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wnt基因的类别及功能

生命的化学 2007年第2期27卷 138-141页

作者：向阳高基民胡志明周明乾南方医科大学生物技术学院广州510515

wnt是一类癌基因,在动物发育过程中具有广泛的作用。该文介绍哺乳动物基因组中19个wnt基因的功能。

关键词： wnt基因癌基因

wnt基因对造血干细胞增殖、分化调控的研究进展

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中华血液学杂志 2005年第6期26卷 379-381页

作者：韩姝师伟裴雪涛军事医学科学院输血医学研究所干细胞生物学研究室北京100850

1982年Nusse首次从小鼠乳腺癌中克隆出了wnt基因.目前,已从不同物种如线虫、斑马鱼、鸡、青蛙、鼠及人类中分离出许多的wnt基因,这些基因共同组成了wnt家族.不断的研究表明,wnt通过复杂的信号传递通路控制着胚胎早期的发育,卵裂、背腹形... 详细信息

1982年Nusse首次从小鼠乳腺癌中克隆出了wnt基因.目前,已从不同物种如线虫、斑马鱼、鸡、青蛙、鼠及人类中分离出许多的wnt基因,这些基因共同组成了wnt家族.不断的研究表明,wnt通过复杂的信号传递通路控制着胚胎早期的发育,卵裂、背腹形成,并对细胞分化、细胞增殖及生长有调节作用.近来研究证明,wnt基因对造血干细胞也有重要的调控作用。

关键词： wnt基因造血干细胞增殖分化调控研究进展

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wnt基因族的进化

生命的化学 1995年第1期15卷 4-6页

作者：马德如南开大学分子生物学研究所

Ｗｎｔ基因族的进化马德如（南开大学分子生物学研究所，天津３０００７１）关键词Ｗｎｔ基因，分子进化一八十年代以来大量证据表明，原癌基因（ｐｒｏｔｏｏｎｃｏｇｅｎｅｓ）在细胞分化和胚胎发育中有重要作用。其中突出的例证是１... 详细信息

Ｗｎｔ基因族的进化马德如（南开大学分子生物学研究所，天津３０００７１）关键词Ｗｎｔ基因，分子进化一八十年代以来大量证据表明，原癌基因（ｐｒｏｔｏｏｎｃｏｇｅｎｅｓ）在细胞分化和胚胎发育中有重要作用。其中突出的例证是１９８２年由Ｎｕｓｓｅ和Ｖａｒｍｕｓ...

关键词： wnt基因分子进化细胞

Sp基因与wnt基因对胚胎发育异常及唇腭裂的影响

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口腔疾病防治 2019年第6期27卷 396-399页

作者：程忠委宋庆高遵义医学院贵州遵义563000 遵义医学院附属口腔医院口腔颌面外科贵州遵义563000

正常的胚胎发育受不同的基因及相关信号通路的调控。近年来,同一组织中不同的基因与基因、基因与信号通路之间的关联性受到了国内外学者的广泛关注,Sp基因、wnt基因的缺失或突变均可导致胚胎发育异常。本文综述结果表明:由于Sp基因缺失... 详细信息

正常的胚胎发育受不同的基因及相关信号通路的调控。近年来,同一组织中不同的基因与基因、基因与信号通路之间的关联性受到了国内外学者的广泛关注,Sp基因、wnt基因的缺失或突变均可导致胚胎发育异常。本文综述结果表明:由于Sp基因缺失/突变导致的胚胎发育异常;锌指蛋白超家族成员Sp1-9参与了造血系统、呼吸系统、骨骼系统等多种组织器官的发育进程,它们的缺失或突变均可导致胚胎相应组织的发育异常,其中Sp8基因与腭裂的发生相关;通过总结近年来关于wnt基因与唇腭裂的关系研究了解到wnt3、wnt3A、wnt5A、wnt9B、wnt10A和wnt11的表达异常与人类唇腭裂的发生密切相关;在胚胎发育过程中Sp5/8是wnt信号通路的关键下游效应子,并且参与wnt信号通路的组成。Sp5/8与wnt信号通路共同参与调控胚胎期小鼠神经嵴的正常发育及胚胎干细胞的自我更新。综上所述,本文提出了Sp基因与wnt基因可能共同参与调控胚胎期腭裂的形成及发生过程,同时为今后在腭裂模型中进一步研究二者之间的关联机制提供参考。

