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Experimental research of pEGFP-C1-wtp53 plasmid transfecting to murine glioma C6 cell by Ultrasound-mediated SonoVue microbubbles

Experimental research of pEGFP-C1-wtp53 plasmid transfecting...

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中国超声医学工程学会第十三届全国超声心动图学术会议

作者： Zhang Ruifang liu haiyan Department of Ultrasound the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University

Objective:To discusses the feasibility of ultrasound-mediated SonoVue microbubble irradiation enhanced pEGFP-C1-wtp53 gene transfection in glioma C6 cell,and optimize the parameters of ultrasound microbubbles concentration and plasmid ***:The in vitro cultured murine glioma C6 cells suspension could be divided into blank control group,the plasmid group,plasmid + ultrasonic group,ultrasonic +microbubble group,microbubble + plasmid group,plasmid + ultrasonic + microbubble *** 1 MHZ frequency,sound intensity 0.8 W/cm,20%of the empty,irradiation time 50 s,under the condition of 37 ℃ and 5%CO culture 24 h-48 h,with fluorescence microscope cell observing transfection rate,Trypan blue staining method detecting cell mortality,RT-PCR detecting of transfection cells wtp53 mRNA expression and MTT colorimetry to detect cell growth inhibition rate,flow cytometry instrument analysising of the cell cycle ***:Compared with blank control group,plasmid±ultrasound±microbubble group of cell survival rate decreased;Compared with each other group,the difference of the cell mortality rate isn’t statistically significant(all p>0.05).Plasmid±ultrasound±microbubble is the highest transfection efficiency group,the wtp53 mRNA expression of transfection cells increase obviously,flow cytometry instrument analysis of the cell cycle G0/G1 phase cell number increase;Compared with other experimental group and control group differences are statistically significant(all Pwtp53 gene transfection in murie glioma C6 cell,and wtp53 gene could be stably expression,thus inhibiting the growth of murie glioma cell,for the future of gene therapy provides a new method of transfection.

关键词： Ultrasound Microbubbles wtp53 gene Glioma Transfection

来源： cnki会议评论

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