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基于中西医病证特点的腹泻型肠易激综合征动物模型的临床吻合度分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 218-227页

作者：蒋风茹何友成吴月潘可怡周淳宇蔡舒雨袁建业上海中医药大学附属龙华医院上海200032

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是临床常见的功能性肠病之一,其发病机制复杂且未被完全阐明,现代医学缺乏稳定且行之有效的治疗方式。建立符合中西医病证特点的IBS-D动物模型有助于进一步揭示其发病机制并完善治疗方案。临床吻合度是一种以... 详细信息

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是临床常见的功能性肠病之一,其发病机制复杂且未被完全阐明,现代医学缺乏稳定且行之有效的治疗方式。建立符合中西医病证特点的IBS-D动物模型有助于进一步揭示其发病机制并完善治疗方案。临床吻合度是一种以疾病中西医最新诊断标准为依据,评价动物模型对中西医病证模拟效果的指标。该文通过对IBS-D动物模型相关文献进行分析归纳,发现IBS-D模型所用动物多以大鼠为主,所用方法多为单因素诱导、双因素诱导和多因素联合诱导,所表现的疾病特征主要是与内脏痛觉过敏或(和)胃肠动力异常相关的症状和(或)体征。其中,单因素诱导IBS-D大鼠模型多具备很高的西医临床吻合度,而中医临床吻合度不足;双因素诱导和多因素诱导的IBS-D模型西医临床吻合度多数较高,但也存在吻合度水平参差不齐的情况。此外,IBS-D中医证候模型构建以肝郁脾虚证为主,而脾肾阳虚、脾胃湿热、脾虚湿盛,寒热错杂证候模型略显不足。因此,今后仍需进一步完善已有的或研发新的IBS-D动物模型,为本病的中西医病证机制探索和治疗手段研发提供更适用的工具。

关键词：腹泻型肠易激综合征动物模型中西医病证特点临床吻合度

基于YWHAZ/p38MAPK/CASP3信号通路探讨软脉煎治疗动脉粥样硬化的机制

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中国药理学通报 2024年第3期40卷 573-581页

作者：赵雪顾耘张璐杜文婷上海中医药大学附属龙华医院上海200032

目的通过网络药理学、分子对接、动物实验探索中药复方软脉煎治疗动脉粥样硬化的作用机制。方法采用TCMSP查询软脉煎药物化学成分及靶点。在DrugBank、GeneCards、OMIM、TTD检索获得动脉粥样硬化的相关靶点。借助Cytoscape软件构建“药... 详细信息

目的通过网络药理学、分子对接、动物实验探索中药复方软脉煎治疗动脉粥样硬化的作用机制。方法采用TCMSP查询软脉煎药物化学成分及靶点。在DrugBank、GeneCards、OMIM、TTD检索获得动脉粥样硬化的相关靶点。借助Cytoscape软件构建“药物-活性成分-靶点”PPI网络。利用David数据库进行GO及KEGG富集分析。采用Seesar软件将关键成分与核心靶点进行分子对接验证。动物实验使用高脂饲料喂养ApoE^(-/-)小鼠建立动脉粥样硬化小鼠模型,软脉煎颗粒剂灌胃,将主动脉病理切片染色,测定血脂,免疫荧光检测Mac2、YWHAZ蛋白表达,Western blot检测p-p38MAPK、c-CASP3蛋白表达。结果软脉煎共筛选了72个药物活性成分,对应168个治疗动脉粥样硬化的靶点基因。靶点主要富集在脂质代谢、炎症和免疫、氧化应激、血管内皮功能、细胞增殖与凋亡、糖酵解以及泛素化相关的生物过程及MAPK、TNF、PI3K-Akt、IL-17信号通路。动物实验验证了软脉煎可以通过下调关键靶点YWHAZ及p-p38MAPK、c-CASP3调控p38MAPK信号通路,减轻动脉粥样硬化炎症反应及炎症诱发的凋亡。结论软脉煎可以抑制YWHAZ表达及p38MAPK信号通路的激活,可能通过调控MAPK、TNF、PI3K-Akt、IL-17信号通路改善血管炎症、脂质代谢、氧化应激等病理过程,进而防治动脉粥样硬化。

关键词：软脉煎动脉粥样硬化网络药理学分子对接动物实验 p38MAPK

中医药调控肿瘤相关巨噬细胞防治肺癌转移的基础研究进展

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中国肺癌杂志 2024年第7期27卷 541-549页

作者：刘诗卉李佳轩阙祖俊于盼田建辉上海中医药大学附属市中医医院肿瘤临床医学中心上海200071 上海中医药大学附属市中医医院肿瘤研究所上海200071

肺癌是全球死亡率最高的癌种,而转移则是导致肺癌患者死亡的主要原因,且防控效率不高。近年来研究发现,免疫疗法或许是突破转移瓶颈的方向。巨噬细胞作为固有免疫的重要组成部分,参与肿瘤发生发展的全过程。肿瘤相关巨噬细胞(tumor-asso... 详细信息