关键词： Sp基因 wnt基因胚胎发育异常唇腭裂锌指蛋白

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涡虫wnt基因的研究进展

生命科学 2012年第3期24卷 274-279页

作者：孙璐王秀丽杨桂文安利国袁金铎山东师范大学生命科学学院山东省动物抗性生物学重点实验室济南250014

涡虫具有强大的再生能力,对其再生机制等方面的研究一直是发育生物学研究的热点问题。wnt信号途径是动物发育中关键的信号途径之一,对生物的生长发育有着至关重要的作用,近年来国内外对涡虫的wnt基因进行了不断的深入研究。从wnt信号途... 详细信息

涡虫具有强大的再生能力,对其再生机制等方面的研究一直是发育生物学研究的热点问题。wnt信号途径是动物发育中关键的信号途径之一,对生物的生长发育有着至关重要的作用,近年来国内外对涡虫的wnt基因进行了不断的深入研究。从wnt信号途径、涡虫wnt基因的种类及命名、涡虫wnt基因的表达及功能几方面对wnt基因在涡虫中的研究进展进行综述。

关键词：涡虫再生 wnt基因表达功能

癌相关成纤维细胞（CAFs）和wnt基因对乳腺癌细胞增殖的影响

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癌相关成纤维细胞（CAFs）和Wnt基因对乳腺癌细胞增殖的影响

作者：赵丽君华中科技大学

学位级别：硕士

目的:探讨来源于人乳腺癌相关成纤维细胞(CAFs)的wnt基因通过wnt信号通路对乳腺癌细胞增殖的影响。方法：1、收集6例术前未进行任何治疗且术后病理证实为乳腺浸润性导管癌的女性患者的乳腺癌组织及正常组织标本。采用胶原酶消化分离法... 详细信息

目的:探讨来源于人乳腺癌相关成纤维细胞(CAFs)的wnt基因通过wnt信号通路对乳腺癌细胞增殖的影响。方法：1、收集6例术前未进行任何治疗且术后病理证实为乳腺浸润性导管癌的女性患者的乳腺癌组织及正常组织标本。采用胶原酶消化分离法提取和培养CAFs、正常乳腺成纤维细胞(NBFs)。 2、建立Matrigel胶三维立体细胞培养模型—CAFs/NBFs与MCF-7体外共培养：每个标本进行六组不同处理，每组重复3次。分为对照组1(人乳腺癌细胞系MCF-7单独培养)、对照组2(MCF-7+NBFs共培养)，实验组1(MCF-7+CAFs共培养)、实验组2(MCF-7+CAFs+wnt3a单克隆抗体共培养)、实验组3(MCF-7+CAFs+wnt5a单克隆抗体共培养)、实验组4(MCF-7+CAFs+wnt10b单克隆抗体共培养)。其中每组上层MCF-7细胞数为5×10/2×10，下层CAFs/NBFs细胞数为1×10。利用公式—平均克隆量/接种细胞量×10%计算MCF-7细胞的克隆率。 3、采用Transwell小室将CAFs/NBFs与MCF-7间接共培养，每个标本进行3组不同处理，每组重复3次。分为对照组(完全培养基单独培养MCF-7)、实验组1(MCF-7+NBFs共培养)、实验组2(MCF-7+CAFs共培养)，然后采用实时定量PCR检测各组MCF-7中wnt3a、wnt5a、wnt10b基因表达的差异。结果： Matrigel胶双层细胞的三维立体培养结果：(1)实验组1中MCF-7细胞的克隆率与对照组1、对照组2相比显著升高，说明CAFs对MCF-7的克隆有促进作用。(2)实验组2、实验组4的细胞克隆形成率较实验组1均明显降低，较对照组1、对照组2仍有升高，说明wnt3a单抗、wnt10b单抗对CAFs有抑制作用，但作用不完全;(3)实验组4的细胞克隆形成率较实验组2显著降低，说明wnt10b单抗对CAFs的抑制作用比wnt3a单抗更强;(4)实验组3与实验组1相比，MCF-7细胞克隆率没有显著变化，说明wnt5a对CAFs的抑制作用不明显。采用实时荧光定量PCR检测CAFs/NBFs与MCF-7间接共培养后MCF-7细胞wnt信号转导通路的表达，实验组MCF-7细胞中wnt3a、wnt5a、wnt10bmRNA的表达均有所上调。实验组2中wnt3a、wnt10b的表达较实验组1高，而wnt5a的表达较实验组1低。结论： CAFs来源的wnt3a、wnt10b对人乳腺癌的发生有促进作用;CAFs来源的wnt5a对乳腺癌的发生无明显促进作用，可能是wnt5a受多种因素的影响，也可能如近年一些研究所言wnt5a是肿瘤抑制基因。而这些作用可能是成纤维细胞上调的wnt基因通过wnt信号转导通路影响乳腺干细胞的自我更新和增殖分化来实现的。

