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结直肠癌中自然杀伤细胞表型及功能初探

上海交通大学学报（医学版） 2024年第6期44卷 713-722页

作者：冯昫皎刘健悦戚炀炀孙晶沈蕾上海交通大学基础医学院免疫学与微生物学系上海市免疫学研究所上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科上海市微创外科临床医学中心上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院免疫与疾病研究中心上海200025

目的·初步探究结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者肿瘤组织中免疫微环境的组成,分析自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)在CRC中的比例、表型及功能特征。方法·收集CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和匹配的CRC患者外周血样本... 详细信息

目的·初步探究结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者肿瘤组织中免疫微环境的组成,分析自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)在CRC中的比例、表型及功能特征。方法·收集CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和匹配的CRC患者外周血样本,消化组织制备成单细胞悬液,使用流式细胞术检测各类免疫细胞比例,通过t-SNE(t-distributed stochastic neighbor embedding)降维与统计学分析,描述CRC肿瘤免疫微环境的特征。运用流式细胞术检测肿瘤组织和癌旁组织中NK细胞表面活化分子的表达情况,包括CD16、CD27、CD69、晚期活化标志人类白细胞抗原-DR(human leukocyte antigen-DR,HLA-DR)、细胞耗竭标志T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域3(T cell immunoglobulin domain and mucin domain-3,TIM-3)。运用流式细胞术探究CD38分子在NK细胞上的表达水平,描述CD38highNK细胞的表型特征。利用细胞刺激试剂盒激活NK细胞,通过流式细胞术胞内染色检测NK细胞的功能,包括细胞因子γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)的表达水平。结果·收集25例CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和15例匹配的CRC患者外周血样本。CRC肿瘤组织中包含T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及髓系细胞等免疫细胞。与癌旁组织相比,肿瘤组织中T淋巴细胞(P=0.000)和髓系细胞(P=0.026)的比例显著升高,NK细胞(P=0.007)的比例显著降低,B淋巴细胞比例差异无统计学意义。与癌旁组织相比,肿瘤组织中NK细胞表面CD27(P=0.000)、CD69(P=0.001)表达水平显著降低,同时CD16(P=0.008)、HLA-DR(P=0.000)和TIM-3(P=0.024)的表达水平显著升高,呈现晚期活化和耗竭表型。NK细胞按CD38的表达水平可分为CD38highNK和CD38lowNK 2个亚群。与癌旁组织相比,肿瘤组织CD38highNK(P=0.003)比例显著降低,CD38lowNK比例差异无统计学意义。相比CD38lowNK,CD38highNK的CD27高表达,CD16、NKp46、CD57、CD94、HLA-DR和CD158a低表达(均P=0.000),处于早期分化和未活化的状态。肿瘤浸润的NK细胞与癌旁组织相比,分泌细胞因子IFN-γ(P=0.032)、TNF-α(P=0.042)和GM-CSF(P=0.019)的水平显著降低,表明NK细胞杀伤功能受损。结论·CRC患者肿瘤组织中NK细胞浸润减少,早期分化状态的CD38highNK细胞亚群下降,分泌细胞因子的能力下降并呈现耗竭表型。这些结果提示NK细胞在CRC中功能受损,介导的抗肿瘤免疫应答下降。

关键词：自然杀伤细胞结直肠癌 CD38

三维组架螺钉与微创钢板固定SandersⅢ型跟骨骨折的有限元分析

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中国组织工程研究 2024年第33期28卷 5289-5294页

作者：孔德伟宋超吴亮吴铭龚璐璐汪嘉琪潘红元范鑫斌张岩宁夏医科大学上海市浦东新区公利医院研究生培养基地上海市200135 上海市浦东新区公利医院骨科上海市200135 同济大学生命科学与技术学院上海市200092

背景:经皮复位加压固定的三维组架螺钉内固定在治疗SandersⅢ型跟骨骨折上已经取得了满意的临床疗效,但在生物力学方面是否可以达到微创钢板内固定的稳定性,以及对比之后的优势与缺点还不得而知。目的:通过有限元分析方法探讨不同内固... 详细信息

