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23-乙酰泽泻醇B对千里光碱致急性肝损伤小鼠水液失衡的影响

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药学学报 2024年第7期59卷 1982-1992页

作者：唐莹莹贾夏丽王金圆董跨陈岩丁丽丽熊爱珍杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

误服误用含吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloid,PA)的中草药是导致我国临床肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome,HSOS)的主要原因,利尿剂是目前临床上治疗PA致HSOS的常用药物之一。泽泻作为传统利尿中药,但... 详细信息

误服误用含吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloid,PA)的中草药是导致我国临床肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome,HSOS)的主要原因,利尿剂是目前临床上治疗PA致HSOS的常用药物之一。泽泻作为传统利尿中药,但其利尿机制仍未完全明确,且尚未有从利尿角度阐释泽泻改善PA致HSOS的报道。基于课题组前期研究,本研究以泽泻三萜23-乙酰泽泻醇B(alisol B 23-acetate,AB23A)为代表性药物,评价其对毒性PA千里光碱致小鼠急性肝损伤的保护作用,并进一步考察AB23A对模型小鼠水液失衡的影响。所有动物实验经上海中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号PZSHUTCM220808017),符合实验动物伦理相关规范。小鼠单次灌胃千里光碱(50 mg·kg^(-1))造模(SEN组),并设AB23A(40 mg·kg^(-1))干预组(AB23A+SEN组)、溶剂对照组(Ctrl组)和AB23A对照组(AB23A组)。结果表明,AB23A可明显降低千里光碱致急性肝损伤小鼠血清肝功能生化指标水平,缓解肝细胞凝固性坏死、肝窦淤血等病理状态;此外,AB23A还可改善小鼠血清肾功能指标,改善千里光碱造成的尿液排泄减少、机体电解质紊乱,并降低千里光碱及其代谢产物的含量。进一步测定小鼠水平衡通路相关蛋白和mRNA的表达,AB23A可明显下调千里光碱模型组小鼠水通路蛋白2(aquaporin-2,AQP2)、血管紧张素II 1型受体的蛋白和mRNA表达水平,抑制AQP2向顶端质膜运输,并降低血清血管紧张素II含量。体外研究进一步证实AB23A可调节肾脏内髓集合管细胞AQP2的表达。本研究表明,AB23A可调节千里光碱致急性肝损伤小鼠肾脏髓质AQP2,影响其对水的重吸收,改善水液平衡。研究结果进一步加深了对泽泻传统利尿活性的认识,为临床利用泽泻治疗PA致HSOS提供实验基础和理论依据。

关键词： 23-乙酰泽泻醇B 吡咯里西啶生物碱水通路蛋白2 利尿水液平衡

连钱草中1个具有13α,27-环丙烷结构的新六环三萜

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药学学报 2024年第5期59卷 1334-1340页

作者：张倩陆美龙刘天资张悦婷朱傲丁丽丽韩竹箴谷丽华王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

为研究连钱草Glechoma longituba(Nakai)Kupr.中的化学成分,探讨其活血化瘀物质基础,采用MCI、硅胶、凝胶、ODS柱色谱及制备薄层等色谱技术对连钱草醇提物进行系统分离,通过MS、1D NMR、2D NMR等波谱数据分析鉴定化合物结构。从连钱草... 详细信息

为研究连钱草Glechoma longituba(Nakai)Kupr.中的化学成分,探讨其活血化瘀物质基础,采用MCI、硅胶、凝胶、ODS柱色谱及制备薄层等色谱技术对连钱草醇提物进行系统分离,通过MS、1D NMR、2D NMR等波谱数据分析鉴定化合物结构。从连钱草醇提物的二氯甲烷萃取部位分离得到8个三萜类化合物,分别鉴定为2α,3α,16β-trihydroxy-13α,27-cyclours-11-en-28-oic acid(1)、28-norurs-12-ene-3β,17β-diol(2)、28-norolean-12-ene-3β,17β-diol(3)、齐墩果酮酸(4)、3β,13β-dihydroxyurs-11-en-28-oic acid(5)、熊果醇(6)、齐墩果酸(7)和熊果酸(8)。化合物1为罕见的具有13α,27-环丙烷结构的新六环三萜,命名为euscaphic acid H,化合物2、3为首次从唇形科中分离得到,化合物4、5为首次从活血丹属中分离得到。以凝血四项指标(APTT、PT、TT、FIB)对三萜类成分进行体外抗凝血活性评价,化合物1~7均显示一定的抗凝血趋势,其中化合物1和6表现出较明显的体外抗凝活性。

