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载脂蛋白M单克隆抗体的制备及其初步应用

中华检验医学杂志 2010年第6期33卷 497-501页

作者：胡敏赵水平张涛田芳艳中南大学湘雅二医院心内科长沙410011 湖南远泰生物技术有限公司

目的制备亲和力高、纯度好的载脂蛋白M（apoM）单克隆抗体,并用以检测apoM在组织细胞及不同人群中的分布.方法用重组apoM蛋白免疫Balb/c小鼠,经细胞融合、筛选及克隆化,得到生长良好、分泌稳定的杂交瘤细胞株;注射Balb/c小鼠腹腔,收... 详细信息

目的制备亲和力高、纯度好的载脂蛋白M（apoM）单克隆抗体,并用以检测apoM在组织细胞及不同人群中的分布.方法用重组apoM蛋白免疫Balb/c小鼠,经细胞融合、筛选及克隆化,得到生长良好、分泌稳定的杂交瘤细胞株;注射Balb/c小鼠腹腔,收取腹腔积液,纯化后得到apoM单克隆抗体,并用本实验制备的单克隆抗体检测健康对照组及冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者稳定型心绞痛（sA）组和急性冠状动脉综合征（ACS）组血清中的apoM蛋白浓度.结果得到了3株单克隆抗体,经亚型鉴定、阻断试验和WB确定为apoM单克隆抗体;并通过该抗体在人细胞和组织中检测到了apoM蛋白.冠心病SA组的apoM浓度为（11.02±1.96）×10-3 g/L,ACS组apoM浓度为（10.76±1.32）×10-3g /L,对照组为（12.83±2.28）×10-3 g/L,3组间差异有统计学意义（F=11.544,P＜0.05）.比较冠心病sA组和ACS组与健康对照组血浆apoM浓度,显示两组冠心病患者血浆apoM浓度均低于健康对照组（t=2.962、3.967,P＜0.05）,两组冠心病组之间血浆apoM浓度差异无统计学意义（t=1.033,P＞0.05）.结论成功制备了3株apoM的单克隆抗体,可与人组织细胞中的apoM蛋白特异结合,为进一步研究apoM在脂代谢中的作用打下了基础.

关键词：载脂蛋白类抗体,单克隆

靶向调控转录依赖的关键因子在恶性骨肿瘤中的研究进展

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中华骨科杂志 2020年第12期40卷 811-818页

作者：张伯裕苏婧肖涛李晓阳中南大学湘雅二医院骨科长沙410011 中南大学生命科学院遗传学系长沙410008 国家癌症中心/中国医学科学院(北京协和医学院)肿瘤医院骨科北京100021

骨肿瘤高度的异质性使新型分子靶向疗法的发展受到一定局限,但另一方面也提示基因组多样性的共同表达调控通路可能为临床治疗提供至关重要的线索。相比点突变为主的癌,骨与软组织肉瘤在遗传学上以染色体改变为特征,产生的特异蛋白多是... 详细信息

骨肿瘤高度的异质性使新型分子靶向疗法的发展受到一定局限,但另一方面也提示基因组多样性的共同表达调控通路可能为临床治疗提供至关重要的线索。相比点突变为主的癌,骨与软组织肉瘤在遗传学上以染色体改变为特征,产生的特异蛋白多是核心转录因子,驱动异常的转录调节进程,从而主导骨肿瘤的发生、发展。骨肿瘤恶性生物学行为的维持依赖转录的持续高水平活化,因此针对转录失调过程中关键的调控因子开发靶向药物可能是骨肿瘤治疗的前景方向。已证实细胞周期蛋白依赖性激酶-7(cyclin-dependent kinase-7,CDK7)是肿瘤异常转录调控的枢纽性节点,其通过磷酸化RNA聚合酶Ⅱ影响细胞生长、增殖、转移等多种生物学功能。关键因子CDK7的精细调控决定着肿瘤特征性的转录依赖,靶向抑制CDK7是阻遏肿瘤生长的有效策略,尤其是特定遗传背景的肿瘤类型对CDK7的干预高度敏感。越来越多的研究表明,CDK7与骨肿瘤的发生、发展密切相关,有望成为骨肿瘤治疗的潜力靶标。