关键词：人乳腺癌癌相关成纤维细胞 wnt基因三维培养克隆

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wnt基因与结直肠癌的发生

国外医学（生理病理科学与临床分册） 2004年第1期24卷 83-86页

作者：臧凤琳孙保存天津医科大学附属肿瘤医院病理科天津300060

wnt信号转导途径能够传递生长刺激信号 ,促进细胞的增殖和组织的生长发育。其过度的转导和异常的活化 ,可改变干细胞的微环境 ,维持、扩增干细胞分隔空间 ,引起干细胞数目的增加 ,最终导致恶性肿瘤 ,尤其是结直肠癌的发生。因此。

关键词： wnt基因结直肠癌干细胞肿瘤发生

凡纳滨对虾蜕皮激素应答基因的结构功能及其调控wnt信号通路的初步研究

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凡纳滨对虾蜕皮激素应答基因的结构功能及其调控Wnt信号通路的初...

作者：杜江丽中国科学院大学(中国科学院海洋研究所)

学位级别：硕士

蜕皮是对虾生长发育和生殖过程中的一个重要事件,其研究具有重要的理论价值和经济意义。然而目前有关对虾蜕皮信号通路的调控网络并不完整,突出的缺口是蜕皮信号传递至Ec R/RXR后,蜕皮激素（20-hydroxyecdysone,20E）应答因子如何调控... 详细信息

蜕皮是对虾生长发育和生殖过程中的一个重要事件,其研究具有重要的理论价值和经济意义。然而目前有关对虾蜕皮信号通路的调控网络并不完整,突出的缺口是蜕皮信号传递至Ec R/RXR后,蜕皮激素（20-hydroxyecdysone,20E）应答因子如何调控下游分子,进而表现出蜕皮和生长现象,其分子机制并不清楚。本课题以凡纳滨对虾为材料,研究多个蜕皮激素应答基因的结构功能并初步分析了对虾蜕皮信号通路与典型的生长发育信号通路-wnt通路之间的关系。通过生物信息学方法分析RNA-Seq数据和基因组数据,我们筛选鉴定和克隆得到了凡纳滨对虾20E重要应答基因Lv EcR、Lv RXR、Lv E75、Lv HR3和Lv FTZ-F1等,并对以上各基因序列进行基因结构分析,构建系统发生树,分析其表达模式,继而分析各基因的功能。研究表明在本研究中涉及的5个蜕皮激素信号通路关键基因都存在多种可变剪切形式。凡纳滨对虾LvEc R基因存在8种可变剪切体;LvRXR基因存在4种可变剪切体;LvE75基因存在6种可变剪切体;LvHR3和LvFTZ-F1基因分别存在5种和4种可变剪切体。这些可变剪切发生在3?或5?端非编码区,通过外显子选择性剪切,内含子保留等方式产生。我们利用凡纳滨对虾表达谱数据,分析了以上5个基因在胚胎和幼体发育时期、蜕皮过程和不同组织中的表达模式。结果显示,在胚胎和幼体发育时期,5个基因的转录形式最为丰富,而在成虾中,各基因仅存在1-2种转录形式。通过dsRNA干扰功能实验,我们发现Lv E75、Lv HR3、Lv Br-C和Lv FTZ-F1分别被干扰后会导致凡纳滨对虾蜕皮率下降,死亡率显著增加。针对死亡或濒死的对虾进行显微观察,我们发现凡纳滨对虾出现头部或尾部不能完成蜕皮,或甲壳不能完全脱落的现象。为了了解对虾蜕皮和生长之间的关系,我们选择与生长发育密切相关的wnt基因作为研究对象。在本研究中我们鉴定了凡纳滨对虾wnt基因家族所有成员,分别命名为Lv wnt1、Lv wnt2、Lv wnt4-Lv wnt11、Lv wnt16和Lv wnt A,这些基因都属于单拷贝基因,且发现对虾基因组中存在Lv wnt1-Lv wnt6保守基因簇。同时结合不同发育时期、不同蜕皮过程和成虾不同组织的RNA-Seq数据初步分析了对虾wnt基因的表达模式。Lv wnts在幼体发育早期开始表达,持续至仔虾时期,但在成虾中只有Lv wnt5和Lv wnt A等少部分Lv wnts表达。RT-qPCR验证Lv wnts在胚胎和幼体发育时期的表达情况,结果和转录组数据一致。另外我们利用蜕皮激素20E处理和蜕皮激素信号通路关键基因干扰的样品,采用荧光定量方法,检测多个wnt基因以及wnt通路相关的ZW3和Sulf-1基因的表达水平,分析蜕皮信号通路与wnt通路之间的关联。结果表明,蜕皮激素20E对Lvwnt基因有更显著的调控作用,而LvEc R、LvRXR和LvE75基因对所研究的几个Lvwnt基因调控不显著。蜕皮激素20E处理后,Lv ZW3表达水平显著上调,对蜕皮激素比较敏感,而Lv Sulf-1无明显效果;LvEcR被干扰后,Lv ZW3表达水平无明显变化,而Lv Sulf-1表达量显著下调;Lv RXR被干扰后,Lv ZW3表达水平显著下降,Lv Sulf-1表达量上调;Lv FTZ-F1和Lv Br-C被干扰后Lv ZW3和Lv Sulf-1有一致明显的上调效果。总结以上研究结果,我们推测,对虾的蜕皮和生长是各自不同的信号通路调控,同时两个通路之间具有少量基因相互关联。