关键词：连钱草活血丹六环三萜化学成分抗凝血

基于“性状-化学成分”关联性分析的三七质量评价新策略

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药学学报 2024年第8期59卷 2326-2336页

作者：王子樱范文翔刘龙婵陆美龙谷丽华李林楠杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

传统的中药材商品规格主要依据性状等感官指标划分为不同的等级,作为优质优价的依据,与现行标准是否吻合、是否能够反映药材的内在质量,尚缺乏系统评价。三七为常用、大宗药材,目前市场上仅根据头数(支数/500 g)划分为8个等级,但与《中... 详细信息

传统的中药材商品规格主要依据性状等感官指标划分为不同的等级,作为优质优价的依据,与现行标准是否吻合、是否能够反映药材的内在质量,尚缺乏系统评价。三七为常用、大宗药材,目前市场上仅根据头数(支数/500 g)划分为8个等级,但与《中华人民共和国药典》规定的以三七总皂苷(3种皂苷之和)含量为指标的标准不相关。本研究采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)并结合质谱分子网络对不同头数三七皂苷类成分进行快速鉴定,共表征64种皂苷成分。通过正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)筛选出与三七头数相关的17个皂苷差异化合物;采用高效液相色谱法(HPLC)对不同头数三七中5种主要皂苷类成分R_(1)、Rb_(1)、Rg_(1)、Rd、Re进行含量测定,相关性分析结果表明Rd、R_(1)是差异皂苷中VIP值最大的皂苷类成分,与三七头数呈显著负相关(P0.08)为指数,可将三七划分为20~60头(优选)与80~200头(统货)两个等级。本研究基于“性状-化学分析”相结合的理念,整合非靶向定性分析与定量测定方法,为三七品质评价提供新的科学依据和策略。

关键词：三七等级品质评价高分辨质谱法皂苷

骨碎补UPLC指纹图谱与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶活性的谱效关系研究

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天然产物研究与开发 2024年第2期36卷 293-302页

作者：陈香丽张慧敏张紫佳上海中医药大学中药研究所、中药标准化教育部重点实验室上海201203

建立骨碎补生品和砂烫品提取物的UPLC指纹图谱,并研究骨碎补提取物与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶(ALP)活性之间的谱效关系。采用UPLC法建立骨碎补生品和烫品的指纹图谱并通过UPLC-Q-TOF MS法对其化学成分进行鉴别;通过测定MG63细胞中... 详细信息

建立骨碎补生品和砂烫品提取物的UPLC指纹图谱,并研究骨碎补提取物与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶(ALP)活性之间的谱效关系。采用UPLC法建立骨碎补生品和烫品的指纹图谱并通过UPLC-Q-TOF MS法对其化学成分进行鉴别;通过测定MG63细胞中ALP活性检测骨碎补提取物对MG63细胞成骨分化的影响;采用灰色关联度分析、双变量相关性分析以及偏最小二乘回归分析法分析骨碎补生品和烫品的UPLC特征指纹峰与其促ALP活性之间的谱效关系。在标定的12个共有峰中,确定了4、5、12号峰与ALP活性呈正相关,其对应的物质依次是咖啡酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、儿茶素7-葡糖苷、柚皮苷,为深入研究骨碎补的促成骨分化活性物质基础提供依据。