关键词：恶性骨肿瘤细胞周期蛋白依赖性激酶靶向调控关键因子 RNA聚合酶Ⅱ 细胞生长靶向药物特异蛋白

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分子实验技能课程教学模式初探

现代生物医学进展 2015年第33期15卷 6567-6568,6515页

作者：邢晓为邓昊中南大学湘雅三医院医学实验中心湖南长沙410013

目的:探索适合临床研究生的分子实验技能课教学模式,提高研究生科研思维能力和实验技能。方法:根据临床研究生的特点,以学生为主体,注重学生科研思维的培养,运用多样化的教学手段,对研究生临床分子实验技能课程的教学方法进行探索。结果... 详细信息

目的:探索适合临床研究生的分子实验技能课教学模式,提高研究生科研思维能力和实验技能。方法:根据临床研究生的特点,以学生为主体,注重学生科研思维的培养,运用多样化的教学手段,对研究生临床分子实验技能课程的教学方法进行探索。结果:通过实验技能课的学习与培训,临床研究生科研思维能力得到很大的提升,对医学实验研究兴趣增加,取得了很好的教学效果。结论:多元化教学模式比较适合临床研究生实验技能课的教学。

关键词：临床实验技能课研究生教学科研思维能力

EB病毒与宿主免疫在鼻咽癌发病中的作用及相关免疫治疗的研究进展

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临床肿瘤学杂志 2017年第2期22卷 184-188页

作者：张娜胡春宏中南大学湘雅二医院肿瘤中心长沙410011

鼻咽癌(NPC)是我国最常见的头颈部肿瘤之一,高发于南方。NPC的病因复杂,发病机制不清,虽对放疗较为敏感,但其治疗仍面临复发和转移的高风险。EB病毒(Epstein-Barr virus)是NPC的高危因素,与NPC密切相关,目前是NPC形成机制的研究重点。... 详细信息

鼻咽癌(NPC)是我国最常见的头颈部肿瘤之一,高发于南方。NPC的病因复杂,发病机制不清,虽对放疗较为敏感,但其治疗仍面临复发和转移的高风险。EB病毒(Epstein-Barr virus)是NPC的高危因素,与NPC密切相关,目前是NPC形成机制的研究重点。本文从免疫应答及EB病毒相关产物两方面就EB病毒在NPC发病机制中的免疫学作用作一综述,并初步探讨免疫治疗在NPC的应用。

关键词：鼻咽癌 EB病毒宿主免疫免疫治疗

92169例拟受血患者梅毒螺旋体特异性抗体检测与分析

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临床输血与检验 2018年第5期20卷 493-495,513页

作者：曹微微李宁梅城李碧娟肖超奇陈廷寅中南大学湘雅医院输血科长沙410008 中南大学湘雅医院信息科长沙410008

目的评估化学发光微粒法(CMIA)检测梅毒螺旋体抗体的特异性,并分析不同年龄段及性别之间梅毒螺旋体阳性率的差异。方法采用CMIA法对本院住院和门诊92169例拟受血患者的血清标本进行梅毒螺旋体特异性抗体(抗-TP)检测,阳性标本用梅毒螺旋... 详细信息