背景:经皮复位加压固定的三维组架螺钉内固定在治疗SandersⅢ型跟骨骨折上已经取得了满意的临床疗效,但在生物力学方面是否可以达到微创钢板内固定的稳定性,以及对比之后的优势与缺点还不得而知。目的:通过有限元分析方法探讨不同内固定装置对SandersⅢ型跟骨骨折的固定效果。方法:选择1名26岁成年健康男性志愿者,根据其跟骨CT数据制作SandersⅢ型跟骨骨折有限元模型。选用经皮微创三维组架螺钉、跗骨窦微创钢板分别固定跟骨骨折模型,分别施加350,700N纵向载荷,分析2种模型的位移、应力分布情况,比较各种模型的稳定性。结果与结论:①三维组架螺钉模型中骨块与内植物的峰值应力明显低于微创钢板模型,三维组架螺钉模型中骨块与内植物的平均应力也明显低于微创钢板模型;②2种模型的最大位移均位于后距关节面内侧,三维组架螺钉模型的最大位移小于微创钢板模型;③微创钢板模型前突骨块与内侧骨块的纵向位移更小,三维组架螺钉模型内侧骨块与中段骨块的横向与垂直位移更小;④提示2种内固定模型均能提供满意的固定效果,其中三维组架螺钉模型使应力分布更均匀、骨块综合位移更小,能提供更好的横向与垂直稳定性,而微创钢板在维持纵向稳定性上更具优势。

关键词：跟骨骨折生物力学 SandersⅢ型内固定有限元分析螺钉微创钢板微创

腓骨近端骨折对伸直状态下膝关节应力影响的有限元分析

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中国组织工程研究 2024年第30期28卷 4757-4762页

作者：汪嘉琪唐江安黄国华孔德策赵一丁龚璐璐潘红元孔德伟刘粤杨铁毅宁夏医科大学上海市浦东新区公利医院研究生培养基地上海市200135 上海市浦东新区公利医院骨科上海市200135 同济大学生命科学与技术学院上海市200092

背景:传统观点认为绝大多数的腓骨近端骨折是不需要固定的,他人和此次研究提示,近端腓骨结构对于膝关节后外侧结构的稳定性具有重要影响,其作用机制值得研究。目的:探讨腓骨近端骨折对于伸直状态膝关节各结构生物力学的影响。方法:运用... 详细信息

背景:传统观点认为绝大多数的腓骨近端骨折是不需要固定的,他人和此次研究提示,近端腓骨结构对于膝关节后外侧结构的稳定性具有重要影响,其作用机制值得研究。目的:探讨腓骨近端骨折对于伸直状态膝关节各结构生物力学的影响。方法:运用有限元方法进行仿真生物力学试验。选用1名健康青年男性志愿者膝关节MRI和CT影像数据资料建立伸直状态下的膝关节有限元模型,并模拟4种近端腓骨形态:模型A为完整模型,模型B为腓骨头下以远1 cm骨折模型,模型C为腓骨近端最顶端向远端1 cm的尖端缺损骨折模型,模型D为腓骨近端最顶端向远端2 cm的骨缺损模型。在股骨干上施加纵向集中载荷1500 N,对比分析膝关节伸直状态下,4种工况下膝关节各个结构最大等效应力、最大第一主应力的分布以及改变趋势。结果与结论:①模型A胫骨软骨、半月板外侧室最大等效应力大于内侧;胫骨平台、半月板内侧室最大第一主应力大于外侧;股骨软骨内侧髁最大等效应力大于外侧髁,股骨软骨内侧髁最大第一主应力大于内侧髁;②相较于模型A,模型C的软骨、半月板的最大等效应力和最大第一主应力大小以及分布情况无明显差异;③相较于模型A,模型B的最大等效应力上升幅度依次为内侧胫骨软骨(14.9%),股骨软骨内侧髁(13.6%),内侧半月板(6.6%);最大第一主应力上升幅度依次为内侧半月板(11.06%),内侧胫骨软骨(8.65%),股骨软骨内侧髁(7.46%);韧带的最大等效应力上升幅度依次为:腘弓状韧带(33.2%)>前交叉韧带(21.3%)>腓侧副韧带(17%)>后交叉韧带(14.3%)>前外侧副韧带(13.2%)>内侧副韧带(10.1%);④相较于模型A,模型D的最大等效应力上升趋势依次为内侧胫骨软骨(19.5%),股骨软骨内侧髁(17.9%),内侧半月板(9.9%);最大第一主应力依次为内侧半月板(14.04%),内侧胫骨软骨(13.03%),股骨软骨内侧髁(11.37%);韧带最大等效应力上升趋势依次为:前交叉韧带(25.2%)>后交叉韧带(18.9%)>内侧副韧带(18.5%)>前外侧副韧带(12.7%);⑤提示在膝关节伸直情况下,腓骨头下1 cm骨折和2 cm腓骨尖端骨缺损对内侧室软骨、前交叉韧带以及后外侧韧带复合体结构的影响较大。