肺癌是全球死亡率最高的癌种,而转移则是导致肺癌患者死亡的主要原因,且防控效率不高。近年来研究发现,免疫疗法或许是突破转移瓶颈的方向。巨噬细胞作为固有免疫的重要组成部分,参与肿瘤发生发展的全过程。肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)是肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中最丰富的免疫群体,具有抗肿瘤的M1型和促肿瘤的M2型,后者通过促进肿瘤侵袭和转移、血管和淋巴管生成、免疫抑制和介导播散肿瘤细胞(disseminated tumor cells,DTCs)休眠重激活等途径促进肿瘤转移。近年来,中医药抑制肿瘤转移疗效显著并得到诸多验证,它能通过减少TAMs的募集、抑制M2型极化和调节TME中的细胞因子和蛋白发挥抗肿瘤作用。本文综述了TAMs与肺癌转移之间的关系,梳理了中医药调控TAMs防治肺癌转移的靶点与机制,以期为肺癌防治提供思路。

关键词：肿瘤相关巨噬细胞极化肺肿瘤转移中医药

汉黄芩素通过调节肠道菌群抑制结直肠癌的药效机制

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中华中医药杂志 2024年第8期39卷 3949-3957页

作者：刘宇婧陆璐潘家姝季光徐汉辰上海中医药大学附属龙华医院上海中医药大学脾胃病研究所上海200032

目的:探讨汉黄芩素调节肠道菌群,抑制结直肠癌(CRC)小鼠肿瘤发生的药效机制。方法:分别建立APCmin+基因缺陷小鼠模型和AOM/DSS炎癌转化小鼠模型,并给予0.2%脱氧胆醇(DCA)饮用水进行造模,随机分为正常组、模型组、汉黄芩素高、低剂量组,... 详细信息

目的:探讨汉黄芩素调节肠道菌群,抑制结直肠癌(CRC)小鼠肿瘤发生的药效机制。方法:分别建立APCmin+基因缺陷小鼠模型和AOM/DSS炎癌转化小鼠模型,并给予0.2%脱氧胆醇(DCA)饮用水进行造模,随机分为正常组、模型组、汉黄芩素高、低剂量组,给予相应药物干预,隔日观察小鼠状态。处死小鼠后取结直肠组织,HE染色观察组织病理形态学变化;免疫荧光染色法检测小鼠瘤组织F4/80、Mannose表达;TUNEL染色观察汉黄芩素对肿瘤细胞凋亡的影响;通过16S rRNA测序技术检测各组小鼠肠道菌群的变化,并进行生物信息学分析。结果:与对照组比较,DCA的干预显著促进了CRC的发生,而汉黄芩素可以显著减少结直肠癌肿瘤的体积(P肿瘤细胞凋亡,而汉黄芩素促使肿瘤细胞发生凋亡;免疫荧光染色结果显示,DCA干预增加了小鼠瘤组织内F4/80、Mannose的表达,而汉黄芩素给药组小鼠瘤组织内F4/80、Mannose表达显著减少。LEfSe分析提示,经DCA造模后,瘤胃球-UCG-014属、相对丰度下降,拟杆菌、鼠杆菌、相对丰度显著上升。相较于模型组,汉黄芩素高剂量干预后大肠埃氏菌属-志贺氏菌属、副拟杆菌属的丰度显著下调,伊雷杆菌属、瘤胃球-UCG-014属的丰度上调。KEGG富集结果表明,相关肠道菌落调控CRC与碳水化合物代谢、癌症通路、氨基酸代谢密切相关。结论:汉黄芩素能够通过调节肠道菌群抑制DCA介导的结直肠癌的发生。

关键词：汉黄芩素结直肠癌肠道菌群巨噬细胞脱氧胆酸

两样本孟德尔随机化法分析1型糖尿病对结直肠癌的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第6期44卷 755-761页

作者：俞洋孟丹仇奕文袁见朱莹杰上海中医药大学附属龙华医院肿瘤一科上海200032

目的·利用孟德尔随机化法(Mendelian randomization,MR)研究1型糖尿病与结直肠癌间潜在的因果关系。方法·采用两样本双向MR分析评估1型糖尿病与结直肠癌的因果关系。研究数据均来自IEU Open GWAS Project数据库。1型糖尿病的数据集包... 详细信息