目的评估化学发光微粒法(CMIA)检测梅毒螺旋体抗体的特异性,并分析不同年龄段及性别之间梅毒螺旋体阳性率的差异。方法采用CMIA法对本院住院和门诊92169例拟受血患者的血清标本进行梅毒螺旋体特异性抗体(抗-TP)检测,阳性标本用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)确认。结果 CMIA法检测发现阳性2 825例,TPPA法阳性确认2680例,CMIA筛查结果与TPPA法确认结果比较,假阳性率0.16%,阳性预测值94.87%。CMIA法S/CO值越大,经TPPA法TP阳性确认率越高;S/CO值小于2的阳性标本确认率仅为72.8%,低于其他S/CO值组;S/CO值大于5的标本,TPPA法阳性确认率为100.0%;比较各S/CO值组TPPA法获得阳性率的差异有统计学意义(χ~2=138.26,P <0.001)。拟受血患者中TP感染率为2.91%;感染率随年龄的增长而增高(χ~2=353.69,P <0.001),60岁以上老年人感染率高于其他人群(χ~2=206.97,P <0.001)。男性感染率为2.78%,女性为3.04%,不同性别患者病毒感染率的差异有统计学意义(χ~2=4.86,P=0.027)。结论CMIA在抗-TP检测中的灵敏度较好,适合大批量筛查。对于CMIA法检测梅毒特异性抗体阳性的标本,尤其是S/CO低值样本(S/CO为1～2),有必要进行TPPA复检,以提高检测结果的准确性,避免临床医疗纠纷。住院和门诊拟受血患者中抗-TP阳性率随年龄增长而增高,同时老年人的假阳性率也较高,因此对老年人的梅毒试验阳性结果应慎重对待。

关键词：梅毒螺旋体特异性抗体化学发光微粒子免疫分析法梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验

老年患者医院感染的临床现状及感染病原菌的耐药性

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中华医院感染学杂志 2013年第13期23卷 3098-3100页

作者：程向群余军幺冬发王行环武汉大学中南医院体检中心湖北武汉430071 昆明市同仁医院肾内科云南昆明650032

目的探讨老年患者医院感染的临床现状及病原菌分布与耐药性,为预防控制老年患者医院感染提供诊断及用药依据。方法回顾性调查2010年1月-2011年12月医院≥60岁老年住院患者的病历资料,了解老年患者医院感染的临床现状及病原菌分布与耐药... 详细信息

目的探讨老年患者医院感染的临床现状及病原菌分布与耐药性,为预防控制老年患者医院感染提供诊断及用药依据。方法回顾性调查2010年1月-2011年12月医院≥60岁老年住院患者的病历资料,了解老年患者医院感染的临床现状及病原菌分布与耐药性。结果 4397例老年患者医院感染率为9.8%;例次感染率为11.5%;感染部位以下呼吸道最为多见,占56.8%,其次为泌尿道和消化道,分别占24.3%、6.9%;感染病原菌中革兰阴性杆菌占69.4%,革兰阳性球菌占22.3%,真菌占8.3%,前5位病原菌依次为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌,分别占20.2%、14.0%、12.8%、8.7%、6.7%;药敏试验显示,肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南均保持了100.0%的敏感性,主要革兰阳性菌对替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺的耐药率均为0,但对其他常用抗菌药物大多产生了严重的耐药性;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为61.4%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌检出率为71.0%;泛耐药铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌分别达到17.6%和21.1%;产ESBLs细菌检出率为62.6%。结论老年患者易罹患医院感染,且感染致病菌的耐药性呈上升趋势,临床医护人员应采取有效的临床干预措施,预防与控制老年患者医院感染。

关键词：老年患者医院感染好发部位病原菌

中国医师协会骨科医师分会骨科循证临床诊疗指南:早发性脊柱侧凸循证临床诊疗指南

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中华外科杂志 2019年第3期57卷 166-169页

作者：中国医师协会骨科医师分会中国医师协会骨科医师分会《早发性脊柱侧凸循证临床诊疗指南》编辑委员会朱锋王岩刘臻王冰不详香港大学深圳医院骨科 518053 解放军总医院第一医学中心骨科北京100853 南京大学医学院附属鼓楼医院中南大学湘雅二医院

为了规范早发性脊柱侧凸(EOS)的诊断和治疗,提高多学科综合诊治水平,中国医师协会骨科医师分会EOS治疗指南工作小组撰写了本指南。本指南依据流行病学资料、循证医学证据和临床研究结果,结合近年来国内外研究进展,经共同讨论审阅,最终... 详细信息

