏组织损伤加重的重要因素。巨噬细胞是免疫-炎症反应的重要角色,其根据微环境的差异,可瞬态、可逆地极化为促炎的M1表... 详细信息

糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)作为2型糖尿病普遍且严重的微血管并发症,慢性微炎症状态是DKD个体肾脏组织损伤加重的重要因素。巨噬细胞是免疫-炎症反应的重要角色,其根据微环境的差异,可瞬态、可逆地极化为促炎的M1表型及抑炎的M2表型。M1/M2巨噬细胞极化平衡紊乱可导致炎性细胞因子聚集在肾小球及肾间质,加剧DKD的病情进展,因此恢复巨噬细胞极化的平衡,是改善DKD慢性微炎症状态的重要途径。巨噬细胞极化是一个多样化、可塑性的复杂动态过程,在极化过程中涉及的多种信息分子和细胞因子在DKD病情进展中具有重要的调控表型的作用,与DKD代谢、炎症、纤维化、线粒体自噬等多种机制有着紧密的联系,通过极化作用协调炎症反应,在代谢相关性疾病炎症的调节中发挥着关键作用。巨噬细胞极化所涉及的复杂的通路网络与中医药多通路、多靶点的治疗模式相吻合。中药活性成分及中药复方均可通过调控巨噬细胞极化实现对DKD的干预,通过减轻肾脏炎症修复肾脏组织,促进肾功能恢复的相关研究已不鲜见。因此,该研究基于现有证据,针对中医药靶向M1/M2巨噬细胞极化平衡改善DKD的研究进展作一综述,旨在挖掘巨噬细胞极化在调控DKD方面的潜力,希冀为DKD的中医药临床诊治及生物学机制的探索提供证据支持。

关键词：巨噬细胞极化糖尿病肾脏疾病中药复方活性成分炎症微环境

龙牡皮炎方对特应性皮炎小鼠氧化应激的干预作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 88-95页

作者：马梦茜吴思琪王清滢李亚琴汪津禾郎娜任建勋中国中医科学院西苑医院北京100091

目的:本研究观察龙牡皮炎方对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导特应性皮炎(AD)的BALB/c小鼠模型氧化应激的干预作用并探讨其机制。方法:采用BALB/c小鼠背部皮肤DNCB致敏的方法建立AD模型。雄性BALB/c小鼠40只,随机分为空白组、模型组、维生素C... 详细信息

目的:本研究观察龙牡皮炎方对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导特应性皮炎(AD)的BALB/c小鼠模型氧化应激的干预作用并探讨其机制。方法:采用BALB/c小鼠背部皮肤DNCB致敏的方法建立AD模型。雄性BALB/c小鼠40只,随机分为空白组、模型组、维生素C组(0.5×10^(-3)g·kg^(-1))及龙牡皮炎方组(26 g·kg^(-1))。除空白组外,模型组、维生素C组和龙牡皮炎方组小鼠分别采用背部外涂不同浓度DNCB致敏的方法诱导AD,空白组予基质外涂。分别于2%DNCB致敏后7 d及0.2%DNCB致敏后24 d开始灌胃给药,连续21 d。实验结束后直接观察各组小鼠皮损变化;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组小鼠血清中白细胞介素(IL)-4,肿瘤坏死因子(TNF)-α、免疫球蛋白E(Ig E)、活性氧(ROS)的水平;总抗氧化能力测定试剂盒-微量法(ABTS法)测定血清抗氧化能力(TAOC)的水平;采用苏木素-伊红(HE)染色观察皮损部位病理形态学改变;免疫组化法检测皮损部位胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测背部皮损部位丝聚蛋白(FLG)的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠皮损评分显著增高(P处TSLP表达明显增加及FLG表达降低(P<0.05);血清中TNF-α、IL-4、Ig E、ROS含量升高,同时TAOC活性下降(P<0.01)。与模型组比较,龙牡皮炎方组小鼠皮损评分显著下降,皮损病理明显改善;同时皮损组织中TSLP表达降低及FLG表达上升(P<0.05);此外龙牡皮炎方组小鼠血清中TNF-α、IL-4、Ig E和ROS含量相比模型组也有不同程度降低(P<0.05,P<0.01),且TAOC活性上升(P<0.01)。结论:AD氧化应激程度与皮损严重程度、细胞炎症因子水平具有明显的关联性。龙牡皮炎方可通过促进ROS清除,提升TAOC而抑制氧化应激,从而改善BALB/c小鼠AD样皮损,保护皮肤屏障,降低炎症反应。

关键词：特应性皮炎龙牡皮炎方氧化应激实验研究机制

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房繄恭针灸治疗盆腔淤血综合征临床经验

中国针灸 2024年

作者：刘欣房繄恭中国中医科学院针灸研究所中国中医科学院针灸医院

介绍房繄恭教授针刺治疗盆腔淤血综合征的临床经验。房繄恭教授认为本病病机为冲任瘀阻，气血运行不畅，胞宫经血流通受阻。临证治疗谨守病机，重调冲任，总结出“立足冲任，化瘀止痛”“腧穴所在，主治所在”“安神定志，身心同调”的... 详细信息

介绍房繄恭教授针刺治疗盆腔淤血综合征的临床经验。房繄恭教授认为本病病机为冲任瘀阻，气血运行不畅，胞宫经血流通受阻。临证治疗谨守病机，重调冲任，总结出“立足冲任，化瘀止痛”“腧穴所在，主治所在”“安神定志，身心同调”的治疗思路，选用百会、神庭、本神、中脘、天枢、关元、大赫、子宫为主穴，并根据病因、症状灵活配穴，针刺过程中重视应用逍遥调神针法，以及医患双方治神守神，为治疗盆腔淤血综合征提供新思路。

关键词：盆腔淤血综合征盆腔静脉曲张慢性盆腔痛针灸房繄恭