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双荧光标记的人高骨转移肺腺癌细胞株的建立及其转录组学特征分析

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中国肺癌杂志 2024年第4期27卷 257-265页

作者：陆悦仇荣邓妍刘星羽杜玉珍上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海交通大学医学院附属第六人民医院医学检验科上海201306

背景与目的骨是肺腺癌常见的转移部位,但肺腺癌骨转移的机制尚不明确。目前肺腺癌骨转移机制研究缺乏易于示踪且稳定高骨转移的肺腺癌细胞模型,因此,本研究旨在建立绿色荧光蛋白(green f luorescent protein,GFP)和萤火虫荧光素酶(firef... 详细信息

背景与目的骨是肺腺癌常见的转移部位,但肺腺癌骨转移的机制尚不明确。目前肺腺癌骨转移机制研究缺乏易于示踪且稳定高骨转移的肺腺癌细胞模型,因此,本研究旨在建立绿色荧光蛋白(green f luorescent protein,GFP)和萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,LUC)双标记的人高骨转移肺腺癌细胞株,为肺腺癌骨转移的研究提供新的实验工具。方法人肺腺癌细胞系A549-GFP-LUC经左心室注射至裸鼠体内构建骨转移模型,经连续3次体内驯化,获取人高骨转移肺腺癌细胞株A549-GFP-LUC-BM3;CCK-8(cell counting kit-8)、克隆形成实验比较A549-GFP-LUC-BM3细胞株和亲本细胞的体外增殖能力,划痕实验、Transwell实验以及Western blot比较迁移和侵袭能力;并进一步将A549-GFP-LUC-BM3细胞和亲本细胞行测序转录组学分析。结果成功建立人高骨转移肺腺癌细胞A549-GFP-LUC-BM3,相较于亲本细胞,该细胞骨转移发生率显著提高,且体外增殖、迁移和侵袭能力显著增强。转录组学测序结果显示,相较于亲本细胞,A549-GFP-LUC-BM3细胞中共筛选到差异基因2954个,其中1021个基因上调,1933个基因下调;基因本体(Gene Ontology,GO)功能富集显示差异基因主要定位于细胞外周、质膜以及细胞外基质等细胞组分,分子功能主要富集在信号受体结合、钙离子结合和细胞外基质结构成分等,生物过程富集在细胞黏附和生物黏附等;京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析显示差异基因在细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)对外源性物质的代谢、视黄醇代谢、细胞黏附分子、CYP对药物代谢、类固醇激素的生物合成以及核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路上显著富集。结论成功建立GFP和LUC双标记的人高骨转移肺腺癌细胞株,该细胞株在生物学行为水平和转录组测序水平均提示具有高骨转移潜能。

关键词：肺肿瘤骨转移动物模型细胞株转录组学分析

大力推进功能MRI技术在腮腺疾病影像诊断中的应用

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中华放射学杂志 2024年第5期58卷 471-473页

作者：杨功鑫朱凌陶晓峰上海交通大学医学院附属第九人民医院放射科上海200011

近年来,多种MRI技术迅速发展,在腮腺疾病影像诊断中的应用是当前研究的热点。该文分析了MRI技术在腮腺疾病影像研究中的研究现状和应用情况,探讨了当前腮腺疾病影像研究中面临的挑战,包括技术限制、临床应用和数据分析等方面的问题,并... 详细信息

近年来,多种MRI技术迅速发展,在腮腺疾病影像诊断中的应用是当前研究的热点。该文分析了MRI技术在腮腺疾病影像研究中的研究现状和应用情况,探讨了当前腮腺疾病影像研究中面临的挑战,包括技术限制、临床应用和数据分析等方面的问题,并提出了未来研究的发展方向。最后强调了MRI新技术、新方法在腮腺疾病影像学研究中的重要性和潜力。

关键词：腮腺磁共振成像应用现状

联合应用二维、三维超微血管成像修正S-Detect分类良、恶性乳腺囊实性病变

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中国医学影像技术 2024年第4期40卷 545-548页

作者：袁杰汪成笪应芬吴林生上海交通大学医学院附属第九人民医院黄浦分院超声科上海200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院黄浦分院乳腺外科上海200011

目的观察联合应用二维超微血管成像(2D-SMI)及三维超微血管成像(3D-SMI)修正S-Detect分类良、恶性乳腺囊实性病变结果的价值。方法回顾性分析143例女性患者146个经病理诊断(良性78个、恶性68个)乳腺囊实性病变资料,记录基于二维超声表现... 详细信息