目的·利用孟德尔随机化法(Mendelian randomization,MR)研究1型糖尿病与结直肠癌间潜在的因果关系。方法·采用两样本双向MR分析评估1型糖尿病与结直肠癌的因果关系。研究数据均来自IEU Open GWAS Project数据库。1型糖尿病的数据集包括患者9266例和对照人群15574例,包含12783129个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的关联分析;结直肠癌的数据集包括患者5657例和对照人群372016例,包含29999696个SNP的关联分析。筛选工具变量SNP,以逆方差加权(inverse variance weighted,IVW)法结果作为效应的主要指标,同时将MR-Egger回归、加权中位数法、基于众数的简单估计、基于众数的加权估计4种方法结果作为参考。采用留一法检验敏感性,采用IVW法和MR-Egger法进行Cochran's Q检验判断异质性,MR-pleiotropy函数检验多效性,采用Steiger检验进行方向性研究。采用共定位分析评估1型糖尿病和结直肠癌之间的效应是否由相同的SNP引起,采用交叉性状连锁不平衡得分回归(linkage disequilibrium score regression,LDSC)分析2种疾病之间的遗传相关性。所有检验采用R语言软件(4.3.1版本)执行分析。结果·经筛选后,共采用工具变量(SNP)33个。异质性检验结果发现,SNP之间存在一定的异质性(IVW法和MR-Egger法结果均P0.05)。Steiger检验发现,1型糖尿病对结直肠癌的效应未受反向作用干扰。反向MR分析未发现结直肠癌对1型糖尿病存在因果效应(均P>0.05)。共定位分析结果显示,H4假设概率为45.7%,2种疾病间的因果关系不是由两者基因序列中相同的SNP引起的。LDSC分析显示2种疾病不存在遗传相关性。结论·1型糖尿病可能促进结直肠癌发生,但结直肠癌对1型糖尿病不存在影响。

关键词：结直肠癌 1型糖尿病孟德尔随机化

大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型的建立与评估

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中国比较医学杂志 2024年第3期34卷 45-50页

作者：余奎梁晓强韩冕张静喆上海中医药大学附属龙华医院浦东分院上海200126 上海中医药大学附属龙华医院中医外科研究所上海200032 上海中医药大学附属龙华医院上海200032

目的建立一种稳定的大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型,检测其病理生理指标,为急性胆管炎、胆汁淤积等疾病的研究提供稳定可靠的标准化动物模型。方法选用SPF级雄性SD大鼠,采用胆总管下段注射类毒素及胆总管结扎方式进行模型构建,评估大... 详细信息

目的建立一种稳定的大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型,检测其病理生理指标,为急性胆管炎、胆汁淤积等疾病的研究提供稳定可靠的标准化动物模型。方法选用SPF级雄性SD大鼠,采用胆总管下段注射类毒素及胆总管结扎方式进行模型构建,评估大鼠造模前后的体重变化、死亡情况、肝功能主要指标变化及肝组织病理改变情况。结果造模后模型组大鼠体重明显降低;假手术组大鼠无死亡,肝功能无异常;模型组大鼠死亡3只,模型组死亡率12%,肝功能主要指标及肝病理呈现出明显的胆汁淤积及肝功能损伤性改变。结论本研究成功建立了大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型,该模型具有操作简便、损伤小、死亡率低、造模成功率高等优势,可为多种常见疾病的机制研究和药物研发提供标准化的实验动物模型。

关键词：急性梗阻性化脓性胆管炎胆总管梗阻动物模型大鼠

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瘘管相关性肛门腺癌1例

中华病理学杂志 2024年第7期53卷 759-761页

作者：魏静静董青军赵秋枫王延文刘岸斐张晓云上海中医药大学附属龙华医院病理科上海200032 上海中医药大学附属龙华医院肛肠科上海200032 上海中医药大学附属龙华医院放射科上海200032

瘘管相关性肛门腺癌是一种罕见的肛门肿瘤,本文报道1例。该患者为37岁男性,肛瘘伴反复肛旁结块、肿痛溃脓20余年,磁共振成像检查示左侧高位肛周脓肿伴复杂性括约肌间瘘。镜下观察:纤维及炎性肉芽组织中见大量细胞外黏液,黏液被纤维间隔... 详细信息

瘘管相关性肛门腺癌是一种罕见的肛门肿瘤,本文报道1例。该患者为37岁男性,肛瘘伴反复肛旁结块、肿痛溃脓20余年,磁共振成像检查示左侧高位肛周脓肿伴复杂性括约肌间瘘。镜下观察:纤维及炎性肉芽组织中见大量细胞外黏液,黏液被纤维间隔分成大小不一的黏液湖,部分纤维间隔表面衬覆梁索状异型腺上皮,局部乳头状增生,细胞多呈柱状,核圆形或卵圆形位于基底部,散在少量杯状细胞,局部细胞异型明显,极性紊乱,核仁清晰,小灶区域黏液湖内可见簇状或印戒样细胞,局灶区域伴出血及含铁血黄素沉积。免疫组织化学:异型上皮细胞细胞角蛋白(CK)7、CK20、MUC2、CDX2、SATB2、Villin、MSH2、MSH6、PMS2、MLH1阳性,MUC5AC部分阳性,突触素局灶区域阳性,MUC6、GCDFP15、嗜铬粒素A阴性。分子检测:KRAS基因第2号外显子第12位密码子突变,NRAS、BRAF V600E及PIK3CA基因未见突变。本文回顾其临床病理特征并复习相关文献,旨在提高对该病的认识,避免漏诊、误诊。