关键词：腓骨近端骨折有限元分析生物力学半月板关节软骨

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枯否细胞亚群与功能的研究进展

中国免疫学杂志 2024年

作者：赵赛于倩刘亮明南京医科大学上海松江临床医学院上海市松江区中心医院

枯否细胞 (Kupffer cell， KC)是位于肝脏血窦内的常驻巨噬细胞群，在清除肠道来源的病原体和受损的红细胞、调节铁和脂肪代谢、维持免疫耐受等方面发挥重要作用。在急性和慢性肝病中，KC通过与其他肝脏细胞群如肝细胞、星状细胞、内皮... 详细信息

枯否细胞 (Kupffer cell， KC)是位于肝脏血窦内的常驻巨噬细胞群，在清除肠道来源的病原体和受损的红细胞、调节铁和脂肪代谢、维持免疫耐受等方面发挥重要作用。在急性和慢性肝病中，KC通过与其他肝脏细胞群如肝细胞、星状细胞、内皮细胞相互作用参与肝组织的损伤和修复，维持肝脏内环境的动态平衡。KC具有高度可塑性，不同的肝脏疾病模型和不同的组织微环境信号都可诱导肝巨噬细胞的表型和功能的变化。在这篇综述中，我们根据细胞起源、细胞极化、细胞表面标记物以及单细胞测序技术鉴定的基因表达谱对KC亚群及其在特定肝脏疾病模型中的功能进行概括。这有助于我们靶向特定KC亚群预防或者治疗相关的肝脏疾病，推动肝脏疾病精准医学的发展。

关键词：枯否细胞细胞极化细胞表面标记单细胞RNA测序

基于HTA的医疗服务项目医保准入机制国际实践与启示

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中国卫生经济 2024年

作者：张晨曦王海银刘昕金春林山东第二医科大学公共卫生学院上海市卫生和健康发展研究中心(上海市医学科学技术情报研究所)

目的：探讨如何构建适用于我国的基于卫生技术评估（HTA）的医疗服务项目医保准入机制。方法：梳理目前各省份医保准入流程，通过专家访谈了解其不足之处；运用文献分析的方法，总结英国和新加坡医保准入的经验和HTA报告包含的指标信息... 详细信息

目的：探讨如何构建适用于我国的基于卫生技术评估（HTA）的医疗服务项目医保准入机制。方法：梳理目前各省份医保准入流程，通过专家访谈了解其不足之处；运用文献分析的方法，总结英国和新加坡医保准入的经验和HTA报告包含的指标信息。结果：我国大部分地区医疗服务价格管理虽然由“排除法”逐渐向“准入法”过渡，但缺乏准入评估的工具。英国和新加坡医保准入机制主要包括主题遴选、评估范围界定、实施HTA、医保准入决策等；HTA报告包含临床证据、成本证据、评估项目对卫生体系的预算影响等数据资料。结论：可以通过多准则决策分析构建循证卫生政策决策框架；通过制定国家层面指导性文件、多情境下HTA评估体系、加强对HTA的监督等途径构建基于HTA医保准入机制。

关键词：医疗服务项目卫生技术评估医保准入启示

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新冠病毒对蛋白酶药物产生耐药的分子机制

科学通报 2024年第15期69卷 1970-1972页

作者：孙浩然周浩杨海涛上海科技大学免疫化学研究所上海201210

新型冠状病毒(SARS-CoV-2,以下简称新冠病毒)是引起肆虐全球的新冠病毒肺炎感染疫情的病原体,携带30 kb左右的单股正链RNA基因组[1].在进入细胞后,它会利用宿主细胞质中的蛋白质翻译机器翻译出2种多聚蛋白pp1a(polyprotein1a)与pp1ab(po... 详细信息