目的观察联合应用二维超微血管成像(2D-SMI)及三维超微血管成像(3D-SMI)修正S-Detect分类良、恶性乳腺囊实性病变结果的价值。方法回顾性分析143例女性患者146个经病理诊断(良性78个、恶性68个)乳腺囊实性病变资料,记录基于二维超声表现的S-Detect分类结果,并根据2D-SMI和3D-SMI所示血供特征、血管构筑及血流动力学等特征加以修正;计算修正前、后S-Detect分类敏感度、特异度及准确率;以受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评估其效能,以DeLong检验加以比较。结果修正前S-Detect分类乳腺良、恶性囊实性病变的敏感度、特异度、准确率及AUC分别为61.76%、58.97%、60.27%及0.604,修正后分别为92.65%、58.97%、74.66%及0.758;修正后AUC高于修正前(P<0.05)。结论联合应用2D-SMI及3D-SMI评估乳腺囊实性病变有助于修正倾向良性的S-Detect分类结果。

关键词：乳腺疾病超声检查人工智能

基于FAERS的奥沙利铂相关过敏反应的挖掘与影响因素的关联分析

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中国医院药学杂志 2024年第11期44卷 1322-1327页

作者：陈阳刘小林吴义来毛峻琴范国荣汪硕闻上海交通大学医学院附属第一人民医院临床药学科上海200081 上海市第一人民医院嘉定医院/上海市嘉定区江桥医院临床药学科上海201803

目的:分析奥沙利铂导致过敏反应药品不良事件(adverse drug event,ADE)发生特点和临床表现,为该药临床安全应用提供参考。方法:利用OpenVigil 2.1工具从美国FAERS数据库收集奥沙利铂的过敏反应ADE报告,筛选后统计患者的基本信息、ADE发... 详细信息

目的:分析奥沙利铂导致过敏反应药品不良事件(adverse drug event,ADE)发生特点和临床表现,为该药临床安全应用提供参考。方法:利用OpenVigil 2.1工具从美国FAERS数据库收集奥沙利铂的过敏反应ADE报告,筛选后统计患者的基本信息、ADE发生时间、症状、结局及药物联用情况,并利用Apriori关联规则算法方法探究不良事件发生的关联情况。结果:收集到以奥沙利铂为主要怀疑的过敏反应报告2195份,年龄主要分布在60岁以上,发生国家以美国及其他欧洲国家为主,常见于结直肠肿瘤患者;最常见的ADE发生在0~1 d,症状伴随呼吸困难、超敏反应等,结局多为延长住院时间、危及生命;ADE发生时间0~1 d与呼吸困难、延长住院及危及生命的关联性较强;女性与ADE症状为呼吸困难、延长住院的关联性较强,提示女性或速发过敏反应出现不良结局的风险因素较高。结论:不同个体使用奥沙利铂出现过敏反应差异较大,医护人员和药师在日常工作中应重视该药物ADE的监测和上报,探讨其发生规律,并针对性地提出用药监护方案,保障患者用药安全。

关键词：奥沙利铂美国食品药品监督管理局不良事件报告系统药品不良事件过敏反应用药安全

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PRMT6促进乳腺癌细胞的增殖和迁移

上海交通大学学报（医学版） 2024年第8期44卷 999-1010页

作者：韩依杉徐梓淇陶梦玉范广建余波上海交通大学医学院附属第一人民医院肿瘤中心上海201600 复旦大学附属肿瘤医院肿瘤内科上海200032 复旦大学上海医学院肿瘤学系上海200032

目的·研究蛋白质精氨酸甲基转移酶6 (protein arginine methyltransferase 6,PRMT6)在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法·通过R语言分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中PRMT6mRNA在多... 详细信息