关键词：骨碎补 UPLC指纹图谱碱性磷酸酶活性谱效关系人骨肉瘤细胞MG63

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制黄精多糖的结构表征及其抗氧化活性研究

中草药 2024年第16期55卷 5418-5427页

作者：龚欢覃宝怡施松善张婷婷王辉俊王顺春上海中医药大学中药研究所上海201203 中药标准化教育部重点实验室上海201203

目的从制黄精中提取制黄精粗多糖(Polygonatum cyrtonema polysaccharides,PSP),分离得到制黄精部位多糖,对其结构特征和抗氧化活性进行研究。方法采用水提醇沉法得到PSP,再经DEAE-Sepharose Fast Flow凝胶色谱柱分离得到制黄精部位多糖... 详细信息

目的从制黄精中提取制黄精粗多糖(Polygonatum cyrtonema polysaccharides,PSP),分离得到制黄精部位多糖,对其结构特征和抗氧化活性进行研究。方法采用水提醇沉法得到PSP,再经DEAE-Sepharose Fast Flow凝胶色谱柱分离得到制黄精部位多糖,并通过高效凝胶过滤法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)、离子色谱仪和近红外光谱(fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)等方法对多糖的相对分子质量、单糖组成和结构特征进行研究;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)自由基清除法、2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS]自由基清除法、羟自由基清除法和Fe3+还原力测定法对多糖的体外抗氧化活性进行评价。结果从PSP中分离得到3个制黄精部位多糖(PSP-W、PSP-1和PSP-2),各部位多糖的得率分别为12.55%、4.22%和14.60%。HPGPC测定3个部位多糖相对分子质量分别为4.903×10^(4)、1.127×10^(4)和2.575×10^(4)。PSP-W的主要单糖组成为阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖和甘露糖,PSP-1和PSP-2的主要单糖组成为阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖和半乳糖醛酸。FT-IR光谱表明3个部位多糖含有β-糖苷键且具有吡喃环。抗氧化研究结果表明,PSP-W、PSP-1和PSP-2均具有抗氧化活性,并且存在明显的浓度相关性,其中PSP-1的抗氧化活性最强。结论从PSP中分离得到3个制黄精部位多糖,均具有一定的抗氧化活性,可作为潜在天然抗氧化剂。为制黄精抗氧化活性机制深入研究以及制黄精多糖相关药物、食品和保健品等开发利用提供研究基础。

关键词：制黄精多糖结构特征抗氧化活性 β-糖苷键

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两面针质量控制方法改进

中成药 2024年第5期46卷 1440-1446页

作者：安定邦林启焰赵祥程雪梅王长虹上海中医药大学中药研究所上海中药标准化研究中心中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 皖西学院生物与制药工程学院安徽六安237012

目的改进两面针质量控制方法。方法在氯化两面针碱、白屈菜红碱、毛两面针素的TLC定性鉴别中,分析采用硅胶GF_(254)薄层板,以氯仿-甲醇-氨水(30∶1∶0.1)为展开剂。建立两面针及其混淆品HPLC指纹图谱。在木兰花碱、氯化两面针碱、白屈... 详细信息

目的改进两面针质量控制方法。方法在氯化两面针碱、白屈菜红碱、毛两面针素的TLC定性鉴别中,分析采用硅胶GF_(254)薄层板,以氯仿-甲醇-氨水(30∶1∶0.1)为展开剂。建立两面针及其混淆品HPLC指纹图谱。在木兰花碱、氯化两面针碱、白屈菜红碱的HPLC含量测定中,分析采用Diamonsil Plus色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%三氟乙酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长273 nm。结果TLC斑点清晰,分离度良好。18批药材指纹图谱相似度为0.484~0.983,两面针及其混淆品得到有效区分。3种成分在各自范围线性关系良好(R^(2)=1.0000),平均加样回收率98.9%~103.3%,RSD 1.17%~1.96%。结论该方法简便,重复性好,可为两面针质量控制提供一种新方法。

关键词：两面针定性鉴别指纹图谱含量测定 TLC HPLC

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宁夏道地药材枸杞子等级质量标准研究

药学学报 2024年第5期59卷 1399-1407页

作者：余钟莲李薛萍杨莉王峥涛刘文静王瑞石燕红上海中医药大学中药学院上海201203 上海中医药大学中医药国际标准化研究所上海201203 上海市中医药国际标准化研究院上海201203 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海市浦东新区公利医院上海200135