新型冠状病毒(SARS-CoV-2,以下简称新冠病毒)是引起肆虐全球的新冠病毒肺炎感染疫情的病原体,携带30 kb左右的单股正链RNA基因组[1].在进入细胞后,它会利用宿主细胞质中的蛋白质翻译机器翻译出2种多聚蛋白pp1a(polyprotein1a)与pp1ab(polyprotein 1ab).

关键词：多聚蛋白病毒分子机制蛋白酶机器翻译病原体

美洲鲥Ⅳ、Ⅴ期卵巢营养成分、卵黄蛋白原、组织蛋白酶D及其mRNA表达的比较分析

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上海海洋大学学报 2024年第3期33卷 623-634页

作者：袁新程施永海徐嘉波于爱清邓平平张之文蒋飞上海市水产研究所上海市水产技术推广站上海200433

为探明美洲鲥(Alosa sapidissima)雌鱼发育后期卵巢内营养物质的变化规律,提高卵子受精率,采用生化分析、酶联免疫吸附及荧光定量PCR等方法,对性腺发育期Ⅳ期和Ⅴ期的卵巢内氨基酸、脂肪酸、卵黄蛋白原(VTG)和组织蛋白酶D(CTSD)含量及其... 详细信息

为探明美洲鲥(Alosa sapidissima)雌鱼发育后期卵巢内营养物质的变化规律,提高卵子受精率,采用生化分析、酶联免疫吸附及荧光定量PCR等方法,对性腺发育期Ⅳ期和Ⅴ期的卵巢内氨基酸、脂肪酸、卵黄蛋白原(VTG)和组织蛋白酶D(CTSD)含量及其mRNA表达量进行对比分析。结果显示,Ⅳ期卵巢中水分含量(75.73%)显著低于Ⅴ期(90.64%),而粗蛋白含量(16.07%)、粗脂肪含量(2.86%)和粗灰分含量(1.28%)均显著高于Ⅴ期(5.83%、1.25%、0.81%)。在Ⅳ、Ⅴ期卵巢内各检测出18种氨基酸,其中谷氨酸含量最高(8.64%和8.13%);8种必需氨基酸中,Ⅳ期苏氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸和色氨酸含量均显著高于Ⅴ期,且二者第一限制氨基酸均为色氨酸;Ⅳ期氨基酸总量(TAA)、半必需氨基酸(HEAA)和非必需氨基酸总量(NEAA)均显著高于Ⅴ期。两期卵巢内共检测出19种脂肪酸,Ⅳ期C17∶0、C20∶1n9、C20∶4n6和C20∶5n3含量显著高于Ⅴ期;其中ΣMUFA、ΣPUFA、ΣUFA、Σn3PUFA和EPA+DHA含量均大于Ⅴ期,ΣUFA(70.54%)达到显著性差异。Ⅳ期卵巢中VTG含量高于Ⅴ期,但不显著;而Ⅳ期卵巢中CTSD含量明显比Ⅴ期低。Ⅴ期卵巢VTG基因表达量是Ⅳ期的13.88倍;而Ⅴ期肝脏内VTG基因表达明显低于Ⅳ期,是Ⅳ期的25%。从Ⅳ期至Ⅴ期,卵巢中CTSD mRNA表达出现下调,肝脏中CTSD mRNA表达出现上调,但均不明显。因此,当前养殖条件下,美洲鲥雌鱼亲本后期发育过程中,卵巢内营养物质积累不均衡,建议适当调整饲料配方,提高限制性氨基酸色氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸及含量较低的赖氨酸、苏氨酸比例和调高多不饱和脂肪酸C20∶3n6、C20∶4n6(AA)、C22∶6n3(DHA)和C20∶5n3(EPA)比例,降低C18∶2n6c的比例,保证卵巢后期发育所需营养的均衡。