目的·研究蛋白质精氨酸甲基转移酶6 (protein arginine methyltransferase 6,PRMT6)在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法·通过R语言分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中PRMT6mRNA在多种癌症中的表达情况。采用基因表达谱交互分析(GeneExpressionProfilingInteractive Analysis,GEPIA2)在线数据库分析PRMT6在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达差异。利用人类蛋白质图谱(The Human Protein Atlas,HPA)数据库获得人正常乳腺组织和乳腺癌组织的免疫组织化学数据,分析PRMT6的蛋白表达情况。使用免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测27例乳腺癌组织及配对癌旁组织中PRMT6的表达。通过小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)转染技术在MDA-MB-231和MCF-7细胞系中敲低PRMT6,实时荧光定量PCR (quantitative realtime PCR,qRT-PCR)及Western blotting在转录和蛋白水平验证PRMT6的敲低效率。通过细胞计数试剂盒8 (cell counting kit-8,CCK-8)、克隆形成实验探究PRMT6对乳腺癌细胞增殖能力的影响。通过细胞划痕实验和Transwell实验探究PRMT6对乳腺癌细胞迁移能力的影响。利用基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中GSE210948数据集的转录组测序数据分析对照组和PRMT6低表达组的差异基因,并进行京都基因与基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析。使用流式细胞术进行细胞周期分析。采用Western blotting技术检测增殖和迁移相关靶蛋白细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达。结果·生物信息学相关分析显示,PRMT6在乳腺癌组织中的表达高于正常乳腺组织(P=0.000)。IHC结果显示,PRMT6在乳腺癌组织中的表达显著高于配对癌旁组织(P=0.001)。qRT-PCR及Western blotting验证MDA-MB-231和MCF-7细胞系中PRMT6的mRNA及蛋白质表达水平,发现与对照组相比,siRNA (siPRMT6#1、siPRMT6#2)显著降低两种细胞中PRMT6mRNA (P=0.006, P=0.004;P=0.001, P=0.043)和蛋白(P=0.035, P=0.001;P=0.003, P=0.002)的表达水平。敲低PRMT6显著降低MDA-MB-231和MCF-7细胞的增殖(P=0.014,P=0.000;P=0.003,P=0.003)和迁移能力(P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.002)。KEGG通路富集分析显示,PRMT6的表达影响细胞周期通路。Western blotting结果显示,敲低PRMT6后,与细胞周期通路相关的cyclin D1蛋白水平下降(P=0.021,P=0.000;P=0.034,P=0.014);qRT-PCR结果显示,敲低PRMT6后,cyclin D1转录水平明显下降(P=0.036,P=0.001;P=0.044,P=0.000)。流式细胞术结果显示,敲低PRMT6后,G0/G1期细胞增加(P=0.000;P=0.003), G2/M期细胞减少。下调PRMT6表达后,与细胞迁移相关的Ecadherin表达增加(P=0.002, P=0.012;P=0.043, P=0.003), N-cadherin (P=0.004, P=0.041;P=0.032, P=0.034)和Vimentin (P=0.028,P=0.005;P=0.024,P=0.001)的蛋白表达减少。结论·PRMT6在乳腺癌组织中表达升高,可促进乳腺癌的增殖和迁移。

关键词：乳腺癌蛋白质精氨酸甲基转移酶6 增殖迁移细胞周期

微流控法制备载卵母细胞水凝胶微球及其玻璃化保存

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生物化学与生物物理进展 2024年第4期51卷 969-980页

作者：张慧张宇琪胡剑麟周新丽上海理工大学健康科学与工程学院生物系统热科学研究所上海200093 上海交通大学医学院附属第一人民医院辅助生殖医学科上海200080

目的通过微流控法制备载卵母细胞海藻酸钠微球,在低浓度保护剂下实现卵母细胞玻璃化保存。方法采用流动聚焦型微流控芯片,通过调整芯片结构、海藻酸钠溶液浓度和流速比,制备大小均匀、空包率低、低温耐受的载卵母细胞海藻酸钠水凝胶微... 详细信息

目的通过微流控法制备载卵母细胞海藻酸钠微球,在低浓度保护剂下实现卵母细胞玻璃化保存。方法采用流动聚焦型微流控芯片,通过调整芯片结构、海藻酸钠溶液浓度和流速比,制备大小均匀、空包率低、低温耐受的载卵母细胞海藻酸钠水凝胶微球。在低浓度低温保护剂下将微球玻璃化保存,复温后检测存活率,采用细胞松弛素B和氯化锶孤雌激活卵母细胞,与Cryotop玻璃化法对比卵母细胞存活率和卵裂率、囊胚率。结果制备的海藻酸钠微球在冷冻复温前后的体积稳定且结构完整,在将卵母细胞包封在海藻酸钠水凝胶中后,空包率低,存活率、卵裂率和囊胚率与新鲜组相比无显著差异。在低浓度低温保护剂10%DMSO+10%乙二醇(EG)+0.5 mol/L海藻糖中玻璃化冻存后卵母细胞的存活率达到92.48%,卵裂率70.80%,囊胚率20.42%,与高浓度保护剂15%DMSO+15%EG+0.5 mol/L海藻糖中Cryotop玻璃化法相比无显著性差异。结论本文设计制作了三通道内部交联芯片并用于卵母细胞玻璃化保存的微流控系统,可生成大小均匀、空包率低、低温耐受的载卵母细胞海藻酸钠水凝胶微球,在低浓度保护剂下实现玻璃化保存,为卵母细胞玻璃化保存方法提供新思路。

关键词：微流控卵母细胞微囊化玻璃化保存低温保护剂

股骨颈骨折围术期深静脉血栓形成相关危险因素的临床研究

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中国修复重建外科杂志 2024年

作者：王永刚付凯郑伟蔡倩莹陈圣宝张长青郑宪友桐乡市第一人民医院骨科上海交通大学医学院附属第六人民医院骨科南昌大学第四附属医院骨科

目的探讨老年股骨颈骨折围术期下肢深静脉血栓形成（deep venous thrombosis,DVT）的发生率及其危险因素。方法回顾分析2012年8月—2020年11月收治且符合选择标准的4 109例老年股骨颈骨折患者临床资料。其中男1 137例，女2 972例；年... 详细信息