关键词：纤维间隔乳头状增生基底部 MUC5AC CK20 MUC2 免疫组织化学肛瘘

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中医药促进慢性创面修复研究进展

中国中西医结合杂志 2024年第2期44卷 250-256页

作者：雷春明单玮上海中医药大学研究生院上海200032 上海中医药大学附属龙华医院中医外科上海200032

慢性难愈性创面俗称慢性溃疡,是指不同病因诱发的经过治疗4周以上仍未愈合也无明显愈合倾向,不能通过正常有序及时的修复达到解剖和功能完整的创面[1],是一种临床常见的外科疾病,特点是病程迁延不愈且容易复发[2]。慢性创面主要包括临... 详细信息

慢性难愈性创面俗称慢性溃疡,是指不同病因诱发的经过治疗4周以上仍未愈合也无明显愈合倾向,不能通过正常有序及时的修复达到解剖和功能完整的创面[1],是一种临床常见的外科疾病,特点是病程迁延不愈且容易复发[2]。慢性创面主要包括临床中的糖尿病溃疡、创伤性溃疡、动/静脉性溃疡、感染性溃疡和压疮等。慢性创面由于原发疾病比较复杂,创面病程长,因此往往病情迁延难愈、反复发作,不仅会对患者造成生理和心理的负担.

关键词：慢性溃疡慢性创面创伤性溃疡静脉性溃疡糖尿病溃疡外科疾病原发疾病压疮

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补肾健脾方对乙肝病毒感染者免疫功能的影响

中药药理与临床 2024年第6期40卷 32-37页

作者：刘影陈旭东邵华卿孙陈岑徐汉辰王磊上海中医药大学附属龙华医院脾胃病研究所上海200030 上海中医药大学附属龙华医院检验科上海200030 上海中医药大学附属龙华医院肝病科上海200030

目的:观察乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染对机体免疫功能的影响,研究补肾健脾方对HBV感染者免疫功能的影响。方法:(1)将招募的慢性HBV感染者及健康志愿者分为实验组和对照组,采集各组研究对象的外周血,分离血清,ELISA法检测... 详细信息

目的:观察乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染对机体免疫功能的影响,研究补肾健脾方对HBV感染者免疫功能的影响。方法:(1)将招募的慢性HBV感染者及健康志愿者分为实验组和对照组,采集各组研究对象的外周血,分离血清,ELISA法检测两组血清中γ干扰素(IFN-γ)、α干扰素(IFN-α)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术(FCM)检测两组的PBMC中自然杀伤细胞(NK)、辅助性T细胞1(Th1)、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)数量及胞内IFN-γ、IFN-α、IL-2、IL-12、TNF-α、干扰素基因刺激蛋白(STING)、T盒子转录因子(T-BET)、信号传导转录激活因子4(STAT4)蛋白表达水平。(2)制备大鼠含药血清,通过WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒筛选含药血清干预PBMC的安全剂量;以HBV感染者PBMC为实验对象将其分为3个组,空白对照组、空白血清组和含药血清组,干预48 h后,ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、IFN-α、IL-2、IL-12、TNF-α含量,FCM检测各组PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量及胞内细胞因子水平;RT-qPCR法检测各组细胞因子mRNA表达。结果:(1)与健康志愿者相比,HBV感染者血清中IFN-γ、IL-12含量和PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量明显降低(P<0.05);HBV感染者PBMC胞内IFN-γ、IL-12、TNF-α、STAT4、T-BET较健康志愿者合成减少(P<0.05)。(2)与空白血清组相比,补肾健脾方含药血清组PBMC细胞培养上清中IFN-γ、IL-12含量明显升高(P<0.05);补肾健脾方含药血清组PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量以及胞内IFN-γ蛋白表达水平较空白血清组明显升高(P<0.05);与空白血清组相比,补肾健脾方含药血清可明显上调Ifnγ、IL2、Il12、TnfαmRNA表达(P<0.05)。结论:补肾健脾方可通过上调CTL、Th1、NK细胞数量,促进IL-12分泌,进而促进IFN-γ的合成与分泌,从而恢复HBV感染者PBMC的免疫功能。

关键词：补肾健脾方干扰素γ 乙型肝炎病毒免疫 T盒子转录因子信号传导转录激活因子4 T淋巴细胞