关键词：凡纳滨对虾蜕皮 EcR RXR 蜕皮激素早期应答基因 wnt基因生长发育

wnt及相关基因在厚壳贻贝幼虫生长发育过程中的作用

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Wnt及相关基因在厚壳贻贝幼虫生长发育过程中的作用

作者：徐跃峰上海海洋大学

学位级别：硕士

厚壳贻贝(Mytilus coruscus)是中国沿海重要的经济贝类之一,其幼虫附着变态的成功与否直接决定育苗的成败。探究厚壳贻贝幼虫附着变态有关的基因对厚壳贻贝的养殖有着重要的意义。在过去的研究发现wnt信号通路相关的基因可以调控海洋无... 详细信息

厚壳贻贝(Mytilus coruscus)是中国沿海重要的经济贝类之一,其幼虫附着变态的成功与否直接决定育苗的成败。探究厚壳贻贝幼虫附着变态有关的基因对厚壳贻贝的养殖有着重要的意义。在过去的研究发现wnt信号通路相关的基因可以调控海洋无脊椎幼虫的生长发育和附着变态,wnt信号通路分为经典信号通路和非经典信号通路,两种信号通路在同一物种中有着不同的功能,因此本文从转录组数据中筛选出4个wnt信号通路相关基因,并通过RACE技术和荧光定量技术探究其在厚壳贻贝幼虫生长发育和附着变态过程中的作用。主要包括以下内容:1.厚壳贻贝wnt4基因的克隆和表达分析为探究wnt4基因在厚壳贻贝幼虫发育阶段和组织生长过程中的作用,通过RACE技术克隆了厚壳贻贝wnt4基因cDNA全长序列,该序列全长3342 bp,开放阅读框为1074 bp,编码357个氨基酸。通过RT-PCR分析wnt4基因在厚壳贻贝成体7个组织中均有表达,其中在外套膜中表达量最高,推测可能与贝壳形成有关;wnt4基因在厚壳贻贝幼虫发育阶段高表达主要集中在壳顶期,并推测wnt4基因可能参与了贝壳形态结构发生转变的过程以及某些器官的形成与发育。本研究为进一步开展双壳贝类wnt基因家族的功能研究提供了理论依据。2.厚壳贻贝wnt7b基因的克隆和表达分析为研究wnt7b基因在厚壳贻贝幼虫发育阶段和成体各个组织生长过程中的作用,利用RACE技术得到了厚壳贻贝wnt7b基因cDNA全长序列,该序列全长1910 bp,开放阅读框为1059 bp,编码352个氨基酸。通过RT-PCR分析发现wnt7b基因在厚壳贻贝成体的7个组织中都有表达,其中在鳃和雌雄性腺中表达量最高,推测wnt7b基因可能与厚壳贻贝性腺的成熟有关;wnt7b基因在厚壳贻贝5个发育阶段都有被检测到,其中在D形幼虫中表达量最高,从D形幼虫到眼点幼虫这个过程中表达量逐渐降低。推测该基因在厚壳贻贝的幼虫生长发育和变态中有非常重要的作用。对该基因的相关功能和调控机制还需深入研究,为进一步开展双壳贝类wnt基因家族的功能研究奠定了提供了理论依据。3.