目的探讨老年股骨颈骨折围术期下肢深静脉血栓形成（deep venous thrombosis,DVT）的发生率及其危险因素。方法回顾分析2012年8月—2020年11月收治且符合选择标准的4 109例老年股骨颈骨折患者临床资料。其中男1 137例，女2 972例；年龄65～101岁，平均77.0岁。骨折至入院时间1～360 h，平均35.2 h。手术采用半髋关节置换术1 858例、全髋关节置换术1 617例、内固定手术634例。术前年龄校正查尔森合并症指数（aCCI）为4(3,5)。术后发生DVT 857例（20.9%）。对发生与未发生围术期DVT患者的年龄、性别、BMI、骨折侧别、骨折至入院时间、手术方式、麻醉方式、是否输血、入院后血压、术前aCCI等变量进行单因素分析，并进一步采用logistic回归分析筛选老年股骨颈骨折围术期发生DVT的危险因素。对发生与未发生围术期DVT患者的年龄、性别、身体质量指数、骨折侧别、骨折至入院时间、手术方式、麻醉方式、是否输血、入院后血压、术前aCCI等变量进行单因素分析，并进一步采用logistic回归分析筛选老年股骨颈骨折围术期发生DVT的危险因素。结果单因素分析示，两组年龄、性别、骨折至入院时间、手术方式及术前aCCI比较差异有统计学意义（P一步行logistic回归分析示，年龄>75岁、女性患者、骨折至入院时间>24 h以及术前aCCI>5是股骨颈骨折围术期DVT形成的危险因素（P<0.05）。结论老年股骨颈骨折患者围术期有较高的DVT发生率，高龄及女性患者、骨折时间较长及合并症较多的患者需要特别注意围术期DVT的预防，以最大可能减轻股骨颈骨折围术期DVT的发生。

关键词：股骨颈骨折下肢深静脉血栓形成围术期危险因素

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噬菌体抗菌治疗在临床成功实施面临的挑战

中国生物工程杂志 2024年第8期44卷 142-147页

作者：何静怡崔泽林上海市第一人民医院检验医学中心上海201620 上海交通大学医学院医学技术学院上海200025

细菌耐药性已经非常严峻,防治耐药细菌感染是当下亟须解决的紧迫问题。噬菌体可用于防治耐药细菌感染,如果能更广泛地被用于临床,将会造福更多患者。噬菌体疗法目前仍面临一定挑战。从法律法规伦理、社会接受度、背景明确的噬菌体资源... 详细信息

细菌耐药性已经非常严峻,防治耐药细菌感染是当下亟须解决的紧迫问题。噬菌体可用于防治耐药细菌感染,如果能更广泛地被用于临床,将会造福更多患者。噬菌体疗法目前仍面临一定挑战。从法律法规伦理、社会接受度、背景明确的噬菌体资源缺乏、制剂制备标准化和质量评估与个体化治疗方案定制五个方面入手,基于国内外噬菌体的临床治疗和研究现状,综合归纳了噬菌体在治疗耐药细菌感染方面所遇到的困难和现有解决方法。

关键词：噬菌体治疗抗菌细菌耐药

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对儿童近视眼前期防控的认识与思考

中华眼科杂志 2024年第4期60卷 316-321页

作者：何鲜桂上海市眼病防治中心、同济大学附属眼科医院、上海交通大学医学院附属第一人民医院、国家眼部疾病临床医学研究中心上海201103

国际近视眼研究院在2019年提出了"近视眼前期"的概念, 将其定义为儿童眼屈光度数≤+0.75 D且>-0.50 D, 结合基线屈光度数、年龄和其他可量化危险因素, 有较大可能在未来发展为近视眼, 故值得采取预防性干预措施。本文从近视眼前期在儿... 详细信息

国际近视眼研究院在2019年提出了"近视眼前期"的概念, 将其定义为儿童眼屈光度数≤+0.75 D且>-0.50 D, 结合基线屈光度数、年龄和其他可量化危险因素, 有较大可能在未来发展为近视眼, 故值得采取预防性干预措施。本文从近视眼前期在儿童青少年中的流行病学特征、近视眼前期的判断标准和屈光变化特点、针对近视眼前期防控技术已有的和尚缺的研究证据、开展近视眼前期防控对促进近视眼防控关口前移的作用与收益4个方面, 阐述儿童近视眼前期防控在近视眼综合防治中的重要价值和未来方向, 以期和专业同道共同探讨有效防控近视眼发生发展的新策略。

关键词：近视屈光不正早期诊断暴露前预防儿童