为了规范早发性脊柱侧凸(EOS)的诊断和治疗,提高多学科综合诊治水平,中国医师协会骨科医师分会EOS治疗指南工作小组撰写了本指南。本指南依据流行病学资料、循证医学证据和临床研究结果,结合近年来国内外研究进展,经共同讨论审阅,最终定稿。希望在临床实践中不断加以完善,进一步提高我国EOS的诊治水平。

关键词：脊柱侧凸牵引术肺功能支具手术

中国大五人格问卷的初步编制Ⅰ：理论框架与信度分析

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中国临床心理学杂志 2010年第5期18卷 545-548页

作者：王孟成戴晓阳姚树桥深圳大学师范学院心理学系广东深圳518060 中南大学湘雅二医院医学心理中心湖南长沙410011

目的:以大五人格结构模型为理论框架,编制适合16岁以上具有初中文化程度国人的大五人格问卷。方法:通过一系列的预实验编制了184个条目的《中国大五人格问卷》测试版本,1221名大学生参加了该版本的测试。结果:①编制的《中国大五人格问... 详细信息

目的:以大五人格结构模型为理论框架,编制适合16岁以上具有初中文化程度国人的大五人格问卷。方法:通过一系列的预实验编制了184个条目的《中国大五人格问卷》测试版本,1221名大学生参加了该版本的测试。结果:①编制的《中国大五人格问卷》题量适中,共包含134个条目,测量22个侧面特质。②具有较好的内部一致性信度和重测信度,在维度层面上的内部一致性alpha系数在0.83(宜人性)到0.91(尽责性)之间,平均0.878。22个特质因子的内部一致性alpha系数从0.64(O5价值观念)到0.84(E4热情)之间,平均0.759。③间隔5周的重测系数在维度层面上均大于0.8,在特质层面上有19个在0.7以上,只有3个特质因子的重测相关在0.6-0.7之间。间隔10周的重测系数在维度层面上也均达到了0.8左右的相关,最小0.78(外向性),最大0.86(严谨性)。结论:本研究基本达到预期目标,所编制的《中国大五人格问卷》题量适中,具有较好的信度。

关键词：大五模型人格评估测验编制信度分析大学生

人IL-15cDNA真核表达载体的构建及其在BEL-7402细胞中的表达

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中国现代医学杂志 2003年第1期13卷 47-50页

作者：杨春艳苏先狮何艳中南大学湘雅二医院肝病研究中心

目的 :构建人白细胞介素 - 15 (hIL - 15 )真核表达载体并在肝癌细胞BEL - 74 0 2中表达 ,为进一步研究IL - 15的功能及临床应用奠定基础。方法 :采用RT -PCR方法自正常成人外周血单核细胞中扩增出hIL -15cDNA ,将其克隆至T -vector中 ... 详细信息

目的 :构建人白细胞介素 - 15 (hIL - 15 )真核表达载体并在肝癌细胞BEL - 74 0 2中表达 ,为进一步研究IL - 15的功能及临床应用奠定基础。方法 :采用RT -PCR方法自正常成人外周血单核细胞中扩增出hIL -15cDNA ,将其克隆至T -vector中 ,经测序确证后 ,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3.1hisB中 ,脂质体法转染BEL - 74 0 2细胞进行表达 ,鉴定表达产物的生物学活性。结果 :测序结果与已报道hIL - 15cDNA序列一致。脂质体转染后获得 6个BEL - 74 0 2细胞阳性克隆 ,IL - 15活性测定为 15 6～ 2 5 2u/ml。结论 :成功地构建了真核表达载体 pcDNA3.1hisB -IL - 15 ,IL - 15cDNA转导的人BEL - 74 0 2肝癌细胞可表达有生物活性的IL - 15。

关键词： hIL-15 RT-PCR 真核基因表达 BEL-7402细胞