厚壳贻贝wnt6基因的克隆和表达分析为研究wnt6基因在厚壳贻贝幼虫发育阶段和成体各个组织生长过程中的作用,利用RACE技术克隆得到了厚壳贻贝wnt6基因cDNA全长序列,该序列全长1616 bp,开放阅读框为1032 bp,编码343个氨基酸。通过RT-PCR分析发现wnt6基因在厚壳贻贝成体的7个组织中的表达情况,发现在鳃、外套膜、足、雌性性腺和雄性性腺有表达,而在消化腺和闭壳肌中不表达。其中在外套膜中的表达量最高,推测可能与贝壳形成相关;wnt6基因在厚壳贻贝幼虫5个发育阶段表达发现仅在壳顶幼虫和稚贝中有表达,而在眼点幼虫阶段并不表达,表明wnt6可能参与了幼虫的附着变态发育过程,且可能参与了幼虫的生理、贝壳形态结构发生转变的过程以及某些器官的形成与发育。综上所述,wnt6可能在厚壳贻贝幼虫附着变态发育过程中发挥负反馈调控作用,对该基因的相关功能和调控机制还需进一步的实验验证。本研究为进一步开展wnt基因家族在双壳贝类附着变态发育的功能方面研究提供了理论依据。4.厚壳贻贝β-catenin基因的克隆和表达分析为探究β-catenin基因在厚壳贻贝幼虫发育阶段和组织生长过程中的作用,并且探究其与wnt信号通路的关系,利用RACE技术克隆得到了厚壳贻贝β-catenin基因c DNA全长序列,该序列全长4051 bp,开放阅读框为2490 bp,编码829个氨基酸。通过RT-PCR分析发现β-catenin基因在厚壳贻贝成体的7个组织中都有表达,其中在消化腺和鳃中的表达量最高,推测β-catenin基因可能与厚壳贻贝的摄食有关;β-catenin基因在厚壳贻贝5个发育阶段都有被检测到,在稚贝和壳顶幼虫中表达量最高,在眼点幼虫阶段表达量最低,表明β-catenin可能参与了幼虫的附着变态发育过程,并且在厚壳贻贝幼虫的附着变态发育过程中发挥负反馈调控作用。通过和前面研究相比较发现,β-catenin和wnt6在厚壳贻贝幼虫附着变态发育过程中发挥负反馈调控作用,证明在厚壳贻贝经典wnt通路中,wnt信号分子与膜蛋白结合,使β-catenin大量聚集,进入细胞核中,激活wnt信号通路中的下游信号分子来调控厚壳贻贝幼虫的附着变态。由于经典wnt信号通路是由许多分子组成,因此,在厚壳贻贝幼虫附着变态的过程中这些分子如何协调参与这一生理过程,尚需进一步地进行研究。综上所述,经典wnt信号通路中的wnt6和wnt7b基因可能参与调控厚壳贻贝幼虫的附着变态,而非经典wnt信号通路中的wnt4基因可能不参与调控厚壳贻贝幼虫的附着变态。β-catenin基因可能也参与调控厚壳贻贝幼虫的附着变态,证明了wnt信号分子可能是通过β-catenin基因传递给下游信号分子来调控厚壳贻贝幼虫的附着变态。

关键词：厚壳贻贝 wnt基因 β-catenin 生长发育基因克隆表达分析