关键词：美洲鲥卵巢营养成分卵黄蛋白原组织蛋白酶D mRNA表达

跑台运动对帕金森病模型大鼠肠道菌群结构及多样性的影响

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中国组织工程研究 2024年第14期28卷 2227-2233页

作者：马欣然刘欣昊李宇佳罗开亮马书杰胡军上海中医药大学康复医学院上海市201203 福建医科大学附属第一医院康复医学科福建省福州市350005 上海市第二康复医院上海市200441

背景:运动对于肠道菌群失调具有调节作用,能有效保护有益菌群,改善肠道环境;但跑台运动对帕金森病肠道微生物群落结构及多样性的影响及具体作用机制尚不明确。目的:利用16S rDNA技术分析跑台运动对帕金森病模型大鼠肠道菌群群落结构及... 详细信息

背景:运动对于肠道菌群失调具有调节作用,能有效保护有益菌群,改善肠道环境;但跑台运动对帕金森病肠道微生物群落结构及多样性的影响及具体作用机制尚不明确。目的:利用16S rDNA技术分析跑台运动对帕金森病模型大鼠肠道菌群群落结构及多样性的影响,并探讨非药物跑台运动改善帕金森病的作用机制。方法:18只SD大鼠随机选取12只,利用单侧黑质2点法脑注射6-羟基多巴胺诱导建立帕金森病大鼠模型;剩余6只为假手术组,采用相同定位及注射方式注射同等剂量含0.2%抗坏血酸的生理盐水。造模成功的12只帕金森病模型大鼠随机分为帕金森病模型组和跑台运动组,每组6只。跑台运动组进行中低强度跑台运动干预(10 m/min,30 min/d,5 d/周),连续干预4周。在最后1次跑台运动结束后24 h取大鼠新鲜粪便并置于液氮冻存,采用16S rDNA测序技术分析大鼠粪便菌群结构的变化。结果与结论:①跑台运动可明显改善帕金森病模型大鼠的行为学及黑质酪氨酸羟化酶阳性细胞表达,缓解由帕金森病引起的肠道微生物群落结构及多样性的变化,增加大鼠操作分类单位(OTUs)数量,调节Alpha及Beta多样性;②在肠道菌群门和属水平,帕金森病模型组中Firmicutes(厚壁菌门)/Bacteroidetes(拟杆菌门)丰度比值较假手术组减少,而Prevotella(普雷沃氏菌属)、Bacteroides(拟杆菌属)、Clostridium_XlV(梭菌属)等有益菌经跑台运动后有明显上升;③结果提示:跑台运动对于帕金森病所导致的行为学异常、多巴胺能神经元的毒性损伤及肠道微生物失衡具有显著调节作用,可缓解与菌群相关的疾病症状,对帕金森病改善具有积极作用。

关键词：跑台运动帕金森病肠道菌群 16S rDNA 大鼠

三级淋巴结构在食管鳞状细胞癌预后及免疫治疗中的研究进展

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中国胸心血管外科临床杂志 2024年

作者：牛振屹金润森颜克鹏张燕李鹤成上海交通大学医学院附属瑞金医院胸外科上海交通大学医学院上海市免疫学研究所

食管鳞状细胞癌（鳞癌）是我国食管癌的主要病理类型，严重威胁我国人民的健康。以免疫检查点抑制剂为主的免疫治疗极大改善了食管鳞癌患者的预后，但仍存在治疗疗效有限的问题。三级淋巴结构（tertiary lymphoid structure,TLS）是在... 详细信息

食管鳞状细胞癌（鳞癌）是我国食管癌的主要病理类型，严重威胁我国人民的健康。以免疫检查点抑制剂为主的免疫治疗极大改善了食管鳞癌患者的预后，但仍存在治疗疗效有限的问题。三级淋巴结构（tertiary lymphoid structure,TLS）是在非淋巴器官内聚集形成的有组织异位淋巴结构。既往研究发现，食管鳞癌中的TLS与患者更好的预后相关，并且能增强患者的免疫治疗疗效。本文结合目前TLS在食管鳞癌领域的相关研究，对TLS与食管鳞癌患者预后及免疫治疗间的关系作一综述，希望能为开展食管鳞癌的精准免疫治疗提供参考。

关键词：食管鳞状细胞癌三级淋巴结构免疫治疗综述