基于传统性状鉴别结合现代中药分析手段的综合评价模式用于宁夏道地药材枸杞子等级划分关键指标的辨识和等级质量标准的建立。本草考证和市场调查指导下,将粒径大小、表皮颜色和不完善粒作为外在性状指标;聚焦枸杞子品质评价的全面性和... 详细信息

基于传统性状鉴别结合现代中药分析手段的综合评价模式用于宁夏道地药材枸杞子等级划分关键指标的辨识和等级质量标准的建立。本草考证和市场调查指导下,将粒径大小、表皮颜色和不完善粒作为外在性状指标;聚焦枸杞子品质评价的全面性和有效性,在水分、灰分、水溶性浸出物、枸杞多糖(Lyciumbarbarum polysaccharide,LBP)和甜菜碱等药典规定指标的基础上,增加枸杞酸(2-O-β-D-glucopyranosyl-L-ascorbic acid,AA-2βG)、玉米黄质双棕榈酸酯(zeaxanthin dipalmitate,ZD)和挥发性醚浸出物为内在质量指标。并通过t检验、相关性分析和主成分分析等数理统计方法,考察不同等级枸杞子外观性状与内在质量的关联,从而进行质量等级的划分和标准的制定,最后从体外细胞水平比较不同等级枸杞子提取物的活性差异。结果表明,枸杞子主要以“粒大色红”为佳;除甜菜碱外,其余指标成分均在表皮颜色鲜红和一等枸杞子中相对偏高;表皮颜色和水分、水溶性浸出物、LBP、AA-2βG和ZD含量之间存在显著相关。综合研究结果和市场流通情况,本研究以枸杞子的粒径大小和表皮颜色为基础,同时引入LBP、AA-2βG、ZD、水溶性浸出物和水分等多指标进一步指导等级划分,建立了外观性状和内在质量关键指标相结合的宁夏道地药材枸杞子等级质量标准,体外细胞活性也初步证实了一等枸杞子具有更为显著的“滋补肝肾”活性,这为枸杞子的质量控制和优质优价的实现提供了实验依据。

关键词：枸杞子道地产区外观性状内在质量等级质量标准

山楂配方颗粒UPLC特征图谱建立及绿原酸含量测定

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中成药 2024年第9期46卷 3068-3071页

作者：张方丽刘龙婵王煜李林楠杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的建立山楂配方颗粒UPLC特征图谱,并测定绿原酸含量。方法分析采用Waters ACQUITY UPLC HSS C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃;检测波长325 nm。结果14批样品特... 详细信息

目的建立山楂配方颗粒UPLC特征图谱,并测定绿原酸含量。方法分析采用Waters ACQUITY UPLC HSS C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃;检测波长325 nm。结果14批样品特征图谱中有6个特征峰。绿原酸在0.78125~200μg/mL范围内线性关系良好(R^(2)=0.9998),平均加样回收率为95.86%,RSD为2.36%。结论该方法简便、重复性好,明显优于国家药品监督管理局发布的山里红配方颗粒分析方法,现已作为《上海市中药配方颗粒标准》发布实行。

关键词：山楂配方颗粒 UPLC特征图谱绿原酸含量测定

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冠心生脉丸质量标准提升

中成药 2024年第3期46卷 724-729页

作者：刘静玉金武燮谷丽华吴立宏王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化中心上海201203

目的提升冠心生脉丸质量标准。方法TLC法定性鉴别人参和三七,分析采用硅胶G薄层板,以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂。HPLC法测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷R... 详细信息

目的提升冠心生脉丸质量标准。方法TLC法定性鉴别人参和三七,分析采用硅胶G薄层板,以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂。HPLC法测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的含量,分析采用Thermo Accucore-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,2.6μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.8 mL/min;柱温20℃;检测波长203 nm。结果TLC斑点清晰,阴性无干扰。4种成分在各自范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9999),平均加样回收率91.21%~106.86%,RSD 0.68%~1.43%。结论该方法专属性、重复性良好,可为冠心生脉丸质量控制提供参考。

关键词：冠心生脉丸人参三七人参皂苷定性鉴别含量测定 TLC HPLC